分子生物學(xué)考題及答案2

本文格式為Word版，下載可任意編輯——分子生物學(xué)考題及答案2步驟2：兩個切口之間長度為28個核苷酸的單鏈DNA片斷在DNA酶的作用下被移除；步驟3：留下的間隙由DNA聚合酶填補，然后由DNA連接酶連接。

（2）真核生物RNA聚合酶Ⅱ完成轉(zhuǎn)錄事件主要包括5個步驟：啟動子的識別、轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體的形成、起始、延伸、終止。

在啟動子識別和轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體形成中主要涉及以下蛋白質(zhì)：通用轉(zhuǎn)錄因子TFIID的TBP組分識別啟動子并結(jié)合；TFIIA和TFIIB與DNA結(jié)合，加強TFⅡD與TATAbox結(jié)合的能力；TFIIF和RNAPII結(jié)合上來，形成前起始復(fù)合體；TFIIE和TFIIH結(jié)合上來，形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體；RNAPII利用游離的NTPs起始轉(zhuǎn)錄；大約合成10nts的RNA片斷后，通用轉(zhuǎn)錄因子釋放，RNAPII進(jìn)入轉(zhuǎn)錄延伸狀態(tài)。

KornbergisolatedDNApolymeraseⅠfromE.coli.DNApolymeraseⅠhasanessentialfunctioninDNA5．

replication.WhatarethefunctionsoftheenzymeinDNAreplication?科恩伯格從大腸桿菌中分開出了DNA聚合酶Ⅰ，在DNA復(fù)制過程中具有一個基本的功能，DNA聚合酶Ⅰ在DNA復(fù)制過程中具有什么功能？

答：DNA聚合酶Ⅰ具有切除在起始DNA復(fù)制時合成的RNA引物的功能，并合成一段DNA以取代RNA。執(zhí)行DNA聚合功能的DNA聚合酶Ⅲ在遇到RNA引物時，就會從DNA鏈上脫離下來，

然后按5’?3’方向合成DNA。DNA聚合酶Ⅰ利用自身具有的5’，3’核酸外切酶的功能切除RNA引物，

6．Thedouble-helixmodelofDNA,assuggestedbyWatsonandCrick,wasbasedondatagatheredonDNAbyotherresearchers.Thefactsfellintothefollowingtwogeneralcategories;givetwoexamplesofeach:(1)chemicalcomposition;(2)physicalstructure.Watson和Crick在其他研究者成果的基礎(chǔ)上提出了DNA雙螺旋模型，這些研究成果可以劃分為兩類即DNA的化學(xué)組成與DNA的物理結(jié)構(gòu)。請詳細(xì)闡述這兩類研究成果的具體結(jié)論。

答：化學(xué)組成即DNA堿基組成的Chargaff規(guī)則：腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩爾數(shù)相等，即A=T；鳥嘌呤和胞嘧啶的摩爾數(shù)相等，即G=C；含氨基的堿基（A和C）總數(shù)等于含酮基的堿基（G和T）總數(shù)，即A+C=G+T；嘌呤的總數(shù)等于嘧啶的總數(shù)，即A+G=C+T。DNA的堿基組成具有生物種的特異性。

物理結(jié)構(gòu)：DNA分子是由核苷酸組成，核苷酸有含氮的堿基、戊糖、磷酸構(gòu)成。根據(jù)富蘭克林和威爾金斯的x射線衍射圖像說明：DNA分子是一個十分有序的雙螺旋結(jié)構(gòu)，每兩個相鄰堿基平面的垂直距離是3.4?，每個螺旋包含10個堿基對。

7．為什么m7GTP能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成，但不抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成？相反人工合成的SD序列能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成，但不抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成？

答：m7GTP之能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成是由于它是真核細(xì)胞mRNA的5’帽子結(jié)構(gòu)的類似物，能夠競爭性地結(jié)合真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成起始階段所必需的帽子結(jié)合蛋白。原核細(xì)胞mRNA的5’沒有帽子結(jié)構(gòu)，因此m7GTP不會抑制原核細(xì)胞蛋白質(zhì)翻譯的起始。

SD序列是存在原核細(xì)胞mRNA的5’端非編碼區(qū)的一段富含嘌呤堿基的序列，能夠與核糖體小亞基上的16SrRNA的3’端的一段序列互補結(jié)合，這種結(jié)合對原核細(xì)胞翻譯過程中起始密碼子的識別十分重要，將人工合成的SD序列加到翻譯體系中，必然會干擾到mRNA所固有的SD序列與16SrRNA的互補序列的相互作用，從而競爭性地抑制原核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的起始。五、綜合分析題（本大題共2小題，任選其一，每題8分，共計8分）

1．在利用飛船進(jìn)行科學(xué)試驗過程中，當(dāng)飛船著陸后，你的任務(wù)是確定某一細(xì)菌樣品DNA復(fù)制的方式。你首先使細(xì)菌在沒有標(biāo)記的培養(yǎng)基上生長幾代，然后轉(zhuǎn)到15N標(biāo)記的培養(yǎng)基中確鑿地繁殖一代。你提取細(xì)菌樣品的DNA并進(jìn)行CsCl梯度離心，你獲得了如下結(jié)果：

15

N15N

Control

14

N14NExperimentalsample

根據(jù)這一結(jié)果，你認(rèn)為DNA是以半保存方式進(jìn)行復(fù)制，但你的觀點是不正確的，為什么？請你設(shè)計另一個試驗方案（用同樣的樣品和一致的技術(shù)手段即CsCl梯度離心）能夠有效地將半保存復(fù)制和彌散復(fù)制這兩種復(fù)制方式區(qū)分開來。

2023年12月28日

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考試試題2

但不能根據(jù)這一結(jié)果就可CsCl梯度離心的結(jié)果雖然排除了全保存復(fù)制的可能性，

證明DNA的復(fù)制是半保存復(fù)制，由于彌散復(fù)制也會出現(xiàn)同樣的結(jié)果。用同樣的樣品和一致的技術(shù)手段即CsCl梯度離心將半保存復(fù)制和彌散復(fù)制區(qū)分開來的方法是將DNA樣品變性，然后利用堿性CsCl梯度離心技術(shù)對單鏈DNA進(jìn)行離心，半保存復(fù)制會出現(xiàn)兩條帶，而若是彌散復(fù)制則出現(xiàn)一條帶，如下圖所示：

彌散復(fù)制半保存復(fù)制

變性后離心

變性后離心

變性后離心

變性后離心

2．Gordon在研究原核生物蛋白質(zhì)翻譯機制時,將EF-Tu,EF-Ts,Phe-tRNAPhe,tRNAPhe,GTP-P32等分別進(jìn)行混合后，經(jīng)硝酸纖維膜過濾，檢測被阻檔滯留在膜上的放射性計量，得到如圖示的結(jié)果。你從這一結(jié)果中可以得到什么結(jié)論？為什么？Phe

EF-Tu,EF-Ts,Phe-tRNA,32

P

GTP-P32Phe

EF-Tu,EF-Ts,tRNA,

GTP-P32

答：延伸因子與GTP、氨酰-t