生物高中生物選修知識點總結(jié)

1/23高中生物選修 1生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：經(jīng)過微生物技術(shù)的培育來生產(chǎn)大批代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵·無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖子生殖

()分裂生殖孢4、在有氧條件下，酵母菌進展有氧呼吸，大批生殖。

CHO＋6O→6CO＋6HO6 12 6 2 2 25、在無氧條件下，酵母菌能進展酒精發(fā)酵。

CHO→2CHOH＋2CO6 12 6 2 56、20℃左右最適合酵母菌生殖酒精發(fā)酵時一般將溫度掌握在 18℃-25℃7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮外表的野生型酵母菌.在發(fā)酵,跟著酒精濃度的提升,紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液,使葡萄酒表達深紅色.在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌能夠生長生殖，而絕大多半其余微生物都因沒法適應(yīng)這一環(huán)境而遇到限制。8、醋酸菌是單細胞細菌(),代謝種類是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂9、當氧氣、糖源都充分時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺乏糖源時，醋酸菌將乙醇變成乙醛，再將乙醛變成醋酸。2CHOH4OCHCOOH＋6HO5 2 3 210、掌握發(fā)酵條件的作用①醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進展深層發(fā)酵時，即便不過短時間中止通入氧氣，也會惹起醋酸菌死亡。②醋酸菌最適生長溫度為 好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時間縮短，又削減雜菌污染的時機。③有兩條門路生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、試驗流程：精選葡萄→沖刷→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒〔→醋酸發(fā)酵→果醋〕12、酒精查驗：果汁發(fā)酵后能否有酒精產(chǎn)生，能夠用重鉻酸鉀來查驗。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反響表達灰綠色。先在試管中參加發(fā)酵液 2ｍL，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L 的H SO3 滴，振蕩混勻，最終滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液2 4

3滴，振蕩試管，觀察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連結(jié)充氣泵進展充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。排氣口要經(jīng)過一個長而曲折的膠管與瓶身相連結(jié)，其目的是防范空氣中微生物的污染。張口向下的目的是有益于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時，應(yīng)當封閉充氣口；制醋時，應(yīng)當充氣口連結(jié)氣泵，輸入氧氣。疑難解答你以為應(yīng)領(lǐng)先沖刷葡萄仍是先除掉枝梗？為何？應(yīng)領(lǐng)先沖刷，而后再除掉枝梗，以防止除掉枝梗時惹起葡萄損壞，增加被雜菌污染的時機。你以為應(yīng)當從哪些方面防范發(fā)酵液被污染？如：要先沖刷葡萄，再除掉枝梗；榨汁機、發(fā)酵裝置要沖洗干凈，并進展酒精消毒；每次排氣時只要擰松瓶蓋，不要完好揭開瓶蓋等。制葡萄酒時，為何要將溫度掌握在18～25℃？制葡萄醋時，為何要將溫度掌握在30～35℃？溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。 20℃左右最適合酵母菌的生殖。所以需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30～35℃，所以要將溫度掌握30～35℃。課題二腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，此中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝種類是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、試驗流程：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進展先期發(fā)酵和后期發(fā)酵。先期發(fā)酵的主要作用：1.創(chuàng)立條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主假設(shè)酶與微生物共同參與生化反響的過程。經(jīng)過各樣輔料與酶的緩解作用，生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cm3cm×1cm的假設(shè)干塊。所用豆腐的含水量為70％左右，水分過多則腐乳不易成形。*水分測定方法以下：精準稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品 5～10g(精準到0.02mg)，置于重量的蒸發(fā)皿中，均勻鋪平后，在4h，拿出后置于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重，而后再烘止。

100～105℃電熱枯燥箱內(nèi)枯燥30min，直至所稱重量不變成樣品水分含量〔%〕計算公式以下：(烘干前容器和樣質(zhì)量量-烘干后容器和樣質(zhì)量量)/烘干前樣質(zhì)量量·毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，將籠屜中的掌握在定的溫度。

