臨床藥理學(xué)試驗(yàn)

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臨床藥理學(xué)試驗(yàn)

ExperimentsforClinicalPharmacology

山東大學(xué)藥學(xué)院

二00八年

臨床藥理學(xué)試驗(yàn)

編寫人員(按姓氏筆畫順序)

曲顯俊紀(jì)建波張慶柱郭秀麗

焦波韓秀珍程艷娜

責(zé)任編寫者:曲顯俊

山東大學(xué)藥學(xué)院臨床藥學(xué)試驗(yàn)室編

二00八年

編寫說(shuō)明

根據(jù)醫(yī)學(xué)系臨床藥學(xué)(7年制)專業(yè)設(shè)置的目的與培養(yǎng)方案，結(jié)合當(dāng)前國(guó)內(nèi)外各院校在該課程教學(xué)方面的實(shí)際狀況和學(xué)生特點(diǎn)，我們?cè)诳偤裨囼?yàn)教學(xué)和科研工作的基礎(chǔ)上，編寫了臨床藥理學(xué)試驗(yàn)講義。該講義的內(nèi)容基本以模擬臨床常見(jiàn)病和多發(fā)病模型，并以理論教學(xué)中各章節(jié)常用典型藥物對(duì)機(jī)體作用特點(diǎn)為依據(jù)，觀測(cè)這些藥物的作用規(guī)律及作用特點(diǎn)，強(qiáng)調(diào)學(xué)生自己動(dòng)手試驗(yàn)的機(jī)遇，有利于提高學(xué)生觀測(cè)和分析問(wèn)題的能力，為進(jìn)入臨床階段的學(xué)習(xí)與實(shí)踐活動(dòng)打下基礎(chǔ)。

由于沒(méi)有其他可供參考的藍(lán)本，本教材所編寫的試驗(yàn)內(nèi)容主要參考了本所試驗(yàn)室教師長(zhǎng)期的科研活動(dòng)并結(jié)合其他發(fā)表研究論文，可能存在一些不足之處，希望教師和學(xué)生在使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)和提出看法，以利改進(jìn)。

編者

二00八年

目錄

試驗(yàn)室基本規(guī)則

試驗(yàn)一臨床藥理學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本方法

1試驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大基本原則2科研工作的基本步驟3論文的格式和基本寫法

試驗(yàn)二抗癌藥物引起血液系統(tǒng)毒性作用觀測(cè)

試驗(yàn)三解熱鎮(zhèn)痛藥物的作用及與氯丙嗪的降溫作用特點(diǎn)比較觀測(cè)試驗(yàn)四維拉帕米抗心律失常作用

試驗(yàn)五苯妥英鈉的抗癲癇作用及其血藥濃度測(cè)定

試驗(yàn)六藥物對(duì)小鼠肝藥酶誘導(dǎo)劑對(duì)藥物代謝的影響（巴比妥類）

試驗(yàn)七有機(jī)磷急性中毒家兔乙酰膽堿酯酶活性變化及阿托品和解磷定的搭救作

用

試驗(yàn)八哮喘動(dòng)物模型的制作及治療藥物療效觀測(cè)試驗(yàn)九雙波長(zhǎng)紫外分光光度法測(cè)定氨茶堿血藥濃度試驗(yàn)十慶大霉素對(duì)大鼠的腎毒性

試驗(yàn)十一體外培養(yǎng)細(xì)胞觀測(cè)阿霉素對(duì)K562細(xì)胞的殺傷作用

臨床藥理學(xué)試驗(yàn)室基本規(guī)則

1.試驗(yàn)前細(xì)心閱讀試驗(yàn)講義，了解試驗(yàn)?zāi)康牡囊蠛筒僮鞑襟E，結(jié)合試驗(yàn)內(nèi)容復(fù)習(xí)有關(guān)的藥理學(xué)基本理論及生理、生化知識(shí)。

2.試驗(yàn)時(shí)要依照操作步驟進(jìn)行，確鑿計(jì)算藥物劑量，細(xì)心觀測(cè)，認(rèn)真記錄，儉約藥品，愛(ài)護(hù)試驗(yàn)器材和動(dòng)物。如有器材損壞應(yīng)報(bào)告教師。

