張玉梅《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》微生物-第35章肝炎病毒

第35章肝炎病毒Hepatitisviruses整理課件肝炎病毒（Hepatitisvirus）以侵害肝臟為主引起病毒性肝炎的病毒種類：甲型肝炎病毒（HAV）：小RNA病毒科嗜肝病毒屬乙型肝炎病毒（HBV）：嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒屬丙型肝炎病毒（HCV）：黃病毒科丙型肝炎病毒屬丁型肝炎病毒（HDV）：缺陷病毒戊型肝炎病毒（HEV）：杯狀病毒科杯狀病毒屬GBV-C/HGV、TTV(輸血傳播肝炎病毒)整理課件肝炎病毒甲、戊型：消化道傳播---急性肝炎，不轉(zhuǎn)為慢性肝炎或慢性攜帶者乙、丙型：輸血、血制品或注射器污染傳播，除引起急性肝炎外，可致慢性肝炎，并與肝硬化及肝癌相關(guān)丁型肝炎病毒為一種缺陷病毒,需輔助病毒，傳播途徑同乙肝庚型肝炎病毒（HGV）、輸血傳播肝炎病毒（TTV），傳播途徑同乙肝整理課件項目甲型肝炎乙型肝炎丙型肝炎丁型肝炎戊型肝炎病毒HAVHBVHCVHDVHEV病毒分類小RNA病毒科嗜肝DNA病毒科黃病毒科缺陷病毒戊型肝炎病毒科基因組ssRNA（+）7.8kb

dsDNA3,2kbssRNA(+)10.5kbssRNA(-)1.7kbssRNA(+)3.5kb傳播途徑腸道傳播腸道外及性傳播多數(shù)腸道外傳播多數(shù)和腸道外傳播腸道傳播潛伏期/范圍（天）25/15～4575/40～12050/15～9050/25～7540/20～30慢性化無3～10%40～70%2～70%無暴發(fā)性肝炎0.2%0.2%0.2%2～20%0.2～10%五型病毒性肝炎比較整理課件HepatitisAvirus1973年Feinstone應(yīng)用免疫電鏡技術(shù)從急性肝炎患者糞便發(fā)現(xiàn)近年發(fā)現(xiàn)許多生物學(xué)性狀與腸道病毒明顯不同1991年國際病毒命名委員會將它重新分類為小核糖核酸（小RNA）病毒科嗜肝病毒屬（新屬）整理課件甲型肝炎病毒（hepatitisAvirus，HAV）整理課件生物學(xué)性狀HAV為球形顆粒，直徑27～32nm，二十面體立體對稱無包膜?；蚪M為線狀+ssRNA整理課件HAV的結(jié)構(gòu)衣殼蛋白由VP1～3三種多肽構(gòu)成衣殼蛋白具有抗原性（HAVAg）整理課件細(xì)胞培養(yǎng)：HAV可用猴腎、人胚腎細(xì)胞等進(jìn)行增殖和傳代，生長緩慢，不引起CPE易感動物：黑猩猩、南美洲猴、獼猴等接種后可出現(xiàn)急性肝炎抵抗力：較強(qiáng)對乙醚、酸、熱（60oC）穩(wěn)定。高壓、紫外、煮沸等可滅活整理課件傳染源多為患者和隱性感染者糞－口途徑傳播通過污染的水、食物、海產(chǎn)品、食具等傳播HAV的致病性散發(fā)流行：以日常接觸為主，臨床多見暴發(fā)流行：水源或食物污染，尤其是生食毛蚶、蛤蠣等水產(chǎn)品整理課件糞－口途徑口咽/唾液腺中早期增殖腸道與局部淋巴結(jié)大量增殖入血并形成病毒血癥肝為最終靶器官（主要是免疫病理作用）通過膽汁隨糞便排出致病機(jī)制10％整理課件整理課件（四）臨床特點1.潛伏期：2～6周2.流行季節(jié)：散發(fā)病例-無明顯季節(jié)性。3.臨床特點：自限性，少數(shù)人出現(xiàn)黃疸，不發(fā)展為慢性暴發(fā)流行-雨水多、洪水泛濫的季節(jié)。流感樣癥狀，消化道癥狀，尿黃、乏力整理課件整理課件微生物學(xué)檢查早期可檢測血清中抗－HAVIgM，HAV新近感染的重要指標(biāo)流行病學(xué)調(diào)查可檢測抗－HAVIgG已接種甲肝疫苗者檢測中和型抗HAV抗體直接檢測抗原用分子生物學(xué)方法檢測病毒RNA整理課件甲肝的防治控制傳染源隔離治療急性期病人所有廢棄物及日常用水均需嚴(yán)格消毒切斷傳播途徑