15～18℃，并保持一1.來自空氣中的毛霉孢子，2.直接接種優(yōu)秀毛霉菌種時間：5天·加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層齊整地擺放在瓶中，同時逐層加鹽，跟著層數(shù)的加高而增加鹽量，靠近瓶口外表的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為 8天左右?！び名}腌制時，留意掌握鹽的用量：鹽的濃度過低，缺乏以抑制微生物的生長，可能致使豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口胃·1.抑制微生物的生長，防止腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬，在后期制作3.調(diào)味作用，給腐乳以必需的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。·配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各樣香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般掌握在12%左右?！ぞ频淖饔茫?.防范雜菌污染以防腐 2.與有機酸聯(lián)合形成酯，賜予腐乳風(fēng)味 3.酒精含量的凹凸與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌生殖快，豆腐易腐敗，難以成塊?！?.2.殺菌防腐作用3.參與并促使發(fā)酵過程·防范雜菌污染：①用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗漱干凈后要用開水消毒。②裝瓶時，操作要快速留神。齊整地擺放好豆腐、參加鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時，最好將瓶口經(jīng)過酒精燈的火焰，防范瓶口被污染。疑難解答利用所學(xué)的生物學(xué)學(xué)問，講解豆腐長白毛是怎么一回事？豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲，在豆腐中還有爬行菌絲。為何要撒很多鹽，將長毛的豆腐腌起來？鹽能防范雜菌污染，防止豆腐腐敗。我們尋常吃的豆腐，哪一種適適用來做腐乳？70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。吃腐乳時，你會覺察腐乳外面有一層致密的“皮”。這層“皮”是如何形成的呢？它對人體有害嗎？它的作用是什么？“皮”是先期發(fā)酵時在豆腐外表上生長的菌絲〔爬行菌絲〕，對人體無害。它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形。課題三制作泡菜·制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代謝種類是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下，降糖分解為乳酸。分裂方式是二分裂。反CHO：

酶2CHO3 6 產(chǎn)

+能量含抗生素牛奶不行以生6 12 6酸奶的原由是抗生素殺死乳酸菌。常有的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。·亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水，在食品生產(chǎn)頂用作食品增加劑?！わ嬍持械膩喯跛猁}一般不會危害人體安康，國家規(guī)定肉制品中不超出 30mg/kg，醬腌菜4/23中不超出20mg/kg，嬰兒奶粉中不超出2mg/kg。亞硝酸鹽被吸取后隨尿液排出體外，但在pH、溫度和必定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。亞 ·一般在腌制 10天后亞硝酸鹽含量開頭降硝 低，故在10天以后食用最好酸 *測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件鹽發(fā)酵時間〔d〕

下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反響后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽聯(lián)合形成玫瑰紅色染料，與濃度的標準顯色液目測比較，估量泡菜中亞硝酸鹽含量。專題二微生物的培育與應(yīng)用課題一微生物的試驗室培育·培育基：人們依照微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的不一樣需求，配制出供其生長生殖的養(yǎng)分基質(zhì)，是進展微生物培育的物質(zhì)根底?！づ嘤勒瘴锢硇再|(zhì)可分為液體培育基半固體培育基和固體培育基。在液體培育基中參加分散劑瓊脂〔是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培育基頂用作分散劑〕后，制成瓊脂固體培育基。微生物在固體培育基外表生長，能夠形成肉眼可見的菌落。依據(jù)菌落的特色能夠推斷是哪一種菌。液體培育基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培育基應(yīng)用于微生物的分別和判定，半固體培育基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等?！ひ勒粘煞峙嘤煞譃槿斯ず铣膳嘤妥匀慌嘤?。合成培育基是用成分的化學(xué)物質(zhì)配制而成，此中成分的種類比率明確，常用于微生物的分別判定。自然培育基是用化學(xué)成分不明的自然物質(zhì)配制而成，常用于實質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)。·依照培育基的用途，可將培育基分為選擇培育基和判定培育基。選擇培育基是指在培育基中參加某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促使所需要的微生物的生長。鑒識培育基是依據(jù)微生物的特色，在培育基中參加某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，用以鑒識不一樣類其余微生物?！づ嘤幕瘜W(xué)成分包含水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等。5/23·碳源：能為微生物的代謝供給碳元素的物質(zhì)。如