3.試驗(yàn)室內(nèi)要保持恬靜、整齊、藥品使用后必需用原瓶塞蓋好，共用藥品和器材不得任意挪動(dòng)，動(dòng)物取走后籠門要及時(shí)關(guān)緊。

4.試驗(yàn)終止后，要認(rèn)真探討，分析試驗(yàn)結(jié)果，寫出試驗(yàn)報(bào)告。最終各組輪番清潔試驗(yàn)室衛(wèi)生，清點(diǎn)試驗(yàn)器材，關(guān)好水電門窗。

素-6等）。內(nèi)生致熱源再刺激下丘腦引起PGE合成和釋放增加，作用于體溫調(diào)理中樞，使體溫升高。非甾體類解熱鎮(zhèn)痛藥物通過(guò)抑制下丘腦合成環(huán)氧酶COX，阻斷PGE的合成，能夠使體溫調(diào)理中樞的體溫定點(diǎn)恢復(fù)正常。因此，該類藥物只能降低發(fā)熱者的體溫，但不能降低至正常體溫以下，而且不影響正常人的體溫。吩噻嗪類藥物氯丙嗪(chlorpromazine)也能降低體溫，是通過(guò)抑制下丘腦體溫調(diào)理中樞，使體溫調(diào)理功能失靈。因次，該藥可降低發(fā)熱病人的體溫，也可降低正常人體溫，降溫程度隨環(huán)境溫度升高而幅度變小，若協(xié)同物理降溫，可降至正常體溫以下。此外，降溫作用與氯丙嗪的擴(kuò)張血管有一定關(guān)系。臨床常協(xié)同冰浴等物理降溫方法，使體溫降至28-32°C，用于低溫麻醉。協(xié)同哌替啶組成冬眠合劑，使患者處于深睡狀態(tài)，體溫、代謝和組織耗氧量均降低，稱為人工冬眠。[試驗(yàn)材料]

器材：體溫計(jì)(肛溫表)，注射器動(dòng)物：家兔6只

藥品：傷寒副傷寒菌苗，或10%蛋白棟或20%氯化鈉（2ml/kg,iv），滅菌牛奶（2ml/kg,im）等。

試驗(yàn)藥物：安基比林，阿司匹林，氯丙嗪。[試驗(yàn)方法]

取健康家兔6只，稱重，編號(hào)，用肛溫計(jì)測(cè)量正常體溫。然后1，2，3號(hào)分別靜脈注射傷寒副傷寒菌苗0.5-1ml/kg（或10%蛋白棟3ml/kgiv,40min后體溫升高）。每隔30分鐘測(cè)量體溫一次。待體溫升高0.6°C以上時(shí)，1號(hào)與4號(hào)腹腔注射5%氨基比林溶液2ml/kg，2號(hào)與5號(hào)腹腔注射0.5%氯丙嗪溶液2ml/kg，3號(hào)與6號(hào)腹腔注射等容量生理鹽水2ml/kg。給藥后每隔30分鐘測(cè)體溫1次，共2-3次，比較其結(jié)果有何不同。

[本卷須知]

（1）家兔應(yīng)健康，雌性應(yīng)無(wú)孕。

（1）家兔正常體溫一般在38-39.5°C，體溫過(guò)高者對(duì)致熱原反應(yīng)不良。（2）測(cè)溫前使家兔恬靜，將肛溫計(jì)甩至35°C以下，頭端涂以少量液體石蠟或

凡士林，輕輕插入肛門內(nèi)約3-4cm，扶住肛溫計(jì)，3分鐘后取出讀數(shù)。

（3）本試驗(yàn)的致熱原也可選用20%氯化鈉（2ml/kg,iv），滅菌牛奶（2ml/kg,im）

等。

[氯丙嗪降溫作用特點(diǎn)]

取健康家兔3只，先測(cè)量正常體溫及觀測(cè)全身狀態(tài)，然后甲兔靜注0.7%氯丙嗪溶液1ml/kg，并用冰袋降溫；乙兔靜注同量氯丙嗪但不用冰袋降溫；丙兔靜注等容量生理鹽水（1ml/kg），并用冰袋降溫。給藥后每20分鐘測(cè)量體溫一次，觀測(cè)各兔體溫變化及全身狀態(tài)有何不同。[本卷須知]冰袋可置家兔腹股溝或腹部等處。

