《醫(yī)院監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)方法》

醫(yī)院消毒監(jiān)測(cè)

檢驗(yàn)方法編輯ppt醫(yī)院消毒監(jiān)測(cè)的主要內(nèi)容包括：

對(duì)重點(diǎn)部門(mén)的室內(nèi)空氣、物體表面及醫(yī)護(hù)人員手表面的消毒情況的監(jiān)測(cè)對(duì)使用中消毒液及滅菌劑的監(jiān)測(cè)對(duì)內(nèi)鏡消毒效果的監(jiān)測(cè)對(duì)各種滅菌器滅菌效果的生物監(jiān)測(cè)對(duì)醫(yī)院污水的監(jiān)測(cè)編輯ppt一、室內(nèi)空氣、物體表面及醫(yī)護(hù)人員手表面消毒情況的監(jiān)測(cè)

編輯ppt1、檢驗(yàn)依據(jù)：GB15982-1995《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》

編輯ppt2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：

（1）、細(xì)菌菌落總數(shù)

環(huán)境類(lèi)別范圍標(biāo)準(zhǔn)空氣cfu/cm3物體表面cfu/cm2醫(yī)護(hù)人員手cfu/cm2Ⅰ類(lèi)層流潔凈手術(shù)室、層流潔凈病房≤10≤5≤5Ⅱ類(lèi)普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、普通保護(hù)性隔離室、供應(yīng)室無(wú)菌區(qū)、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房≤200≤5≤5Ⅲ類(lèi)兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治療室、供應(yīng)室清潔區(qū)、急診室、化驗(yàn)室、各類(lèi)普通病房和房間≤500≤10≤10Ⅳ類(lèi)傳染病科及病房-≤15≤15編輯ppt2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：

（2）、致病菌不得檢出致病微生物，包括：乙型溶血鏈球菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌等要求在母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面及醫(yī)護(hù)人員手上不得檢出沙門(mén)氏菌。

編輯ppt3、空氣采樣及檢查方法：

采樣：

采樣時(shí)間：選擇消毒處理后與進(jìn)行醫(yī)療活動(dòng)之前期間采樣采樣高度：與地面垂直高度80~150cm布點(diǎn)方法：室內(nèi)面積≤30m2，設(shè)一條對(duì)角線上取3點(diǎn)，即中心一點(diǎn)、兩端各距墻1m處各取一點(diǎn)；室內(nèi)面積>30m2，設(shè)東、西、南、北中5點(diǎn)，其中東、西、南、北點(diǎn)均距墻1m。3采樣方法：用9cm直徑普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板在采樣點(diǎn)暴露5min。編輯ppt3、空氣采樣及檢查方法：

檢測(cè)方法：細(xì)菌菌落總數(shù)檢查：將采樣好的平板放置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)后，進(jìn)行數(shù)落計(jì)數(shù)。結(jié)果計(jì)算：

50000×平均菌落數(shù)（cfu/平皿）

空氣細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/m3）=

平板面積（cm2）×平板暴露時(shí)間（min）

編輯ppt4、醫(yī)院物體表面采樣及檢查方法：

采樣：采樣時(shí)間：選擇消毒處理后4h內(nèi)進(jìn)行采樣。采樣面積：被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2。采樣方法：用5×5cm2的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣1~4個(gè)規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子裝有10ml采樣液的試管中，門(mén)把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的方法采樣。編輯ppt4、醫(yī)院物體表面采樣及檢查方法：

檢測(cè)方法：細(xì)菌菌落總數(shù)檢查：將含有棉拭子的采樣液充分混勻并進(jìn)行適當(dāng)稀釋后，取1ml采樣液接種于無(wú)菌平皿中，平行接種兩個(gè)平皿，然后倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂15~20ml，待凝固后將平板放置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，進(jìn)行數(shù)落計(jì)數(shù)。

編輯ppt4、醫(yī)院物體表面采樣及檢查方法：

檢測(cè)方法：結(jié)果計(jì)算：平皿上菌落的平均數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)

物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/m2）=

采樣面積（cm2）

編輯ppt5、醫(yī)護(hù)人員手采樣及檢查方法：

采樣：

采樣時(shí)間：在接觸病人、從事醫(yī)療活動(dòng)前進(jìn)行采樣。采樣面積：采雙手，一只手涂擦面積約30cm2，采樣面積按平方厘米計(jì)算。采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無(wú)菌生理鹽水采樣液的棉拭子一支在雙手曲面從指根到指端來(lái)回涂擦各兩次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管內(nèi)送檢。

