豬THRSP基因多態(tài)性課件

豬Thrsp基因的多態(tài)性及其與豬背膘的相關(guān)性研究國內(nèi)外研究概況研究的主要內(nèi)容預(yù)期結(jié)果

主

要

內(nèi)

容選題的依據(jù)研究工作中面臨的技術(shù)難點(diǎn)和擬采取的解決辦法選題的目的和意義研究方法及技術(shù)路線

研究的創(chuàng)新點(diǎn)

1選題的目的和意義

隨著社會經(jīng)濟(jì)和人們消費(fèi)水平的提高，改善肉質(zhì)已經(jīng)成為適應(yīng)消費(fèi)需求和應(yīng)對畜禽業(yè)提高質(zhì)量與尋求發(fā)展的重要議題之一。脂肪含量是影響肉質(zhì)性狀的一個(gè)重要的因素，且在動(dòng)物維持正常的生理代謝和生理功能中起著非常重要的作用。脂肪是機(jī)體的主要成分之一，是維持正常生命活動(dòng)所必需的物質(zhì)基礎(chǔ)。合理的脂肪儲備是必須的，但當(dāng)所攝入的能量超過維持身體正常需要時(shí)，多余的能量便被轉(zhuǎn)化為體脂而沉積下來。在動(dòng)物體內(nèi)，脂肪蓄積的組織主要是脂肪組織，維持適當(dāng)含量的皮下脂肪，可以使胴體的外觀比較好，提高產(chǎn)品等級；適當(dāng)?shù)募￠g脂肪(IMF)可以提高口感，產(chǎn)品的風(fēng)味、嫩度和多汁性。因此，如何控制胴體脂肪沉積已經(jīng)成為畜禽遺傳育種學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。2

選題依據(jù)2.1

理論依據(jù)

動(dòng)物脂肪代謝途徑、動(dòng)物脂肪的沉積調(diào)控、激素與脂肪沉積引物設(shè)計(jì)、DNA提取

PCR、酶切電泳、SNP2

選題依據(jù)對實(shí)驗(yàn)豬進(jìn)行豬耳采樣，提取組織DNA豬耳采樣根據(jù)現(xiàn)有的理論基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)引物，對目標(biāo)基因序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增。引物設(shè)計(jì)對擴(kuò)增出來的片段進(jìn)行酶切電泳操作，觀察其基因多態(tài)性。序列檢測SNP（snSNPSps）2.2技術(shù)依據(jù)3

國內(nèi)外研究概況3.1、Thrsp基因概況甲狀腺激素是由甲狀腺分泌的胺類激素,包括四碘甲腺原氨酸(Thyroxine,T4)和三碘甲腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)兩種形式,T4轉(zhuǎn)化為有效活性形式T3,與下丘腦?垂體?肝臟軸中的生長激素(Growthhormone,GH)、胰島素樣生長因子1(Insulinlikegrowthfactor,IGF-1)等協(xié)同作用,調(diào)節(jié)動(dòng)物體生長發(fā)育和物質(zhì)代謝過程。甲狀腺激素不與胞漿受體結(jié)合進(jìn)入核內(nèi)發(fā)揮作用,直接與核受體結(jié)合調(diào)節(jié)核內(nèi)基因的表達(dá)[1],其中甲狀腺激素應(yīng)答Spot14(Thyroidhormoneresponsivespot14,THRSP)是核內(nèi)3

國內(nèi)外研究概況

3.2THRSP基因的序列研究

目前，有關(guān)THRSP基因的研究多見于人、大鼠和小鼠。周倩倩等（2011年）通過檢測脂肪型豬和瘦肉型豬THRSP基因編碼區(qū)的遺傳變異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，豬

THRSP基因編碼區(qū)的核苷酸序列與人和牛的同源性分別為

86%和

88%，存在

2個(gè)

SNPs位點(diǎn)（G123A

和A308G）分別位于距

CDS起點(diǎn)的123bp

和

308bp處，其中

G123A為同義突變，而

A308G導(dǎo)致

THRSP蛋白質(zhì)

103位的賴氨酸變?yōu)榫彼?，引起了酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位點(diǎn)由

TKEE轉(zhuǎn)變?yōu)門REE，并產(chǎn)生了2種類型的

mRNA折疊和蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)，從而影響THRSP

基因的最終功能和作用，進(jìn)而對脂肪生成相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)節(jié)，造成豬產(chǎn)脂能力的變化。

3

國內(nèi)外研究概況

牛的THRSP基因位于第29號染色體上，包含兩個(gè)外顯子，一個(gè)內(nèi)含子，且只有第一外顯子編碼蛋白，第一外顯子長度為490

bp。Gene

Bank中提供的牛THRSP

基因的序列登錄號：No.

NC_007330。在人體中，THRSP編碼基因被定位于11q13，人THRSP基因與大鼠基因序列有81%同源，都屬單拷貝基因，含有一段較長的5′調(diào)控區(qū)、兩個(gè)外顯子和一個(gè)內(nèi)含子，外顯子

1

包含整個(gè)編碼區(qū)和部分

3′非翻譯區(qū)，外顯子

2

為3′非翻譯區(qū)。在氨基酸方面有78%同源性，免疫組化分析表明，該蛋白在大鼠中屬核蛋白，并在肝臟中與其他脂肪生成酶呈帶狀分布。4

研究內(nèi)容通過對樣本DNA的提取，進(jìn)行酶切檢測，觀測目標(biāo)基因的SNP。根據(jù)SNPs型的檢測結(jié)果，選配和選擇不同基因型的后代，組織飼養(yǎng)，監(jiān)測樣本的生長性狀。根據(jù)檢測結(jié)果，計(jì)算基因頻率，分析SNPs與性狀之間的關(guān)聯(lián)性。內(nèi)容DNA提取方法圖2本試驗(yàn)技術(shù)路線實(shí)驗(yàn)材料的選擇加工預(yù)試驗(yàn)選擇合適的條件進(jìn)行試驗(yàn)試件外觀測量測定密度、pH值測定機(jī)械性能分析化學(xué)成分綜合分析試驗(yàn)結(jié)果評價(jià)軟木及其產(chǎn)品耐老化性6預(yù)期結(jié)果獲得軟木原材料及聚結(jié)軟木制品、軟木橡膠制品、軟木革的耐候性情況，對軟木的耐候性進(jìn)行評價(jià)，為以后軟木室外制品的發(fā)展提供依據(jù)。獲得有涂層和無涂層的軟木制品耐候性的差異，從而得出涂料對軟木及其制品的耐候性的影響。8

研究工作中面臨的技術(shù)難點(diǎn)和擬采取的解決辦法由于軟木的耐候性以前沒有研究過，本次試驗(yàn)