血液學(xué)一般檢驗(yàn)緒論第一章詳解演示文稿_第1頁(yè)
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血液學(xué)一般檢驗(yàn)緒論第一章詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日(優(yōu)選)血液學(xué)一般檢驗(yàn)緒論第一章現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日1903年美國(guó)賓西法尼亞州立醫(yī)院成立了第一個(gè)專門的臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室1931年,恩斯特·魯斯卡通過(guò)研制電子顯微鏡,使生物學(xué)發(fā)生了一場(chǎng)革命。

1950年美國(guó)學(xué)者Levey和Jennings發(fā)表第一篇關(guān)于使用質(zhì)控圖的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉開序幕,該方法至今仍被各臨床實(shí)驗(yàn)室所使用。國(guó)外醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日19世紀(jì)70年代,德國(guó)學(xué)者Koch創(chuàng)造固體培養(yǎng)基,將細(xì)菌從環(huán)境或病人排泄物等標(biāo)本中分離成單一菌落1959放射免疫分析技術(shù)及1975年單克隆抗體技術(shù)的創(chuàng)立均獲得諾貝爾生物醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。

1985年美國(guó)PECetus公司人類遺傳研究室的Mullis等發(fā)明了具有劃時(shí)代意義的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)國(guó)外醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日新中國(guó)成立時(shí),檢驗(yàn)專業(yè)技術(shù)人員4000余人1979年9月成立了中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì),并在WHO的支持指導(dǎo)下,同年成立了衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史

現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日70年代我國(guó)參加了世界衛(wèi)生組織的臨床化學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)1991年我國(guó)衛(wèi)生部部長(zhǎng)令:首批淘汰三十五項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目

1990年后,一些高科技、分子生物學(xué)技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)方面應(yīng)用迅速增多2000年《中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志》正式更名為《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》,檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)作為一個(gè)學(xué)科名稱正式確立。國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日clinicallaboratorytechnologyorscience臨床檢驗(yàn)

通過(guò)實(shí)驗(yàn)室的各種檢查方法,包括感官檢查、理學(xué)檢查、化學(xué)檢查、顯微鏡檢查以及自動(dòng)化儀器檢查等,對(duì)病人的血液、體液、分泌物和排泄物等標(biāo)本進(jìn)行檢查、分析,以獲得病原、病理變化及臟器功能狀態(tài)等資料?,F(xiàn)在是7頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日醫(yī)院檢驗(yàn)科臨檢室生化室免疫室血液室基因室微生物室病理室現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日從手工檢測(cè)進(jìn)行儀器自動(dòng)化檢測(cè)檢驗(yàn)試劑批量化、專業(yè)化、多樣化檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)施了全面的質(zhì)量管理和保證床旁檢測(cè)(pointofcaretest,POCT)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)的現(xiàn)狀現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)的臨床應(yīng)用

1、為準(zhǔn)確診斷、及時(shí)治療提供依據(jù)

臨床檢驗(yàn)的結(jié)果是支持診斷、鑒別診斷、甚至確定診斷的主要依據(jù)例:anemia依據(jù):血中紅細(xì)胞和血紅蛋白量減少leukemia依據(jù):血象和骨髓象變化腎臟有實(shí)質(zhì)性損傷依據(jù)尿液中出現(xiàn)蛋白、細(xì)胞、管型tumor?現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日2、為分析病情、觀察療效、判斷預(yù)后提供依據(jù)

在疾病過(guò)程中,血液、體液、分泌物和排泄物也會(huì)隨之發(fā)生相應(yīng)的變化3、為預(yù)防疾病提供資料

如血象和腫瘤細(xì)胞學(xué)的普查等臨床檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用4、為科學(xué)研究提供醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日目視檢查:

直接觀察標(biāo)本:顏色、透明度、性狀,有無(wú)凝塊或寄生蟲理學(xué)檢查:

液體的相對(duì)密度、血液比粘度、紅細(xì)胞沉降率、紅細(xì)胞比積等病理變化臨床檢驗(yàn)的一般方法(1)現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日化學(xué)檢查:

定性和定量檢測(cè)標(biāo)本化學(xué)成分的病理變化顯微鏡檢查:

觀察有型成分的數(shù)量和形態(tài)自動(dòng)化儀器檢查:

電子技術(shù)、程序控制的發(fā)展臨床檢驗(yàn)的一般方法(2)現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日