編輯ppt5、醫(yī)護(hù)人員手采樣及檢查方法：

檢測(cè)方法：細(xì)菌菌落總數(shù)檢查：將含有棉拭子的采樣液充分混勻并進(jìn)行適當(dāng)稀釋后，取1ml采樣液接種于無(wú)菌平皿中，平行接種兩個(gè)平皿，然后倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂15~20ml，待凝固后將平板放置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，進(jìn)行數(shù)落計(jì)數(shù)。編輯ppt5、醫(yī)護(hù)人員手采樣及檢查方法：

檢測(cè)方法：結(jié)果計(jì)算：

平皿上菌落的平均數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)

手表面細(xì)菌菌落總數(shù)（cfu/m2）=

30×2

編輯ppt二、對(duì)于使用中消毒劑及滅菌劑的監(jiān)測(cè)

1、檢驗(yàn)依據(jù)：GB15982-1995《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：要求細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)100cfu/mL，同樣不得檢出致病菌。此外，在衛(wèi)生廳印發(fā)的《監(jiān)測(cè)方案》中還提出使用中的消毒劑及滅菌劑應(yīng)監(jiān)測(cè)其有效成份含量，使其符合使用的標(biāo)準(zhǔn)。編輯ppt使用中消毒劑及滅菌劑的監(jiān)測(cè)

采樣:采樣時(shí)間：采取更換前使用中的消毒劑與無(wú)菌器械保存液采樣量及方法：在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管吸取1mL被檢樣液，加入9mL含中和劑的稀釋液中。

根據(jù)所采的樣液不同，應(yīng)在采樣液中加入相應(yīng)的中和劑，以中和被檢樣液的殘效作用編輯ppt☆關(guān)于中和劑的選擇對(duì)于醇類(lèi)與酚類(lèi)消毒劑，稀釋液用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯對(duì)于含氯、含碘消毒劑、過(guò)氧化物消毒，需在肉湯中加入0.1%硫代硫酸鈉對(duì)于洗必泰、季銨鹽類(lèi)消毒劑，需在肉湯中加入3%（W/V）吐溫80和0.3%卵磷脂對(duì)于醛類(lèi)消毒劑，需在肉湯中加入0.3%甘氨酸對(duì)于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需在肉湯中加入3%（W/V）吐溫80編輯ppt使用中消毒劑及滅菌劑的監(jiān)測(cè)

檢測(cè)方法

:細(xì)菌菌落總數(shù)檢查：將采樣液充分混勻并進(jìn)行適當(dāng)稀釋后，取1mL采樣液接種于無(wú)菌平皿中，平行接種兩個(gè)平皿，然后倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂15~20ml，待凝固后將平板放置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，進(jìn)行數(shù)落計(jì)數(shù)。結(jié)果分析：平板上有菌生長(zhǎng)，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個(gè)平板菌落數(shù)在10個(gè)以下，仍可用于消毒處理（但不能用于滅菌），若第每個(gè)平板菌落數(shù)超過(guò)10個(gè)，說(shuō)明每毫升被檢樣液含菌量已超過(guò)100個(gè)，即不宜使用。

編輯ppt使用中消毒劑及滅菌劑的監(jiān)測(cè)

檢測(cè)方法

:有效成份含量：依據(jù)衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版中的2.2消毒產(chǎn)品理化檢驗(yàn)技術(shù)規(guī)范進(jìn)行有效氯含量測(cè)定2.2.1.2.1有效碘含量測(cè)定2.2.1.2.2過(guò)氧乙酸含量測(cè)定2.2.1.2.3戊二醛含量測(cè)定2.2.1.2.9需要指出的是，使用中消毒劑及無(wú)菌器械保存液的有效成份含量均較低，因此，滴定液的濃度要適當(dāng)降低。

編輯ppt三、內(nèi)鏡消毒滅菌監(jiān)測(cè)主要依據(jù)：內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范（2004年版）第五章衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：消毒后的內(nèi)鏡合格標(biāo)準(zhǔn)為：細(xì)菌總數(shù)<20cfu/件，不能檢出致病菌；滅菌后的內(nèi)鏡合格標(biāo)準(zhǔn)為：無(wú)菌檢測(cè)合格。

編輯ppt三、內(nèi)鏡消毒滅菌監(jiān)測(cè)

采樣：采樣方法：監(jiān)測(cè)采樣部位為內(nèi)鏡的內(nèi)腔面。用無(wú)菌注射器抽取10ml含相應(yīng)中和劑的緩沖液，從待檢內(nèi)鏡活檢口注入，用15ml無(wú)菌試管從活檢出口收集，及時(shí)送檢，2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。

編輯ppt三、內(nèi)鏡消毒滅菌監(jiān)測(cè)

