人白介素10IL10Elisa試劑盒檢測(cè)方法原理步驟說明書

人IL-10定量分析酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒IL-10簡(jiǎn)介：人IL-10是由160個(gè)氨基酸組成4α螺旋結(jié)構(gòu)的的細(xì)胞因子，分子量為18.5kDa。在水溶液中以二聚體形式存在，分子量約為39kDa。人IL-10是個(gè)多效性的因子，能夠?qū)Χ喾N細(xì)胞起作用，主要表現(xiàn)為免疫抑制和免疫刺激兩方面的作用，特別是在調(diào)節(jié)淋巴系和髓系的細(xì)胞功能方面扮演重要的作用。IL-10/巨噬細(xì)胞依賴、抗原刺激引起的的PBMNC和NK細(xì)胞合成其它細(xì)胞因子的抑制作用。巨噬細(xì)胞膜介導(dǎo)的共刺激引起的T細(xì)胞和NKIL-10IL-10/巨噬細(xì)胞功能的強(qiáng)有力的調(diào)節(jié)物。IL-10作為細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的抑制物，能夠抑制像前列腺素E2、TNF-α、1、0和8等許多引起炎癥的細(xì)胞因子。IL-10能夠促進(jìn)可溶性TNF體的和ICAM1和B7在細(xì)胞表面的表。IL-10B細(xì)胞、細(xì)胞及腺細(xì)胞的和分化的調(diào)。IL-10的IL-10在DNA列和氨基酸，其DNA列中的基因-巴基因組基因，可能在中扮演重要的原因。在許多的中，IL0表也，、原、形、等。分的分、結(jié)核、 分等的也引起IL0的表。檢測(cè)原:ELISAIL-10IL-10抗體，其中的IL-10IL-10抗體IL-10的被。連IL-10辣其450nm的OD，IL-10

，制，對(duì)中OD，可中IL-10。人定量分析酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒組成:組分IL-10分析液液96T/48T）12/65ml/3ml10ml/5ml人IL-104/2()IL-1010ml/5ml和素的HRP酶10ml/5ml液20×30ml/15mlTMB底物10ml/5ml中液5ml/3ml封膠紙3/2張說明書1份收集:的收集請(qǐng)按下列流進(jìn)行操作：細(xì)胞清懸浮物后可；BeijingBLKWBiotechnologyCo.,Ltd.C.EDTAD.20℃反復(fù)融。2.添加任何防腐劑或抗劑；澈透明前如有懸浮物通過離心去除；勿使溶高脂或污染否則結(jié)果將準(zhǔn)確。注：正常人或緩沖做倍比稀釋再。注意事項(xiàng):試劑盒保2～8℃。濃縮洗滌因低溫下可有結(jié)晶水浴加熱使結(jié)晶完全溶解再配制。準(zhǔn)復(fù)溶加。物勿劑。加污染。試劑盒。對(duì)保證反結(jié)果準(zhǔn)性很重要加輕輕叩擊邊緣以保證。室溫反格控制25～28℃。洗滌過程至關(guān)重要洗滌會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。試驗(yàn)準(zhǔn)建議雙復(fù)孔。加過程氣泡產(chǎn)生?？贵w孵育間適當(dāng)延長(zhǎng)。前準(zhǔn)備:試劑盒出置室溫平衡20鐘每次試劑2～8℃保。將濃縮洗滌雙蒸水或去離子水稀釋(1加19水)。準(zhǔn):加入l至干瓶0終度達(dá)到l室格控在25～28靜置15輕輕懸溶解準(zhǔn)稀釋倍比梯度稀釋依次加。（準(zhǔn)曲線取七個(gè)點(diǎn)最高濃度為2000pg/ml,準(zhǔn)稀釋直加入為0度.）洗滌:動(dòng)板機(jī)板每孔為300u入與吸出間隔15-30秒板5次最一次板成板倒扣著厚吸水紙力拍干。實(shí)驗(yàn)過程需備：1規(guī)格加相2.酶儀；3動(dòng)洗板機(jī)4子水或雙蒸水；操步驟:通過確保4℃。BeijingBLKWBiotechnologyCo.,Ltd.室溫孵育120分鐘。對(duì)于血清或血漿標(biāo)請(qǐng)入50ul樣分析緩沖后50ul標(biāo)如稀釋量大請(qǐng)將樣與樣分析緩沖等量入不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋100ul。洗板5次且最后一次厚吸水紙上拍干。入生物素化抗體工作(100ul/)。用封板膠紙封住反應(yīng)室溫孵育60分鐘。洗板5次且最后一次厚吸水紙上拍干。入酶結(jié)合物工作(100ul/)。用封板膠紙封住反應(yīng)20分鐘。洗板5次且最后一次厚吸水紙上拍干。入TMB100ul/避光室溫孵育20分鐘。入50ul/,混勻后刻測(cè)量OD結(jié)果判斷:

值。450復(fù)20%的差異范圍內(nèi)結(jié)果復(fù)的值均后作測(cè)量值。每標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)OD值應(yīng)的OD值。工標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品濃度作標(biāo)OD值作標(biāo)線標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)。標(biāo)OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上出濃度。標(biāo)OD于標(biāo)準(zhǔn)曲線上應(yīng)稀釋后測(cè)算濃度時(shí)應(yīng)乘稀釋倍數(shù)。典型數(shù)值參考曲線濃度典型OD值1典型OD值2OD均值00.110.13320.121662.50.24680.36620.30651250.31040.41340.36192500.47480.6110.54295000.90451.06470.984610001.47871.52411.501420002.03342.24612.13975人IL-10參考標(biāo)準(zhǔn)曲線人人IL-10標(biāo)準(zhǔn)曲線2.521.5DO10.50062.512525050010002000人IL-10（pg/ml）應(yīng)同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所標(biāo)準(zhǔn)曲線算標(biāo)含量。靈敏度特異性復(fù)性:靈敏度：多次復(fù)結(jié)果表明最小檢出量8.8pg/ml。BeijingBLKWBiotechnologyCo.,Ltd.IL-10sRα,IL-10Rβ,IL-22,IL-24IL-10和貓IL-10等沒有交叉反應(yīng)。重復(fù)板內(nèi)，板間變系數(shù)均<10%.參考文獻(xiàn):JSurgRes.2001Aug;99(2):187-93.AmJGastroenterol.2001Jul;96(7):2