CO、NaHCO2

等無機碳源；糖類、石單質(zhì)碳不行以作為碳油、花生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物只好利用有機碳源。 源。- +·氮源：能為微生物的代謝供給氮元素的物質(zhì)。如

〔無機氮源〕蛋白2 3 3 4質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨〔有機氮源〕等。

只有固氮微生物才能利用N?！づ嘤€要知足微生物生長對pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。比方，培育

2乳酸桿菌時需要在培育基中增加維生素，培育霉菌時須將培育基的

pH調(diào)至酸性，培育細菌是需pH調(diào)至中性或微堿性，培育厭氧型微生物是則需要供給無氧的條件·無菌技術(shù)·獵取純潔培育物的重點是防范外來雜菌的入侵，要留意以下幾個方面：①對試驗操作的空間、操作者的穿著和手，進展干凈和消毒。②將用于微生物培育的器皿、接種器具和培育基等器具進展滅菌。③為防止四周環(huán)境中微生物的污染，試驗操作應(yīng)在酒精燈火焰鄰近進展。④試驗操作時應(yīng)防止已經(jīng)滅菌辦理的資料器具與四周的物件相接觸。無菌技術(shù)除了用來防范試驗室的培育物被其余外來微生物污染外，還有什么目的？答：無菌技術(shù)還可以有效防止操作者自己被微生物感染?！は九c滅菌的差異消毒指派用較為平和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對人體有害的微生物〔不包含芽孢和孢子〕。消毒方法常用 煮沸消毒法，巴氏消毒法〔關(guān)于一些不耐高溫的液體〕還有化學(xué)藥劑〔如酒精、氯氣、石炭酸等〕消毒、紫外線消毒。滅菌則是指派用劇烈的理化要素殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包含芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬器具等使用干熱滅菌法，所用器材是干熱滅菌箱；③培育基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器材是高壓蒸汽滅菌鍋。④外表滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器材是紫外燈。6/23比較項理化要素的作用強度消滅微生物的數(shù)目芽孢和孢子可否被消滅消毒較為平和局部生活狀態(tài)的微生物不行以滅菌劇烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固體培育基〕方法步驟：計算、稱量、熔解、滅菌、倒平板?！车蛊桨宀僮鞯牟襟E：①將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培育基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口快速經(jīng)過分焰。③用左手的拇指和食指將培育皿翻開一條稍大于瓶口的空隙，右手將錐形瓶中的培育基〔10～20mL〕倒入培育皿，左手馬上蓋上培育皿的皿蓋。④等候平板冷卻分散，或許需5～10min。而后，將平板倒過來擱置，使培育皿蓋在下、皿底在上?！さ蛊桨宀僮鞯恼?wù)撆嘤鶞缇?，需要冷卻到基的溫度？

