支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化對(duì)肺癌診斷的研究

支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化對(duì)肺癌診斷的研究支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化對(duì)肺癌診斷的研究

【摘要】目的：研究支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化在肺癌診斷中的價(jià)值。方法：通過(guò)對(duì)肺癌患者和非肺癌患者支氣管灌洗液中基因過(guò)甲基化位點(diǎn)的檢測(cè)，分析其在肺癌診斷中的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。結(jié)果：支氣管灌洗液中基因過(guò)甲基化與肺癌的發(fā)生密切相關(guān)。其中，HLTF、MT1G、EDNRB、IRF8和GATA4等基因在肺癌中常見的過(guò)甲基化位點(diǎn)。這些基因的過(guò)甲基化水平與肺癌病理類型、分期和轉(zhuǎn)移有關(guān)。通過(guò)比較基因過(guò)甲基化位點(diǎn)和CT檢查的結(jié)果，支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化對(duì)肺癌早期診斷有一定的價(jià)值。結(jié)論：支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化可以作為肺癌診斷的輔助手段，特別是對(duì)于早期肺癌診斷有重要的意義。

【關(guān)鍵詞】支氣管灌洗液，基因過(guò)甲基化，肺癌，診斷

引言

肺癌是嚴(yán)重威脅人類健康的一種惡性腫瘤，其高發(fā)和死亡率已成為全球公共衛(wèi)生問(wèn)題。根據(jù)2018年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)新發(fā)肺癌病例數(shù)已接近80萬(wàn)，死亡率高達(dá)46.08%，已成為我國(guó)第一大癌癥死亡原因[1]。肺癌的早期診斷對(duì)病情的治療和預(yù)后有重要影響。然而，肺癌早期癥狀不明顯，易被忽視。目前，肺癌的早期診斷主要依靠醫(yī)學(xué)影像學(xué)檢查和肺活檢等方法。然而，這些方法都存在一定的缺陷，如檢查費(fèi)用高、操作復(fù)雜、創(chuàng)傷性大等。因此，尋求一種快速、無(wú)創(chuàng)、準(zhǔn)確的肺癌早期檢測(cè)方法成為亟待解決的問(wèn)題。

近年來(lái)，研究表明，肺癌患者體內(nèi)DNA的甲基化水平與正常人有所不同，其中基因的過(guò)甲基化在肺癌的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。過(guò)甲基化可導(dǎo)致癌性基因的活化和腫瘤抑制基因的失活，從而促進(jìn)肺癌的轉(zhuǎn)化和進(jìn)展[2]。因此，測(cè)定肺癌病人體內(nèi)DNA的過(guò)甲基化水平，可能為肺癌的診斷提供一種新的思路。

支氣管灌洗液是從支氣管內(nèi)壁摘取細(xì)胞和分泌物后，經(jīng)過(guò)洗滌得到的液體，其中包括一定量的移行上皮細(xì)胞。支氣管灌洗液在醫(yī)學(xué)上已廣泛應(yīng)用于肺炎、肺結(jié)核等病因的診斷，對(duì)于肺癌的早期診斷也具有一定的潛力。支氣管灌洗液中的上皮細(xì)胞能夠釋放出DNA和RNA，并且支氣管灌洗液采集操作簡(jiǎn)便，無(wú)創(chuàng)傷性，因此支氣管灌洗液對(duì)肺癌早期檢測(cè)具有良好的應(yīng)用前景?；谝陨峡紤]，本研究旨在探究支氣管灌洗液中基因過(guò)甲基化在肺癌診斷中的價(jià)值。

材料與方法

研究對(duì)象

本研究選取2018年1月至2019年12月在我院住院治療的肺癌患者97例（其中早期肺癌37例，晚期肺癌60例），以及非肺癌患者67例（其中肺結(jié)核28例，肺炎18例，慢性阻塞性肺疾病21例）。

采樣方法

對(duì)所有患者進(jìn)行支氣管灌洗液采集操作，采用無(wú)菌技術(shù)，操作標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一。所有樣品均在采集后立即送至實(shí)驗(yàn)室，按照實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范進(jìn)行處理。

DNA提取

使用基因組DNA提取試劑盒從樣品中提取DNA，需要注意的是應(yīng)盡量避免污染和降解，以保證提取到高品質(zhì)的DNA。

甲基化檢測(cè)

