體液免疫球蛋白測定

免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）：是由漿細胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質。現(xiàn)在是1頁\一共有40頁\編輯于星期三重鏈性質，Ig分5類：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質，Ig分2型：κ、λIg占血漿蛋白總量：20%檢測意義：反應機體的免疫功能、診斷疾病Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L體液IgG、IgA、IgM：mg/L

現(xiàn)在是2頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是3頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是4頁\一共有40頁\編輯于星期三第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測定現(xiàn)在是5頁\一共有40頁\編輯于星期三IgG的特性和功能IgG于出生后3個月開始合成，是血清中含量最高的免疫球蛋白IgG多為單體，半衰期約為23天，占血清免疫球蛋白總量的75%～80%大多數抗感染抗體與自身抗體均為IgG類IgG是唯一能通過胎盤的抗體有四個亞型（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）現(xiàn)在是6頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是7頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是8頁\一共有40頁\編輯于星期三IgM的特性和功能為五聚體，是分子量最大的Ig，稱巨球蛋白。IgM激活補體能力比IgG強天然血型抗體是IgMIgM是個體發(fā)育過程最早能產生的抗體，胚胎晚期已能合成，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，表示該兒曾有宮內感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體，故檢測IgM水平可用于傳染病的早期診斷有2個亞型（IgM1、IgM2）現(xiàn)在是9頁\一共有40頁\編輯于星期三IgA的特性和功能分為血清型和分泌型兩種，血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細胞產生。而分泌型IgA（SIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細胞產生。主要存在于初乳、唾液、淚液，以及呼吸道消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜分2個亞型：（IgA1、IgA2）現(xiàn)在是10頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是11頁\一共有40頁\編輯于星期三一、血清IgG、IgA、IgM測定測定方法

單向環(huán)狀免疫擴散法免疫濁度法現(xiàn)在是12頁\一共有40頁\編輯于星期三原理誤差主要原因評價

單向環(huán)狀免疫擴散法現(xiàn)在是13頁\一共有40頁\編輯于星期三免疫濁度法直接透射比濁法速率散射比濁法注意點評價現(xiàn)在是14頁\一共有40頁\編輯于星期三二、血清IgG、IgA、IgM測定的臨床意義年齡年齡與血中Ig含量有一定關系高Ig血癥:多克隆Ig增高（感染）；單克隆Ig增高（免疫增殖?。┑虸g血癥:

先天性低Ig血癥（免疫缺陷病）；獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).現(xiàn)在是15頁\一共有40頁\編輯于星期三第二節(jié)血清IgD、IgE測定

正常人血清中IgD含量很低，半衰期2.8天。膜結合型IgD(mIgD)構成BCR，是B細胞分化發(fā)育成熟的標志。未成熟B細胞僅表達mIgM成熟B細胞表達mIgM和mIgD活化的B細胞或記憶B細胞mIgD逐漸消失

現(xiàn)在是16頁\一共有40頁\編輯于星期三

IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細胞分泌，為親細胞抗體，引起I型超敏反應；與機體抗寄生蟲免疫也可能有關?，F(xiàn)在是17頁\一共有40頁\編輯于星期三一、血清IgD測定及臨床意義測定方法：

放射免疫分析法化學發(fā)光免疫分析法免疫比濁法

酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在是18頁\一共有40頁\編輯于星期三IgD：生物功能不詳

增高：類風濕性關節(jié)炎、變態(tài)反應性疾病、敗血癥、新生兒溶血病

降低：意義不大現(xiàn)在是19頁\一共有40頁\編輯于星期三二、血清IgE測定及臨床意義測定方法總IgE測定：放射免疫分析法

化學發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測定：免疫斑點法酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在是20頁\一共有40頁\編輯于星期三IgE臨床意義：

增高：變態(tài)反應性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。

降低：意義不大現(xiàn)在是21頁\一共有40頁\編輯于星期三第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測定

正常人尿液中的Ig含量甚微，當機體的免疫功能異?；蜓装Y反應引起腎臟疾病時，可導致腎小球濾過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損，從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質漏出增多。生理情況下，Ig根據其分子量大小，通過血腦屏障的難易度不同，IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時，腦脊液組分發(fā)生改變。現(xiàn)在是22頁\一共有40頁\編輯于星期三現(xiàn)在是23頁\一共有40頁\編輯于星期三分子屏障：腎小球濾過屏障現(xiàn)在是24頁\一共有40頁\編輯于星期三電荷屏障：1上皮細胞2基底膜3內皮細胞4被濾過物質現(xiàn)在是25頁\一共有40頁\編輯于星期三一、尿液Ig測定及臨床意義尿液：

