新微生物學(xué)試驗(yàn)復(fù)習(xí)提綱

本文格式為Word版，下載可任意編輯——新微生物學(xué)試驗(yàn)復(fù)習(xí)提綱微生物學(xué)試驗(yàn)復(fù)習(xí)提綱

1.研究微生物學(xué)的基本技術(shù)有哪些？（顯微鏡技術(shù)、無菌技術(shù)、純種分開技術(shù)和純種培養(yǎng)技術(shù)）

2.光學(xué)顯微鏡又稱“復(fù)式顯微鏡〞，由哪兩部分組成？顯微鏡的什么最為關(guān)鍵？為什么？3.油鏡的放大倍數(shù)為多少？與其他物鏡相比，油鏡的使用比較特別，需在載玻片與鏡頭間滴加什么？其什么作用？

4.影響顯微鏡分辯率的因素有哪些？（光源的波長(zhǎng)、物鏡的鏡口角和鏡頭間介質(zhì)的折射率）5.油鏡使用后應(yīng)怎樣處理？鏡油擦拭的正確方法是怎樣的？6.制造接種環(huán)、接種針的金屬常用鉑或鎳,原因是軟硬適度，能經(jīng)受火焰反復(fù)灼燒，又易冷卻.7.培養(yǎng)皿的包裝一般以多少套作一包比較適合？5~8套。8.滅菌吸管的包裝的本卷須知：（1）吸管必需枯燥;(2)在距其粗頭頂端約0.5cm處，塞一小段約1.5cm長(zhǎng)的棉花（不能用脫脂棉）。作用是避免外界及口中雜菌吸入管內(nèi)，并防止菌液等吸入口中。

9.空的玻璃器皿一般用干熱滅菌，若用濕熱滅菌。則要多用幾層報(bào)紙包扎，外面最好加一層牛皮紙或鋁箔。

10.接種環(huán)在用前必需燒灼滅菌，用后也應(yīng)馬上燒灼。

11.簡(jiǎn)單染色的原理是什么？其主要操作步驟是什么？固定的作用是什么？染色過程中應(yīng)注意哪些環(huán)節(jié)？

12.革蘭氏染的原理及步驟是什么？革蘭氏染色后的正確結(jié)果是什么顏色？

13.你認(rèn)為哪些環(huán)節(jié)會(huì)影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性？其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么？答：（1）涂片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽(yáng)性；

（2）脫色，此環(huán)節(jié)最關(guān)鍵。脫色不足，陰性菌被誤染成陽(yáng)性菌；脫色過度，陽(yáng)性菌被誤染成陰性菌。

（3）菌齡也影響染色結(jié)果。如陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)或已死亡及部分菌自行溶解了，會(huì)出現(xiàn)陰性反應(yīng)。

14.酵母的死細(xì)胞和活細(xì)胞可通過哪些方式鑒別？

15.霉菌的直接制片觀測(cè)法常用什么染色劑？此染液的優(yōu)點(diǎn)是什么？16.細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類微生物的菌落各有何特點(diǎn)？17.為什么霉菌菌落的中央與邊遠(yuǎn)、正面與反面在外形、顏色、構(gòu)造等方面常有明顯的區(qū)別？放線菌、細(xì)菌和酵母菌呢？（理解）

18.測(cè)量微生物大小的工具是什么？包括哪兩部分？功能各是什么？

19.如何校正目鏡測(cè)微尺刻度？計(jì)算公式？更換不同放大倍數(shù)的目鏡活物鏡時(shí)，是否需要重新校正？

20.培養(yǎng)基按化學(xué)成分、物理狀態(tài)、用途劃分可分為哪幾種類型？

21.試驗(yàn)常用的凝固劑是哪一種？固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基加凝固劑瓊脂的量為多少？瓊脂在什么溫度下溶化？什么溫度下凝固？

22.配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)遵循哪些原則？配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟是什么？配制培養(yǎng)基時(shí)不可用銅鍋或鐵鍋，原因是什么？調(diào)pH一般用什么試劑調(diào)？配制pH低的瓊脂培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)怎樣配制？

