治療心腦血管疾病,心腦血管疾病治療的福音-新洷康天然水蛭素

1.作用動物試驗與臨床研究表明蛭能高效抗凝血抗栓形成以阻止凝血酶催化的凝血因子活化和血小板反應(yīng)等進(jìn)一步血瘀現(xiàn)象外還能抑制凝血酶誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞的增殖和凝血酶對內(nèi)皮細(xì)胞的刺激肝素比它不僅用量少不引起出血也依賴于內(nèi)源性輔助因子肝素則有引起出血的危險彌性血管內(nèi)凝血的發(fā)病過程中抗凝血酶III往往減少，這將制肝素的療效，采用水蛭會有較好的效果。2.應(yīng)用水蛭素是一類很有前途的抗凝化瘀藥物可用于治療各種血栓疾病其靜脈血栓和彌漫性血管凝血的治療可于外科手術(shù)后預(yù)防動脈血栓的形成防溶解血栓后或血管再造后血栓的形成善外液循環(huán)和血液透析過程顯微外科手術(shù)中常因為吻合處血管栓塞而導(dǎo)致失敗采用水蛭可促進(jìn)傷口愈合究還表明水素在腫瘤治療中也能發(fā)揮作用能阻止腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移證有療效的腫瘤如纖維肉瘤肉管肉瘤，黑素瘤和白血病等蛭素還可配合化學(xué)治療和放射治療于促進(jìn)腫瘤中的血流而增強(qiáng)療效。動物試驗和臨床研究表明靜脈或皮下注射水蛭素均無明顯毒副作用論性亞急性的毒性試驗，對血壓、心率、血相、出血時間和血液化學(xué)成分均不受影響，呼吸系統(tǒng)也沒有影響，無過敏反應(yīng)，一般無特異抗體發(fā)現(xiàn)。半致死劑，大于治療所用的劑量1mgAg)。其值得指出的是，水蛭素可以口服，這給用帶來很大方便。水蛭素比較穩(wěn)定，胰蛋白酶和糜蛋白酶并不破壞其活性，而且水蛭素的某些水解片段仍有抑制凝血酶的作用，這就可以解釋為何口服中藥水蛭提取液仍然有療效的原理。近年來在我國以水蛭素為主要成分的中成藥已有許多種抗血栓片活通膠囊等其年產(chǎn)值達(dá)數(shù)千萬元水的新藥在不斷研究和推出用基因工程生產(chǎn)重組水蛭類多肽藥物以代水蛭素或作為抗凝化瘀藥的添加成分在近期內(nèi)就可實現(xiàn)作為注射劑用于心血管系統(tǒng)疾和腫瘤治療藥物還需要進(jìn)一步的臨床研究庸置疑重組水蛭素類多肽藥物的開發(fā)將會帶來巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。3.重組水蛭素由于水蛭素具有重要開發(fā)價值水蛭的來源有限國外醫(yī)藥界均著重研究通過基因工程獲得重組水蛭素。年，重組水蛭已在大腸桿菌和酶母中分別表達(dá)成功，與天然水蛭素相比，重組水蛭素在第63位基酪氨酸)上未硫酸酪化，活性略低，其性質(zhì)基本相同治的劑量下靜注射無毒副反應(yīng)國外一些大的生物技術(shù)公司對水蛭素己進(jìn)入多方面的臨床研究。有關(guān)水蛭素類多肽的專利，每年公布的數(shù)量至少在十多項以上，包括水蛭素類似的多肽，研究論文每年總在數(shù)十篇以上1998年底重組水蛭素藥物德國

正式上市，年英國批準(zhǔn)上市，己注冊的國家有國歐洲澳大利亞、新西蘭、南非等I0多個國家。水蛭素在使用過中清半衰期太短發(fā)抗栓效果一研究機(jī)構(gòu)將水蛭素與PEG一起加工成為耦合體制劑后可大大延長水蛭素的血清半衰期從而提高其在體內(nèi)的抗血栓生成效果。4.研究我們對重組水蛭素基因工程作了大量系統(tǒng)的研究有堅實的技術(shù)基礎(chǔ)們從國內(nèi)養(yǎng)殖的醫(yī)用水蛭中克隆出水蛭素的cDNA進(jìn)測序，合成了大腸桿菌偏愛密碼子的水蛭素基因構(gòu)了分泌型大腸桿菌表載體優(yōu)化表達(dá)條件獲得高效表達(dá)，產(chǎn)物直接分泌至跑外大簡化了下游工程我們據(jù)水蛭素的特性設(shè)了適合大規(guī)模生產(chǎn)的低成本的分離純化新工藝，無高液相層或反相層析只三步純化即獲得電泳純的產(chǎn)品。目前我們得到水蛭素的表達(dá)量、純度和得率均達(dá)到國際先進(jìn)水平。5.技術(shù)的發(fā)展前景心血管系統(tǒng)疾病和腫瘤是主要危害人類健康的兩大類病害這兩大類疾病的藥物是新藥研制的重點。水蛭在破血瘀通經(jīng)、消痞等方面的療效已為我國數(shù)千年中醫(yī)實踐所證明重組水蛭素在抗凝消栓以配合腫瘤化療和放療上的作用也為國外臨床所證明射針劑的要求較高前臨床主用于抗深靜脈血栓作為口服藥劑在短期內(nèi)即可取得經(jīng)濟(jì)和社會效益重組水蛭素類多肽藥物取代水蛭或作為中成藥的添加成分計至少可獲得上億元的經(jīng)濟(jì)效益隨著臨床驗的擴(kuò)大它將可以用于更多的疾病的防治發(fā)展前景十分廣闊。6國外同技術(shù)較表達(dá)水平純工藝，產(chǎn)品質(zhì)量國外水平相當(dāng)，某些技術(shù)指標(biāo)超過國外，成本比國外低。在美國，藥用重組水蛭素每毫克美元。我國生產(chǎn)的成本低，如果每毫克降至人民幣元廣大患者就有可能承受得起國重組水蛭素都采用針劑們正在研制口服劑型口無疑更易被病人接受成也可更降低尤其是它可以拓寬使用的范圍于各種血栓病的防治，或作為有關(guān)藥物的主要成分或添加成分，可開發(fā)更大的市場。7.市場狀況及需求分析