思考題：

1.氨基比林和氯丙嗪對(duì)發(fā)熱家兔和正常家兔體溫的影響有何不同？為什么？2.氯丙嗪的降溫作用有何特點(diǎn)？有何臨床意義？（曲顯?。?/p>

試驗(yàn)四藥物對(duì)不同類型心律失常作用觀測(cè)

[試驗(yàn)?zāi)康腯了解心律失常模型的制作方法，把握利多卡因、阿托品抗心律失常的藥理學(xué)作用及其原理，初步了解不同類型心律失常的心電圖表現(xiàn)。

[試驗(yàn)原理]藥理學(xué)研究中常用的心律失常模型有兩類：過(guò)速型心律失常模型和緩慢型心律失常模型。過(guò)速型心律失?？梢酝ㄟ^(guò)以下方法形成：①電刺激心臟誘導(dǎo)；②外科手術(shù)或器械損傷形成；③化學(xué)藥物誘發(fā)形成。氯化鋇能促進(jìn)浦氏纖維鈉離子內(nèi)流，提高舒張期的除極速率從而誘發(fā)室性心律失常，表現(xiàn)為室性早博、二聯(lián)律、三聯(lián)律、室性心動(dòng)過(guò)速、心室纖顫等；利多卡因等藥物具有抗心律失常的作用，從而對(duì)抗氯化鋇誘發(fā)的室性心律失常。緩慢型心律失常模型可由維拉帕米、麻醉劑和煙堿等誘發(fā)產(chǎn)生。維拉帕米能夠抑制心肌細(xì)胞內(nèi)的Ca2+內(nèi)流，抑制竇房結(jié)的興奮性，減慢心室的傳導(dǎo)，阿托品對(duì)這種類型的心律失常具有預(yù)防和治療作用。[試驗(yàn)材料]

試驗(yàn)器材：BL-410生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)；大鼠解剖臺(tái)，天平1臺(tái)，大、小剪刀各1把，小鑷子1把，注射器（5ml1支，1ml3支，2ml1支）。

試驗(yàn)藥品：3%戊巴比妥鈉溶液

0.4％氯化鋇2.5mg/ml維拉帕米0.5％利多卡因1mg/ml阿托品生理鹽水。

試驗(yàn)動(dòng)物：大鼠[試驗(yàn)方法]

過(guò)速型心律失常試驗(yàn)：

1．選擇230-250g健康大鼠3只，稱重后編號(hào)為甲、乙、丙。腹腔注射3％戊巴比妥鈉1ml/kg，大鼠麻醉后，仰位固定于解剖臺(tái)上，通過(guò)引導(dǎo)電極的連接方法形成大鼠的標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)信號(hào)引入連接，分別記錄3只大鼠正常Ⅱ?qū)碾妶D。2．分開股靜脈，甲鼠靜脈注射0.4ml生理鹽水（對(duì)照），乙鼠靜脈注射0.5％利多卡因0.2ml/100g，丙鼠靜脈注射阿托品1mg/只，分別記錄3只大鼠給藥后1、2分鐘的心電圖圖形；然后，3只大鼠均靜脈注射0.5％氯化鋇0.4ml/100g，記錄靜脈注射開始第15、30秒鐘和1、3、5、10、15分鐘內(nèi)的心電圖變化，比較3只大鼠給予氯化鋇后心電圖有何不同。緩慢型心律失常試驗(yàn)：

1．另取大鼠3只，稱重，編號(hào)為1、2、3號(hào)。腹腔注射3％戊巴比妥鈉1ml/kg麻醉后，仰位固定于解剖臺(tái)上，分別記錄3只大鼠正常Ⅱ?qū)碾妶D。

2．分開股靜脈，1號(hào)大鼠靜注0.4ml生理鹽水作為對(duì)照，2號(hào)鼠靜注阿托品1mg/只，3號(hào)大鼠同法注射0.5％利多卡因0.2ml/100g，分別記錄3只大鼠給藥后1、2分鐘的心電圖圖形；接著，3只大鼠均靜脈注射2.5mg/ml維拉帕米0.2ml/100g，記錄靜注開始第15、30秒鐘和1、3、5、10、15分鐘的心電圖變化，觀測(cè)3只大鼠給予維拉帕米后心電圖有何不同。[試驗(yàn)結(jié)果]

