血液學一般檢驗緒論第一章詳解演示文稿

血液學一般檢驗緒論第一章詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有79頁\編輯于星期日（優(yōu)選）血液學一般檢驗緒論第一章現(xiàn)在是2頁\一共有79頁\編輯于星期日1903年美國賓西法尼亞州立醫(yī)院成立了第一個專門的臨床檢驗實驗室1931年，恩斯特·魯斯卡通過研制電子顯微鏡，使生物學發(fā)生了一場革命。

1950年美國學者Levey和Jennings發(fā)表第一篇關于使用質(zhì)控圖的實驗室室內(nèi)質(zhì)控，臨床檢驗實驗室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉開序幕，該方法至今仍被各臨床實驗室所使用。國外醫(yī)學檢驗學發(fā)展簡史現(xiàn)在是3頁\一共有79頁\編輯于星期日19世紀70年代，德國學者Koch創(chuàng)造固體培養(yǎng)基，將細菌從環(huán)境或病人排泄物等標本中分離成單一菌落1959放射免疫分析技術及1975年單克隆抗體技術的創(chuàng)立均獲得諾貝爾生物醫(yī)學獎。

1985年美國PECetus公司人類遺傳研究室的Mullis等發(fā)明了具有劃時代意義的聚合酶鏈反應技術國外醫(yī)學檢驗學發(fā)展簡史現(xiàn)在是4頁\一共有79頁\編輯于星期日新中國成立時，檢驗專業(yè)技術人員4000余人1979年9月成立了中華醫(yī)學會檢驗分會，并在WHO的支持指導下，同年成立了衛(wèi)生部臨床檢驗中心國內(nèi)醫(yī)學檢驗學發(fā)展簡史

現(xiàn)在是5頁\一共有79頁\編輯于星期日70年代我國參加了世界衛(wèi)生組織的臨床化學質(zhì)量評價活動1991年我國衛(wèi)生部部長令：首批淘汰三十五項檢驗項目

1990年后，一些高科技、分子生物學技術在檢驗醫(yī)學方面應用迅速增多2000年《中華醫(yī)學檢驗雜志》正式更名為《中華檢驗醫(yī)學雜志》，檢驗醫(yī)學作為一個學科名稱正式確立。國內(nèi)醫(yī)學檢驗學發(fā)展簡史現(xiàn)在是6頁\一共有79頁\編輯于星期日clinicallaboratorytechnologyorscience臨床檢驗

通過實驗室的各種檢查方法，包括感官檢查、理學檢查、化學檢查、顯微鏡檢查以及自動化儀器檢查等，對病人的血液、體液、分泌物和排泄物等標本進行檢查、分析，以獲得病原、病理變化及臟器功能狀態(tài)等資料?，F(xiàn)在是7頁\一共有79頁\編輯于星期日醫(yī)院檢驗科臨檢室生化室免疫室血液室基因室微生物室病理室現(xiàn)在是8頁\一共有79頁\編輯于星期日從手工檢測進行儀器自動化檢測檢驗試劑批量化、專業(yè)化、多樣化檢驗方法標準化實施了全面的質(zhì)量管理和保證床旁檢測（pointofcaretest,POCT）醫(yī)學檢驗學的現(xiàn)狀現(xiàn)在是9頁\一共有79頁\編輯于星期日臨床檢驗基礎的臨床應用

1、為準確診斷、及時治療提供依據(jù)

臨床檢驗的結果是支持診斷、鑒別診斷、甚至確定診斷的主要依據(jù)例：anemia依據(jù)：血中紅細胞和血紅蛋白量減少leukemia依據(jù)：血象和骨髓象變化腎臟有實質(zhì)性損傷依據(jù)尿液中出現(xiàn)蛋白、細胞、管型tumor？現(xiàn)在是10頁\一共有79頁\編輯于星期日2、為分析病情、觀察療效、判斷預后提供依據(jù)

在疾病過程中，血液、體液、分泌物和排泄物也會隨之發(fā)生相應的變化3、為預防疾病提供資料

如血象和腫瘤細胞學的普查等臨床檢驗的臨床應用4、為科學研究提供醫(yī)學檢驗數(shù)據(jù)現(xiàn)在是11頁\一共有79頁\編輯于星期日目視檢查:

直接觀察標本：顏色、透明度、性狀，有無凝塊或寄生蟲理學檢查:

液體的相對密度、血液比粘度、紅細胞沉降率、紅細胞比積等病理變化臨床檢驗的一般方法（1）現(xiàn)在是12頁\一共有79頁\編輯于星期日化學檢查:

定性和定量檢測標本化學成分的病理變化顯微鏡檢查:

觀察有型成分的數(shù)量和形態(tài)自動化儀器檢查:

電子技術、程序控制的發(fā)展臨床檢驗的一般方法（2）現(xiàn)在是13頁\一共有79頁\編輯于星期日

理論聯(lián)系實踐實驗技能和方法學評價檢驗結果參考值及臨床意義檢驗工作者的醫(yī)德學習臨床檢驗的基本要求現(xiàn)在是14頁\一共有79頁\編輯于星期日thanks現(xiàn)在是15頁\一共有79頁\編輯于星期日現(xiàn)在是16頁\一共有79頁\編輯于星期日血液標本的采集現(xiàn)在是17頁\一共有79頁\編輯于星期日一、血液生理血液的組成血液的理化特性血液的功能現(xiàn)在是18頁\一共有79頁\編輯于星期日血液血漿血細胞紅細胞白細胞血小板

水：90～92％

血漿蛋白

溶質(zhì)：8～10％小分子物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)激素代謝產(chǎn)物有機物無機鹽（電解質(zhì)）白蛋白球蛋白纖維蛋白原血液的組成及血漿成分現(xiàn)在是19頁\一共有79頁\編輯于星期日現(xiàn)在是20頁\一共有79頁\編輯于星期日現(xiàn)在是21頁\一共有79頁\編輯于星期日血液的功能1

營養(yǎng)2運輸3緩沖

4參與機體免疫參與凝血和抗凝現(xiàn)在是22頁\一共有79頁\編輯于星期日二、血液標本的采集現(xiàn)在是23頁\一共有79頁\編輯于星期日全血靜脈全血：G-6-PD、糖化血紅蛋白、基因檢測動脈全血：血氣分析末稍全血：用于細胞計數(shù)、分類、形態(tài)觀察分類現(xiàn)在是24頁\一共有79頁\編輯于星期日血漿：全血去除血細胞,用于血栓止血檢測血清：全血自然凝固后析出的液體,用于生物化學、免疫學檢測等分類現(xiàn)在是25頁\一共有79頁\編輯于星期日采血用品現(xiàn)在是26頁\一共有79頁\編輯于星期日1、皮膚采血法：微量檢測(thecollectionofcapillaryblood)

采血部位：耳垂或手指末梢血液標本采集的方法現(xiàn)在是27頁\一共有79頁\編輯于星期日2、靜脈采血法(thecollectionofvenousblood)

用于血沉、免疫、生化等檢測項目部位：以肘部靜脈為主采集方法現(xiàn)在是28頁\一共有79頁\編輯于星期日注血標本法現(xiàn)在是29頁\一共有79頁\編輯于星期日采血的注意事項現(xiàn)在是30頁\一共有79頁\編輯于星期日現(xiàn)在是31頁\一共有79頁\編輯于星期日頭蓋顏色臨床用途標本類型采血量（ml）紅色

血清生化血庫試驗血清3.04.05.07.0綠色快速血漿生化血流變試驗血漿3.04.05.0黃色快速血清生化藥代動力學試驗血清3.55.0

紫色血液常規(guī)、全血試驗血流變試驗全血2.05.0

淺藍色凝血試驗凝血因子試驗血漿1.82.7

黑色手工血沉試驗全自動血沉試驗全血1.82.4

真空采血管顏色及應用現(xiàn)在是32頁\一共有79頁\編輯于星期日多管血分配順序黃色紅色紫色黑色綠色淺藍色現(xiàn)在是33頁\一共有79頁\編輯于星期日動脈采血法通常選用橈動脈（方便）、股動脈、肱動脈現(xiàn)在是34頁\一共有79頁\編輯于星期日標本采集時應規(guī)范操作，以減少誤差毛細血管采血時應避開傷損部位，避免擠壓皮膚，血液應自然流出靜脈采血時壓脈帶壓迫時間不宜太長動脈采血后應立即與空氣隔絕，阻止血氣交換

標本采集的注意事項注意：嚴禁在靜脈輸液管中采集血液現(xiàn)在是35頁\一共有79頁\編輯于星期日兩種采血方法的應用皮膚采血法靜脈采血法缺點限制了重復實驗和追加實驗，標本量少，局部炎癥可得假結果，組織液可混入不同抗凝劑的使用，改變血液性質(zhì)，影響有形成分的形態(tài)優(yōu)點價廉、快速、操作簡便，標本可直接測定標本代表性大，無組織液影響，適于臨床研究，可重復實驗和追加其他實驗現(xiàn)在是36頁\一共有79頁\編輯于星期日