檢測(cè)方法：菌落計(jì)數(shù)：將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.5ml，加入2只直徑90mm無(wú)菌平皿，每個(gè)平皿分別加入已經(jīng)熔化的45℃~48℃營(yíng)養(yǎng)瓊脂15ml~18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35℃培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)。結(jié)果判斷：菌落數(shù)/鏡=2個(gè)平皿菌落數(shù)平均值×20。致病菌檢測(cè)：將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.2ml分別接種90mm血平皿、中國(guó)蘭平皿和SS平皿，均勻涂布，35℃培養(yǎng)48小時(shí)，觀察有無(wú)致病菌生長(zhǎng)。

編輯ppt四、致病菌檢測(cè)方法需要檢測(cè)的致病菌主要有：溶血鏈球菌綠膿桿菌金黃色葡萄球菌沙門(mén)氏菌編輯ppt1、溶血性鏈球菌

依據(jù)：GB/T4789.11-2003

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)溶血性鏈球菌檢驗(yàn)編輯ppt1、溶血性鏈球菌

檢驗(yàn)程序：檢樣葡萄糖肉湯血平板血平板（分純培養(yǎng)）鏈激酶試驗(yàn)桿菌肽敏感試驗(yàn)觀察溶血革蘭氏染色報(bào)告36℃±1℃24h36℃±1℃36℃±1℃24h24h編輯ppt2、綠膿桿菌依據(jù)：GB7918.4-87化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法綠膿桿菌編輯ppt2、綠膿桿菌

檢驗(yàn)程序：增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)染色鏡檢氧化酶試驗(yàn)綠膿菌素試驗(yàn)硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)明膠液化試驗(yàn)42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)

報(bào)告37℃培養(yǎng)18~24h

37℃培養(yǎng)18~24h

編輯ppt3、金黃色葡萄球菌

依據(jù)：GB7918.5-87化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法金黃色葡萄球菌編輯ppt3、金黃色葡萄球菌

檢驗(yàn)程序：增菌分離染色鏡檢甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)血漿凝固酶試驗(yàn)報(bào)告37℃18~24h

37℃24~48h

編輯ppt4、沙門(mén)氏菌

沙門(mén)氏菌：按國(guó)標(biāo)要求，對(duì)于母嬰同室、早產(chǎn)兒室、新生兒及兒科病房物表面和醫(yī)護(hù)人員手上，不得檢出沙門(mén)氏菌。檢驗(yàn)方法主要參照GB4789.4-2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

1、檢驗(yàn)依據(jù)：WS/T310.3-2009《醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第3部分清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)》GB15981-1995《消毒與滅菌效果評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)》、消毒技術(shù)規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)中要求，對(duì)滅菌質(zhì)量采用物理監(jiān)測(cè)法、化學(xué)監(jiān)測(cè)法和生物監(jiān)測(cè)法進(jìn)行。編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：

壓力蒸汽滅菌物理監(jiān)測(cè)法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測(cè)并記錄滅菌時(shí)的溫度、壓力、時(shí)間等滅菌參數(shù)。溫度波動(dòng)范圍在±3℃以?xún)?nèi)，時(shí)間滿(mǎn)足最低滅菌時(shí)間的要求，同時(shí)應(yīng)記錄所有臨界點(diǎn)的時(shí)間、溫度與壓力值，結(jié)果應(yīng)符合滅菌的要求。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：壓力蒸汽滅菌化學(xué)監(jiān)測(cè)法：應(yīng)進(jìn)行包外、包內(nèi)化學(xué)指示物監(jiān)測(cè)。具體要求為滅菌包包外應(yīng)有化學(xué)指示物、高度危險(xiǎn)性物品包內(nèi)應(yīng)放置包內(nèi)化學(xué)指示物，置于最難滅菌部位。如果透過(guò)包裝材料可直接觀察包內(nèi)化學(xué)指示物的顏色變化，則不必放置包外化學(xué)指示物。通過(guò)觀察化學(xué)指示物顏色的變化，判定是否達(dá)到滅菌合格要求；采用快速壓力蒸汽滅菌程序時(shí)，應(yīng)直接將一片包內(nèi)化學(xué)指示物置于待滅菌物品旁邊進(jìn)行化學(xué)監(jiān)測(cè)。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：壓力蒸汽滅菌生物監(jiān)測(cè)法：應(yīng)每周監(jiān)測(cè)一次；緊急情況下，可在生物PCD中加用5類(lèi)化學(xué)指示物；新的包裝材料和方法進(jìn)行滅菌時(shí)應(yīng)進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)B-D試驗(yàn)：預(yù)真空壓力蒸汽滅菌器應(yīng)每日開(kāi)始滅菌運(yùn)行前進(jìn)行B-D測(cè)試，測(cè)試合格后，方可使用。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：干熱滅菌物理監(jiān)測(cè)法：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行物理監(jiān)測(cè)。將多點(diǎn)溫度檢測(cè)儀的多個(gè)探頭分別放于滅菌器各層內(nèi)、中、外各點(diǎn)，關(guān)好柜門(mén)，引出導(dǎo)線，由記錄儀中觀察溫度上升與持續(xù)時(shí)間。溫度在設(shè)定時(shí)間內(nèi)均達(dá)到預(yù)置溫度，則物理監(jiān)測(cè)合格。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：干熱滅菌化學(xué)監(jiān)測(cè)法：每一滅菌包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，每一滅菌包內(nèi)應(yīng)使用包內(nèi)化學(xué)指示物，并置于最難滅菌的部位。對(duì)于未打包的物品，應(yīng)使用一個(gè)或多個(gè)包內(nèi)化學(xué)指示物，放在待滅菌物品附近進(jìn)行監(jiān)測(cè)。經(jīng)過(guò)一個(gè)滅菌周期后取出，據(jù)其顏色的改變判斷是否達(dá)到滅菌要求。