養(yǎng)成良好的衛(wèi)生飲食習(xí)慣水產(chǎn)品不宜生吃水果蔬菜要洗干凈整理課件免疫預(yù)防免疫預(yù)防對象是未感染者，主要為兒童和與肝炎病人有密切接觸者減毒活疫苗或滅活疫苗被動免疫可用丙種球蛋白整理課件HapatitisBVirus1963年Blumberg在多次輸血的血友病患者中發(fā)現(xiàn)澳抗，1968年確認(rèn)與血清型肝炎高度相關(guān)，1970年Dane在電鏡下看到具有傳染性的42nm病毒顆粒HBV在亞洲廣泛流行，在中國約10%人口攜帶該病毒，全球約3.5億慢性感染者。屬嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒屬整理課件整理課件電鏡檢查血清標(biāo)本可見小球形顆粒（22nm）、管形顆粒（22nmx50—700nm）、大球形顆粒（42nm）整理課件電鏡下的HBV生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與結(jié)構(gòu)整理課件Dane顆粒（大球形顆粒）Dane顆粒具有雙層核殼結(jié)構(gòu)：外殼為包膜，其表面有HBsAg，前S1，前S2內(nèi)殼為衣殼，HBcAg，HBeAg核心內(nèi)部含HBV的DNA和DNA多聚酶整理課件Dane顆粒（完整的病毒）形態(tài)HBsAgHBcAgHBVDNADNA聚合酶（外膜蛋白）（核衣殼蛋白）整理課件（二）HBV的基因結(jié)構(gòu)與復(fù)制方式不完全雙鏈環(huán)狀DNA

長鏈為負(fù)鏈，至少含4個ORF：S、C、P和X區(qū)。

S區(qū)有S基因、前S1基因和前S2基因；

C區(qū)中有C和前C基因；

P區(qū)編碼DNA聚合酶，有逆轉(zhuǎn)錄酶的活性；

X

區(qū)編碼HBxAg，與肝癌的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)整理課件短鏈為正鏈，長度為長鏈的50%～80%兩條鏈DNA的5′端構(gòu)成粘性末端粘性末端兩側(cè)分別有11nt組成直接重復(fù)序列（directrepeat,DR），稱為DR1和DR2DR區(qū)是病毒DNA成環(huán)和病毒復(fù)制關(guān)鍵序列整理課件整理課件2.HBV基因組結(jié)構(gòu)pre-s1pre-s2SPCpre-cXHBVDNA3.2kb編碼pre-S1LHBs(PreS1抗原)pre-S2MHBs

(PreS2抗原)SSHBs(HBs)pre-CHBeAgCHBcAgPDNA聚合酶XHBxAgS區(qū)C區(qū)整理課件HBV的復(fù)制1.吸附、侵入、脫殼2.形成完整雙環(huán)3.轉(zhuǎn)錄；翻譯；4.裝配5.逆轉(zhuǎn)錄負(fù)鏈6.復(fù)制正鏈7.成熟與釋放整理課件HBV的復(fù)制吸附穿入脫殼dsDNA入核（+）DNA延長修補(bǔ)裂隙（-）DNA轉(zhuǎn)錄2.1KbmRNA外衣殼蛋白3.4KbmRNA（前基因組）內(nèi)衣殼蛋白逆轉(zhuǎn)錄子代V（-）DNA（易整合）子代V（+）DNAdsDNADNA聚合酶0.7KbmRNA2.4KbmRNA3.5KbmRNA整理課件

