第八章動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作

第八章動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)

第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑和方法第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血方法當(dāng)前1頁(yè)，總共56頁(yè)。第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定一、大鼠小鼠二、豚鼠三、家兔四、犬當(dāng)前2頁(yè)，總共56頁(yè)。小鼠的手法捉拿當(dāng)前3頁(yè)，總共56頁(yè)。大鼠的手法捉拿當(dāng)前4頁(yè)，總共56頁(yè)。大、小鼠的固定當(dāng)前5頁(yè)，總共56頁(yè)。二、豚鼠的捉拿和固定豚鼠的捉拿豚鼠的手法固定當(dāng)前6頁(yè)，總共56頁(yè)。三、家兔的捉拿和固定家兔的捉拿家兔的手法固定當(dāng)前7頁(yè)，總共56頁(yè)。四、犬的捉拿當(dāng)前8頁(yè)，總共56頁(yè)。家兔手術(shù)臺(tái)固定當(dāng)前9頁(yè)，總共56頁(yè)。第二節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，特別是手術(shù)等實(shí)驗(yàn)，為減少動(dòng)物的掙扎、保持安靜和便于操作，常對(duì)動(dòng)物采用必要的麻醉。由于動(dòng)物種屬間的差異，所采用的麻醉方法和選用的麻醉劑亦有不同。當(dāng)前10頁(yè)，總共56頁(yè)。一、常用的麻醉劑

氨基甲酸已酯戊巴比妥鈉乙醚當(dāng)前11頁(yè)，總共56頁(yè)。（一）揮發(fā)性麻醉劑包括乙醚、氯仿等。優(yōu)點(diǎn)：其麻醉量和致死量差距大，所以安全度也很大，動(dòng)物麻醉深度容易掌握，而且麻后蘇醒較快。缺點(diǎn)：對(duì)局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醉時(shí)必需有人照看，以防麻醉過(guò)深而出現(xiàn)上述情況。當(dāng)前12頁(yè)，總共56頁(yè)。（二）非揮發(fā)性麻醉劑包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類(lèi)的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛等。優(yōu)點(diǎn)：使用方便，一次給藥可維持較長(zhǎng)的麻醉時(shí)間，麻醉過(guò)程較平衡，動(dòng)物無(wú)明顯掙扎現(xiàn)象。缺點(diǎn)：蘇醒較慢。當(dāng)前13頁(yè)，總共56頁(yè)。氨基甲酸乙酯特點(diǎn)：藥性溫和安全度大多數(shù)動(dòng)物均可使用。有致癌作用不能用于腫瘤有關(guān)的實(shí)驗(yàn);有時(shí)可降低血壓。

動(dòng)物給藥途徑劑量濃度給藥量維持時(shí)間

（g/kg)﹪ml/kg

犬貓兔腹腔靜脈0.75~1.0253~42~4h豚鼠肌肉1.35207.0大小鼠腹腔1.5~2.02010當(dāng)前14頁(yè)，總共56頁(yè)。戊巴比妥鈉動(dòng)物給藥途徑劑量濃度給藥量維持時(shí)間

（mg/kg)﹪ml/kg犬貓兔靜脈3031.02~4h腹腔40~5031.4~1.7豚鼠腹腔40~5022.0~2.5大小鼠腹腔4522.3特點(diǎn)：短效麻醉劑，對(duì)動(dòng)物的循環(huán)和呼吸無(wú)顯著影響。當(dāng)前15頁(yè)，總共56頁(yè)。（三）中藥麻醉劑

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)也用到像洋金花和氫溴酸東莨菪堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才理想，故在使用過(guò)程中不能得到普及。當(dāng)前16頁(yè)，總共56頁(yè)。二、動(dòng)物的麻醉方法

（一）全身麻醉

1.吸入法

操作：用乙醚浸濕棉球或紗布，迅速轉(zhuǎn)入密閉容器使其揮發(fā)，然后把待麻醉動(dòng)物投入，約隔4～6分鐘即可麻醉，麻醉后應(yīng)立即取出。給藥過(guò)程中如發(fā)現(xiàn)動(dòng)物的角膜反射消失，瞳孔突然放大，應(yīng)立即停止麻醉?？上茸⑸浒⑼衅奉A(yù)防窒息。當(dāng)前17頁(yè)，總共56頁(yè)。2.腹腔和靜脈給藥麻醉法非揮發(fā)性麻醉劑可用作腹腔和靜脈注射麻醉，操作簡(jiǎn)便，是實(shí)驗(yàn)室最常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠，較大的動(dòng)物如兔、犬、猴等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長(zhǎng)短以及毒性的差別。所以在腹腔和靜脈麻醉時(shí)，一定控制藥物的濃度和注射量。當(dāng)前18頁(yè)，總共56頁(yè)。（二）局部麻醉

