微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)ppt

微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)ppt第1頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)第2頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四(一)概念、特點(diǎn)：

個(gè)體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統(tǒng)稱。微生物包括細(xì)菌、病毒、真菌、和少數(shù)藻類等。（但有些微生物是肉眼可以看見的，像屬于真菌的蘑菇、靈芝等。）結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡(jiǎn)單,個(gè)體多數(shù)十分微小.通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu).且體內(nèi)一般不含有葉綠素.不能進(jìn)行光合作用.第3頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類：細(xì)菌、支原體、放線菌、藍(lán)藻個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單酵母菌、霉菌、食用菌真菌：原生生物：顯微藻類、原生生物（如：草履蟲、變形蟲等）病毒、類病毒、朊病毒◆微生物的共同特點(diǎn)：第4頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四細(xì)菌細(xì)菌：?jiǎn)渭?xì)胞不分枝的原核微生物。細(xì)菌細(xì)胞微小而透明，通常用適當(dāng)染料染色后顯微鏡觀察圖1-1常見的三種細(xì)菌典型形態(tài)A.球菌

B.桿菌C.弧菌第5頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四球菌弧菌桿菌第6頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四細(xì)菌細(xì)菌第7頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四細(xì)菌*細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：堅(jiān)韌且有彈性細(xì)胞壁有哪些功能？①固定細(xì)胞外形；

②保護(hù)細(xì)胞免受外力的損傷；

③阻攔大分子物質(zhì)進(jìn)人細(xì)胞；④使細(xì)胞具有致病性及對(duì)噬菌體的敏感性。傷寒桿菌細(xì)胞壁中含毒素第8頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四芽孢

有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌.第9頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四菌落單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。有鞭毛細(xì)菌常形成邊緣不規(guī)則的菌落；具有莢膜的菌落表面較透明，邊緣光滑整齊；有芽孢的菌落表面干燥皺褶；有些能產(chǎn)生色素的細(xì)菌菌落還顯出鮮艷的顏色。第10頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四幾種菌落及其形態(tài)第11頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四菌落細(xì)菌的菌落特征因種而異第12頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類型根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營(yíng)養(yǎng)類型。自養(yǎng)菌（autotroph）異養(yǎng)菌（heterotroph）腐生菌寄生菌大部分病原菌第13頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四放線菌1、結(jié)構(gòu)：?jiǎn)渭?xì)胞原核分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）第14頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素

微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的

應(yīng)用:第15頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四第16頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四第17頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四如圖是酵母菌電子顯微鏡下的形態(tài)結(jié)構(gòu)酵母菌和霉菌青霉第18頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四生殖腐生生活孢子生殖第19頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四病毒的結(jié)構(gòu)第20頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四病毒

第21頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四SARS病毒、禽流感病毒第22頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）第23頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四1.培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)(1)水(2)碳源(3)氮源(4)無機(jī)鹽（二）培養(yǎng)基第24頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四：凡是能為微生物提供所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。①無機(jī)碳源：CO2；NaHCO3等②有機(jī)碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②異養(yǎng)微生物的能源⑴.概念⑵.來源：⑶.作用：1.微生物的碳源第25頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四①無機(jī)氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能夠?yàn)槲⑸锾峁㎞元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含N的代謝產(chǎn)物。2.微生物的氮源⑴.概念：⑵.來源：⑶.作用：3.生長(zhǎng)因子⑶.常見的生長(zhǎng)因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)物。酶和核酸的組成成分。維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。第26頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四(1)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)----?如：培養(yǎng)乳酸桿菌需要在培養(yǎng)基中添加維生素(2)pH值如:培養(yǎng)霉菌需酸性、培養(yǎng)細(xì)菌需中性或微堿性(3)氧氣的含量如:培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無氧的條件2.培養(yǎng)基內(nèi)所需的其他條件練習(xí)生長(zhǎng)因子第27頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四練習(xí)1（多項(xiàng)選擇）1、下列細(xì)菌中，能利用含碳無機(jī)物作碳源的是A光合細(xì)菌B根瘤菌C硝化細(xì)菌D乳酸菌2、培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中，必需含有的碳源和氮源是A糖、有機(jī)酸等B二氧化碳、碳酸鹽C蛋白質(zhì)D無機(jī)氮化物3、下列敘述不正確的是A培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)B液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基所含的最基本物質(zhì)不相同C微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌A.CA.CB.C.第28頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四(1)按物理狀態(tài)分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基3.分類——加入凝固劑（如瓊脂）第29頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四固體培養(yǎng)基：菌落，菌苔第30頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四液體培養(yǎng)基：表面生長(zhǎng)均勻混濁生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)第31頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)(是否運(yùn)動(dòng))

