國(guó)產(chǎn)重組乙型肝炎疫苗(CHO細(xì)胞)

1國(guó)產(chǎn)重組乙型肝炎疫苗（CHO細(xì)胞）什么是乙型肝炎？是一種由乙型肝炎病毒（HBV）感染機(jī)體后所引起的疾病。乙型肝炎病毒是一種嗜肝病毒，主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)并損害肝細(xì)胞，引起肝細(xì)胞炎癥、壞死、纖維化。乙型病毒性肝炎分急性和慢性?xún)煞N。急性乙型肝炎在成年人中90%可自愈，而慢性乙型肝炎表現(xiàn)不一，分為慢性乙肝攜帶者、慢性活動(dòng)性乙型肝炎、乙肝肝硬化等。我國(guó)目前乙肝病毒攜帶率為7.18%，其中約三分之一有反復(fù)肝損害，表現(xiàn)為活動(dòng)性的乙型肝炎或者肝硬化。隨著乙肝疫苗的推廣應(yīng)用，我國(guó)乙肝病毒感染率逐年下降，5歲以下兒童的HBsAg攜帶率僅為0.96%。(2006年我國(guó)進(jìn)行的乙型肝炎流行病毒調(diào)查結(jié)果)41992年與2006年HBsAg陽(yáng)性率比較2010年湖北省CDC在2個(gè)市的3個(gè)縣人群中開(kāi)展乙肝血清學(xué)監(jiān)測(cè)，共監(jiān)測(cè)人群700人,HBsAg陽(yáng)性率為2.14%；0～4歲為0.67%,15歲以上為5.00%,15～19歲最高,為7.00%2006年調(diào)查結(jié)果表明，我國(guó)1-59人群乙肝表面抗原攜帶率為7.18%，5歲以下兒童的HBsAg攜帶率僅為0.96%

2011年全國(guó)報(bào)告發(fā)病/死亡前10位病種乙肝為何難治?乙肝病毒兩層結(jié)構(gòu)，外包一層致密堅(jiān)硬的蛋白質(zhì)外殼，專(zhuān)門(mén)抵御藥物對(duì)他的作用，藥物對(duì)他根本無(wú)可奈何；病毒隱匿在肝細(xì)胞里面復(fù)制，藥物分子比肝細(xì)胞還大，根本無(wú)法進(jìn)入到肝細(xì)胞里面，進(jìn)而也不可能對(duì)病毒有絲毫的作用；

病毒有一個(gè)復(fù)制模塊，存在于細(xì)胞核中，專(zhuān)門(mén)誘導(dǎo)病毒高速?gòu)?fù)制繁殖，藥物分子連細(xì)胞都無(wú)法進(jìn)入，更無(wú)法進(jìn)入到細(xì)胞核中；

病毒會(huì)變性、變異。藥物一接近它它就會(huì)迅速的改變結(jié)構(gòu)和特性，從而讓藥物無(wú)法捕捉到他，逃避掉藥物對(duì)它的作用；

久之病毒會(huì)與人體基因長(zhǎng)生鏈接，此時(shí)任何藥物都無(wú)法做到切除，必需借助其它高科技醫(yī)學(xué)手段；

病毒生命周期是90天，附著藥物分子沒(méi)有那么久的吞殺效力，一般都會(huì)被人體快速消化掉，所以殺滅病毒根本無(wú)從談起。乙肝治療新技術(shù)三大肝病突破性技術(shù)先后研發(fā)成功。最早的是日本中微子透析技術(shù)；緊隨其后，德國(guó)O3技術(shù)也震撼性問(wèn)世；2011年末，我國(guó)上海復(fù)旦大學(xué)研究的治療性疫苗（乙克）也宣告三期臨床試驗(yàn)效果顯著。復(fù)旦新聞文化網(wǎng)/fudannews/2011/1115/29282.html8目前乙肝疫苗接種的問(wèn)題1、低無(wú)應(yīng)答率高，情況普遍，10-15%接種疫苗后無(wú)應(yīng)答。2、保護(hù)時(shí)間短，新生兒接種5微克3年后抗體陽(yáng)性率約30%。3、成人應(yīng)用劑量低。4、母嬰阻斷沒(méi)有正確處理。華北制藥—金坦生物99不同劑量乙肝疫苗母嬰阻斷效果疫苗劑量母親單陽(yáng)性母親雙陽(yáng)性調(diào)查人數(shù)陽(yáng)性人數(shù)陽(yáng)性率（％）調(diào)查人數(shù)陽(yáng)性人數(shù)陽(yáng)性率（％）10g317121.179044.445g32593312.74612337.70合計(jì)430358.141512717.88崔富強(qiáng)王富珍鄭徽，接種不同劑量重組乙型肝炎疫苗（酵母）阻斷乙型肝炎病毒母嬰傳播的評(píng)價(jià)，中國(guó)計(jì)劃免疫.2007,13(4).-289-292（X2=32.616,P<0.001）X2=23.032,P<0.001乙肝疫苗預(yù)防接種常見(jiàn)的問(wèn)題10結(jié)論:1、接種10ugX3重組HepB(酵母)阻斷HBV母嬰傳播的效果優(yōu)于5ugX3重組HepB(酵母)。2、對(duì)于母親HBsAg陽(yáng)性?xún)和?，特別是母親HBsAg和HBeAg雙陽(yáng)性的兒童，主動(dòng)免疫時(shí)采用10ugX3的重組HepB(酵母)為宜。6不同免疫劑量低、無(wú)應(yīng)答率比較

