生物檢定金葉

生物檢定金葉第1頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

主要內(nèi)容第一節(jié)概述第二節(jié)生物檢定質(zhì)反應(yīng)的直接測定法第四節(jié)生物檢定法的應(yīng)用第三節(jié)生物檢定量反應(yīng)的平行線測定法第2頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一第一節(jié)概述五.生物檢定的常用方法二.生物檢定的應(yīng)用范圍三.標(biāo)準(zhǔn)品四.生物檢定中的基本概念一.生物檢定法簡介六.生物檢定的步驟七.生物統(tǒng)計(jì)知識第3頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

一

生物檢定法簡介1.什么是生物檢定法？

待檢藥物被測物的相對效力（效價或毒性）有效性安全性生物體標(biāo)準(zhǔn)品活性反應(yīng)動物組織細(xì)胞微生物利用藥物對生物體的作用以測定其效價或生物活性的一種方法第4頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一相對快速、重復(fù)性好、不能反映藥品的生物特異性和有效性反映藥品的生物特異性和有效性

繁瑣、誤差大2.生物檢定采用的實(shí)驗(yàn)方法

定量、半定量、定性

藥品的生物效價、安全檢查、鑒別

體外測定

(invitro)離體器官、組織,微生物,酶和細(xì)胞

體內(nèi)測定

(invivo)

整體動物

類別第5頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一3.生物檢定法特點(diǎn)

以藥理學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)(定量藥理學(xué)—劑量和反應(yīng)的函數(shù)關(guān)系)以標(biāo)準(zhǔn)品對比校驗(yàn)為手段（在產(chǎn)生特定反應(yīng)情況下，以供試品與標(biāo)準(zhǔn)品劑量比值推算供試品效價）以生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法為結(jié)果判斷的依據(jù)真正的活性測定，與理化分析、蛋白結(jié)合試驗(yàn)不同；但生物差異性大（實(shí)驗(yàn)誤差大）、專業(yè)性強(qiáng)、實(shí)驗(yàn)周期長，人力、物力消耗大，計(jì)算較繁。第6頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一控制生物差異性的方法與措施:生物來源、飼養(yǎng)或培養(yǎng)條件必須均一。采用特定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),對影響實(shí)驗(yàn)誤差的條件和因子進(jìn)行限制,減少實(shí)驗(yàn)誤差。用生物統(tǒng)計(jì)方法提高實(shí)驗(yàn)的可靠性。第7頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一應(yīng)用范圍342藥物效價測定1微量生理活性物質(zhì)測定某些有害雜質(zhì)限度檢查中藥質(zhì)量控制二生物檢定法的應(yīng)用范圍第8頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一多組分生化藥物制劑、激素類藥物、生物制品:

由結(jié)構(gòu)類似、而生物活性不同、比例不定的多種成份組成，或其組分不明確、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，難用理化方法反映其生物活性；雖可用理化方法測定含量，但含量不能完全反映效價（生物檢定是反映產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo)，具有專屬性。當(dāng)前英國、美國及中國藥典都有收載）藥物效價測定第9頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一肝素天青A顯色比色法測定

×（但變性的肝素同時顯色，不能反應(yīng)肝素活性）所以:肝素抗凝血活性√第10頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一生化藥物肝素、胰島素、縮宮素、絨促性素、硫酸魚精蛋白、精蛋白鋅胰島素、卵泡刺激素、黃體生成素、降鈣素、生長激素、升壓素等21個品種（約占我國生化藥的10%）抗生素生物制品

菌苗、疫苗、抗毒素、類毒素等藥典生物藥物效價測定品種:第11頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一應(yīng)用范圍342藥物效價測定1微量生理活性物質(zhì)測定某些有害雜質(zhì)限度檢查中藥質(zhì)量控制二生物檢定法的應(yīng)用范圍第12頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