在醫(yī)藥市場上抗栓藥物的需求日俱增但于天然水蛭來源有限各國醫(yī)藥界都將注意力集中在重組水蛭素的開發(fā)上。美國、法國士、德國、英國、日本十多家生物技術(shù)公司和醫(yī)院都在臨床應(yīng)用或研究重組水蛭素類多肽抗栓藥物治療血栓疾病的范圍和療效。1998年德首先上重組水蛭素藥物1999年國也獲批準(zhǔn)上市前己注冊的國家有歐洲、美國、澳大利亞新蘭南非等十多個國家。中國具有心血管疾病藥物和腫瘤物的巨大市場蛭又是傳統(tǒng)中藥此組水蛭素開發(fā)前景十分看好。據(jù)估計，我國目前血栓病人約有2000萬人，如果其中人采用水蛭素治療，每年共需300—500公斤。國際上常用肝素作為抗凝藥物，這類抗凝藥物的使用已有60多歷史，需用量逐年增加。美國70年每年就有1000萬人使用肝素，大部分是手術(shù)后預(yù)防血栓的形成。僅美國肝素的年用量就超過9000億位，約相當(dāng)于噸研究表明，水蛭素在許多性能都優(yōu)于肝素，它用藥量小，不引起出血，也不依賴于內(nèi)源性輔助因子。隨著臨床研究的廣泛開展，重組水蛭素的應(yīng)用范圍不斷拓寬，它的需求也會日益增大。8.優(yōu)點第一水蛭素與水蛭肽抑制凝血的反應(yīng)不需要抗凝血酶(AT—)為輔助因子使其抗凝作用與量效關(guān)系更吻合且可在缺乏抗凝血酶Ⅲ的病如彌漫性血管內(nèi)凝)中使用。第二肝素不能滅活結(jié)和于血栓的凝血酶水素與水蛭肽則對循環(huán)中的和結(jié)合于血栓上的凝血酶都可以抑制。第三，肝素會被激活的血小板釋放的血小板因子4(PTF4)富含組氨基酸的糖蛋白等結(jié)合，水蛭素與水蛭肽則不受這些因素的影響。第四水素與水蛭肽用于抗血治療血副作用較小且無過敏反應(yīng)和免疫原性無毒反應(yīng)。9.性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及抗凝原理天然水蛭素是由65或66個基酸殘基組成的單鏈多,分子量約為7000,能在極端的pH和條件下穩(wěn)定存在。水蛭素的形狀類似蝌,蚪頭部是多肽的N端富半胱氨酸(cys),半胱氨酸間相互作用形成3個硫(N末端結(jié)構(gòu)緊;蝌蚪尾部是含有多酸性氨基酸和一個被磺酸化的酪氨(Tyr63)多肽C末端。凝血酶(thrombin)是血液固和止血過程中的中心,不但能剪切纖維蛋白,纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋;還能激活其它的固血液的酶,凝血因子Ⅴ、Ⅷ、ⅩⅢ和抗凝血酶蛋白C(Fenton,1981)等。凝血酶與大分子底物的相互作用取決于三個不同的區(qū)催化反應(yīng)位點的初級結(jié)合位C(Magnusen,1971),鄰近催化點的非極性結(jié)合位點AB(BrlinrandShen,1977;SonderandFenton,1984)負(fù)責(zé)凝血酶與纖維蛋白原專一性作用的陰離子結(jié)合位點(識別位點)R(Fentonal.1989;HenriksenandMann,1988)蛭的

N端封阻凝血酶的活性位,疏水結(jié)構(gòu)域與凝血酶的非極性結(jié)合位(AB)互補(bǔ),該非極性結(jié)合位點靠近凝血酶的催化中心。水蛭素末有6個性氨酸,能與帶正電的凝血酶識別位點形成許多離子鍵N端、C端個功能域以同的方式結(jié)合到凝血酶,凝血酶的活性部位形成一個帽子阻止底物的結(jié)合。為了更好地了解水蛭素結(jié)構(gòu)對性能的影,們對于水蛭素的N端C端和各點做了大量研究得出許多結(jié)論,為水蛭肽的設(shè)計打了堅實的理論基礎(chǔ)。各種研表明水蛭素C末的10個基酸是必需的最小結(jié),C末端的最佳大小至少是2個氨基(Hir54-65),在這一序列中每個氨基酸都非常重要。幾個疏水殘基和酸性殘基對于維持水蛭素C末端的功能非常重要。10.水蛭與制蛭的區(qū)別1.水蛭素，主要是從吸血水蛭的唾液中分離提純出來，具有抗,抗血栓功效的肽物質(zhì)臨床常用于多重血栓性疾病的治療,可以消除血管阻,使血細(xì)胞解聚,栓消散促進(jìn)微血管復(fù)通改微循