生物監(jiān)測(cè)法：應(yīng)每周監(jiān)測(cè)一次

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：環(huán)氧乙烷滅菌的監(jiān)測(cè)物理監(jiān)測(cè)法：每次應(yīng)連續(xù)監(jiān)測(cè)并記錄滅菌時(shí)的溫度、壓力和時(shí)間等滅菌參數(shù)。滅菌參數(shù)符合滅菌器的使用說(shuō)明或操作手冊(cè)的要求。化學(xué)監(jiān)測(cè)法：每個(gè)滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，作為滅菌過(guò)程的標(biāo)志；每包內(nèi)最難滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過(guò)觀察其顏色變化判定是否達(dá)到滅菌合格要求。生物監(jiān)測(cè)法：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及要求：過(guò)氧化氫等離子滅菌、低溫甲醛蒸汽滅菌監(jiān)測(cè)物理監(jiān)測(cè)法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測(cè)并詳細(xì)記錄滅菌過(guò)各的參數(shù)，滅菌參數(shù)符合滅菌器的使用說(shuō)明或操作手冊(cè)的要求?；瘜W(xué)監(jiān)測(cè)法：每個(gè)滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，作為滅菌過(guò)程的標(biāo)志；每包內(nèi)最難滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過(guò)觀察其顏色變化，判定是否達(dá)到滅菌合格要求。生物監(jiān)測(cè)法：過(guò)氧化氫等離子滅菌應(yīng)每天至少進(jìn)行一次生物監(jiān)測(cè)；低溫甲醛蒸汽滅菌應(yīng)每周監(jiān)測(cè)一次。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3、監(jiān)測(cè)方法

在進(jìn)行醫(yī)院監(jiān)測(cè)時(shí)，對(duì)于各種滅菌器的滅菌效果監(jiān)測(cè)應(yīng)采用生物監(jiān)測(cè)的方法。按《消毒技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定，將指示菌株制成標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試包或生物PCD，或使用一次性標(biāo)準(zhǔn)生物測(cè)試包，對(duì)滅菌器內(nèi)的滅菌質(zhì)量進(jìn)行生物監(jiān)測(cè)。標(biāo)準(zhǔn)生物監(jiān)測(cè)包置于滅菌器排氣口的上方或廠家建議的滅菌器內(nèi)最難滅菌的部位，并設(shè)陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照。編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3.1、壓力蒸汽滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953或SSIK31）菌片含量為5.0×105cfu/片~5.0×106cfu/片。（D121值1.3min~1.9min，KT值為≤19min，ST值≥3.9min）。

培養(yǎng)基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。

標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包：由16條41cm×66cm的全棉手術(shù)巾制成。將每條手術(shù)巾的長(zhǎng)邊折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成23cm×23cm×15cm大小的測(cè)試包。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3.1、壓力蒸汽滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法檢測(cè)方法：將兩個(gè)嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，在無(wú)菌條件下，取出標(biāo)準(zhǔn)包中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)56℃±1℃培養(yǎng)7天（自含式生物指示物按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)執(zhí)行）觀察培養(yǎng)結(jié)果。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3.1、壓力蒸汽滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格；陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性，判定為滅菌不合格；同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗(yàn)組陽(yáng)性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染菌所致。編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3.2、干熱滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法