抗原組成HBsAg和PreSAg是機(jī)體受HBV感染的標(biāo)志由S區(qū)中S基因編碼HBsAg有1個共同抗原決定簇a和2組互相排斥的亞型抗原決定簇d/y和w/r4種亞型：adr、adw、ayr、ayw我國內(nèi)地和沿海各省漢族主要為adr型，少數(shù)民族多為ayw，歐美為adw抗HBs能與HBV表面結(jié)合，使其失去感染性，具有保護(hù)作用整理課件HBV核心抗原（HBcAg）在肝細(xì)胞核中才能檢出，血中不易檢出分子量22KD，由C區(qū)C基因編碼，病毒內(nèi)衣殼蛋白抗HBc無中和作用，非保護(hù)性抗體檢出高效價抗HBc，特別是抗HBcIgM表示HBV在肝內(nèi)處于增殖狀態(tài)整理課件HBVe抗原（HBeAg）由PreC和C基因共同編碼，15KDHBeAg是PreC經(jīng)蛋白酶降解形成HBV活躍復(fù)制及具有強(qiáng)傳染性的標(biāo)志抗HBe對HBV感染有一定保護(hù)作用，預(yù)后良好征象PreC區(qū)可發(fā)生突變，出現(xiàn)變異株，對抗HBe（+）應(yīng)檢測血中HBVDNA整理課件易感動物和細(xì)胞培養(yǎng)：只有黑猩猩對HBV易感，體外細(xì)胞培養(yǎng)尚未成功，采用病毒DNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)整理課件抵抗力：強(qiáng)對低溫、干燥、UV、醚、氯仿、酚等均有抵抗性高壓蒸汽滅菌、0.5%過氧乙酸、5%次氯酸鈉、3%漂白粉液、0.2%新潔爾滅均可滅活病毒，但處理時間要稍長HBV其它生物學(xué)性狀整理課件二、致病性與免疫性傳染源：患者或無癥狀HBV攜帶者傳播途徑：血液、血制品、母-嬰傳播及接觸傳播臨床表現(xiàn)：多樣，有無癥狀帶毒者、急性肝炎、慢性肝炎、重癥肝炎等病毒并不直接引起肝細(xì)胞損傷，主要造成免疫病理損害整理課件致病與免疫機(jī)制（一）細(xì)胞免疫及其介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng)（二）體液免疫及其介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng)（三）自身免疫反應(yīng)引起的病理損害（四）免疫耐受與慢性肝炎（五）病毒變異的免疫逃逸

整理課件致病與免疫機(jī)制（一）細(xì)胞免疫及其介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng)途徑有三：1、CTL的直接殺傷作用2、T細(xì)胞產(chǎn)生和分泌多種細(xì)胞因子3、CTL誘導(dǎo)的肝細(xì)胞調(diào)亡作用后果：急性肝炎重癥肝炎慢性肝炎在清除病毒同時又導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷整理課件致病與免疫機(jī)制（二）體液免疫及其介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng)

1、產(chǎn)生抗HBsAb、PreS1-Ab和PreS2-Ab等保護(hù)性中和抗體，清除游離病毒、阻斷病毒黏附

后果：形成抗原抗體復(fù)合物，導(dǎo)致III型超敏反應(yīng)，主要導(dǎo)致肝外損害。腎小球腎炎、關(guān)節(jié)炎、急性肝壞死。臨床表現(xiàn)為重癥肝炎

整理課件致病與免疫機(jī)制（三）自身免疫反應(yīng)引起的病理損害

HBV感染肝細(xì)胞后，暴露出肝特異性脂蛋白抗原（LSP），可作為自身抗原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對肝細(xì)胞組分的自身免疫反應(yīng)。后果：產(chǎn)生自身抗體，導(dǎo)致慢性肝炎

整理課件致病與免疫機(jī)制（四）免疫耐受與慢性肝炎當(dāng)HBV感染者特異性免疫處于較低水平或完全缺乏時，機(jī)體既不能有效地清除病毒，也不能產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答殺傷靶細(xì)胞，病毒與宿主之間和平共處，形成免疫耐受。

后果：臨床上表現(xiàn)為無癥狀攜帶者和慢性持續(xù)性肝炎。

整理課件致病與免疫機(jī)制（五）病毒變異的免疫逃逸

變異可導(dǎo)致病毒的免疫學(xué)性狀和機(jī)體特異性應(yīng)答反應(yīng)的改變，包括S基因、Pre-S基因、

Pre-C基因、C基因的變異。后果：造成慢性肝炎。整理課件病毒數(shù)量不多，應(yīng)答正常急性肝炎痊愈病毒數(shù)量多，應(yīng)答過高重癥肝炎死亡率高病毒不斷復(fù)制及釋放，應(yīng)答過低慢性肝炎肝硬化免疫應(yīng)答強(qiáng)弱與臨床表現(xiàn)及轉(zhuǎn)歸關(guān)系出現(xiàn)免疫效應(yīng)雙重性整理課件HBV與原發(fā)性肝癌（HCC）攜帶者發(fā)生肝癌的危險性比正常人高217倍X基因編碼的X蛋白有反式激活作用，可反式激活原癌基因等，從而影響細(xì)胞周期，促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，最后發(fā)展成原發(fā)性肝癌。動物實驗整理課件乙肝五項的臨床意義