理論聯(lián)系實(shí)踐實(shí)驗(yàn)技能和方法學(xué)評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果參考值及臨床意義檢驗(yàn)工作者的醫(yī)德學(xué)習(xí)臨床檢驗(yàn)的基本要求現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日thanks現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日血液標(biāo)本的采集現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日一、血液生理血液的組成血液的理化特性血液的功能現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日血液血漿血細(xì)胞紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板

水:90~92%

血漿蛋白

溶質(zhì):8~10%小分子物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)激素代謝產(chǎn)物有機(jī)物無(wú)機(jī)鹽(電解質(zhì))白蛋白球蛋白纖維蛋白原血液的組成及血漿成分現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日血液的功能1

營(yíng)養(yǎng)2運(yùn)輸3緩沖

4參與機(jī)體免疫參與凝血和抗凝現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日二、血液標(biāo)本的采集現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日全血靜脈全血:G-6-PD、糖化血紅蛋白、基因檢測(cè)動(dòng)脈全血:血?dú)夥治瞿┥匀河糜诩?xì)胞計(jì)數(shù)、分類、形態(tài)觀察分類現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日血漿:全血去除血細(xì)胞,用于血栓止血檢測(cè)血清:全血自然凝固后析出的液體,用于生物化學(xué)、免疫學(xué)檢測(cè)等分類現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日采血用品現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日1、皮膚采血法:微量檢測(cè)(thecollectionofcapillaryblood)

采血部位:耳垂或手指末梢血液標(biāo)本采集的方法現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日2、靜脈采血法(thecollectionofvenousblood)

用于血沉、免疫、生化等檢測(cè)項(xiàng)目部位:以肘部靜脈為主采集方法現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日注血標(biāo)本法現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日采血的注意事項(xiàng)現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日頭蓋顏色臨床用途標(biāo)本類型采血量(ml)紅色

血清生化血庫(kù)試驗(yàn)血清3.04.05.07.0綠色快速血漿生化血流變?cè)囼?yàn)血漿3.04.05.0黃色快速血清生化藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)血清3.55.0

紫色血液常規(guī)、全血試驗(yàn)血流變?cè)囼?yàn)全血2.05.0

淺藍(lán)色凝血試驗(yàn)?zāi)蜃釉囼?yàn)血漿1.82.7

黑色手工血沉試驗(yàn)全自動(dòng)血沉試驗(yàn)全血1.82.4

真空采血管顏色及應(yīng)用現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日多管血分配順序黃色紅色紫色黑色綠色淺藍(lán)色現(xiàn)在是33頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日動(dòng)脈采血法通常選用橈動(dòng)脈(方便)、股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)規(guī)范操作,以減少誤差毛細(xì)血管采血時(shí)應(yīng)避開傷損部位,避免擠壓皮膚,血液應(yīng)自然流出靜脈采血時(shí)壓脈帶壓迫時(shí)間不宜太長(zhǎng)動(dòng)脈采血后應(yīng)立即與空氣隔絕,阻止血?dú)饨粨Q

標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)注意:嚴(yán)禁在靜脈輸液管中采集血液現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日兩種采血方法的應(yīng)用皮膚采血法靜脈采血法缺點(diǎn)限制了重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追加實(shí)驗(yàn),標(biāo)本量少,局部炎癥可得假結(jié)果,組織液可混入不同抗凝劑的使用,改變血液性質(zhì),影響有形成分的形態(tài)優(yōu)點(diǎn)價(jià)廉、快速、操作簡(jiǎn)便,標(biāo)本可直接測(cè)定標(biāo)本代表性大,無(wú)組織液影響,適于臨床研究,可重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追加其他實(shí)驗(yàn)現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日

標(biāo)本送檢、保存與處理

唯一標(biāo)識(shí)、生物安全原則、盡快運(yùn)送接收與拒收標(biāo)本原則;未檢測(cè)標(biāo)本的保存、檢測(cè)后標(biāo)本析保存檢驗(yàn)后血液標(biāo)本的處理