腎小球濾膜受損程度：選擇性蛋白尿指數（selectiveproteinuriaindex,SPI）標本：晨尿或隨機尿SPI＝（尿IgG／血清IgG）／（尿TRF／血清TRF）SPI≤0.1選擇性微小病變型腎病SPI≥0.2非選擇性膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合癥

現(xiàn)在是26頁\一共有40頁\編輯于星期三增高有臨床意義：腎病、免疫增殖病可根據尿內Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類現(xiàn)在是27頁\一共有40頁\編輯于星期三二、腦脊液Ig測定及臨床意義腦脊液：

血腦屏障受損程度：白蛋白商值白蛋白商值（ALBquotient，QALB）：QALB＝［（AlbCSF／AlbS）×1000］QALB〈9時，提示血腦屏障無明顯受損9－15輕度受損急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經梅毒、帶狀皰疹神經節(jié)炎、腦萎縮15－33中度受損急性神經疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭－巴雷綜合征33－100重度受損化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結核性腦膜炎等細菌感染性疾病〉100完全破裂現(xiàn)在是28頁\一共有40頁\編輯于星期三區(qū)分鞘內免疫球蛋白來源：IgG生成指數和24hIgG合成率IgG生成指數＝QIgG／Qalb(QIgG=IgGCSF/IgGS,Qalb=AlbCSF/Albs)IgG合成率/24h=[(IgGCSF-IgGS/541)-(AlbCSF-AlbS/243)×(IgGS/AlbS)×0.43×500IgG生成指數和24hIgG合成升高時，表明CSF中的IgG主要有中樞神經系統(tǒng)鞘內合成，多見于多發(fā)性硬化癥現(xiàn)在是29頁\一共有40頁\編輯于星期三第四節(jié)血清IgG亞類測定及臨床意義Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降測定方法：

單向免疫擴散法免疫比濁法（常用）放射免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在是30頁\一共有40頁\編輯于星期三臨床意義：IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化IgG亞類缺陷可表現(xiàn)為：反復呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎、支擴以及哮喘等IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷，某些病毒感染IgG1、IgG2、IgG3下降顯著IgG亞類異常增高主要見于Ⅰ型變態(tài)反應現(xiàn)在是31頁\一共有40頁\編輯于星期三第五節(jié)M蛋白測定及臨床意義

M蛋白：B淋巴細胞或漿細胞單克隆異常增殖產生的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等

現(xiàn)在是32頁\一共有40頁\編輯于星期三M蛋白測定蛋白區(qū)帶電泳：經典方法計算蛋白含量和百分比免疫比濁法：免疫球蛋白定量準確性高、快速免疫電泳：M蛋白分型免疫固定電泳：M蛋白分型及鑒定，分辨率高現(xiàn)在是33頁\一共有40頁\編輯于星期三GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定電泳模式圖現(xiàn)在是34頁\一共有40頁\編輯于星期三第六節(jié)輕鏈測定及臨床意義本周蛋白的檢測

樣本：尿液方法：免疫電泳、加熱沉淀（簡便易行）κ–Ig和λ-Ig定量檢測

樣本：尿液、血液方法：單向免疫擴散法、免疫比濁法（常用，準確、快速）應用：M蛋白血癥的分型及鑒定現(xiàn)在是35頁\一共有40頁\編輯于星期三第七節(jié)冷球蛋白的檢測冷球蛋白：

在低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復溶的免疫球蛋白在低溫時產生冷沉淀的機制尚不十分明確多數冷球蛋白為免疫復合物，其抗原可以是外源性的，也可以是內源性的現(xiàn)在是36頁\一共有40頁\編輯于星期三冷球蛋白的類型及臨床意義

I型：為單克隆冷球蛋白型，占25%～40%;最常見為IgG或IgM。多見于免疫增生性疾病

Ⅱ型：單克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%～25%;最常見的組合為IgM－IgG。多見于自身免疫性疾病

Ш型：多克隆混合型冷球蛋白，約占50%;最常見的組合為IgM－IgG。多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病現(xiàn)在是37頁\一共有40頁\編輯于星期三標本：在體溫條件下采集和保存靜脈血4ml，不加抗凝劑檢測：靜脈血水浴離心冰箱37℃37℃0-4℃1－2h沉淀24h內，單克隆冷球蛋白數天后出現(xiàn)為混合型冷球蛋白驗證：將冷沉淀物置于pH4.0的0.1M乙酸鈉緩沖液