第32頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四3.分類(2)按用途分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基------選擇菌種------鑒別菌種第33頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四連線下列選擇培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌：分離金黃色葡萄球菌：分離固氮菌：分離自養(yǎng)型微生物：無氮培養(yǎng)基的培養(yǎng)基不含有機(jī)物的培養(yǎng)基高濃度食鹽培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基第34頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基金屬光澤深紫色菌落第35頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四3.分類(3)按成分分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基------成分未知，來源有限------成分已知第36頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四血清中含有：①多種蛋白質(zhì)（白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等）②多種金屬離子；③激素；④促貼附物質(zhì)，如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長(zhǎng)因子⑥轉(zhuǎn)移蛋白⑦不明成分

人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清）。第37頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四（三）無菌技術(shù)1、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵:2、無菌技術(shù)包括的四大方面(參看教材15頁)3、消毒與滅菌(1)消毒：概念：使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物。包括芽孢和孢子嗎？方法:煮沸消毒法巴氏消毒法:如牛奶的消毒化學(xué)藥劑消毒:酒精、氯氣、石碳酸、煤酚皂溶液等紫外線消毒(不包括芽孢和孢子)防止外來雜菌的入侵第38頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四（2）滅菌概念：使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法：a

灼燒滅菌b

干熱滅菌c

高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌微生物的接種工具(接種環(huán)、接種針)或其他金屬用具直接在火焰的充分燃燒層灼燒注意適用范圍第39頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四干熱滅菌

160－170℃；1－2h能耐高溫的需要保持干燥的物品(玻璃器皿)高壓蒸汽滅菌100kPa121℃15-30min通常用于培養(yǎng)基的滅菌第40頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四

請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手（4）注射器（5）新鮮牛奶（6）自來水（7）實(shí)驗(yàn)室的空氣思考第41頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四四、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g將上述物質(zhì)溶解后，添加自來水，定容至1000mL第42頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四1．計(jì)算、稱量2．溶化3．調(diào)pH：pH7．6

4．過濾：這一步可以省去。5．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6．加塞7．包扎操作步驟第43頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四8．滅菌:

將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。將培養(yǎng)皿用舊報(bào)紙包裹，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下滅菌2h。第44頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四倒平板技術(shù)1.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手撥出棉塞。1234第45頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四倒平板技術(shù)2.右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰。1234第46頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四倒平板技術(shù)12343.用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~

20mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。第47頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四倒平板技術(shù)12344.等待平板冷卻凝固，大約需5~10min。然后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上。第48頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四9．倒平板:

待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）2d后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種.10．無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。第49頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。問題討論第50頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。第51頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。第52頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。第53頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四二、實(shí)驗(yàn)操作（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)算－稱量－溶化－滅菌－倒平板（二）純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法（三）將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)12h和24h后，觀察并記錄定容—調(diào)PH

第54頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四三、課題延伸：菌種的保藏1、斜面保藏（臨時(shí)保存）2、甘油保藏（長(zhǎng)期保存）練習(xí)第55頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四倒平板第56頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？問題討論

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。第57頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。第58頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四第四課時(shí)第59頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四1、平板劃線法第60頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四問題討論