現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日抗凝劑的選擇和運(yùn)用抗凝

用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,稱為抗凝。抗凝劑

鈣拮抗劑、肝素。概念現(xiàn)在是38頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日抗凝原理:形成草酸鈣沉淀使用方法:草酸鈉0.1mol/L和血液1:9優(yōu)點(diǎn):溶解性好,價(jià)廉缺點(diǎn):對(duì)凝血因子保護(hù)功能差,影響凝血因子;形成草酸鈣沉淀物,影響自動(dòng)凝血儀器的使用使用范圍:雙草酸鹽維持紅細(xì)胞體積,使血小板聚集、白細(xì)胞形態(tài)改變草酸鹽現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日抗凝原理:與鈣離子生成可溶性的鰲合物使用方法:配成109mmol/L的濃度和血液1:9,106mmol/L的濃度和血液1:4優(yōu)點(diǎn):對(duì)凝血因子有很好的保護(hù)作用缺點(diǎn):血液中溶解度低,抗凝作用較弱使用范圍:止血學(xué)檢驗(yàn)、血沉、輸血保養(yǎng)液(毒性?。╄蹤此徕c現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日抗凝原理:生成可溶性的鰲合物。使用方法:15g/LEDTA和血液1:10。優(yōu)點(diǎn):對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞形態(tài)影響小。缺點(diǎn):影響血小板的聚集。使用范圍:全血細(xì)胞分析和血細(xì)胞比容測(cè)定,不適用于出凝血實(shí)驗(yàn)和血小板功能乙二胺四乙酸(EDTA)鹽現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日抗凝原理:加強(qiáng)抗凝血酶作用使用方法:肝素鈉1g/L與血液1:10優(yōu)點(diǎn):抗凝能力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血、能耐高溫缺點(diǎn):引起白細(xì)胞聚集,使白細(xì)胞計(jì)數(shù)降低,不利于制備血涂片,價(jià)格昂貴使用范圍:紅細(xì)胞脆性實(shí)驗(yàn),科學(xué)研究等肝素現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日謝謝現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日血涂片的用途:

血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)網(wǎng)織紅異常寄生蟲檢驗(yàn)四、血涂片

血涂片的制備技術(shù)現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日涂片技術(shù)是制備血液樣品最常用的技術(shù)。將血液樣品制成單層細(xì)胞的涂片標(biāo)本,染色后可對(duì)血液中各種細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行形態(tài)觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞大小測(cè)量等工作。實(shí)驗(yàn)原理現(xiàn)在是45頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日

1.采血

2.制作涂片

3.干燥涂片

4.標(biāo)記涂片

5.染色

6.觀察結(jié)果血涂片制備步驟(手工推片法)現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日醫(yī)用一次性采血針酒精棉球鑷子經(jīng)脫脂洗凈的載玻片雙凹片(推片)

實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備現(xiàn)在是47頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日采血現(xiàn)在是49頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日由于第一滴血中含單核白細(xì)胞較多,因此棄去第一滴血現(xiàn)在是50頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日推片:擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)現(xiàn)在是51頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日

再取另一張邊緣光滑的雙凹片,斜置于血滴的前緣,先向后稍移動(dòng)輕輕觸及血滴,使血液沿玻片端展開成線狀?,F(xiàn)在是52頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日30~45°

兩玻片的角度以30~45°為宜,輕輕將雙凹片向前勻速推進(jìn),即涂成血液薄膜。現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日

將推玻片向后稍抽回,當(dāng)血液充滿推玻片的寬度后,以一定均勻的速度向前方滑動(dòng)。血涂片的制作現(xiàn)在是54頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日均勻厚薄頭體尾邊緣兩側(cè)血涂片質(zhì)量評(píng)價(jià)注意:血滴大,速度快、角度大----血膜厚現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日現(xiàn)在是56頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日染料(天然染料和人工染料)