無菌、微生物限度、熱原、細(xì)菌內(nèi)毒素、異常毒性、降壓物質(zhì)、過敏等

藥典幾百種有害雜質(zhì)限度檢查第13頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一應(yīng)用范圍342藥物效價測定1微量生理活性物質(zhì)測定某些有害雜質(zhì)限度檢查中藥質(zhì)量控制二生物檢定法的應(yīng)用范圍第14頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

一些神經(jīng)介質(zhì)，激素等微量生理活性物質(zhì)，由于其很強(qiáng)的生理活性，在體內(nèi)的濃度很低，加上體液中各種物質(zhì)的干擾，很難用理化方法測定。

而不少活性物質(zhì)的生物測定法由于靈敏度高、專一性強(qiáng)，對供試品稍作處理即可直接測定。

如乙酰膽堿，5-羥色胺等活性物質(zhì)的測定。微量生理活性物質(zhì)測定第15頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一應(yīng)用范圍342藥物效價測定1微量生理活性物質(zhì)測定某些有害雜質(zhì)限度檢查中藥質(zhì)量控制二生物檢定法的應(yīng)用范圍第16頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一中藥成份復(fù)雜，大部分中藥的有效成份尚未搞清，難以用理化方法加以控制，但可用一些以其療效為基礎(chǔ)的生物測定方法來控制其質(zhì)量。中藥質(zhì)量控制第17頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一三標(biāo)準(zhǔn)品(S)與供試品(T)及其表示標(biāo)準(zhǔn)品（S）：系指用于生物檢定中效價測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以效價單位(U)表示。

PS表示S的效價國家標(biāo)準(zhǔn)品：系指用國際標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定的用于定量測定某一制品效價或毒性的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其生物活性以國際單位（IU）或以單位（U）表示。

第18頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

供試品（T）

供試品(T)是供檢定其效價的樣品,它的活性成分應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品基本相同。

AT是T的標(biāo)示量或估計(jì)效價

PT是經(jīng)檢定的T的效價,稱“測得效價”第19頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

效價是表達(dá)藥物效力強(qiáng)弱或活性物質(zhì)含量的一種公認(rèn)的劑量單位。效價單位（U）是衡量生物藥物有效成分效力的具體尺度。效價:用每毫升或每毫克中含有某種生物藥物的效價單位數(shù)表示藥物效力或濃度單位U/mg，U/mL

例如:

青霉素鈉的效價為1670U/mg

慶大霉素的效價為590U/mg

洋地黃的效價為10U/mL

效價單位(效應(yīng)濃度單位)第20頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一四.效價檢定中的基本概念（一）生物反應(yīng)（生物檢定的基礎(chǔ)）（二）劑量與反應(yīng)的關(guān)系（三）等反應(yīng)對比檢定第21頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一（一）生物反應(yīng)（生物檢定的基礎(chǔ)）

藥物

生物學(xué)定量法

胰島素

小鼠血糖降低法小鼠驚厥法

肝素

家兔血凝時間法

抗生物

微生物生長抑制法

生物制品

動物保護(hù)力活菌數(shù)和活病毒滴度

生長激素

去垂體大白鼠體重法第22頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一（二）劑量與反應(yīng)的關(guān)系生物反應(yīng)類型質(zhì)反應(yīng)：給藥后,觀察某一反應(yīng)的某一程度出現(xiàn)與否。如是否死亡、是否驚厥，是質(zhì)的變化，稱質(zhì)反應(yīng)。量反應(yīng)：藥物對生物體所引起的反應(yīng)隨著藥物劑量的增加產(chǎn)生的量變可以測量者,稱量反應(yīng)。如血壓、血凝時間、血糖等。第23頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一劑量與反應(yīng)的關(guān)系某降壓藥：劑量降壓作用

1μg15mmHg2μg25mmHg3μg30mmHg劑量與反應(yīng)間一般呈曲線關(guān)系第24頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