標本送檢、保存與處理

唯一標識、生物安全原則、盡快運送接收與拒收標本原則;未檢測標本的保存、檢測后標本析保存檢驗后血液標本的處理

現(xiàn)在是37頁\一共有79頁\編輯于星期日抗凝劑的選擇和運用抗凝

用物理或化學方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固，稱為抗凝?？鼓齽?/p>

鈣拮抗劑、肝素。概念現(xiàn)在是38頁\一共有79頁\編輯于星期日抗凝原理：形成草酸鈣沉淀使用方法：草酸鈉0.1mol/L和血液1:9優(yōu)點：溶解性好，價廉缺點：對凝血因子保護功能差，影響凝血因子；形成草酸鈣沉淀物，影響自動凝血儀器的使用使用范圍：雙草酸鹽維持紅細胞體積，使血小板聚集、白細胞形態(tài)改變草酸鹽現(xiàn)在是39頁\一共有79頁\編輯于星期日抗凝原理：與鈣離子生成可溶性的鰲合物使用方法：配成109mmol/L的濃度和血液1:9,106mmol/L的濃度和血液1:4優(yōu)點：對凝血因子有很好的保護作用缺點：血液中溶解度低，抗凝作用較弱使用范圍：止血學檢驗、血沉、輸血保養(yǎng)液（毒性?。╄蹤此徕c現(xiàn)在是40頁\一共有79頁\編輯于星期日抗凝原理：生成可溶性的鰲合物。使用方法：15g/LEDTA和血液1:10。優(yōu)點：對紅細胞和白細胞形態(tài)影響小。缺點：影響血小板的聚集。使用范圍：全血細胞分析和血細胞比容測定，不適用于出凝血實驗和血小板功能乙二胺四乙酸（EDTA）鹽現(xiàn)在是41頁\一共有79頁\編輯于星期日抗凝原理：加強抗凝血酶作用使用方法：肝素鈉1g/L與血液1:10優(yōu)點：抗凝能力強、不影響血細胞體積、不易溶血、能耐高溫缺點：引起白細胞聚集，使白細胞計數(shù)降低，不利于制備血涂片，價格昂貴使用范圍：紅細胞脆性實驗，科學研究等肝素現(xiàn)在是42頁\一共有79頁\編輯于星期日謝謝現(xiàn)在是43頁\一共有79頁\編輯于星期日血涂片的用途：

血細胞形態(tài)學檢驗網(wǎng)織紅異常寄生蟲檢驗四、血涂片

血涂片的制備技術現(xiàn)在是44頁\一共有79頁\編輯于星期日涂片技術是制備血液樣品最常用的技術。將血液樣品制成單層細胞的涂片標本，染色后可對血液中各種細胞形態(tài)進行形態(tài)觀察、細胞計數(shù)、細胞大小測量等工作。實驗原理現(xiàn)在是45頁\一共有79頁\編輯于星期日

1．采血

2．制作涂片

3．干燥涂片

4．標記涂片

5．染色

6．觀察結果血涂片制備步驟(手工推片法)現(xiàn)在是46頁\一共有79頁\編輯于星期日醫(yī)用一次性采血針酒精棉球鑷子經(jīng)脫脂洗凈的載玻片雙凹片（推片）

實驗器材準備現(xiàn)在是47頁\一共有79頁\編輯于星期日采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹現(xiàn)在是48頁\一共有79頁\編輯于星期日采血現(xiàn)在是49頁\一共有79頁\編輯于星期日由于第一滴血中含單核白細胞較多，因此棄去第一滴血現(xiàn)在是50頁\一共有79頁\編輯于星期日推片：擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)現(xiàn)在是51頁\一共有79頁\編輯于星期日

再取另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開成線狀?，F(xiàn)在是52頁\一共有79頁\編輯于星期日30~45°

兩玻片的角度以30～45°為宜，輕輕將雙凹片向前勻速推進，即涂成血液薄膜?，F(xiàn)在是53頁\一共有79頁\編輯于星期日

將推玻片向后稍抽回，當血液充滿推玻片的寬度后，以一定均勻的速度向前方滑動。血涂片的制作現(xiàn)在是54頁\一共有79頁\編輯于星期日均勻厚薄頭體尾邊緣兩側(cè)血涂片質(zhì)量評價注意：血滴大，速度快、角度大----血膜厚現(xiàn)在是55頁\一共有79頁\編輯于星期日現(xiàn)在是56頁\一共有79頁\編輯于星期日染料(天然染料和人工染料）