鄭徽,王富珍,陳園生，等.新生兒接種重組乙型肝炎疫苗（酵母）后低、無(wú)應(yīng)答率及影響因素中國(guó)計(jì)劃免疫,2007;13(4):303-305.WHO,HepatitisBpositionpaper.（X2=50.91P<0.01）無(wú)應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)：<10mIU/ml低應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)：10～100mIU/ml華北制藥—金坦生物12陳胤忠，江蘇省鹽城市CDC，《基因重組乙型肝炎疫苗用于成人的免疫程序和接種劑量的研究》，《中國(guó)計(jì)劃免疫》2005.2結(jié)果：高劑量疫苗組抗一HBsGMT和抗體高滴度分布比例均高于低劑量疫苗組；重組(CHO細(xì)胞)乙肝疫苗抗一HBsGMT高于重組(酵母)乙肝疫苗，重組(CHO細(xì)胞)乙肝疫苗10ug誘導(dǎo)的抗一HBsGMT顯著優(yōu)于10ug重組(酶母)乙肝疫苗。結(jié)論:對(duì)成人開(kāi)展乙肝疫苗接種應(yīng)選擇高劑量的乙肝疫苗，建議選用20ug重組(CHO細(xì)胞)乙肝疫苗．并優(yōu)先選擇0、1、6個(gè)月免疫程序。13高劑量疫苗是主流疫苗中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)聯(lián)合制訂《慢性乙型肝炎防治指南》（2010版）建議：對(duì)成人建議接種20μgCHO或20μg重組酵母乙型肝炎疫苗。對(duì)免疫功能低下或無(wú)應(yīng)答者，應(yīng)增加疫苗的接種劑量和針次；對(duì)3針免疫程序無(wú)應(yīng)答者可再接種3針，并于第2次接種3針乙型肝炎疫苗后1~2個(gè)月檢測(cè)血清中抗-HBs。14北京疾控中心做的觀察華北制藥CHO20-10-10大連漢遜酵母10-10-10深圳康泰酵母10-5-5北京天壇酵母10-5-5

在大學(xué)新生當(dāng)中做的觀察，華北CHO疫苗陽(yáng)轉(zhuǎn)率最高，達(dá)到98.7%。全國(guó)肝炎疫苗研究及應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)、《中國(guó)計(jì)劃免疫》2007.8151、天壇2、康泰3、大連4、華北全國(guó)肝炎疫苗研究及應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)、《中國(guó)計(jì)劃免疫》2007.816由此可見(jiàn)劑量越高，抗體滴度越高。相同劑量，產(chǎn)生抗體滴度相近。17乙肝疫苗的種類(lèi)1、血源乙肝疫苗—用無(wú)癥狀的HBsAg攜帶者的血液制成

2、基因工程乙肝疫苗—利用基因工程研制重組DNA乙肝疫苗，曾先后研制過(guò)大腸桿菌系統(tǒng)、啤酒酵母細(xì)胞系統(tǒng)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)和牛痘病毒系統(tǒng)的重組乙肝疫苗。根據(jù)生產(chǎn)系統(tǒng)：（酵母、CHO細(xì)胞）