劑量與反應(yīng)關(guān)系的直線化劑量與反應(yīng)間一般呈曲線關(guān)系將劑量取對數(shù)(lgd)后可與反應(yīng)(y)成直線關(guān)系生物檢定中的劑量常用對數(shù)表示第25頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

將藥物的供試品（T）和已知效價的標(biāo)準(zhǔn)品（S）對生物體進(jìn)行同時對比，以對T的效價（或毒力）進(jìn)行檢定的方法。屬于對比檢定。

（三）等反應(yīng)對比檢定

（相對效力的計(jì)算）

S—dS

（標(biāo)準(zhǔn)品劑量）；PS

（標(biāo)準(zhǔn)品效價）

T—dT

（供試品劑量）；PT

（供試品效價）

常以產(chǎn)生等反應(yīng)時的效價比值R得出R=PT/PS第26頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

對于量反應(yīng)：

S和T各自的對數(shù)劑量和反應(yīng)應(yīng)呈直線關(guān)系

S和T的兩條直線應(yīng)平行

等反應(yīng)對比檢定原理

lgdS=XSlgdT=XTM=lgdS-lgdT=XS-XTS與T等反應(yīng)時所對應(yīng)劑量分別為：第27頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一等反應(yīng)時:S和T中所含效價應(yīng)相等，即：

dT·PT=dS·PS（S和T中所含效價單位數(shù)）令：

R=PT/PS=dS/dT

（1）

∴PT=R·PS

（2）

求出R就可以求出PT

（R為等反應(yīng)效價的比值）第28頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一（1）式兩邊取對數(shù)，lgR=lgPT/PS=lg(dS/dT)=lgdS-lgdT

令lgR=M,lgd=X,則對數(shù)效價比值：

lgR=M=lgdS-lgdT=XS-XT

R=lg-1M=lg-1

(XS-XT)

PT=R·PS=lg-1M·PS實(shí)際工作中S的劑量常按已知效價計(jì)算，而T的劑量按標(biāo)示效價或估計(jì)效價（AT）來安排:

PT=R·AT

R=PT/PS=dS/dT

（1）第29頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一五生物檢定的常用方法(一)質(zhì)反應(yīng)的直接測定(二)量反應(yīng)平行線測定法第30頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一六生物檢定的步驟實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的選擇反應(yīng)指標(biāo)的測定實(shí)驗(yàn)可靠性檢驗(yàn)(方差分析)相對效力的計(jì)算及可信限的估計(jì)第31頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一七.生物統(tǒng)計(jì)知識

（實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及方差分析）（四）實(shí)驗(yàn)可靠性檢驗(yàn)（方差分析)（一）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的（二）試驗(yàn)設(shè)計(jì)重要三原則（三）生物檢定常用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第32頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的最少的代價獲得最多的信息可有效排除混雜變異對結(jié)果的影響便于采用簡化計(jì)算

(采用定型對稱設(shè)計(jì)有利于有效性檢驗(yàn)的簡化)采用特殊實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

(提高精度和靈敏度)第33頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一標(biāo)準(zhǔn)曲線法與量反應(yīng)平行線4.4法測定

LMWH產(chǎn)品抗FXa效價比較標(biāo)準(zhǔn)曲線法結(jié)果誤差大,重現(xiàn)性差,波動大,缺乏可比性；當(dāng)采用量反應(yīng)平行線原理的4·4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),結(jié)合生物統(tǒng)計(jì),其結(jié)果較平穩(wěn),誤差小,重現(xiàn)性好。第34頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一2.試驗(yàn)設(shè)計(jì)重要三原則重復(fù)隨機(jī)對照

如：試驗(yàn)?zāi)撤N降壓藥物的降壓作用：將20只雄性大鼠隨機(jī)分成兩組，每組10只，一組作為空白對照，一組給予待測藥物。第35頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)3.生物檢定常用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第36頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

(1)完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)動物號12345678910隨機(jī)號1203874596組別甲乙乙甲乙甲乙甲甲乙