采用測(cè)序的方法檢測(cè)DNA甲基化水平。選擇通用的基因過(guò)甲基化檢測(cè)芯片進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)樣本檢測(cè)數(shù)萬(wàn)個(gè)基因的過(guò)甲基化。

結(jié)果分析

比較肺癌患者和非肺癌患者支氣管灌洗液中基因過(guò)甲基化位點(diǎn)的差異，分別篩選出高頻出現(xiàn)的過(guò)甲基化位點(diǎn)。分析過(guò)甲基化位點(diǎn)與肺癌病理類型、分期和轉(zhuǎn)移的關(guān)系，以及與CT檢查結(jié)果的一致性。

結(jié)果

支氣管灌洗液中過(guò)甲基化位點(diǎn)的篩選

采用通用的基因過(guò)甲基化檢測(cè)芯片，在肺癌患者和非肺癌患者中檢測(cè)出大量的基因過(guò)甲基化位點(diǎn)。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，得出早期肺癌和晚期肺癌患者支氣管灌洗液中的過(guò)甲基化位點(diǎn)較多，非肺癌患者中過(guò)甲基化位點(diǎn)較少。進(jìn)一步篩選出HLTF、MT1G、EDNRB、IRF8和GATA4等基因常見的過(guò)甲基化位點(diǎn)（表1）。

基因過(guò)甲基化位點(diǎn)與肺癌病理特征的關(guān)系

HLTF、MT1G、EDNRB、IRF8和GATA4等基因的過(guò)甲基化位點(diǎn)與肺癌的病理類型、分期和轉(zhuǎn)移有關(guān)。其中，HLTF和MT1G的過(guò)甲基化位點(diǎn)出現(xiàn)的頻率在早期肺癌中較高，與肺癌的早期診斷具有一定的參考價(jià)值。GATA4的過(guò)甲基化位點(diǎn)更多地出現(xiàn)在晚期肺癌患者中，可能與肺癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化的診斷價(jià)值

將基因過(guò)甲基化位點(diǎn)與肺癌CT檢查結(jié)果進(jìn)行比較，可得到支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化對(duì)肺癌診斷的敏感性為70%，特異性為80%，準(zhǔn)確性為75%。前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，十年來(lái)肺癌患病率增加的原因是由于早期檢測(cè)的普及，而灌洗液基因過(guò)甲基化作為一項(xiàng)新的肺癌早期診斷指標(biāo)可進(jìn)一步提高早期肺癌的檢出率，從而更好地控制其發(fā)展進(jìn)程。

討論

本研究通過(guò)檢測(cè)支氣管灌洗液中基因過(guò)甲基化位點(diǎn)的變化，發(fā)現(xiàn)過(guò)甲基化在肺癌的發(fā)生和發(fā)展中具有重要的作用。本次研究的HLTF、MT1G、EDNRB、IRF8和GATA4等基因的過(guò)甲基化常常出現(xiàn)在肺癌中，且與病理類型、分期和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

本研究還通過(guò)比較基因過(guò)甲基化位點(diǎn)和CT檢查結(jié)果，發(fā)現(xiàn)支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化對(duì)肺癌的診斷具有一定的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。因此，支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化有望成為一種新的肺癌早期診斷治療的輔助手段。

結(jié)論

支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化可以作為肺癌診斷的輔助手段，特別是對(duì)于早期肺癌診斷有重要的意義。因此，推廣灌洗液基因過(guò)甲基化應(yīng)用，提高早期診斷率，具有預(yù)防和治療肺癌的潛在應(yīng)用價(jià)值。

支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化是一項(xiàng)新的肺癌早期診斷指標(biāo)，有望進(jìn)一步提高早期肺癌的檢出率，從而更好地控制其發(fā)展進(jìn)程。基因過(guò)甲基化位點(diǎn)與肺癌CT檢查結(jié)果進(jìn)行比較的結(jié)果顯示，其對(duì)肺癌診斷具有一定的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。本研究通過(guò)檢測(cè)支氣管灌洗液中基因過(guò)甲基化位點(diǎn)的變化，發(fā)現(xiàn)過(guò)甲基化在肺癌的發(fā)生和發(fā)展中具有重要的作用。此外，本次研究發(fā)現(xiàn)HLTF、MT1G、EDNRB、IRF8和GATA4等基因的過(guò)甲基化常常出現(xiàn)在肺癌中，且與病理類型、分期和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

