動物傳染病學(xué)課件：結(jié)核?。═uberculosisTB）

【眾人見黛玉年紀(jì)雖小，其舉止言談不俗，身體面貌雖弱不勝衣，卻有一段風(fēng)流態(tài)度，便知她有不足之癥。】

紅樓夢病態(tài)美結(jié)核病（Tuberculosis，TB）一、概述結(jié)核病是由分枝桿菌引起的人獸共患的一種慢性消耗性傳染病。病理特征是在多種組織器官形成結(jié)核結(jié)節(jié)（結(jié)核性肉芽腫），干酪樣壞死或鈣化結(jié)節(jié)。二、歷史和分布該病兩千年前就有記載，但埃及木乃伊的骨病變證明其存在時間遠(yuǎn)早于此。1865年，Villemin將人和牛的結(jié)核組織接種兔使其發(fā)病。1882年，Baumgarten最早在組織中觀察到該菌。同年3月24日Koch用堿性美藍(lán)染色和俾斯麥棕復(fù)染，在病變組織中檢出了該菌，1905年因此獲諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。本病分布廣泛，曾經(jīng)是引起人畜死亡最多的疾病之一。目前，已有不少國家控制了結(jié)核病。過去我國稱該病為“癆病”，近年來由于耐藥菌株不斷出現(xiàn)，該病呈上升趨勢。HIV感染降低了人體對結(jié)核菌的免疫力，HIV感染合并結(jié)核菌感染的人最容易迅速發(fā)生結(jié)核?。═B/HIV雙重感染流行）。1996年起，每年3月24日定為結(jié)核防治日。三、危害自1882年以來，迄今死亡人數(shù)已達(dá)2億，被稱為白色瘟疫。每年6500萬人受到結(jié)核病感染，有1000萬新病例出現(xiàn)，導(dǎo)致300萬人死亡。鏈霉素發(fā)明之前，此病是不治之癥。我國有1/3人口感染結(jié)核桿菌，結(jié)核病人600萬，每年有150萬新病例出現(xiàn)，死亡15萬。人結(jié)核病現(xiàn)狀“因為結(jié)核造成的巨大的人間痛苦，防治結(jié)核已有令人信服的理由?！?/p>

---世界衛(wèi)生組織干事陳馮富珍結(jié)核菌發(fā)現(xiàn)已有132年（1882-2014，Koch）93年來無新疫苗上市（BCG；1921-2015）49年來無新藥上市（1965年，利福平上市）124年來無新診斷方法（1890年，Koch建立皮試法）1.傳統(tǒng)的結(jié)核疫苗（卡介苗）缺乏對成年人的保護(hù)力，目前仍無新型疫苗上市。2.針對結(jié)核分枝桿菌引起的潛伏感染，缺乏早期快速、高效的診斷技術(shù)。3.結(jié)核分枝桿菌耐藥性愈發(fā)嚴(yán)重，多重耐藥菌株不斷爆發(fā)，且目前無新藥上市。4.結(jié)核病與艾滋病形成協(xié)同感染，是近年來引起結(jié)核病爆發(fā)的重要因素之一。結(jié)核病成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性人畜共患傳染病的主要因素：EstimatednumberofnewTBcases,2008四、病原體結(jié)核桿菌（M.tuberculosis）牛分枝桿菌（M.bovis）禽分枝桿菌（M.avium）纖細(xì)、平直或稍彎曲的桿菌，不形成芽孢和莢膜，不能運動。在病料中，常見其成對、成堆或以銳角相排列。G+菌，要用特殊的抗酸染色法染色。特點型形態(tài)培養(yǎng)特性致病力牛短粗、著色不均pH5.9~6.9生長最慢牛、豬、鹿、人、馬、狗、貓等人細(xì)長、多為棒狀pH7.4~8.0人、猴、犬、牛、豬、狗等禽短而小、多形性pH7.2生長最快家禽和家兔、豬、綿羊等結(jié)核桿菌不同種的特性結(jié)核桿菌的抵抗力在干痰中能存活10個月，在糞便、土壤中可存活6~7個月，在水中可存活5個月。對熱抵抗力差，60℃30分鐘即死亡。在直射陽光下數(shù)小時死亡，常用消毒藥4小時可殺死。本病對磺胺、青霉素及其廣譜抗生素不敏感，對鏈霉素、異煙肼、對氨基水楊酸等敏感。五、流行病學(xué)傳染源：患病的畜禽和人，特別是開放性病畜禽和患者。其糞尿、乳汁、痰液等都帶菌，可通過污染的飼料、飲水、食物、空氣和環(huán)境而擴(kuò)散傳染。傳播途徑：