50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么方法來估量培育提示：能夠用手觸摸盛有培育基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度降落到剛剛不燙手時，便可以進展倒平板了。為何需要使錐形瓶的瓶口經(jīng)過分焰？答：經(jīng)過灼燒滅菌，防范瓶口的微生物污染培育基。平板冷凝后，為何要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會分散水珠，分散后的培育基外表的濕度也比較高，將平板倒置，既能夠使培育基外表的水分更好地揮發(fā)，又能夠防范皿蓋上的水珠落入培育基，造7/2310/23成污染。在倒平板的過程中，假設(shè)不留神將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還可以用來培育微生物嗎？為何？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋長，所以最好不要用這個平板培育微生物。純化大腸桿菌〔1〕〔2〕平板劃線法是經(jīng)過接種環(huán)在瓊脂固體培育基外表連續(xù)劃線的操作。將齊集的菌種 逐可見的子細胞集體，這就是菌落。〔3〕稀釋涂布平板法是將菌液進展一系列的梯度稀釋，而后將不一樣稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的外表，進展培育。分為系列 稀釋操作和涂布平板操作兩步?！秤闷桨鍎澗€法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使齊集在一同的微生物分別成單個細胞，從而能在培育基外表形成單個的菌落，以便于純化菌種?！称桨鍎澗€法操作步驟：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并翻開棉塞。③將試管口經(jīng)過分焰。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管經(jīng)過分焰，并塞上棉塞。⑥左手將皿蓋翻開一條空隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。留意不要劃破培育皿。⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一地區(qū)劃線的尾端開頭往其次地區(qū)內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五地區(qū)內(nèi)劃線。留意不要將最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。⑧將平板倒置放入培育箱中培育?！て桨鍎澗€操作的談?wù)摓楹卧诓僮鞯牡谝徊揭约懊看蝿澗€以前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作完畢時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為何？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死前一次劃線完畢后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接根源于前一次劃線的尾端，從而經(jīng)過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目漸漸削減，以便獵取菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán)，能實時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細菌污染環(huán)境和感染操作者。在灼燒接種環(huán)以后，為何要等其冷卻后再進展劃線？答：免得接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。在作其次次以及后來的劃線操作時，為何老是從前一次劃線的尾端開頭劃線？答：劃線后，線條尾端細菌的數(shù)目比線條開端處要少，每次從前一次劃線的尾端開始，能使細菌的數(shù)目跟著劃線次數(shù)的增加而漸漸削減，最終能獵取由單個細菌生殖而來的菌落?！惩坎计桨宀僮鞯牟襟E：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。②取少量菌液，滴加到培育基外表。8～10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培育基外表。涂布平板操作的談?wù)撏坎计桨宓娜坎僮鞫紤?yīng)在火焰鄰近進展。聯(lián)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想想，第 2步應(yīng)如何進展無菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。比方，酒精燈與培育皿的距離要適合、吸管頭不要接觸任何其余物體、吸管要在酒精燈火焰四周；等等。菌種的保存〕關(guān)于屢次使用的菌種，能夠承受臨時保藏的方法。①臨時保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培育基上，在適合的溫度下培育。當菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。此后每3～6個月，都要從頭將菌種從舊的培育基上轉(zhuǎn)移到穎的培育基上。②弊端：這類方法保存的時間不長，菌種簡潔被污染或產(chǎn)生變異。〕關(guān)于需要長期保存的菌種，能夠承受 甘油管藏的方法。1mL培育的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘20℃的冷凍箱中保存。疑難解答〕生物的養(yǎng)分養(yǎng)分是指生物攝入、利用養(yǎng)分物質(zhì)的過程。養(yǎng)分物質(zhì)是指保持機體生命活動，保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。人及動物的養(yǎng)分物質(zhì)：水、無機鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。