指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372），菌片含量為5.0×105cfu/片~5.0×106cfu/片。（D160值1.3min~1.9min，KT值為≤19min，ST值≥3.9min）。檢測(cè)方法：將枯草桿菌黑色變種芽胞菌片分別裝入滅菌中試管內(nèi)（1片/管）。滅菌器與每層門(mén)把手對(duì)角線內(nèi)、外角處放置2個(gè)含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關(guān)好柜門(mén)，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，待溫度降至80℃時(shí)，加蓋試管帽后取出試管。在無(wú)菌條件下，加入普通營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)培養(yǎng)基(5ml/管)，36℃±1℃培養(yǎng)48h，觀察初步結(jié)果，無(wú)菌生長(zhǎng)管繼續(xù)培養(yǎng)至第7日。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3.2、干熱滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，若每個(gè)指示菌片接種的肉湯管均澄清，判定為滅菌合格；陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，而指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格；對(duì)難以判定的肉湯管，取0.1ml接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，用滅菌L棒或接種環(huán)涂勻，置36℃±1℃培養(yǎng)48h，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長(zhǎng)，若有指示菌生長(zhǎng)，判為滅菌不合格；若無(wú)指示菌生長(zhǎng)，判為滅菌合格。

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3.3、環(huán)氧乙烷滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法：

指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372），菌片含量為5.0×105cfu/片~5.0×106cfu/片。（在環(huán)氧乙烷劑量為600mg/L±300mg/L，作用溫度為54℃±2℃，相對(duì)濕度為60%±10%條件下，其殺滅90%微生物的D值為2.6min~5.8min，KT值為≤58min，ST值≥7.8min）。

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3.3、環(huán)氧乙烷滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法：常規(guī)生物測(cè)試包的制備：取一個(gè)20ml無(wú)菌注射器，去掉針頭，拔出針?biāo)?，將生物指示劑放入針筒?nèi)，帶孔的塑料帽應(yīng)朝向針頭處，再將注射器的針?biāo)ú寤蒯樛?，不要踫到生物指示物，之后用一條全棉小毛巾兩層包裹，置于紙塑包裝袋中，封裝。

編輯ppt五、滅菌器消毒滅菌效果的監(jiān)測(cè)

3.3、環(huán)氧乙烷滅菌的生物監(jiān)測(cè)方法：檢測(cè)方法：常規(guī)生物測(cè)試包放在滅菌器最難滅菌的部位，即整個(gè)裝載滅菌包的中心部位。滅菌周期完成后，應(yīng)立即將生物指示物從被滅菌物品中取出，接種于含有復(fù)方中和劑的0.5%的葡萄糖肉湯培養(yǎng)基中，36℃±1℃培養(yǎng)7天。結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格；陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照組培養(yǎng)陰性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性，判定為滅菌不合格；同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗(yàn)組陽(yáng)性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染菌所致。

編輯ppt六、醫(yī)院污水的采樣及檢測(cè)主要依據(jù)：GB18466-2005《醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染排放標(biāo)準(zhǔn)》編輯ppt六、醫(yī)院污水的采樣及檢測(cè)2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求：標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，醫(yī)療機(jī)構(gòu)門(mén)診、病房、手術(shù)室、各類(lèi)檢驗(yàn)室、病理解剖室、放射室、洗衣房、太平間等處排出的診療、生活及糞便污水。當(dāng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)其他污水與上述污水混合排出時(shí)一律視為醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了污水中多項(xiàng)污染物排放限值，我們主要監(jiān)測(cè)的指標(biāo)是：糞大腸菌群及總余氯；其合格標(biāo)準(zhǔn)如下：編輯ppt六、醫(yī)院污水的采樣及檢測(cè)2、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求：對(duì)于傳染病、結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)：糞大腸菌群數(shù)<100MPN/L；總余氯<0.5mg/L2.2對(duì)于綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)和其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)：糞大腸菌群數(shù)<500MPN/L；總余氯<0.5mg/L編輯ppt六、醫(yī)院污水的采樣及檢測(cè)采樣方法用采水器或其他滅菌容器采取污水樣至少200mL，放入滅菌瓶?jī)?nèi)，如果是經(jīng)加氯處理的污水，需加1.5％硫代硫酸鈉溶液中和余氯。

另外應(yīng)取一瓶不加中和劑的污水，用于總余氯的檢測(cè)。

編輯ppt六、醫(yī)院污水的采樣及檢測(cè)

檢驗(yàn)方法

糞大腸菌群的檢驗(yàn)程序：樣品處理：確定樣品的量，糞大腸菌群數(shù)量相對(duì)較少的接種量一般為10、1、0.1ml；數(shù)量較多的接種量為1、0.1、0.01ml或0.1、0.01、0.00