醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)分子診斷學(xué)檢驗試卷含答案

醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)分子診斷學(xué)檢驗試卷注意事項：1、出卷人： 本試卷共2、本試卷共4頁，滿分100分，考試時間為60分鐘。3、答題時請使用藍(lán)、黑鋼筆或圓珠筆。項目-一一-二二三四五總分得分一、名詞解釋：（3x6=18分）1質(zhì)粒2、同工酶3、基因4、基因組5、端粒6、熒光定量PCR二、 填空題： （1x25=25分）1、 核酸的最大吸收峰波長在 nm,蛋白質(zhì)的最大吸收峰在 nm,可以用紫外分光光度題答要不內(nèi)線封密發(fā)通過A260與A280的比值來判定有無污染；純的DNA的A260/A280比值為 。題答要不內(nèi)線封密2、 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)是常用的用于擴增目的DNA片段的技術(shù)，該項技術(shù)的核心部分是不斷對三個步驟的循環(huán)來實現(xiàn)對目的DNA擴增的，該三個步驟依次為 、 和 。3、 科學(xué)家感興趣的外源基因又稱為 ，其來源有幾種途徑：化學(xué)合成、酶促合成cDNA、制備的基因組DNA及 技術(shù)。4、 核酸的基本單位是 ，它們之間是通過 連接而成。5、核酸分離純化的原則包括保證一級結(jié)構(gòu)的完整性和 ，為了保證核酸的完整性，應(yīng)該盡量避免有害的物理、化學(xué)和 因素。6、 質(zhì)粒DNA分子一般有3種構(gòu)型，分別為 、 和 。7、影響電泳分離結(jié)果的主要因素包括 、 和分子形狀；分子量和分子形狀相同的粒子，帶電量越 ，泳動速度越慢。8、 根據(jù)采用的載體性質(zhì)不同，將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法有 、 和轉(zhuǎn)染。9、 引物設(shè)計的原則是在 和 間取得平衡。三、 選擇題（2x15=30分）1、 基因是（）A具有特定遺傳效應(yīng)的DNA片段B一個單倍體細(xì)胞中的染色體數(shù)C遺傳單位 D生物體的細(xì)胞內(nèi)基因的分子總量2、 抗藥性質(zhì)粒也稱為（）AF質(zhì)粒BR質(zhì)粒CCol質(zhì)粒 D接合型質(zhì)粒 E自傳遞型質(zhì)粒3、 染色體的基本單位是（）ADNA BRNAC核小體D線粒體E葉綠體4、 大多數(shù)質(zhì)粒在自然狀態(tài)下是一種（）A線性雙鏈DNA B閉合雙鏈DNAC線性單鏈DNA D線性單鏈RNA5、 EB作為核酸分子電泳的指示劑，其原理是（）A是一種轉(zhuǎn)性染料 B在紫外線下發(fā)射熒光C能特異性的結(jié)合核酸分子D是一種可視物質(zhì) E能插入核酸分子之間并能在紫外光下產(chǎn)生熒光

6、ACE76、ACE7、限制性核酸內(nèi)切酶酶切DNA后產(chǎn)生（5'-磷酸基團(tuán)和3'-羥基基團(tuán)的末端5'-磷酸基團(tuán)和3'-磷酸基團(tuán)的末端以上都不是可識別并切割特異DNA序列的酶是（B3'-磷酸基團(tuán)和5'-羥基基團(tuán)的末端D5'-羥基基團(tuán)和3'-羥基基團(tuán)的末端）B限制性核酸內(nèi)切酶EDNA酶（DNase）8、在已知序列的情況下獲得目的DNA最常用的是A限制性核酸外切酶D非限制性核酸內(nèi)切酶C非限制性核酸外切酶A化學(xué)合成法B篩選基因組文庫C篩選cDNA文庫D聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)EDNA合成儀合成9、重組DNA技術(shù)領(lǐng)域常用的質(zhì)粒DNA是（）A細(xì)菌染色體DNA的一部分B細(xì)菌染色體外的獨立遺傳單位C病毒基因組DNA的一部分D真核細(xì)胞染色體DNA的一部分E真核細(xì)胞染色體外的獨立遺傳單位10、 有關(guān)理想質(zhì)粒載體的特點，正確的是（）A為線性單鏈DNAB含有多種限制性酶的單一位點C含有同一個限制酶的多個切點D復(fù)制收到宿主控制E不含耐藥基因11、 基因工程的操作程序可簡單的概括為（）A目的基因和載體的分離、提純與鑒定B限制酶的應(yīng)用C將載體和目的基因結(jié)合成重組體D將重組體導(dǎo)入宿主細(xì)胞并篩選E分、切、接、轉(zhuǎn)、篩12、 實驗室內(nèi)常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是（）ATaq酶 BT4DNA連接酶CDNA聚合酶IDDNA聚合酶IIEDNA聚合酶III13、 PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定因素為（）A模板B引物CdNTPD鎂離子EpH值14、 在PCR反應(yīng)中，下列哪項可以引起非靶序列的擴增（）ATaqDNA聚合酶加量過多 B引物量過多CAB都可D緩沖溶液中鎂離子含量過高 EABD都可15、 PCR延伸選擇的溫度是（）A72°CB55°CC60°CD94°CE80°C四、問答題（27分）1、 試述基因工程的基本操作步驟？