啤酒酵母乙肝疫苗（釀酒酵母、酵母）

漢遜酵母乙肝疫苗

畢赤酵母乙肝疫苗

CHO細(xì)胞乙肝疫苗乙肝疫苗的種類(lèi)3、含前S蛋白的乙肝疫苗目前臨床上應(yīng)用的血源性疫苗與基因工程疫苗，均只含HBsAg蛋白，當(dāng)證實(shí)S蛋白能增強(qiáng)HBsAg的免疫應(yīng)答后，又注意到單純只含HBsAg蛋白的疫苗對(duì)血液透析病人與新生兒免疫效果較差時(shí)，遂生產(chǎn)出添加前S蛋白的酵母源性重組乙肝疫苗，它確能明顯地增強(qiáng)免疫應(yīng)答。19酵母疫苗：Engerix-B(史克)、Recombivac-B（merck）漢遜酵母：萊茵、Hepavax-Gene(綠十字韓)、

GeneVacB(印度),畢赤酵母：ShanvacB

(印度)、

Enivax-HB(印度),Euvax(LG韓國(guó))

CHO細(xì)胞：Bio-hep-B（以色列）,

Genhevac-B（法國(guó)）,Hepacare(英國(guó)),Sci-B-vac(澳大利亞、香港、以色列)

默克2004年已經(jīng)改為生產(chǎn)CHO疫苗。現(xiàn)有的國(guó)產(chǎn)及進(jìn)口基因重組乙肝疫苗20

生產(chǎn)單位疫苗名稱(chēng)(種類(lèi))劑型國(guó)內(nèi)大連漢信重組乙肝苗（漢遜酵母）10μg/0.5ml/支

天壇生物重組乙肝苗（釀酒酵母）5μg/0.5ml/支10μg/0.5ml/支10μg/1.0ml/支20μg/1.0ml/支華藥金坦重組乙肝苗（CHO）10μg/0.5ml/支20μg/1.0ml/支深圳康泰重組乙肝苗（釀酒酵母）10μg/0.5ml/支20μg/1.0ml/支5μg/0.5ml/支60μg/1.0ml/支北京華爾盾重組乙肝苗（CHO）10μg/支20μg/支進(jìn)口益可欣重組乙肝苗（漢遜酵母）10μg/0.5ml/支20μg/ml葛蘭素史克重組乙肝苗（釀酒酵母）10μg/0.5ml/支20μg/1.0ml/支聯(lián)合疫苗北京科興倍爾來(lái)福HA500EI.U.+HB10mg/1ml葛蘭素史克

HA720EI.U.+HB20mg/1.0ml到目前為止，有兩種規(guī)?；a(chǎn)的基因工程乙肝疫苗：一種是CHO細(xì)胞表達(dá)的一種是酵母細(xì)胞表達(dá)的

同重組乙肝疫苗(酵母)相比，重組乙肝疫苗(CHO細(xì)胞)具有如下特點(diǎn):CHO細(xì)胞表達(dá)的重組HepB是高等真核細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物，其天然結(jié)構(gòu)較低等的真核細(xì)胞酵母表達(dá)的HBsAg蛋白更適合人體吸收，生產(chǎn)過(guò)程中不同于酵母使用硫氰酸鹽處理，安全性好什么是重組乙型肝炎疫苗(CHO細(xì)胞)？

采用基因工程技術(shù)將無(wú)傳染性的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的S基因片段克隆到載體，用重組載體轉(zhuǎn)染真核生物CHO細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、增殖、分泌出HBsAg到培養(yǎng)液中，收集分泌液，經(jīng)高速離心、純化、除菌后，加人佐劑吸附(氫氧化鋁)而制成23CHO—中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

Chinesehamsterovarycell1、工程細(xì)胞2、國(guó)外75%以上基因工程藥品由哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá),我國(guó)寥寥無(wú)幾（僅有乙肝疫苗、重組人紅細(xì)胞生成素兩個(gè)產(chǎn)品）3、產(chǎn)品活性高4、技術(shù)門(mén)檻高中國(guó)生物工程雜志2005，25（2）24《藥典》及《預(yù)防接種工作規(guī)范》