將10個觀察對象隨機(jī)分為兩組：例：洋地黃效價測定——鴿最小致死量(MLD)法單號為甲組，雙號為乙組第37頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一(2)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)區(qū)組處理ABCD一1432二5687三1091211四16141315五19181720六23222124七28272625八30312932將分成8各區(qū)組（如來自8個窩的動物）的32個受試者隨機(jī)分配到A,B,C,D四個處理組各區(qū)組中的受試者被隨機(jī)分配接受的不同處理例：催產(chǎn)素生物檢定法——大鼠子宮法第38頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一動物編號1234第一次STST第二次TSTS(3)交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)S為標(biāo)準(zhǔn)品組，T為供試品組平衡實(shí)驗(yàn)次序的影響。把不同因素不同水平均攤于受試對象，去除試驗(yàn)時間次序和試驗(yàn)次序的影響例:小鼠血糖法測定胰島素效價處理在同一受試對象上重復(fù)觀察，由于處理是在同體上比較，從而避免了個體差異。第39頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一(4)方差分析(F檢驗(yàn))

①

方差分析的概念

用于推斷多個總體均數(shù)有無差異(差異顯著性)的檢驗(yàn)方法如：觀察四種降壓藥對大鼠的降壓效果或觀察四個劑量的降壓藥對大鼠的降壓效果第40頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一②方差S2：是測量值在其總體均值周圍分布狀況的一種量度，方差表征隨機(jī)變量分布的離散程度。方差S2==f

=n-1自由度離均差∑(yi-)2fSSf方差S2==f

=n-1fSSf方差S2==差方和SSf

=n-1fSSf方差S2==f

=n-1fSSf方差S2==f

=n-1fSSf方差S2==f

=n-1f

SSf第41頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一組間變異總變異組內(nèi)變異組間變異（處理效應(yīng)）用組間方差表示；組內(nèi)變異（隨機(jī)誤差）用組內(nèi)方差表示。③方差分析原理

S2總=S2處理

+S2誤差第42頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

s2總=s2處理

+s2誤差

④

方差和F值計(jì)算方法

SS總=SS處理

+SS誤差

f總=f處理

+f誤差

SS誤差=SS總－SS處理

f誤差=f總－

f處理

s2總=SS總/f總；s2處理

=SS處理/

f處理

s2誤差=SS誤差/f誤差第43頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一誤差項(xiàng)S2F值=處理效應(yīng)方差S2

SS處理f

SS誤差f=方差分析（F檢驗(yàn)）:

以處理組方差(S2)與誤差項(xiàng)方差（S2（誤差））的比值（稱F值）來確定處理效應(yīng)差異的顯著性程度。

查F值表，當(dāng)F計(jì)算值大于P＝0.05或P＝0.01的查表值時，則P＜0.05或P＜0.01，即為在此概率水平下該項(xiàng)變異有顯著意義。第44頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一⑤方差分析(F檢驗(yàn))的步驟建立檢驗(yàn)假設(shè)：無效假設(shè)把處理間的方差μ12與誤差的方差假設(shè)相等即：H0：μ12=μ22

；備擇假設(shè)HA：μ12≠μ22計(jì)算各處理組的方差及組內(nèi)的方差，求出相應(yīng)的F值。計(jì)算所得的F值與F表中按一定自由度查得的F0.05或F0.01進(jìn)行比較若處理組F＞F0.05（F0.01）則拒絕H0，接受HA，認(rèn)為該處理所引起的差異有顯著（極顯著）意義。若處理組F＜F0.05則接受H0，認(rèn)為該處理所引起的差異無顯著意義。第45頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

主要內(nèi)容第一節(jié)概述第二節(jié)生物檢定質(zhì)反應(yīng)的直接測定法第四節(jié)生物檢定法的應(yīng)用第三節(jié)生物檢定量反應(yīng)的平行線測定法第46頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一第二節(jié)質(zhì)反應(yīng)的直接測定一.測定程序