1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？

答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。第61頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。第62頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四2.稀釋涂布平板法:(1)系列稀釋操作:第63頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四問題討論

涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？

應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。第64頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四涂布平板操作討論:涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。第65頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四返回菌落：?jiǎn)蝹€(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。不同的細(xì)菌的菌落特征不同菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。第66頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四(2)碳源可作為碳源的物質(zhì)有:含碳無機(jī)物:

、

、

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含碳有機(jī)物：蛋白質(zhì)脂肪酸不同微生物所利用的碳源不同異養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為碳酸鹽碳酸氫鹽二氧化碳糖類（主要）含碳有機(jī)物（有機(jī)碳）含碳無機(jī)物（無機(jī)碳）第67頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四(3)氮源可作為氮源的物質(zhì)有:含氮無機(jī)物：、、、含氮有機(jī)物：蛋白胨牛肉膏尿素返回固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獍睔庀跛猁}氨鹽氮?dú)獾?8頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四思考:1)無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？

2)消毒和滅菌有何不同？3)為什么消毒牛奶要用巴氏消毒法?4)請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿②玻棒、試管、燒瓶和吸管③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手消毒滅菌條件溫和強(qiáng)烈作用范圍物體表面或內(nèi)部一部分,不包括芽孢和孢子物體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。滅菌滅菌消毒營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞第69頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四?思考1溶化時(shí)為什么要將牛肉膏連同稱量紙一起加熱?

答:②加瓊脂的目的是什么?答:可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中,減少誤差作為凝固劑第70頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四思考2在滅菌前,用牛皮紙、舊報(bào)紙包緊盛有培養(yǎng)基的錐形瓶的目的是什么？答:

②培養(yǎng)皿能否用高壓蒸汽滅菌？答:?在滅菌時(shí)能避免水蒸汽凝結(jié)時(shí)浸濕棉塞,在取出培養(yǎng)基錐形瓶時(shí)也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用不能,因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保持干燥,應(yīng)該用干熱滅菌.第71頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四練習(xí)2:1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是A將用于微生物培養(yǎng)的器皿.接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌B接種純種細(xì)菌C適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D防止外來雜菌的入侵2.下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是A接種前用肥皂洗雙手,再用酒精擦拭雙手B接種前用火焰燒灼接種針C培養(yǎng)在50℃左右時(shí)擱置斜面D在酒精燈的火焰旁完成3.外科手術(shù)器械和罐頭食品的處理,要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)A球菌B桿菌C螺旋菌D芽孢DCD第72頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四4.某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地,以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容,首先對(duì)食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理,準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具,然后從菌種站購(gòu)來各種食用菌菌種.請(qǐng)回答以下問題:

(1)對(duì)買回來的菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),首先制備試管培養(yǎng)基,寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料

。其中提供氮源的主要

是

；提供能源的主要物質(zhì)是

；瓊脂的作用是

，它不提供營(yíng)養(yǎng)。(2)微生物在生長(zhǎng)過程中對(duì)各種成分所需量不同,故制備培養(yǎng)基時(shí)各成分要有合適的

,在燒杯加入瓊脂后要不停地

,防止

.牛肉膏、蛋白胨、水、無機(jī)鹽、瓊脂牛肉膏蛋白胨凝固劑比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂第73頁，共88頁，2023年，2月20日，星期四(3)將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加棉塞后包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入中滅菌,壓力為

,溫度為

,時(shí)間

,滅菌完畢拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力

,將試管取出.

(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)注意,先向鍋內(nèi)倒入

,把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將基中原有冷空氣徹底排除后將鍋密閉.(5)從一支試管向另一支試管接種時(shí)注意,接種環(huán)要在酒精燈

焰滅菌.并且待接種環(huán)

后沾取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰附近,將接種的試管放入

℃冰箱中保藏.高壓滅菌鍋100KPa121℃自然降至零后適量水