23.培養(yǎng)基分裝時(shí)，液體分裝高度以試管的多少為宜，三角瓶的多少為宜？固體分裝高度以試管的多少為宜，三角瓶的多少為宜？半固體分裝高度以試管的多少為宜？24.培養(yǎng)基滅菌時(shí)外用牛皮紙包扎的目的是什么？25.擺斜面的正確方法是什么？

26.棉塞的作用是什么？正確的棉塞要求是什么？棉塞的長(zhǎng)度多少在管口外，多少在管內(nèi)為宜？作棉塞的棉花要求是什么？能否用脫脂棉？為什么？

27.培養(yǎng)基配好后，為什么必需馬上滅菌？假使來不及滅菌應(yīng)如何處理？

28.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、高氏Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基、馬鈴薯（PDA）培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基或豆芽汁培養(yǎng)基分別培養(yǎng)什么微生物？

29.什么是選擇性培養(yǎng)基？試分析教材P98酵母菌富集培養(yǎng)基和Ashby無氮培養(yǎng)基的選擇原理。

30.什么是鑒別性培養(yǎng)基？試以EMB培養(yǎng)基為例，分析其鑒別作用的原理。

31.蛋白胨稱取時(shí)應(yīng)怎樣？為什么？溶解可溶性淀粉的正確方法是什么？高氏Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中0.001tSO47H2O配制的正確方法是什么？

32.配制合成培養(yǎng)基加微量元素時(shí)最好用什么方法參與？自然培養(yǎng)基為什么不需要另加微量元素？

33.馬丁氏培養(yǎng)基中孟加拉紅、鏈霉素的作用是什么？鏈霉素應(yīng)如何參與？

34.采用什么方法能分開到能分解并利用苯作為碳源和能源物質(zhì)的細(xì)菌純培養(yǎng)？（以苯作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基）

答：①?gòu)谋胶枯^高的環(huán)境中采集土樣或水樣；②配制培養(yǎng)基，倒平板，一般僅以苯作為唯一

碳源（A），另一種不含任何碳源作為對(duì)照（B）；③將樣品適當(dāng)稀釋（十倍稀釋法），涂布A平板；④將平板置于溫度適當(dāng)?shù)臈l件下（37℃）培養(yǎng)，觀測(cè)是否有菌落產(chǎn)生；⑤將A平板上的菌落編號(hào)并分別轉(zhuǎn)接至B平板，置于一致溫度條件下培養(yǎng)（在B平板上生長(zhǎng)的菌落可利用空氣中的CO2的自養(yǎng)型微生物）；⑥挑取在A平板上生長(zhǎng)而不在B平板上生長(zhǎng)的菌落，在一個(gè)新的A平板上劃線、培養(yǎng)，獲得單菌落，初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物；⑦將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵試驗(yàn)，利用相應(yīng)的化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解苯的狀況。

35.什么是滅菌？消毒？列表比較高溫滅菌或消毒的各大方法的溫度、時(shí)間、適用對(duì)象？36.干熱滅菌原理是什么？為什么干熱滅菌比濕熱滅菌所需要的溫度高，時(shí)間長(zhǎng)？37.在干熱滅菌過程中應(yīng)注意哪些問題,為什么？

38.高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵技術(shù)是什么？（壓力上升之前需將鍋內(nèi)冷空氣排盡）

39.高壓蒸汽滅菌開始之前，為什么要將鍋內(nèi)的冷空氣排盡？滅菌完畢后，為什么待壓力降低“0〞時(shí)才能開啟排氣閥，開蓋取物？免？

40.對(duì)含糖（如葡萄糖或乳糖等）培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)，應(yīng)采用大多壓力、多長(zhǎng)時(shí)間滅菌為宜？

41.對(duì)血清、噬菌體濃縮液、氨基酸溶液、維生素溶液、抗生素溶液能否進(jìn)行高壓蒸汽滅菌？應(yīng)采用何種方法除菌為宜？

42.紫外線滅菌的原理及適用對(duì)象是什么？

43.過濾除菌法的適用對(duì)象是什么？缺點(diǎn)是什么？

44.微生物的平板分開純化技術(shù)是哪位科學(xué)家發(fā)明的？德國(guó)人科赫

45.微生物分開純化常用的方法有哪些？劃線法、單細(xì)胞挑取法、稀釋平板法、選擇培養(yǎng)基法46.假使要從自然界中篩選能產(chǎn)高溫蛋白酶的菌株，你將如何完成？寫出簡(jiǎn)明的試驗(yàn)方案。47.假使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基分開一種對(duì)青霉素具有抗性的細(xì)菌，你認(rèn)為該如何做？