1．將試驗(yàn)結(jié)果填寫記錄表內(nèi)

動(dòng)物數(shù)

恢復(fù)竇性心律數(shù)

心律失常持續(xù)時(shí)間（min）

型速生理鹽水組過(guò)利多卡因組

阿托品組

生理鹽水組緩慢利多卡因組型阿托品組

不能恢復(fù)竇性心律大鼠，心律失常持續(xù)時(shí)間按15分鐘計(jì)

2．剪貼有代表性的心電圖，將各組給藥前后的心電圖粘貼在試驗(yàn)報(bào)告上進(jìn)行分

析。[本卷須知]

1．氯化鋇需新鮮配制，快速注射，注入氯化鋇的速度要求一致。

2．利多卡因要緩慢注射。利多卡因作用時(shí)間維持時(shí)間短，因此預(yù)防給藥組的大鼠注入數(shù)分鐘后仍可能出現(xiàn)心律失常，此時(shí)可在注射利多卡因治療，但不可過(guò)多。[思考題]

1．氯化鋇、維拉帕米致心律失常的作用機(jī)制是什么？2．利多卡因抗氯化鋇所致心律失常的作用原理是什么？3．從本試驗(yàn)角度分析，心律失常患者臨床用藥應(yīng)注意什么？（楊月，郭秀麗，曲顯俊）

[試驗(yàn)?zāi)康腯觀測(cè)苯妥英鈉的毒性反應(yīng)，對(duì)藥物血藥濃度監(jiān)測(cè)有初步的認(rèn)識(shí)。[試驗(yàn)原理]苯妥英鈉治療有效濃度為10-20mg/L，血藥濃度大于20mg/L出現(xiàn)眼球震顫，大于30mg/L致共濟(jì)失調(diào)等小腦前庭系統(tǒng)功能障礙，大于40mg/L可引起精神改變。測(cè)定苯妥英鈉可用光譜法、HPLC及免疫化學(xué)法，較成熟的是衍生化后紫外檢測(cè)法。其原理是將標(biāo)本調(diào)理至pH6.8后，以二氯甲烷提取及沉淀蛋白，再轉(zhuǎn)溶于NaOH溶液，加KmnO4再加熱，使苯妥英氧化為吸光值大的二苯酮衍生物，再以環(huán)已烷提取，247nm紫外光比色定量。本法靈敏度、線性范圍、重復(fù)性均可滿足TDM要求。[試驗(yàn)材料]

試驗(yàn)五苯妥英鈉的血藥濃度測(cè)定及中毒反應(yīng)觀測(cè)

器材可調(diào)微量加樣器5ml注射器具塞離心試管水浴鍋藥品20mg/ml苯妥英鈉溶液7mol/L氫氧化鈉溶液

pH6.8磷酸鹽緩沖液3%戊巴比妥鈉溶液飽和KMnO4溶液

二氯甲烷環(huán)己烷動(dòng)物大鼠[試驗(yàn)方法]

1.選擇230-250g健康大鼠1只稱重，腹腔注射苯妥英鈉(120mg/kg),密切觀測(cè)2小時(shí)內(nèi)大鼠反應(yīng),并在給藥后0、10、30、50、70、90、120min自頸靜脈竇采血1ml，離心5min（2500rpm）取血清待測(cè)。

2.紫外法測(cè)血藥濃度取大鼠血清0.3ml，再分別參與pH6.8磷酸鹽緩沖液0.3ml，混勻后用二氯甲烷5ml提取，離心15min（2500rpm），棄去上層，取下層二氯甲烷于另一具塞離心試管中，參與7mol/LNaOH3.0ml，混合均勻，離心15min（2500rpm），取上層堿液于另一10ml具塞離心試管中，置70℃水浴約5min除去二氯甲烷，參與飽和高錳酸鉀溶液3.0ml，混勻，置80℃水浴加熱20min，冷卻至室溫。參與環(huán)己烷3.0ml，混勻，離心15min（2500rpm），取上層，以環(huán)己烷為空白對(duì)照，在247nm波優(yōu)點(diǎn)測(cè)其吸收度(A)。將吸光度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，得到苯妥英納的血藥濃度。

3．標(biāo)準(zhǔn)液的配制縝密稱定枯燥至恒重的苯妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品0.025g，加新沸過(guò)放冷的蒸餾水定容至25ml，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液備用。