發(fā)色基團(tuán)和助色基團(tuán)使生物學(xué)染色劑產(chǎn)生顏色和被染組織親合。五、血細(xì)胞常用的染色方法現(xiàn)在是57頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日堿性染料:陽(yáng)離子染料,能接受質(zhì)子,染細(xì)胞核的染料(如亞甲藍(lán)、天青)酸性染料:陰離子染料,能釋放質(zhì)子。能結(jié)合細(xì)胞的堿性成分并染色,如血紅蛋白,嗜酸性顆粒成分等。復(fù)合染料:同時(shí)具有陰、陽(yáng)離子型的染料如瑞氏染料染料的分類現(xiàn)在是58頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日物理作用:滲透、吸收、吸附作用等化學(xué)作用:a、染料的化學(xué)成分:助色基團(tuán)的存在。堿性染料在溶媒中為陽(yáng)離子型,易與組織和細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)結(jié)合;而酸性染料在溶媒中為陰離子型,與帶正電荷的堿性物質(zhì)結(jié)合。細(xì)胞著色原理現(xiàn)在是59頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日b.蛋白質(zhì)的化學(xué)性質(zhì):蛋白質(zhì)中的氨基酸含有不同數(shù)量的氨基(-NH2)和羧基(-COOH),同時(shí)還有其他活性基團(tuán)。在游離狀態(tài)時(shí),-NH2獲得一個(gè)H+變成帶正電的-NH3+,而-COOH失去一個(gè)H+變成帶負(fù)電的-COO-。分別與不同染料結(jié)合?;瘜W(xué)作用現(xiàn)在是60頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日C.周圍環(huán)境的酸堿度:如環(huán)境pH<pI(pI為等電點(diǎn)),則蛋白質(zhì)帶正電,結(jié)合酸性染料;反之,pH>pI,則結(jié)合堿性染料?;瘜W(xué)作用現(xiàn)在是61頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日染色原理

分兩相進(jìn)行,第一相是酸性伊紅與細(xì)胞中的堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結(jié)合;堿性染料天青B與細(xì)胞中的酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、特異中性顆粒、血小板結(jié)合。第二相是天青B和伊紅結(jié)合在適宜條件下形成紫色的天青B-伊紅復(fù)合物,結(jié)果使白細(xì)胞核染色質(zhì)成紫色(瘧原蟲的染色質(zhì)成紅色),中性粒細(xì)胞的顆粒及血小板顆粒區(qū)成紫色。

瑞氏染色法現(xiàn)在是62頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日試劑

1.Wright染液瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml甲醇:有強(qiáng)大的脫水力,可將細(xì)胞固定為一定形態(tài),并使蛋白質(zhì)沉淀為顆粒狀、網(wǎng)狀等結(jié)構(gòu),增加細(xì)胞與染料接觸表面積,提高對(duì)染料的吸附作用,增強(qiáng)染色效果。瑞氏染色法現(xiàn)在是63頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日試劑

2.磷酸鹽緩沖液(PBS)磷酸二氫鉀(無(wú)水)0.3g,磷酸氫二鈉(無(wú)水)0.2g,蒸餾水加到1000ml。配好后用磷酸鹽溶液校正pH,塞緊瓶口備用。瑞氏染色法現(xiàn)在是64頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日a.用蠟筆在血膜兩頭劃線,平放于染色架上b.加瑞氏染液覆蓋血膜,固定1minc.滴加等量或稍多的緩沖液,混勻,染色10-15分鐘d.用清水沖洗,待干后油鏡鏡檢瑞氏染色方法現(xiàn)在是65頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日染色

待涂片在空氣中完全干燥后,滴加數(shù)滴Wright’s染液蓋滿血膜為止,染色1min。然后滴加等量或稍多緩沖液,使其與染液均勻混合,靜置10~15min。用流水緩緩沖去染液,待干鏡檢。

現(xiàn)在是66頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日染色原理

基本成分仍然是伊紅和亞甲藍(lán),改進(jìn)了染料的質(zhì)量,使細(xì)胞核著色好,結(jié)構(gòu)顯示更清晰,而胞漿和中性顆粒染色較差。試劑

Giemsa染液甲醇純甘油姬姆薩染色法現(xiàn)在是67頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日1.甲醇固定干燥血膜3-5min2.將血膜在染液中浸染10-30min3.流水沖洗,待干后鏡檢姬姆薩染色方法現(xiàn)在是68頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日瑞氏和姬氏染粉按一定比例混合,用甲醇溶解配制成瑞-姬染液。染色過(guò)程和染色原理與瑞氏染色類似。瑞-姬染色現(xiàn)在是69頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日新鮮配制的染液偏堿,染色效果較差,應(yīng)貯存一段時(shí)間后再用。不能使用肝素抗凝標(biāo)本玻片必須清潔、干燥、無(wú)塵。使用玻片時(shí),只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面染色注意事項(xiàng)現(xiàn)在是70頁(yè)\一共有79頁(yè)\編輯于星期日制作涂片時(shí)根據(jù)血細(xì)胞比容、血粘度的高低決定應(yīng)采用血滴的大小及推片的角度和速度。血涂片干透后方可固定染色。根據(jù)染液濃度

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