基因工程學(xué)案檢測-高二下學(xué)期生物人教版（2019）選擇性必修3

基因工程學(xué)案檢測1．限制性核酸內(nèi)切酶(也稱“限制酶”)(1)特點(diǎn)：①識(shí)別雙鏈DNA分子的某種序列。②切割特定核苷酸序列中的特定切點(diǎn)。(2)作用：斷裂特定的兩個(gè)核苷酸之間的。(3)結(jié)果：產(chǎn)生。2．DNA連接酶E?coliDNA連接酶來源于、連接末端；T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，連接兩種末端，但連接末端效率低。3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體(1)種類有、λ噬菌體的衍生物和。(2)必備條件：在宿主細(xì)胞中保存下來并大量、有多個(gè)、有一定的，便于篩選、對(duì)受體細(xì)胞無害，大小適宜。4.目的基因的獲取方法①從基因文庫中獲取目的基因，包括基因組文庫和。②利用技術(shù)擴(kuò)增目的基因：③直接人工合成目的基因（根據(jù)氨基酸序列合成DNA）5.基因表達(dá)載體的組成為：、目的基因、終止子、。6．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是。如圖表示四種質(zhì)粒和目的基因，其中，質(zhì)粒上箭頭所指部位為酶的識(shí)別位點(diǎn)，陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因載體的質(zhì)粒是()7．下表所示為幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，請(qǐng)回答下列問題：(1)從表中四種酶的切割位點(diǎn)看，可以切出平末端的酶是________。(2)將目的基因與質(zhì)粒DNA縫合依靠的是________酶，它的作用是形成磷酸二酯鍵。(3)圖1中的質(zhì)粒分子可被表中限制酶________切割，切割后的質(zhì)粒含有________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(4)在相關(guān)酶的作用下，圖1中的甲與圖2中的乙________(填“能”或“不能”)拼接起來。請(qǐng)說明理由：____________________________________。一、知識(shí)點(diǎn)填空1、基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：______________________、___________________、___________________、__________________________。2、目的基因的獲取目的基因可以從____________________________，也可以用_________________。目的基因主要是指____________________，也可以是一些____________________________。獲取目的基因的方法有以下幾種：、_______________________________、_____________________________________。3、基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因工程的核心是___________________。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除了外，還必須有_____________、_____________以及_____________等。4、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化：___________________________________________________________。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是______________，除此之外，還有________和______________等方法。______________是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法。大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用_______處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種___________________________________的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為。5、目的基因的檢測與鑒定要檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因，非常關(guān)鍵，檢測方法是______________。要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，檢測方法是______________。檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是______________。除了上述分子檢測外，有的還需要進(jìn)行________________的鑒定。習(xí)題練習(xí)1、受體細(xì)胞不同,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法也不相同,下列受體細(xì)胞與導(dǎo)入方法匹配錯(cuò)誤的一項(xiàng)是（）A.棉花細(xì)胞—花粉管通道法B.大腸桿菌—農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C.羊受精卵—顯微注射技術(shù)D.番茄細(xì)胞—基因槍法2、在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草的過程中以下操作中錯(cuò)誤的是()A.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體B.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸C.將重組DNA分子導(dǎo)入煙草體細(xì)胞D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞3、若要利用某目的基因(見圖甲)和P1噬菌體載體(見圖乙)構(gòu)建重組DNA(見圖丙)，限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是()A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體4、科學(xué)家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因Pin－Ⅱ?qū)霔顦浼?xì)胞，培育成了抗蟲楊樹。下圖表示含目的基因的DNA分子和農(nóng)桿菌質(zhì)粒，圖中AmpR表示氨芐青霉素抗性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭頭表示識(shí)別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述不正確的是()A．目的基因插入到質(zhì)粒的T－DNA上，才能整合到受體細(xì)胞染色體中B．為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRⅠ和PstⅠC．成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素D．可用PCR等技術(shù)或抗原—抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)5.蛋白質(zhì)工程流程圖（1）③；④；（2）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)→推測應(yīng)有的序列→找到對(duì)應(yīng)的