4．標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備取10ml具塞離心試管6只，按順序參與大鼠空白血清0.3ml和0、3、6、12、24、48μl新配的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存液，混勻，再分別參與pH6.8磷酸鹽緩沖液0.3ml，混勻后用二氯甲烷5ml提取，離心15min（2500rpm），棄去上層，取下層二氯甲烷于另一具塞離心試管中，參與7mol/LNaOH3.0ml，混合均勻，離心15min（2500rpm），取上層堿液于另一10ml具塞離心試管中，置70℃水浴約5min除去二氯甲烷，參與飽和高錳酸鉀溶液3ml，混勻，置80℃水浴加熱20min，冷卻至室溫。參與環(huán)己烷3.0ml，混勻，離心15min（2500rpm），取上層，以環(huán)己烷為空白對(duì)照，在247nm波優(yōu)點(diǎn)測(cè)其吸收度(A)。以A對(duì)藥物濃度C回歸，求標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。

（紅棕色）[試劑配制]

（1）2/15M磷酸氫二鈉溶液：稱取Na2HPO423.87g，用蒸餾水溶解并稀釋至500ml。

（2）2/15M磷酸二氫鉀溶液：稱取KH2PO49.08g,用蒸餾水溶解并稀釋至500ml。

（3）pH7.2磷酸鹽緩沖液：取2/15MNa2HPO4溶液72ml和2/15MKH2PO4溶液28ml混合即成。

（4）0.001MpH4.5醋酸緩沖液：先用每升含冰醋酸5.78ml的水溶液28ml和每升含醋酸鈉（不含結(jié)晶水）8.2g的水溶液4.22ml混合成為0.1MpH4.5的醋酸鹽緩沖液，再用蒸餾水稀釋100倍。

（5）0.007M乙酰膽堿底物用液：快速稱取氯化乙酰膽堿0.127g(或溴化乙酰膽堿0.158g)，溶于0.001MpH4.5醋酸鹽緩沖液10ml里，貯于冰箱中，臨用時(shí)用pH7.2磷酸鹽緩沖液稀釋10倍即成。

（6）堿性羥胺溶液：臨用前20分鐘取等量14％NaOH溶液和14％鹽酸羥胺溶液混合即成。

（7）10％三氯化鐵溶液：稱取FeCl310g,用0.1N鹽酸溶解使成100ml。（8）33.3％（V/V）鹽酸溶液：量取鹽酸溶液33.3ml,加蒸餾水至100ml。（9）0.2%（V/V）敵敵畏：取敵敵畏0.1ml加生理鹽水至50ml。

（紀(jì)建波，張慶柱）

試驗(yàn)八哮喘動(dòng)物模型的制作及治療藥物療效觀測(cè)

[試驗(yàn)?zāi)康腯了解動(dòng)物哮喘模型的制作過(guò)程，測(cè)定常用支氣管平喘藥物的作用，把握支氣管哮喘發(fā)病機(jī)理及藥物作用機(jī)制。

[基本原理]不少藥物當(dāng)以氣霧法給予豚鼠時(shí)可以引起支氣管痙攣、窒息，從而導(dǎo)致抽搐而跌倒。這種動(dòng)物模型可用于觀測(cè)藥物的支氣管平滑肌松弛作用。目前最常用的引喘藥物是組胺和乙酰膽堿。藥物氣霧引喘裝置見(jiàn)圖[試驗(yàn)材料]

器材：藥物氣霧引喘裝置動(dòng)物：豚鼠4只

藥品：引喘藥物，組胺和乙酰膽堿試驗(yàn)藥物，氨茶堿或特布他林[試驗(yàn)方法]

取豚鼠6只備用。取豚鼠1只，放入玻璃罩內(nèi)（容積約4L），以400mmHg的壓力噴入2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組胺等容積的混合液15s，觀測(cè)豚鼠的引喘潛伏期（從噴霧開始到哮喘發(fā)作、呼吸困難，直到抽搐跌倒的時(shí)間），一般不超過(guò)120s，超過(guò)此潛伏期可考慮不用。