1.貓的局部麻醉一般應(yīng)用0.5～1.0%鹽酸普魯卡因注射。粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可卡因。2.兔在眼球手術(shù)時(shí)，可于結(jié)膜囊滴入0.02%鹽酸可卡因溶液，數(shù)秒鐘即可出現(xiàn)麻醉。3.犬的局部麻醉用0.5～1%鹽酸普魯卡因注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可卡因。當(dāng)前19頁(yè)，總共56頁(yè)。三、麻醉注意事項(xiàng)

1、動(dòng)物麻醉前禁食10~12h,不少于5h2、虛弱和過(guò)于肥胖的動(dòng)物給藥劑量應(yīng)低于標(biāo)準(zhǔn)量3、靜脈注射麻醉劑應(yīng)注意緩慢達(dá)到所需要的麻醉深度則停止給藥4、注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保溫。做慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。

貓為38.6℃±1.0℃，兔為38.4℃±1.0℃，大鼠為39.3℃±0.5℃

當(dāng)前20頁(yè)，總共56頁(yè)。第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中為了觀察藥物對(duì)機(jī)體功能、代謝、形態(tài)的作用需要將藥物注入到動(dòng)物的體內(nèi)。一般根據(jù)動(dòng)物種類(lèi)和藥物劑型確定給藥的方法。當(dāng)前21頁(yè)，總共56頁(yè)。一、給藥方法（一）皮下注射當(dāng)前22頁(yè)，總共56頁(yè)。動(dòng)物注射部位注射量犬貓大腿外側(cè)2ml豚鼠大腿內(nèi)側(cè)或小腹部1ml大小鼠側(cè)下腹部0.4ml/1ml當(dāng)前23頁(yè)，總共56頁(yè)。（二）皮內(nèi)注射當(dāng)前24頁(yè)，總共56頁(yè)。（三）肌肉注射動(dòng)物注射部位注射量犬臀部2~5ml家兔大腿外側(cè)0.5~1.0ml(2ml)豚鼠大腿外側(cè)0.2~0.5ml大鼠大腿外側(cè)0.2~0.5ml小鼠大腿外側(cè)0.1~0.2ml(1ml)當(dāng)前25頁(yè)，總共56頁(yè)。（四）腹腔注射當(dāng)前26頁(yè)，總共56頁(yè)。注射部位左下腹部1/3處小鼠0.1~0.2ml大鼠1~3ml豚鼠2~5ml家兔5~10ml犬5~15ml當(dāng)前27頁(yè)，總共56頁(yè)。（五）靜脈注射大小鼠的尾靜脈注射當(dāng)前28頁(yè)，總共56頁(yè)。家兔耳部血管家兔的耳緣靜脈注射耳外緣靜脈耳中央動(dòng)脈當(dāng)前29頁(yè)，總共56頁(yè)。靜脈注射給藥劑量小鼠大鼠豚鼠家兔犬0.2~0.5ml1~2ml1~5ml3~10ml5~15ml當(dāng)前30頁(yè)，總共56頁(yè)。（六）經(jīng)口給藥各種動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積:小鼠為0.5~1.0ml，大鼠為4~7ml，豚鼠為4~7ml，家兔為80~150ml，犬為200~500ml。當(dāng)前31頁(yè)，總共56頁(yè)。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥量的確定及計(jì)算方法

按照人與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體表面積比例計(jì)算（一）人體表面積計(jì)算人體表面積（m2）=0.0061×身高（cm）+0.0128×體重(kg)－0.1529例：某人身高168cm，體重55kg，試計(jì)算其體表面積。解0.0061×168+0.0128×55.0.1529=1.576m2中國(guó)人平均身高：男1.70m女1.59m,體重：男67.7kg女59.6kg當(dāng)前32頁(yè)，總共56頁(yè)。（二）動(dòng)物體表面積計(jì)算A（體表面積，以m2計(jì)算）=K×W（體重，以g計(jì)算）2/3

10000K值人小鼠大鼠豚鼠家兔貓犬猴10.69.19.19.810.19.811.211.8當(dāng)前33頁(yè)，總共56頁(yè)。計(jì)算公式A人/A動(dòng)物＝B人/B動(dòng)物A:體表面積（m2）