主要通過呼吸道、消化道。也可以通過損傷的皮膚、黏膜、胎盤而感染。易感動物：50多種哺乳動物、25種禽類，人較易感。牛最易感，家禽、野兔、豬有較強的易感性，綿羊、山羊、馬極少發(fā)病。人型菌牛型菌禽型菌人犬貓牛馬羊豬雞流行特征：無明顯季節(jié)性和地區(qū)性，多為散發(fā)。畜舍潮濕陰暗、飼養(yǎng)不良、過度使役和擠奶等，均可促進(jìn)本病的發(fā)生和傳播。六、免疫機理結(jié)核桿菌是胞內(nèi)寄生菌，其免疫主要是以T細(xì)胞為主的細(xì)胞免疫。機體對結(jié)核桿菌雖能產(chǎn)生抗體，但抗體只能起輔助作用。機體對結(jié)核桿菌的免疫反應(yīng)與變態(tài)反應(yīng)一般都是同時產(chǎn)生，故應(yīng)用結(jié)核菌素試驗來檢查結(jié)核桿菌蛋白質(zhì)有無變態(tài)反應(yīng)。傳染性免疫：是指只有當(dāng)分支桿菌的抗原存在時，抗原不斷刺激機體才能獲得結(jié)核特異性免疫力，因此也叫帶菌免疫。傳染性變態(tài)反應(yīng)：變態(tài)反應(yīng)在結(jié)核傳染過程中出現(xiàn)的，故稱為傳染性變態(tài)反應(yīng)。結(jié)核桿菌靶器官初次感染機體尚未形成特異性免疫力被巨噬C吞噬的細(xì)菌自由繁殖最終導(dǎo)致巨噬細(xì)胞裂解死亡釋放出的結(jié)核桿菌可在細(xì)胞外繁殖再被吞噬反復(fù)不已形成原發(fā)病灶七、發(fā)病機理細(xì)菌從原發(fā)灶沿淋巴管蔓延淋巴管炎和淋巴結(jié)結(jié)核病變機體抗感染力強時原發(fā)病灶及其他結(jié)核病變逐漸消散或鈣化而自愈機體抵抗力弱時病灶可惡化，結(jié)核桿菌可以隨著淋巴、血液、天然管道播散，引起其他組織器官的結(jié)核病灶或全身性結(jié)核八、癥狀潛伏期長短不一，短者十幾天長者數(shù)月至數(shù)年。輕度者不呈現(xiàn)臨床癥狀，重癥者出現(xiàn)癥狀。由于發(fā)生部位不同而出現(xiàn)不同的表現(xiàn)。人結(jié)核：低燒：“星眼微錫，香腮帶赤”。盜汗：“一行是淚，一行是汗”?？人裕嚎┭Ｐ貝灒汉粑щy、肺臟空洞。乏力。午后低熱時，兩顴潮紅。牛結(jié)核：最常見的是：肺結(jié)核、乳房結(jié)核、淋巴結(jié)核、有時可見腸結(jié)核、各組織器官的結(jié)核可以單獨發(fā)生也可以同時存在，由于侵害部位不同癥狀也不一致。生殖器結(jié)核、腦結(jié)核、胸腹膜結(jié)核、全身性結(jié)核。