將選用的豚鼠隨機(jī)分2組（據(jù)試驗(yàn)要求定），每組3只，試驗(yàn)組豚鼠腹腔注射氨茶堿125mg/kg(12.5%溶液1ml/kg)，或其他受試藥物。注射后30min，重新測(cè)定其潛伏期，及6min內(nèi)跌倒的只數(shù)。另一組以400mmHg的壓力噴入0.5%異丙腎上腺素1min，讓其再吸入3min，馬上重新測(cè)定其引喘潛伏期，以及6min內(nèi)跌倒的只數(shù)。[本卷須知]

（4）氣霧噴頭所噴出的霧粒大小（其直徑1-5μm）是本試驗(yàn)成敗的關(guān)鍵，也

可用超聲霧化器替代，但應(yīng)確鑿定量。

（5）各鼠每天只能測(cè)定一次引喘潛伏期。同一天內(nèi)，屢屢測(cè)定，會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)

果。

（6）判斷藥物有無(wú)平喘作用的指標(biāo)：用藥后引喘潛伏期明顯延長(zhǎng)；計(jì)算用藥后

6min內(nèi)動(dòng)物不會(huì)因呼吸困難、窒息而跌倒的只數(shù)，不跌倒者引喘潛伏期以360s計(jì)算。

（7）抗組胺藥物無(wú)直接松弛支氣管平滑肌作用，但用這種動(dòng)物模型，也能得到

平喘效果。因此，在分析試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)排除這種假陽(yáng)性現(xiàn)象。（韓秀珍）

試驗(yàn)九雙波長(zhǎng)紫外分光光度法測(cè)定氨茶堿血藥濃度

[試驗(yàn)?zāi)康腯學(xué)習(xí)雙波長(zhǎng)紫外分光光度法測(cè)定氨茶堿的血藥濃度測(cè)定方法。體會(huì)

穩(wěn)態(tài)一點(diǎn)法設(shè)定藥物給藥量。[試驗(yàn)材料]

紫外分光光度計(jì);旋渦混合器;離心機(jī);10ml容量瓶，離心管，吸管，移液器茶堿標(biāo)準(zhǔn)品;氯仿、異丙醇、0.1mol/L氫氧化鈉、0.1mol/L鹽酸。動(dòng)物家兔[試驗(yàn)方法]

1.取家兔1只，給予氨茶堿100mg/kg（用50%葡萄糖注射液稀釋至5ml），緩慢靜

脈注射。1小時(shí)后取血2ml，分開血清。取血情0.5ml，置離心管中,加0.1mol/L鹽酸溶液0.2ml,縝密參與氯仿∶異丙醇(95∶5)溶液5ml,振搖混合,離心(2500r/min)10min,吸取氯仿液(下層)4.0ml置另一離心管中,參與0.1mol/L氫氧化鈉溶液4.0ml,振搖均勻,離心(2500r/min)10min,吸取堿液(上層)3～3.5ml,供測(cè)定用。

2.茶堿血藥濃度的結(jié)果計(jì)算測(cè)得血清樣品的ΔA,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得相應(yīng)的血

藥濃度C(ug/ml),C×10即為茶堿的血藥濃度C1(ug/ml)。

3．給藥量設(shè)計(jì)

D’=D×C’/C

其中，D原來(lái)劑量，D’為調(diào)整后劑量，C為測(cè)得血藥濃度，C’為目標(biāo)濃度。[試驗(yàn)結(jié)果]

根據(jù)測(cè)得的血藥濃度和目標(biāo)濃度，計(jì)算調(diào)整后劑量。

附.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備縝密稱取茶堿標(biāo)準(zhǔn)品5.0mg,加蒸餾水0.2ml,再參與0.1

mol/L的氫氧化鈉溶液于10ml容量瓶中,得到濃度為0.5ug/uL的茶堿標(biāo)準(zhǔn)溶液。取茶堿標(biāo)準(zhǔn)液5.0、7.5、10.0、15.0、20.0、25.0uL參與空白血清0.5ml中混勻,使其濃度為0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、2.5ug/ml,以0.1mol/L的氫氧化鈉4ml加2ml蒸餾水為參比,測(cè)定A274和A298處的吸收度,計(jì)算ΔA,求得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。

（焦波）

試驗(yàn)十慶大霉素對(duì)大鼠腎臟毒性觀測(cè)

[試驗(yàn)?zāi)康腯觀測(cè)慶大霉素對(duì)大鼠的腎毒性