植物的養(yǎng)分物質(zhì)：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的養(yǎng)分物質(zhì)：水、無機鹽、碳源、氮源及特別養(yǎng)分物質(zhì)五類。〔2〕確立培育基制作能否合格的方法將未接種的培育基在恒溫箱中保溫1～2天，無菌落生長，說明培育基的制備是成功的，不然需要從頭制備。課題二土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素其實不行以直接被農(nóng)作物吸取。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨以后，才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素，是由于他們能合成脲酶尿素最先是從人的尿液中覺察的選擇菌株〔1〕試驗室中微生物的選擇應(yīng)用的原理人為供給有益于目的菌株生長的條件〔包含養(yǎng)分、溫度、 pH等〕，同時抑制或阻擋其他微生物生長?！尺x擇性培育基在微生物學(xué)中，將同意特定種類的微生物生長，同時抑制或阻擋其余種類微生物生長的培育基，稱作選擇培育基?！撑渲七x擇培育基的依照依據(jù)選擇培育的菌種的生理代謝特色參加某種物質(zhì)以到達選擇的目的。比方，培育基中不參加有機物能夠選擇培育自養(yǎng)微生物；培育基中不參加氮元素，能夠選擇培育能固氮的微生物；參加高濃度的食鹽可選擇培育金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計菌落數(shù)目〕〕稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理當樣品的稀釋度足夠高時，培育基外表生長的一個菌落，根源于樣品稀釋液中的一個活菌。經(jīng)過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推斷出樣品中或許含有多少活細菌。為了保證結(jié)果3～530～300菌落數(shù)常常比活菌的實質(zhì)數(shù)目低，所以，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。承受此方法的留意事項：1.一般選用菌落數(shù)在30~300 之間的平板進展計數(shù)2.為了防范菌落延長，影響計數(shù)，可在培育基中參加TTC3.本法僅限于形成菌落的微生物設(shè)置比較設(shè)置比較的主要目的是去除試驗組中非測試要素對試驗結(jié)果的影響，提升試驗結(jié)果的可信度。比較試驗是指除了被測試的條件之外，其余條件都同樣的試驗，其作用是比照試驗組，去除任何其余可能原由的擾亂，證明確實是所測試的條件惹起相應(yīng)的結(jié)果。試驗設(shè)計試驗設(shè)計包含試驗方案，所需儀器、資料、器具和藥品，具體的實行步驟以實時間安排等的綜合考慮和安排。〔1〕土壤取樣：同其余生物環(huán)境比照，土壤中的微生物，數(shù)目最大，種類最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長。從富含有機物、潮濕、 pH≈7的土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約3～8cm的土壤層取樣。〔2〕樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實質(zhì)操作中，尋常承受必定稀釋范圍的樣品液進展培育，以保證獵取菌落數(shù)在 30~300之間、適于計數(shù)的平板。測定土壤中細菌的數(shù)目，一般承受 104105106測定放線菌的數(shù)目，一般承受103104105測定真菌的數(shù)目，一般承受102103104〕微生物的培育與觀察30~37℃1~2天25~28℃5~725~28℃3~4天24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選用菌落數(shù)目穩(wěn)準時的記錄作為結(jié)果，這樣能夠防范因培育時間缺乏而致使一樓菌落的數(shù)目。一般來說，在必定的培育條件下〔同樣的培育基、只有及培育時間〕，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)固的菌落特色。外形、大小、隆動身度、顏色疑難解答〔1〕如何從平板上的菌落數(shù)推斷出每克樣品中的菌落數(shù)？3個平板，計算出平板菌落數(shù)的均勻值=〔C/V〕*MC代表某一稀釋度下平板上生長的均勻菌落V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積〔ml〕，M代表稀釋倍數(shù)課題三分解纖維素的微生物的分別纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶〔1〕棉花是自然界中纖維素含量最高的自然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素?！?〕纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般以為它起碼包含三種組分，即 C酶、C 酶和葡萄糖苷1 X酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長供給養(yǎng)分。纖維素分解菌的選擇〕選擇方法：剛果紅染色法。能夠經(jīng)過顏色反響直接對微生物進展選擇?！硠偣t染色法選擇纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料，它能夠與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但其實不睦水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這類反響。當我們在含有纖維素的培育基中參加剛果紅時，剛果紅能與培育基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復(fù)合物就沒法形成，培育基中會消滅以纖維素分解菌為中心的透亮圈。這樣，我們便可以經(jīng)過能否產(chǎn)生透亮圈來選擇纖維素分解菌。