（9分）2、 PCR過程中引物設(shè)計的基本原則有哪些？（9分）3、 簡述核酸分子雜交的基本原理？（9分）醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)分子診斷學(xué)檢驗試卷注意事項:出卷人：本試卷共2、注意事項:出卷人：本試卷共2、本試卷共4頁，滿分100分，考試時間為60分鐘。題答要不內(nèi)線封密一、名詞解釋：（3x6=18分）1題答要不內(nèi)線封密一、名詞解釋：（3x6=18分）1、質(zhì)粒2、同工酶3、基因4、基因組項目-一一-二二三四五總分得分得分評卷人5、端粒6、熒光定量PCR得分評卷人二、填空題：（1x25=25分）1、 , 2、 得分評卷人得分評卷人三、選擇題（2x15=30分）123456789101112131415得分評卷人四、問答題 （27分）答案不夠?qū)戅D(zhuǎn)到反面分子診斷學(xué)試卷答案一、名詞解釋：（3x6=18分）1、 質(zhì)粒：是指在細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA之外，能夠自主復(fù)制的DNA分子。2、 同工酶：催化的化學(xué)反應(yīng)相同，酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。3、 基因：是產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列4、 基因組：一個單倍體生物所含有的全部DNA。5、 端粒：以線性染色體的形式存在于真核基因組DNA末端的特殊結(jié)構(gòu)。6、 熒光定量PCR：通過熒光信號對PCR過程中的產(chǎn)物量進(jìn)行實時監(jiān)測，精確計算出PCR的初始模板量。二、 填空題：（1x25=25分）1、260,280，1.8。2、—變性―，_退火，延伸。3、—目的基因一，PCR。4、—核苷酸―,， 3'-5'磷酸二酯鍵 。5、盡量排除其他分子污染， 生物。6、閉環(huán)，開環(huán)， 線性。7、電荷，大小，大。8、轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)導(dǎo)。9、擴增特異性， 擴增效率。三、選擇題（2x15=30分）12345678910ABABEABDBB1112131415EBBCA四、問答題（27分）1、試述基因工程的基本操作步驟？（參考答案）狹義基因工程的基本五步:切、接、轉(zhuǎn)、增、檢。從供體中分離出基因組DNA，用限制性內(nèi)切酶分別將外源DNA和載體分子切開。接，用DNA連接酶含有外源基因的DNA片段接到載體分子上，構(gòu)成DNA重組分子轉(zhuǎn)，借助細(xì)胞轉(zhuǎn)化手段將DNA重組分子導(dǎo)入受體細(xì)胞中。增，短時間培養(yǎng)轉(zhuǎn)化細(xì)胞，以擴增DNA重組分子或使其整合到受體細(xì)胞的基因組中。e檢，篩選和鑒定經(jīng)轉(zhuǎn)化處理的細(xì)胞，獲得外源基因高效穩(wěn)定表達(dá)的基因工程菌或細(xì)胞。2、 PCR過程中引物設(shè)計的基本原則有哪些？（參考答案）（1） 引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp，但不應(yīng)大于38,因為過長會導(dǎo)致其延伸溫度大于74°C，不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng)。（2） G+C含量:應(yīng)在40%-60%之間。（3） 堿基分布的隨機性:應(yīng)避免連續(xù)出現(xiàn)4個以上的單一堿基。尤其是不應(yīng)在其3’端出現(xiàn)超過3個的連續(xù)G或C。（4引物自身:不能含有自身互補序列，否則會形成發(fā)夾樣二級結(jié)構(gòu)。（5）引物之間:兩個引物之間不應(yīng)有多于4個的互補或同源堿基，不然會形成引物二聚體，尤應(yīng)避免3’端的互補重疊。引物3’端最好選T,錯配的幾率與A相比大大的降低了。3、 簡述核酸