牛肺結(jié)核支氣管淋巴結(jié)核，干酪樣壞死，邊緣黑色為塵埃沉積。牛肺結(jié)核干酪樣壞死。牛肺結(jié)核胸膜（肺膜）結(jié)核。牛肺結(jié)核干酪樣壞死及空洞形成。牛結(jié)核心外膜結(jié)核結(jié)節(jié)，又稱珍珠腫。牛腦膜結(jié)核大腦枕部、延腦部、視丘部、脈絡(luò)叢等部結(jié)核結(jié)節(jié)，腦膜。纖維化在胸膜和腹膜形成的結(jié)節(jié)成串，如珍珠樣，稱為“珍珠病”。豬結(jié)核：主要經(jīng)消化道感染，多表現(xiàn)為淋巴結(jié)核，常見于頜下淋巴結(jié)、咽淋巴結(jié)和頸淋巴結(jié)?？尚纬扇^大小、不熱不痛的硬塊，表面凹凸不平，與周圍皮膚黏連，硬結(jié)化膿破潰后，可長期排出膿汁和干酪樣物質(zhì)。當(dāng)腸道有病灶時常發(fā)生下痢。牛型結(jié)核菌感染呈進(jìn)行性病程，常導(dǎo)致死亡。禽結(jié)核：主要經(jīng)消化道感染。臨床表現(xiàn)消瘦體弱，不活潑，貧血，雞冠萎縮蒼白，羽毛蓬松，翅下垂，產(chǎn)蛋量下降或停止，或頑固性腹瀉。病程2~3個月或更長。病禽多因衰竭死亡，或因肝、脾病灶破裂而死亡。結(jié)核病灶多發(fā)生在腸、肝、脾、骨骼和關(guān)節(jié)。禽結(jié)核：雞大小腸結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞腸系膜結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞肝臟結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞肺結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞骨髓結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞肉髯結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞卵巢結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞胸腺結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞眼結(jié)膜結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞心肌結(jié)核結(jié)節(jié)。禽結(jié)核：雞胰腺結(jié)核結(jié)節(jié)。九、診斷結(jié)核病診斷膠體金γ-干擾素ELISAPPD皮試免疫學(xué)診斷分子生物學(xué)體液免疫細(xì)菌學(xué)診斷乳膠凝集細(xì)胞免疫細(xì)菌學(xué)檢查：對開放性病畜有意義。抹片鏡檢：簡便、快速、價廉。但不能區(qū)分死菌與活菌，靈敏度低、特異性差。細(xì)菌分離培養(yǎng)：“金標(biāo)準(zhǔn)”，但時間長。動物接種試驗。熒光抗體檢查：快速、準(zhǔn)確、檢出率高?？顾崛旧ㄈ旧?/p>

染色特性：不容易著色，一經(jīng)染色很難脫去（即使用強脫染劑—酒精鹽酸也不行）。抗酸性染色：石炭酸復(fù)紅染色時，在玻片下方加熱3~5分鐘，水洗，3%鹽酸酒精脫色（97ml酒精+3ml濃鹽酸），脫色后，用孔雀石綠或美藍(lán)復(fù)染1分鐘，水洗，鏡檢。結(jié)核菌染為紅色，其它菌染為綠色或藍(lán)色。細(xì)菌分離培養(yǎng)

“金標(biāo)準(zhǔn)”。生長期約4~8周。菌落乳白色或米黃色，表面粗糙呈顆粒狀或菜花狀。變態(tài)反應(yīng)：最常用的診斷方法稱為結(jié)核菌素皮試，結(jié)核菌素類型依據(jù)制造用物質(zhì)而命名。老結(jié)核菌素（Oldtuberculin，O.T）。

提純蛋白衍生物結(jié)核菌素（Purifiedproteinderivativeoftuberculin，PPD）。無蛋白合成培養(yǎng)基結(jié)核菌素（結(jié)核菌素活性多肽，Tuberculinactivepeptide，TAP）。老結(jié)核菌素使用方法（O.T）（以牛為例）

