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
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文檔簡介
2.GelChromatographySeparateCaseinandRiboflavinbySephadexG-75
Purposebasicoperationofgelchromatography(凝膠層析)
principleofseparatingriboflavin(核黃素)andcaseinbySephadexG-75welcometousethesePowerPointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperienceprinciple1.ConceptionGelchromatography,
in
analyticalchemistry,techniqueforseparatingchemicalsubstancesbyexploitingthedifferencesintheratesatwhichtheypassthroughabedofaporous,semisolidsubstance(gel).Themethodisespeciallyusefulforseparatingenzymes,proteins,peptides,andaminoacidsfromeachotherandfromsubstancesoflow
molecularweight.
2.固定相(凝膠)三維空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)
交聯(lián)劑越多交聯(lián)度越大網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)越緊密交聯(lián)劑越少交聯(lián)度越小網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)越疏松Sephadex?
Beadsarepreparedbycross-linkingdextran
(葡聚糖)withepichlorohydrin
(環(huán)氧氯丙烷).Widelyusedinindustrialprocesses.Alsousefulindesalting(脫鹽)andbufferexchange.Sephadex的分級范圍
G10<700G15<1,500G251,000~5,000G-501,500~30,000G-753,000~70,000G1004,000~150,000G1505,000~400,000G2005,000~800,000吸水性*G類的型號—每克干凝膠吸水量(ml)x10*如G-75—每克干凝膠吸水量為7.5mlVe-VoKd=————Vi分配系數(shù)Kd
:特點:(1)與被分離物質(zhì)分子的大小和凝膠顆??紫兜拇笮∮嘘P(guān)(2)與柱的長短粗細無關(guān)
每個溶質(zhì)分子在流動相和固定相之間有一個特定的分配系數(shù)(Kd)應(yīng)用脫鹽測分子量分離純化VeAlbuminNaClVeVe優(yōu)點缺點凝膠層析的優(yōu)缺點凝膠是一種不帶電荷的惰性載體,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定要求樣品和洗脫液的粘度很低操作條
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