將實(shí)驗(yàn)對象隨機(jī)分成兩組，S組與T組，分別測定兩組的MED（最小效量）——y值計(jì)算出M、R和PT

估計(jì)實(shí)驗(yàn)誤差（用可信限（FL）表示）在較短時間內(nèi)能準(zhǔn)確測得各個動物對S和T的最小效量的方法。以產(chǎn)生質(zhì)反應(yīng)的最低有效量(MED)為反應(yīng)指標(biāo)（y）第47頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

按公式計(jì)算出M，再求算R和PT：

R=lg-1MPT=R·AT二.M和PT的計(jì)算R=

PT/PS=dS/dT第48頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一誤差項(xiàng)方差S2的計(jì)算三.實(shí)驗(yàn)誤差的估計(jì)（用可信限（FL）表示）步驟：標(biāo)準(zhǔn)誤SM的計(jì)算可信限（FL）的計(jì)算第49頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一1.誤差項(xiàng)方差S2的計(jì)算S2=(∑XS2－)+(∑XT2－）(∑XS)2nS(∑XT)2nTnS+nT-2nS、nT為標(biāo)準(zhǔn)品和供試品的反應(yīng)個數(shù)第50頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一2.標(biāo)準(zhǔn)誤SM的計(jì)算

是指平均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差,即各均數(shù)之間差異的大小,用SM表示,SM越小差異也越小。S

2為誤差項(xiàng)方差nS、nT分別為標(biāo)準(zhǔn)品和供試品的反應(yīng)個數(shù)用SM對總體均數(shù)進(jìn)行評估，計(jì)算可信限。第51頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

標(biāo)志檢定(R和PT)結(jié)果的精確度

R的FL=lg-1(M±t·SM)PT的FL=AT·lg-1(M±t·SM)

t(f,0.05)：根據(jù)f和概率水平查表獲得R或PT高限-R或PT低限2R或2PT3.可信限（FL）的計(jì)算R或PT的FL%=×100%除藥典另有規(guī)定外，可信限率不得大于5%。第52頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一4.示例:質(zhì)反應(yīng)直接測定法

洋地黃效價的測定——鴿最小致死量（MLD）法本法系比較洋地黃標(biāo)準(zhǔn)品(S)與供試品(T)對鴿的最小致死量(MLD，U/kg)，以測定供試品的效價。

第53頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一實(shí)驗(yàn)方法：

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液

(S)0.9％氯化鈉1→30稀釋(使MLD在25～34ml)供試品溶液和稀釋液的配制供試品(T)按AT配制和稀釋(AT=10U/g)使鴿與S接近第54頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一檢定法按直接測定法計(jì)算效價(PT)及實(shí)驗(yàn)誤差FL(％)本法的可信限率FL(％)不得大于15％。

鴿(250～400g)標(biāo)準(zhǔn)品組

(6只)供試品組

(6只)注射S至死亡MLDS(U／Kg)MLDT

(U／Kg)注射T至死亡第55頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一STMLDS（dS）XSXS2MLDT(dT）XTXT2U/kg體重Lg(dS×10)U/kg體重Lg(dS×10)1.151.0611.1261.111.0451.0921.011.0041.0081.231.0901.1881.101.0411.0841.061.0251.0511.141.0571.1171.311.1171.2481.061.0251.0510.940.9730.9470.950.9780.9561.361.1341.286∑XS6.166∑XT6.384XS1.028XT1.064

測定結(jié)果(∑X)2

38.019

40.755

∑X26.3426.811第56頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

效價的計(jì)算

M==1.028-1.064=-0.036

R=lg-1M=antilgM=antilg(-0.036)=0.9204

PT=R·AT=0.9204×10U/g=0.9204U/g已知：XS=1.028；XT=1.064；AT=10U/g第57頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