發(fā)色基團和助色基團使生物學染色劑產(chǎn)生顏色和被染組織親合。五、血細胞常用的染色方法現(xiàn)在是57頁\一共有79頁\編輯于星期日堿性染料：陽離子染料，能接受質(zhì)子，染細胞核的染料（如亞甲藍、天青）酸性染料：陰離子染料，能釋放質(zhì)子。能結合細胞的堿性成分并染色，如血紅蛋白，嗜酸性顆粒成分等。復合染料：同時具有陰、陽離子型的染料如瑞氏染料染料的分類現(xiàn)在是58頁\一共有79頁\編輯于星期日物理作用：滲透、吸收、吸附作用等化學作用：a、染料的化學成分：助色基團的存在。堿性染料在溶媒中為陽離子型，易與組織和細胞內(nèi)帶負電荷的酸性物質(zhì)結合；而酸性染料在溶媒中為陰離子型，與帶正電荷的堿性物質(zhì)結合。細胞著色原理現(xiàn)在是59頁\一共有79頁\編輯于星期日b.蛋白質(zhì)的化學性質(zhì)：蛋白質(zhì)中的氨基酸含有不同數(shù)量的氨基（-NH2）和羧基（-COOH），同時還有其他活性基團。在游離狀態(tài)時，-NH2獲得一個H+變成帶正電的-NH3+，而-COOH失去一個H+變成帶負電的-COO-。分別與不同染料結合?；瘜W作用現(xiàn)在是60頁\一共有79頁\編輯于星期日C.周圍環(huán)境的酸堿度：如環(huán)境pH＜pI（pI為等電點），則蛋白質(zhì)帶正電，結合酸性染料；反之，pH＞pI，則結合堿性染料?；瘜W作用現(xiàn)在是61頁\一共有79頁\編輯于星期日染色原理

分兩相進行，第一相是酸性伊紅與細胞中的堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結合；堿性染料天青B與細胞中的酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、特異中性顆粒、血小板結合。第二相是天青B和伊紅結合在適宜條件下形成紫色的天青B-伊紅復合物，結果使白細胞核染色質(zhì)成紫色（瘧原蟲的染色質(zhì)成紅色），中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區(qū)成紫色。

瑞氏染色法現(xiàn)在是62頁\一共有79頁\編輯于星期日試劑

1.Wright染液瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml甲醇：有強大的脫水力，可將細胞固定為一定形態(tài)，并使蛋白質(zhì)沉淀為顆粒狀、網(wǎng)狀等結構，增加細胞與染料接觸表面積，提高對染料的吸附作用，增強染色效果。瑞氏染色法現(xiàn)在是63頁\一共有79頁\編輯于星期日試劑

2.磷酸鹽緩沖液（PBS）磷酸二氫鉀（無水）0.3g，磷酸氫二鈉（無水）0.2g,蒸餾水加到1000ml。配好后用磷酸鹽溶液校正pH，塞緊瓶口備用。瑞氏染色法現(xiàn)在是64頁\一共有79頁\編輯于星期日a.用蠟筆在血膜兩頭劃線，平放于染色架上b.加瑞氏染液覆蓋血膜，固定1minc.滴加等量或稍多的緩沖液，混勻，染色10-15分鐘d.用清水沖洗，待干后油鏡鏡檢瑞氏染色方法現(xiàn)在是65頁\一共有79頁\編輯于星期日染色

待涂片在空氣中完全干燥后，滴加數(shù)滴Wright’s染液蓋滿血膜為止，染色1min。然后滴加等量或稍多緩沖液，使其與染液均勻混合，靜置10～15min。用流水緩緩沖去染液，待干鏡檢。

現(xiàn)在是66頁\一共有79頁\編輯于星期日染色原理

基本成分仍然是伊紅和亞甲藍，改進了染料的質(zhì)量，使細胞核著色好，結構顯示更清晰，而胞漿和中性顆粒染色較差。試劑

Giemsa染液甲醇純甘油姬姆薩染色法現(xiàn)在是67頁\一共有79頁\編輯于星期日1.甲醇固定干燥血膜3-5min2.將血膜在染液中浸染10-30min3.流水沖洗,待干后鏡檢姬姆薩染色方法現(xiàn)在是68頁\一共有79頁\編輯于星期日瑞氏和姬氏染粉按一定比例混合，用甲醇溶解配制成瑞-姬染液。染色過程和染色原理與瑞氏染色類似。瑞-姬染色現(xiàn)在是69頁\一共有79頁\編輯于星期日新鮮配制的染液偏堿，染色效果較差，應貯存一段時間后再用。不能使用肝素抗凝標本玻片必須清潔、干燥、無塵。使用玻片時，只能手持玻片邊緣，切勿觸及玻片表面染色注意事項現(xiàn)在是70頁\一共有79頁\編輯于星期日制作涂片時根據(jù)血細胞比容、血粘度的高低決定應采用血滴的大小及推片的角度和速度。血涂片干透后方可固定染色。根據(jù)染液濃度