B:藥量（重量）

當(dāng)前34頁(yè)，總共56頁(yè)。人和動(dòng)物間按體表面積折算的等效劑量比值表

小鼠(20g)大鼠(200g)豚鼠(400g)家兔(1.5kg)貓(2.0kg)猴(4.0kg)狗(12kg)人(70kg)人(70kg)

0.00260.0180.0310.070.0780.160.821.0當(dāng)前35頁(yè)，總共56頁(yè)。第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血方法

實(shí)驗(yàn)研究中，經(jīng)常要采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液和尿液進(jìn)行常規(guī)檢查或某些生物化學(xué)分析，故必須掌握血液和尿液的正確采集、分離和保存的操作技術(shù)。當(dāng)前36頁(yè)，總共56頁(yè)。采血量采血部位動(dòng)物品種最少量血尾靜脈耳靜脈眼底靜脈叢腹壁靜脈冠、腳蹼皮下靜脈

大鼠、小鼠兔、犬、貓、豬、綿羊兔、大鼠、小鼠青蛙、蟾蜍雞、鴨、鵝最中量血后肢外側(cè)皮下小隱靜脈前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈耳中央動(dòng)脈頸靜脈心臟斷頭翼下靜脈頸動(dòng)脈犬、猴、貓犬、猴、貓兔犬、貓、兔豚鼠、大鼠、小鼠大鼠、小鼠雞、鴨、鴿、鵝雞、鴨、鴿、鵝最大量血股動(dòng)脈、頸動(dòng)脈心臟頸靜脈摘眼球犬、猴、貓、兔犬、猴、貓、兔馬、牛、山羊、綿羊大鼠、小鼠不同動(dòng)物采血部位與采血量的關(guān)系當(dāng)前37頁(yè)，總共56頁(yè)。

常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的最大安全采血量與最小致死采血量

動(dòng)物品種最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510家兔1040犬50200猴1560當(dāng)前38頁(yè)，總共56頁(yè)。一、大、小鼠采血法1.剪尾采血2.鼠尾刺血法每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3~0.5ml。當(dāng)前39頁(yè)，總共56頁(yè)。

3.眼眶靜脈叢采血體重20~25g的小鼠每次可采血0.2~0.3ml；體重200~300g大鼠每次可采血0.5~1.0ml。內(nèi)眼角當(dāng)前40頁(yè)，總共56頁(yè)。4.心臟采血當(dāng)前41頁(yè)，總共56頁(yè)。5.頸動(dòng)靜脈采血當(dāng)前42頁(yè)，總共56頁(yè)。6、摘眼球采血當(dāng)前43頁(yè)，總共56頁(yè)。二、家兔采血法

1.耳靜脈采血當(dāng)前44頁(yè)，總共56頁(yè)。2.耳中央動(dòng)脈采血

當(dāng)前45頁(yè)，總共56頁(yè)。3.心臟采血4.后肢脛部皮下靜脈采血5.股靜脈、頸靜脈取血當(dāng)前46頁(yè)，總共56頁(yè)。三、采血注意事項(xiàng)1、采血室內(nèi)光線(xiàn)充足，溫度適宜。2、采血部位采血用具應(yīng)消毒。3、盛放血液的器具應(yīng)清潔干燥。4、如果血液需要抗凝應(yīng)預(yù)先在盛放血液的容器內(nèi)加入抗凝劑。5、采血后應(yīng)注意采血部位的止血、消毒。當(dāng)前47頁(yè)，總共56頁(yè)。四、幾種常用血液抗凝劑的配制及使用力法（一）肝素（二）草酸鹽合劑（三）氟化鈉當(dāng)前48頁(yè)，總共56頁(yè)。（一）肝素1、作用機(jī)理抑制凝血酶的活力，阻止血小板凝聚2、使用方法（1）純品肝素10mg能抗凝65ml—125ml的血液。（2）用1%肝素生理鹽水溶液制作肝素試管。當(dāng)前49頁(yè)，總共56頁(yè)。（3）動(dòng)物全身抗凝大鼠3.0mg/kgw家兔10mg/kgw犬5.0mg/kgw

肝素可改變蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，當(dāng)用鹽析法分離蛋白作分類(lèi)測(cè)定時(shí)，不可采用素。當(dāng)前50頁(yè)，總共56頁(yè)。（二）草酸鹽合劑配制：稱(chēng)取草酸銨1.2g、草酸鉀0.8g、福爾馬林0.1ml，用蒸餾水加至100ml。1、作用機(jī)理能夠沉淀血凝過(guò)程中所必需