收錄品種，明確指明的常用疫苗：

CHO乙肝疫苗啤酒酵母乙肝疫苗

25CHO乙肝疫苗的優(yōu)勢(shì)CHO苗特性酵母苗特性重組CHO細(xì)胞乙肝疫苗技術(shù)為我國(guó)專(zhuān)有技術(shù)，國(guó)家Ⅰ類(lèi)新藥用我國(guó)乙肝病毒流行株adr亞型的HBsAg基因，針對(duì)性更強(qiáng)由哺乳動(dòng)物細(xì)胞（CHO細(xì)胞）表達(dá)，結(jié)構(gòu)均一，抗原決定簇與天然抗原相似，免疫原性高糖基化完全，穩(wěn)定性高，產(chǎn)品25℃放置3月后，效力仍然很高全人群應(yīng)用酵母技術(shù)系美國(guó)默克公司技術(shù)轉(zhuǎn)讓。流行株為adw亞型低等的真核細(xì)胞酵母菌表達(dá)，抗原結(jié)構(gòu)松散，影響其免疫原性。抗體維持時(shí)間短產(chǎn)品無(wú)糖基化，穩(wěn)定性較差有人群限制，使用不便26快----產(chǎn)生抗體時(shí)間快中國(guó)藥品生物制品檢定所檢測(cè)，CHO疫苗第一針注射完平均第8天產(chǎn)生抗體。漢遜酵母疫苗第一針后平均第25天后產(chǎn)生抗體。

CHO8天漢遜酵母25天----中國(guó)藥品生物制品檢定所十一五課題27產(chǎn)生抗體滴度高CHO疫苗酵母疫苗28CHO疫苗的持久性數(shù)據(jù)：中國(guó)CDC病毒所在河北正定的觀察劑量：10μg人群：新生兒免疫8年后，抗體陽(yáng)性率85.76%，抗體水平在18.47mIU/ml以上。----《中國(guó)計(jì)劃免疫》，2007年2月29華北疫苗與其它CHO疫苗的區(qū)別1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)最高。原液純度達(dá)到99%以上；效力>1.2有效期3年2、連續(xù)生產(chǎn)、自動(dòng)化水平高。3、生產(chǎn)規(guī)模大，產(chǎn)量高。4、擴(kuò)免經(jīng)驗(yàn)豐富。

華北乙肝疫苗在新生兒的使用選取眾多應(yīng)用中比較代表性的幾個(gè)30中國(guó)肝炎防治基金會(huì)劉崇柏等關(guān)于“農(nóng)村貧困地區(qū)新生兒乙型肝炎疫苗扶貧工作效果分析”（中國(guó)計(jì)劃免疫2003年6月第9卷第3期）中，對(duì)中國(guó)肝炎防治基金會(huì)開(kāi)展的乙型肝炎疫苗新生兒免疫扶貧項(xiàng)目的工作效果進(jìn)行了分析。扶貧項(xiàng)目中使用的乙肝疫苗為北京天壇、華北制藥及深圳康泰，使用華北制藥疫苗的四個(gè)縣中，3個(gè)縣的保護(hù)率為100%，1個(gè)縣保護(hù)率為95.44%?！袊?guó)計(jì)劃免疫2003年6月第9卷第3期31河北省衛(wèi)生防疫站、中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所等單位曾在河北省正定縣選擇7個(gè)鄉(xiāng)做研究現(xiàn)場(chǎng)，對(duì)國(guó)產(chǎn)乙肝基因重組（CHO）疫苗的免疫效果進(jìn)行研究，取得了良好的效果。1年內(nèi)陽(yáng)轉(zhuǎn)率98.25%，3年內(nèi)陽(yáng)轉(zhuǎn)率92.31%?！腥A醫(yī)學(xué)雜志2002年1月第82卷第1期32

北京市衛(wèi)生防疫站、北京大興縣衛(wèi)生防疫站、北京順義區(qū)衛(wèi)生防疫站等單位曾選大興、順義地區(qū)的健康新生兒為觀察對(duì)象，進(jìn)行國(guó)產(chǎn)基因重組疫苗的實(shí)驗(yàn)，也證明CHO疫苗有很好的免疫效果。實(shí)驗(yàn)分組為：第I組酵母苗10-5-5μg接種、第II組酵母苗5-5-5μg接種、第III組CHO苗10-10-10μg接種。3組陽(yáng)轉(zhuǎn)分別為85.51%、86.44%、100%?！袊?guó)計(jì)劃免疫2000年6月第6卷第3期3334華北CHO乙肝疫苗在全國(guó)使用情況安徽、吉林、山西、河北的新生兒使用CHO乙肝疫苗。中國(guó)肝炎防治基金會(huì)采購(gòu)50萬(wàn)人份華北CHO乙肝疫苗，用于青海兒童。陜西查漏補(bǔ)種使用的是華北CHO乙肝疫苗。國(guó)家CDC工作人員接種華北CHO乙肝疫苗。北京的大學(xué)生接種華北CHO乙肝疫苗。35