48.稀釋分開時(shí)，為什么要將已溶化的瓊脂培養(yǎng)基冷卻到45～50左右才能傾入到裝有菌液的皿內(nèi)？

49.在恒溫箱中培養(yǎng)微生物時(shí)為何培養(yǎng)皿均需倒置？（①防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā)②防止冷凝水的

滾動(dòng)造成平板表面的“交織感染〞，影響單個(gè)菌落的形成③防止外物掉在培養(yǎng)基上.）

50.請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)分開篩選以下微生物菌種的試驗(yàn)方案（提醒：包括采樣、稀釋液制備、培養(yǎng)基名

稱、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、分開純化方法等）（1）土壤中鏈霉素產(chǎn)生菌的分開、純化

（2）啤酒泥或酒曲發(fā)酵窖泥中酵母菌的分開、純化（3）甜酒藥曲或釀酒種曲中霉菌的分開、純化51.常用菌種保藏方法有哪些？有何優(yōu)缺點(diǎn)？52.ATCC采用菌種保藏的方法是什么？53.常用于測(cè)定微生物數(shù)量的方法有哪些？

54.什么是顯微直接計(jì)數(shù)法？工具是什么？此方法的優(yōu)缺點(diǎn)？缺點(diǎn)怎樣戰(zhàn)勝？55.利用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，如何計(jì)數(shù)？計(jì)算公式？56.簡(jiǎn)述測(cè)定化學(xué)消毒劑的殺（抑）菌作用的濾紙片法。

57.某公司推出一種新型飲料，并聲稱是100％的純自然產(chǎn)品，不含防腐劑，利用你所把握的微生物學(xué)知識(shí)，試設(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單試驗(yàn)來初步判斷此飲料是否含防腐劑。

58.根據(jù)深層瓊脂培養(yǎng)的特征來判斷好氧菌、微好氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌、耐氧厭氧菌。P103

59.什么是IMViC試驗(yàn)？硫化氫試驗(yàn)？作用是什么？各試驗(yàn)的原理是什么？結(jié)果是什么？60.我國(guó)衛(wèi)生部門規(guī)定的飲用水標(biāo)準(zhǔn)是什么？1mL自來水中的細(xì)菌總數(shù)不可超過100個(gè)（37℃，

培養(yǎng)24h），而1000mL自來水中的大腸菌群數(shù)則不能超過3個(gè)（37℃，培養(yǎng)24h）。

61.水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群值各反映了什么？

62.水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定的方法是什么？（平板菌落計(jì)數(shù)法）自來水、湖水采集的正確方法是什么？

63.水中大腸菌群的檢測(cè)方法多管發(fā)酵法的基本原理？包括哪3個(gè)部分？陽(yáng)性和陰性判斷的依據(jù)是什么？德漢氏小管起什么作用？溴甲酚紫起什么作用？

64.EMB培養(yǎng)基的鑒別大腸菌群原理是什么？EMB培養(yǎng)基含哪幾種主要成分？在檢查大腸菌群時(shí)，各起什么作用？（乳糖是碳源起選擇作用，大腸菌群能利用，而好多其他細(xì)菌不能利用；蛋白胨是氮源；NaCl是無機(jī)鹽；伊紅和美藍(lán)作為指示劑）大腸菌群在EMB培養(yǎng)基上的典型菌落特征是什么？

65.包括腸桿菌科的埃希氏菌屬（Escherichia）、腸桿菌屬（Enterobacter）、檸檬酸細(xì)菌屬（Citrobacter）和克雷伯氏屬（Klebsiella）。66.影響微生物生長(zhǎng)的主要因素有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、水的活度、溫度、_pH__和氧等。67.細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌培養(yǎng)的溫度一般為多少？培養(yǎng)時(shí)間？

68.名詞解釋：無菌技術(shù)/操作、分辯率、菌落、菌苔、簡(jiǎn)單染色法、革蘭氏染色法、培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、消毒、滅菌、純培養(yǎng)、石炭酸系