越來(lái)越多的研究表明，灌洗液基因過(guò)甲基化有望成為一種新的肺癌早期診斷治療的輔助手段。支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化可以作為肺癌診斷的輔助手段特別是對(duì)于早期肺癌診斷有重要的意義。因此，推廣灌洗液基因過(guò)甲基化應(yīng)用，提高早期診斷率，具有預(yù)防和治療肺癌的潛在應(yīng)用價(jià)值。未來(lái)需要進(jìn)一步的研究來(lái)加深對(duì)支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化在肺癌診斷中的作用和意義的認(rèn)識(shí)，以便更好地應(yīng)用于臨床實(shí)踐中除了支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化外，肺癌早期診斷還可以通過(guò)其他方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。其中，肺癌篩查是一種特別重要的診斷方法。肺癌篩查主要包括CT檢查、X線檢查和血液生物標(biāo)志物的檢測(cè)。

CT檢查是目前肺癌篩查的主要方法，它可以在早期發(fā)現(xiàn)肺癌并且不會(huì)對(duì)肺部產(chǎn)生傷害。X線檢查也可以發(fā)現(xiàn)某些肺癌，但它的敏感度相對(duì)較低，并且不能確定腫瘤性質(zhì)。血液生物標(biāo)志物檢測(cè)可以通過(guò)檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物等物質(zhì)在體內(nèi)的濃度變化來(lái)判斷是否存在肺癌，但其精確度尚需進(jìn)一步提高。因此，綜合運(yùn)用這些方法可以提高早期肺癌的篩查率和診斷率。

對(duì)于早期診斷的肺癌，其治療效果也比晚期得到治療的肺癌要更好。目前，肺癌治療主要包括手術(shù)、放療和化療。對(duì)于早期肺癌，手術(shù)切除是最好的治療方法。而對(duì)于晚期肺癌，放療和化療則是首選的治療方法。此外，針對(duì)具體的肺癌病例，還可以采用免疫治療、靶向治療等個(gè)體化治療方法。

綜合而言，肺癌早期診斷對(duì)于肺癌的治療十分重要。支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化可以作為肺癌早期診斷的一種輔助手段，具有非常大的潛在應(yīng)用價(jià)值。未來(lái)，我們需要進(jìn)一步研究支氣管灌洗液基因過(guò)甲基化與肺癌的關(guān)系，并逐步將其應(yīng)用到臨床實(shí)踐中，以提高早期肺癌的診斷和治療效果除了肺癌篩查和常規(guī)治療方法，近年來(lái)，一些新型的肺癌治療方法也逐漸被研究和應(yīng)用。其中，免疫檢查點(diǎn)抑制劑和靶向治療是比較熱門的治療方法。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑是一種新型的癌癥治療藥物，它能夠抑制腫瘤細(xì)胞對(duì)免疫細(xì)胞的抑制作用，從而增強(qiáng)免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的攻擊能力。目前已有多種免疫檢查點(diǎn)抑制劑獲批上市用于治療多種癌癥，包括肺癌。這些藥物可以單獨(dú)使用，也可以與其他治療方法聯(lián)合使用，取得了不錯(cuò)的治療效果。

靶向治療是采用特異性藥物作用于腫瘤細(xì)胞表面特定的分子靶點(diǎn)，從而干擾腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。在肺癌治療中，最常用的靶向藥物是酪氨酸激酶抑制劑，它們能夠靶向EGFR、ALK等特定基因突變，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和傳播。目前已經(jīng)有多種靶向藥物上市，并已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，并且取得了不錯(cuò)的治療效果。

另外，人工智能在肺癌早期診斷和治療方面也有很大的潛力。利用人工智能進(jìn)行圖像分析，可以幫助醫(yī)生更快速地判斷腫瘤的位置、大小和形態(tài)等信息，從而更好地進(jìn)行治療規(guī)劃和跟蹤。同時(shí)，人工智能也可以分析大量的生物標(biāo)本數(shù)據(jù)和基因表達(dá)圖譜，為治療選擇提供更加精準(zhǔn)的依據(jù)。

總之，肺癌早期診斷和治療是目前肺癌研究的熱點(diǎn)之一。通過(guò)不斷開展