HBsAg、抗HBsHBeAg、抗HBe抗HBc（IgM、IgG）1.HBsAg(+)：HBV感染的指標(biāo)。見于急性、慢性肝炎和無癥狀攜帶者；抗HBs陽性機(jī)體對HBV獲得免疫力，乙肝恢復(fù)期及疫苗接種者2.判斷傳染性： 血清中出現(xiàn)HBsAg、HBeAg和抗HBcIgM表示病毒復(fù)制，傳染性強(qiáng)。

HBeAg轉(zhuǎn)陰，表示病毒停止復(fù)制，傳染性降低。前C區(qū)基因變異除外。

HBeAg是強(qiáng)感染的指標(biāo)。三、微生物檢查整理課件3.判斷預(yù)后：

HBsAg陽性持續(xù)6個月以上，應(yīng)考慮乙肝由急性轉(zhuǎn)為慢性；HBsAg、HBeAg轉(zhuǎn)陰抗HBs出現(xiàn)表示乙肝進(jìn)入恢復(fù)期，預(yù)后良好4.PreS1、PreS2和抗PreS1、PreS2，臨床上不做常規(guī)檢測5.

HBVDNA:檢測血清中HBVDNA是病毒體內(nèi)復(fù)制和血清有傳染性的直接指標(biāo)整理課件病毒抗原抗體系統(tǒng)檢測結(jié)果分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBcIgMIgG結(jié)果分析+-----無癥狀攜帶者++--+-乙肝急性期（傳染性強(qiáng)，“大三陽”）+--+-+慢性乙肝，趨向好轉(zhuǎn)，病毒低（或無）復(fù)制（“小三陽”）++--+/-+慢性乙型肝炎急性發(fā)作，病毒復(fù)制，傳染性強(qiáng)--++-+/-乙型肝炎恢復(fù)期-----+既往感染--+---感染過HBV或接種過疫苗，有免疫力整理課件整理課件預(yù)防及免疫控制傳染源，切斷傳播途徑，保護(hù)易感者人工主動免疫：疫苗（血源性、基因工程、多肽或核酸疫苗)人工被動免疫：含高效價抗HBsAb人血清球蛋白（HBIG）

8天內(nèi)有預(yù)防作用整理課件我國丙肝病毒攜帶者的比例在2%-5%隨著年齡的增長，丙肝病毒攜帶率亦增高乙肝患者容易重疊HCV感染易感人群感染HCV后，慢性化的比例高達(dá)50%以上整理課件丙型肝炎病毒HepatitisCVirus球形，有包膜+SSRNA,主要在肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制人類是HCV的天然宿主，體外培養(yǎng)困難抵抗力：不強(qiáng)對乙醚、氯仿等脂溶劑敏感。甲醛、紫外、煮沸等可滅活黃病毒科丙型肝炎病毒屬整理課件

Hypervariable

region：包膜蛋白抗原性快速變異，引起免疫逃逸，慢性肝炎的主要原因，研制疫苗障礙capsidenvelopeproteinprotease/helicaseRNApolymerasec225’coreE1E2/NS1NS2NS333cNS4c-100NS53’HepatitisCVirusGenome整理課件HCV的致病性與免疫性傳播途徑似是引起輸血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因潛伏期：4-8周致病機(jī)制與病毒的直接致病作用和免疫病理損傷有關(guān)，易于慢性化急性肝炎、慢性肝炎、無癥狀攜帶者；誘發(fā)肝外損傷：腎小球腎炎免疫力不牢固HBV整理課件HCV的診斷及預(yù)防檢查病毒RNA檢測抗HCV，必須對獻(xiàn)血員進(jìn)行該項檢測因HCV免疫原性不強(qiáng)及變異，目前尚無可用疫苗整理課件HDVPrevalenceHighIntermediateLowVery

LowNo

DataTaiwanPacificIslandsGeographicDistributionofHDVInfection我國丁肝感染率在1.6%-5%，西南地區(qū)感染率高整理課件丁型肝炎病毒（hepatitisDvirus，HDV）HDV是一種缺陷病毒，為球形。必須在HBV或其他嗜肝DNA病毒輔助下才能復(fù)制?；蚪M為環(huán)狀