分別分解纖維素的微生物的試驗流程土壤取樣→選擇培育〔此步能否需要，應(yīng)依據(jù)樣品中目的菌株數(shù)目的多少來確立〕→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒識纖維素分解菌的培育基上→精選產(chǎn)生透亮圈的菌落〕土壤采集選擇富含纖維素的環(huán)境。〕剛果紅染色法分別纖維素分解菌的步驟倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板〕剛果紅染色法種類一種是先培育微生物，再參加剛果紅進展顏色反響，另一種是在倒平板時就參加剛果紅。課題延長對分解纖維素的微生物進展了初步的選擇后，不過分別純化的第一步，為確立獵取的是纖維素分解菌，還需要進展發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的試驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有 液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進展定量的測定。疑難解答〕為何要在富含纖維素的環(huán)境中找尋纖維素分解菌？由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提升，所以從這類土樣中獵取目的微生物的幾率要高于一般環(huán)境。〕將濾紙埋在土壤中有什么作用？你以為濾紙應(yīng)當埋進土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對齊集，其實是人工設(shè)置纖維素分解菌生計的適合環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約 10cm左右腐殖土壤中?！硟煞N剛果紅染色法的比較方法一是傳統(tǒng)的方法，弊端是操作繁瑣，參加剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混淆；其特長是這樣顯示出的顏色反響根本上是纖維素分解菌的作用。方法二的特長是操作簡易，不存在菌落混淆問題，弊端是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，能夠使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物消滅假陽性反響。但這類只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透亮圈較為模糊，由于培育基中纖維素占主要地位，所以能夠與纖維素酶產(chǎn)生的透亮圈相劃分。方法二的另一弊端是：有些微生物擁有降解色素的力量，它們在長時間培育過程中會降解剛果紅形成明顯的透亮圈，與纖維素分解菌不易劃分?！碁楹芜x擇培育能夠“濃縮”所需的微生物？在選擇培育的條件下，能夠使那些能夠適應(yīng)這類養(yǎng)分條件的微生物獵取快速生殖，而那些不適應(yīng)這類養(yǎng)分條件的微生物的生殖被抑制，所以能夠起到“濃縮”的作用。專題三植物的組織培育技術(shù)課題一菊花的組織培育植物組織培育的根本過程細胞分化：在生物個體發(fā)育過程中，細胞在形態(tài)、構(gòu)造和生理功能上消滅穩(wěn)固性差異的過程。離體的植物組織或細胞，在培育了一段時間此后，會經(jīng)過細胞分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的細胞擺列松散而無規(guī)章，是一種高度液泡化的呈無定外形態(tài)的薄壁細胞。由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化，或許叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織連續(xù)進展培育，又能夠從頭分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗，移栽到地里，能夠發(fā)育成完好的植物體。植物細胞工程擁有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞，都擁有發(fā)育成完好個體的力量，即每個生物細胞都擁有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中其實不表現(xiàn)出來，這是由于在特定的時間和空間條件下，經(jīng)過基因的選擇性表達，構(gòu)成不一樣組織和器官。植物組織培育技術(shù)的應(yīng)用有：實現(xiàn)優(yōu)秀品種的快速生殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物品種以及細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等?！ぜ毎只且环N長期性的變化，它有什么生理意義？使多細胞生物體中細胞構(gòu)造和功能趨勢特意化，有益于提升各樣生理功能的效率。比較根尖分生組織和愈傷組織的異同組織種類細胞根源組織種類細胞根源細胞形態(tài)細胞構(gòu)造細胞擺列細胞去處根尖 分化成多種分生組織 受精卵 正方形 無液泡 親熱 細胞組織響植物組織培育的條件愈傷組織高度分化細胞無定形高度液泡化松散再分化成個體同樣點 都經(jīng)過有絲分裂進展細胞增殖資料：不一樣的植物組織，培育的難易程度差異很大。植物資料的選擇直接關(guān)系到試驗的成敗。植物的種類、資料的年紀和保存時間的長短等都會影響試驗結(jié)果。菊花組織培育一般選擇未開花植物的莖上部萌發(fā)的側(cè)枝作資料。一般來說，簡潔進展無性生殖的植物簡潔進展組織培育。選用生長旺盛嫩枝進展組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，簡潔引誘脫分化和再分化。養(yǎng)分：離體的植物組織和細胞，對養(yǎng)分、環(huán)境等條件的要求相對特別，需要配制適合的培MSNPSK、Ca、Mg，微量元FeMnBZnCuMoICo，有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。激素：植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的重點性激素。在生長素存在的狀況下，細胞分裂素的作用表達增加趨勢。在培育基中需要增加生長素和細胞分裂素等植物激素，其濃度、使用的先后次序、用量的比率等都影響結(jié)果。15/23使用次序