謝謝附錄資料：不需要的自行刪除兒科疑難病例討論病例資料一般情況患兒，男，8月，因“發(fā)熱1天”由門(mén)診擬“上呼吸道感染”于2013年2月17日

收入院。病例資料現(xiàn)病史：

患兒于昨夜無(wú)明顯誘因下于家中出現(xiàn)發(fā)熱，體溫39.2℃左右，無(wú)咳嗽，無(wú)鼻塞，自服“小兒柴桂顆粒”后仍有發(fā)熱，且喂藥后患兒嘔吐1次，非噴射性，嘔出胃內(nèi)容物，無(wú)腹瀉，無(wú)面色發(fā)紺，無(wú)抽搐，即來(lái)我院就診。

病來(lái)患兒精神偏軟，胃納一般，夜寐欠安，大小便無(wú)殊。病例資料個(gè)人史、既往史及家族史:未見(jiàn)明顯異常情況。病例資料體格檢查：T

39.7℃，P

122次/分

,R

28次/分，Wt

10kg，神清，精神尚可，前囟未閉，1.0cm*1.0cm，平坦，氣尚平，三凹征陰性，全身未見(jiàn)皮疹，淺表淋巴結(jié)未及腫大，鞏膜無(wú)黃染，外耳道無(wú)異常分泌物，鼻不塞，咽紅，雙側(cè)扁桃未見(jiàn)腫大，頸軟，無(wú)抵抗，兩肺呼吸音粗，未及明顯干濕性啰音，心率122次/分,律齊，未及明顯病理性雜音，腹平軟，未及包塊，肝脾肋下未及，脊椎及四肢無(wú)關(guān)節(jié)紅腫疼痛，活動(dòng)自如，神經(jīng)系統(tǒng)檢查病理征未引出。病例資料入院前輔助檢查：（2013-02-17我院）血常規(guī)+CRP示W(wǎng)BC20.6G/L,N55.3%,L39.47%,HB109g/L，PLT385G/L

，CRP19MG/L。

病例資料初步診斷

急性上呼吸道感染33.47106.615121CRP(mg/L)

41091199352PLT(10^9/L)0.2360.2610.3070.318HCT

8089104105HGB(g/L)2.993.373.894.01RBC(10^12/L)

36.937.924.830.2LY%54.859.974.760.4NE%

22.211.813.624.3WBC(10^9/L)92.17

日期BRT+CRP輔助檢查

日期BRT+CRP2.262.273.043.053.07WBC(10^9/L)14.114.317.918.410.5NE%51.72738.942.623.1LY%33.953.839.839.362.8RBC(10^12/L)2.812.712.822.932.99HGB(g/L)7773787979HCT0.2240.210.2260.2340.238PLT(10^9/L)410535814818683CRP(mg/L)19.721722.4918.32<1輔助檢查

日期ESR63.10ESR(mm/h)143393101

日期肝功能63.053.10TP(60.0-83.0g/L)68.304773.18083.9ALB(34.0-54.0g/L)44.126.725.832.734.8BIB24.220.347.347.319.1輔助檢查輔助檢查病毒類(lèi)：巨細(xì)胞病毒抗體IgG陽(yáng)性(AU/mL)，余均陰性。輔助檢查2.21心臟B超：1.心內(nèi)結(jié)構(gòu)、房室大小、瓣膜活動(dòng)及血流信號(hào)未見(jiàn)明顯異常；2.左心室功能測(cè)定正常；3.心包少量積液。B超測(cè)定左右冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑返回未見(jiàn)明顯擴(kuò)張（左冠狀動(dòng)脈起始段內(nèi)徑1.52mm，右冠狀動(dòng)脈起始段內(nèi)徑1.81mm）3.8復(fù)查心臟B超：左冠狀動(dòng)脈起始段內(nèi)徑2.5mm，右冠狀動(dòng)脈起始段內(nèi)徑3.7mm輔助檢查2.21胸片：兩肺支氣管肺炎。2.25肺部CT:1.兩下肺散在斑片狀密度增高影，考慮炎癥可能；2.右側(cè)胸腔積液；3.兩側(cè)胸膜增厚。血氨、異常白細(xì)胞形態(tài)、免疫球蛋白類(lèi)、T細(xì)胞+NK+B細(xì)胞、ANA譜、血培養(yǎng)（兩次）、二便常規(guī)、腦電圖：