臨床檢驗方法學(xué)評價

臨床檢驗方法學(xué)評價目前，臨床實驗室中所使用的檢驗方法，多為常規(guī)分析方法，一般使用商品試劑，基本上可以滿足臨床檢驗的要求。由于作為常規(guī)分析方法的商品試劑種類繁多，其檢驗結(jié)果的質(zhì)量也不相同，因此，臨床實驗室在建立新的檢驗方法時，應(yīng)對該方法的基本性能進行評價，以掌握方法的特征，判斷其能否滿足使用要求。在選擇方法并對其進行評價時，可主要考慮以下幾個方面：檢驗結(jié)果的可溯源性檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，是臨床醫(yī)生對疾病進行診斷和治療的重要依據(jù)。在臨床實驗室中如何確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確，是每個檢驗人員必須關(guān)心的問題。通常，在檢驗過程中使用可溯源性校準(zhǔn)品是保證檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的前提，而參加室間質(zhì)評價活動，可以發(fā)現(xiàn)實驗室結(jié)果準(zhǔn)確性的偏倚。檢驗方法學(xué)分類包括：決定性方法（definitivemethod）：經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因的方法；參考方法（referencemethod）：經(jīng)詳盡研究證實其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的方法；常規(guī)方法（routinemethod）：可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)又稱參考物質(zhì)（referencematerial），是一類充分均勻，并具有一個（或多個）確定的特性值的材料或物質(zhì)，用以校準(zhǔn)儀器設(shè)備、評價測量方法，或給其它物質(zhì)賦值。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果一般表示為：標(biāo)準(zhǔn)值±總不確定度?！皹?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書“是介紹標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的技術(shù)文件，是研制單位向用戶提出的質(zhì)量保證書和使用說明。附有證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱為有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（certifiedreferencematerial,CRM），其特性值由建立了溯源性的程序確定，使可溯源至準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)的表示該特性值的計量單位，且每個標(biāo)準(zhǔn)值都附有給定置信水平的不確定度。一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（primaryreferencematerial）：穩(wěn)定、均一，采用高度準(zhǔn)確、可靠的若干方法定值，可用于校準(zhǔn)決定性方法及為二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值。在我國，一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是測量準(zhǔn)確度達到國內(nèi)最高水平的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，由國家技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)、頒布并授權(quán)生產(chǎn)。如：人血清無機成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW09135）和血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW09138）。二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（secondaryreferencematerial）：用一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)，參考方法定值。如：紅細胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)—GBW（E）090001、膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)—GBW（E）090002、氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)—GBW（E）090004和純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)—GBW（E）090011。校準(zhǔn)物（calipator）：用二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)，常規(guī)方法定值。用于對常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn)。質(zhì)控物（controlmaterial）：具有與檢測過程相適應(yīng)的特性，其成份與檢測樣本的基質(zhì)相同或相似。應(yīng)使用充分均一和穩(wěn)定的質(zhì)控物，其瓶間變異必須小于監(jiān)測系統(tǒng)預(yù)期的變異，其常規(guī)檢測應(yīng)有助于確層析）、對鹽水透析過的混合血清（在線性實驗中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)）。商品質(zhì)控物或校準(zhǔn)物（此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實際的線性結(jié)果）、水溶液（一般無基質(zhì)效應(yīng)），等。實驗程序：全部實驗和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。