誤差項(xiàng)S2及可信限計(jì)算S2=(∑XS2－)+(∑XT2－）(∑XS)2nS(∑XT)2nTnS+nT-2=0.002373已知：

∑XS2=6.342

∑XT2=6.811

(∑XS)2=38.019

(∑XT)2=40.755nS=nT=6第58頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一＝0.02812

R的FL=lg-1(M±t·SM)

查t值表t(10)0.05=2.23（P=0.95）lg-1(M+t·SM)是R的高限;lg-1(M-t·SM)是R的低限

PT的FL=AT·

lg-1

(M±t·SM)

AT·lg-1(M＋t·SM)是PT

的高限；

AT·lg-1(M－t·SM)是PT的低限

PT的FL=7.97～10.6(U/g)第59頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

PT的FL%=10.6-7.972×9.20×100%=14.3%R(或PT)的FL%=R高限(或PT高限)-R低限(或PT低限)2R（2PT）×100%結(jié)果PT的FL%＜15％，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。第60頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一直接測定法的優(yōu)點(diǎn)：

可使用較少量的動物，直接測得S和T的等反應(yīng)劑量直接測定法常用的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

隨機(jī)設(shè)計(jì)配對交叉設(shè)計(jì)小結(jié)第61頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

主要內(nèi)容第一節(jié)概述第二節(jié)生物檢定質(zhì)反應(yīng)的直接測定法第四節(jié)生物檢定法的應(yīng)用第三節(jié)生物檢定量反應(yīng)的平行線測定法第62頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一一.量反應(yīng)的平行線關(guān)系第三節(jié)量反應(yīng)平行線測定法對于量反應(yīng)：S和T各自的對數(shù)劑量和反應(yīng)應(yīng)呈直線關(guān)系S和T的兩條直線應(yīng)平行藥物對生物體所引起的反應(yīng)隨藥物劑量的增加產(chǎn)生的量變可以測量者，稱量反應(yīng)第63頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一

∵R=dS/dT；lgR=lgdS-lgdT=XS-XT=M∴R=lg-1M=lg-1（XS-XT）

當(dāng)供試品按標(biāo)示量或估計(jì)效價進(jìn)行試驗(yàn)時:

PT=AT·R

或

PT=AT·lg-1M量反應(yīng)的測定方法:常用(k.k)法，如(2.2法)和（3.3法）?；蚍Q4點(diǎn)法（S和T各用2個劑量組）和6點(diǎn)法（S和T各用3個劑量組）。二.測定原理

等反應(yīng)時(yS=yT):dT·PT=dS·PS

則：

R=PT/PS=dS/dT

令：M=

XS-XT第64頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一三.量反應(yīng)平行線法常用的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)設(shè)計(jì)隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)交叉設(shè)計(jì)

第65頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一四.測定步驟按定型實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行指標(biāo)測定；將測得反應(yīng)值(y)按劑量分組列成方陣表;方差計(jì)算和可靠性檢驗(yàn)（采用定型公式的簡算法）；進(jìn)行效價及可信限計(jì)算（采用定型公式的簡算法）。計(jì)算軟件：中國藥典生物檢定統(tǒng)計(jì)程序

BS2000ForWin-dows9X第66頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一五.實(shí)例-縮宮素效價測定S為縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品:

dS1:0.0068udS1:0.009u

T為縮宮素注射液

標(biāo)示量AT:10u/mldT1:0.008udT2:0.0106ur=1:0.75I=lgr=lg(1/0.75)=0.125

反應(yīng)(y):子宮收縮高度(mm)(隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)(2.2)法)①實(shí)驗(yàn)安排第67頁，共77頁，2023年，2月20日，星期一②給藥順序

將標(biāo)準(zhǔn)品和供試品高低2個劑量組S1，S2，T1，T2

分別用ABCD表示，作出5組收縮數(shù)據(jù)（5個區(qū)組）。

給藥順序：

ABCDBCDACDABDABCCBDA第68頁，共77頁，202