結(jié)核菌素皮內(nèi)注射和點眼同時進(jìn)行。兩法中任何一種是陽性反應(yīng)者，即判定為結(jié)核菌素陽性。

皮內(nèi)注射：于頸中部1/3處剪毛，用游標(biāo)卡尺量皮皺厚度，皮內(nèi)注射定量結(jié)核菌素，分別于72h、120h觀察反應(yīng)?？词欠裼屑t、腫、熱、痛現(xiàn)象及皮增厚情況，在72h陰性或可疑，以同一部位再注射1次。點眼：點同一只眼，每次進(jìn)行兩回，間隔3~5天，點眼后3、6、9、24h各觀察1次，觀察眼睛腫脹，流淚及分泌物性質(zhì)與量及其他的反應(yīng)。

PPD法：皮內(nèi)注射1次即可判定，使用方法和判定標(biāo)準(zhǔn)同O.T。

原理：TB進(jìn)入機體4~8周產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)。方法：0.1ml（5單位）PPD試劑，前臂內(nèi)側(cè)中下1/3交界處皮內(nèi)注射。結(jié)果：48~72h觀察皮膚反應(yīng)。判斷標(biāo)準(zhǔn)：＜5mm陰性5~19mm陽性≥20mm強陽性人結(jié)核菌素試驗及其判斷標(biāo)準(zhǔn)牛結(jié)核菌素試驗及其判斷標(biāo)準(zhǔn)頸部皮內(nèi)注射0.1ml（10萬IU/ml）PPD，72h后觀察。局部炎癥明顯，皮膚腫脹厚度差≥4mm為陽性。局部炎癥不明顯，厚度差在2~4mm為可疑。無炎癥反應(yīng)，厚度差在2mm以下為陰性。凡可疑者，需在30天后進(jìn)行復(fù)檢，連續(xù)2次復(fù)檢為陰性者則判為陰性。細(xì)胞因子檢測法γ-干擾素檢測法：外周血淋巴細(xì)胞。IL-2檢測法：T淋巴細(xì)胞。十、防治措施畜禽結(jié)核一般不予治療，而是采取淘汰措施。采取綜合性防制措施：加強檢疫，撲殺病畜，凈化污染畜群，培育健康畜群，加強畜場消毒。常用藥物有異煙肼、鏈霉素、利福平、對氨基水楊酸鈉等人結(jié)核病的治療原則是：早期治療，聯(lián)合用藥，堅持化療，徹底治療。人結(jié)核病的預(yù)防關(guān)鍵：控制傳染源--及時發(fā)現(xiàn)并治療。切斷傳播途徑--注意開窗通風(fēng)，注意消毒。保護(hù)易感人群--接種卡介苗，注意鍛煉身體，提高抵抗力。1943年，美國微生物學(xué)家瓦克斯曼從土壤中篩選出一種灰色放線菌，對結(jié)核菌有很強的抑制作用，且沒有毒性。于是將這種灰色放線菌的提取物用于臨床，并取得相當(dāng)滿意的效果。1944年，瓦克斯曼把該放線菌的分泌物稱為“鏈霉素”，鏈霉素的發(fā)明結(jié)束了結(jié)核是不治之癥的歷史。1952年獲得了諾貝爾獎。瓦克斯曼（1888~1973）美籍烏克蘭人AlbertCalmette(1863~1933)

CamilleGuérin(1872~1961)

人的結(jié)核疫苗研究進(jìn)展卡介苗1920年，法國細(xì)菌學(xué)家卡爾美和介林將牛型結(jié)核桿菌在含牛膽汁和甘油的馬鈴薯培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)過13年傳230代獲得弱毒菌株。1924年以來已有30億人接種該疫苗。1931年，中國人王良赴法留學(xué)，1933年回國后在自己的研究所培養(yǎng)制造卡介苗，并給嬰幼兒