分析序列應(yīng)為隨機排列。有顯著攜帶污染時，應(yīng)用空白隔開樣本。每個濃度樣本重復(fù)測定4次。記錄測定結(jié)果。結(jié)果分析：觀察結(jié)果有無明顯的數(shù)據(jù)錯誤，若有明顯異常時，應(yīng)判斷是否為離群點。對于特定濃度Yi值的離群點進行檢驗時，需將其4個重復(fù)值從大到小排列（Yi-1到Y(jié)i-4）。計算極差D=Yi-1-Yi-4。若Yi-1可能是離群點，計算：D1=（Yi-1–Yi-2）/D。若Yi-4可能是離群點，計算：D4=（Yi-3–Yi-4）/D。計算結(jié)果（D1或D4）如果大于0.765(0.05)或0.889(0.01)，則該點判為離群點。全部數(shù)據(jù)中的離群點如果有2點或以上，則應(yīng)保留全部數(shù)據(jù)或重新進行實驗。以分析物濃度為X軸，反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸，繪制X-Y線性圖。目測線性和進行統(tǒng)計學(xué)分析，判斷是否符合要求。對于線性結(jié)果的分析，應(yīng)當(dāng)注意統(tǒng)計學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同；應(yīng)慎用方法學(xué)線性范圍從0開始；有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評價中，如最低線性濃度、醫(yī)學(xué)決定水平及最高線性濃度。方法學(xué)比較臨床實驗室中使用的檢驗方法，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展不斷更新，在引進新方法前或用一種方法替代另一種方法時為保證臨床實驗室檢驗結(jié)果的連續(xù)性，通常要進行偏差分析，以比較不同的分析方法在測定同一分析項目時結(jié)果的差異。1、樣本要求：用于方法學(xué)對比實驗的樣本，應(yīng)來源于健康人或患者，無明顯干擾因素，并應(yīng)盡量避免使用貯存樣本。全部樣本在醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)均勻分布，樣本至少40例，增加可提高可信性。2、對比方法：可采用廠家要求的實驗室常規(guī)方法或公認的參考方法。對比方法應(yīng)具有好的精密度，沒有已知的干擾物，與評價方法單位相同，相對國家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏差為已知。3、實驗程序：a)操作者應(yīng)有足夠的時間熟悉儀器操作，保養(yǎng)程序及評價方案。在全部實驗過程中，都必須建立適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制程序。b)進行方法學(xué)對比實驗，每天應(yīng)測定8份樣本，每份樣本都用評價方法和對比方法進行雙份測定，至少連續(xù)測定5天，共40份樣本。測定時先對樣本排序，再按順序1至8測定第一次，順序8至1測定第二次。按表3收集實驗數(shù)據(jù)c)結(jié)果繪圖：實驗結(jié)果可繪制4張圖，第一張圖是Yi對Xi的均值散點圖，第二張圖為Yij對Xi散點圖，第三張為（Yi-Xi）對Xi偏差圖，第四張為（Yij-Xij）對Xi的偏差圖。常用的與方法學(xué)評價EP5-A：臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評價核準(zhǔn)指南（EvaluationofPrecisionPerformanceofClinicalChemistryDevices;ApprovedGuideline）用于臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評價的實驗設(shè)計及如何與生產(chǎn)廠聲明的精密度進行比較。EP6-P2：定量分析方法的線性評價：統(tǒng)計方法，提議指南第二版（EvaluationoftheLinearityofQuantitativeAnalyticalMethods:AStatisticalApproach;ProposedGuidelineSecondEdition）：指南可用于在法評價過程中檢驗方法線性、作為常規(guī)質(zhì)量保證的一部分進行線性檢查及驗證廠家聲明的線性范圍。EP7-P：臨床化學(xué)實驗干擾提議指南（InterferenceTestinginClinicalChemistry;ProposedGuideline）提供背景信息和監(jiān)定程序，用于干擾物對檢驗結(jié)果影響的定性。EP9-A：用病人樣本進行方法學(xué)比較和偏倚評估，核準(zhǔn)批南（MethodComparisonandBiasEstimationUsingPatientSamples;ApprovedGuideline）。主要用于檢驗兩種臨床方法或設(shè)備間的偏倚，和使用病人樣本進行方法比較的實驗設(shè)計及數(shù)據(jù)分析。EP10-A：定量臨床實驗室方法的初步評價，核準(zhǔn)指南（PreliminaryEvaluationofQuantitativeClinicalLaboratoryMethods;ApprovedGuideline）：提供了用于分析方法和設(shè)備操作的初步評價的實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析。EP11-P：用于體外診斷檢驗說明的統(tǒng)一描述，提議指南（UniformDescriptionofClaimsForInVitroDiagnosticTests;ProposedGuideline）EP12-P：用于定性實驗評價的用戶協(xié)議，提議指南（UserProtocolforEvaluationofQualitativeTestPerformance;ProposedGuideline）EP13-R：實驗室統(tǒng)計—標(biāo)準(zhǔn)差，報告（LaboratoryStatistics—StandardDeviation;AReport）EP14-A：基質(zhì)效應(yīng)的評價，核準(zhǔn)指南（EvaluationofMatrixEffects;ApprovedGuideline）EP15-A:精密度和準(zhǔn)確度性能的應(yīng)用，核準(zhǔn)指南（UserDemonstrationofPerformanceforPrecisionandAccuracy;ApprovedGuideline）EP18-P:檢驗單位使用