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文檔簡介

堿性磷酸酶Km值的測定底物濃度酶濃度pH溫度激活劑抑制劑※研究一種因素的影響時，其余各因素均恒定。影響酶促反應的因素底物濃度對反應速率影響在其他因素不變的情況下，底物濃度對反應速率的影響呈矩形雙曲線關系。[S]V

Km值①Km等于酶促反應速度為最大反應速度一半時的底物濃度。②意義：a)

Km是酶的特征性常數(shù)之一；b)

Km可近似表示酶對底物的親和力；c)

同一酶對于不同底物有不同的Km值。KmKm＝[S]2＝Km+[S]VmaxVmax[S]VmaxV[S]KmVmax/2雙倒數(shù)作圖法Vmax[S]Km+[S]V=（林－貝氏方程）+1/V=KmVmax1/Vmax1/[S]兩邊同取倒數(shù)Ｋm值與Ｖmax值的測定注意事項1底物和酶取樣準確2保溫時間準確

1234567加入酶的時間加入堿性溶液終止反應的時間9:00:009:00:309:01:309:02:009:02:309:03:009:01:009:15:009:15:309:16:009:16:309:17:009:17:309:18:00保證每個試管的反應時間為15分鐘注意事項1做如下表格2可電腦作圖3若人工作圖，在坐標軸上禁止出現(xiàn)分數(shù)(1/2,1/16)4實驗的最終目的是測得Km值，因此實驗報告最終必須得出結論：Km值等于多

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