試驗結(jié)果

+ 生長素／細胞分裂素比值與結(jié)果先生長素，

環(huán)境比值高時

促根分化， 條后細胞分裂素先細胞分裂素，后生長素同時使用

分化細胞既分裂也分化分化頻次提升

件： 抑芽形成PH、促芽分化，溫度、比值低時抑根形成光等環(huán)比值適中促使愈傷組織生長境條件。不一樣的植物對各樣條件的要求常常不一樣。進展菊花的組織培育，一般將 pH掌握在5.8 左右，溫度掌握在18~22℃，并且每天用日光燈照耀 12h.4、操作流程配制MS固體培育基：配制各樣母液：將各樣成分按配方比率配制成的液〕。

〔培育基母·使用時依據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計算用量，并加蒸餾水稀釋?！づ渲婆嘤簯?yīng)參加的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大批元素、微量元素、有機物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1000毫升?！ぴ诰栈ńM織培育中，能夠不增加植物激素原由是菊花莖段組織培育比較簡潔?！缇撼惺艿臏缇椒ㄊ歉邏赫羝麥缇?。·MS培育基中各樣養(yǎng)分物質(zhì)的作用是什么？與肉湯培育基對 MS培育基有哪些特比， 色？大批元素和微量元素供給植物細胞所必需的無機鹽；蔗糖供給碳源，保持細胞浸透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主假設(shè)為了知足離體植物細胞在正常代謝門路遇到必定影響后所產(chǎn)生的特別養(yǎng)分需求。MS盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖刷后可加少量洗衣粉，用軟刷輕輕洗刷，洗刷后在流水下16/2317/23沖刷20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分數(shù)為 70%的酒精中搖2~36~7s，馬上將外植體拿出，在無菌水中沖洗。拿出后仍用無菌吸水紙吸干外植體外表水分，放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。拿出后，在無菌水中起3次，漂洗消毒液。留意：對外植體進展外表消毒時，就要考慮藥劑的消毒成效，又要考慮植物的耐受力量。7～8個外植體。外植體接種與細菌接種相像，操作步驟同樣，并且都要求無菌操作。培育：應(yīng)當放在無菌箱中進展，并按期進展消毒，保持適合的溫度〔18~22℃〕和光照〔12h〕移栽：栽前應(yīng)先翻開培育瓶的封口膜，讓其在培育間生長幾天，而后用流水沖洗根部培育基。而后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍寶巖等環(huán)境中生活一段時間，進展壯苗。最終進展露天種植。種植外植體在培育過程中可能會被污染，原由有外植體消毒不完全；培育基滅菌不完全；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。專題二月季的花藥培育被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊尋常包含花絲、花藥兩局部?；ㄋ帪槟覡顦?gòu)造，內(nèi)部含有很多花粉。花粉是由花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，所以，花粉是單倍體的生殖細胞。被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)受小孢子四分體期間、單核期和雙核期等階段。在小孢子4個單倍體細胞連在一同，進入單核期時，四分體的4個單倍體細胞相互分離，形成4個擁有單細胞核的花粉粒。這時的細胞含濃重的原生質(zhì)，核位于細胞的中心〔單核居中期〕。跟著細胞不停長大，細胞核由中心移向細胞一側(cè)〔單核靠邊期〕，并分養(yǎng)分細胞。生殖細胞將在分裂一次，形成兩個精子。留意：①成熟的花粉粒有兩類，一類是二核花粉粒，其花粉粒中只含花粉管細胞核和生殖細胞核，二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的；另一類是三核花粉粒，花粉在成熟前，生殖細胞就進展一次有絲分裂，形成兩個精子，此花粉粒中含有兩個精子核和一個花粉管核〔養(yǎng)分核〕②花粉發(fā)育過程中的四分體和動物細胞減數(shù)分裂的四分體不一樣。花粉發(fā)育過程中的四分體是花粉母細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的 4個連在一同的單倍體細胞；而動物細胞減數(shù)分裂過程中的四分體是聯(lián)會配對后的一對同源染色體，由于含有四條染色單體而稱為四分體。③同一世殖細胞形成的兩個精子，其基因構(gòu)成完好同樣。產(chǎn)生花粉植株的兩種門路經(jīng)過花藥培育產(chǎn)生花粉植株〔即單倍體植株〕一般有 兩種門路，一種是花粉經(jīng)過胚狀體階段發(fā)育為植物，另一種是花粉在引誘培育基上先形成愈傷組織，再將其引誘分化成植株。這兩種門路之間并無確定的界限，主要取決于培育基中 激素的種類及其濃度配比。留意：①不管哪一種產(chǎn)生方式，都要先引誘生芽，再引誘生根②胚狀體：植物體細胞組織培育過程中，引誘產(chǎn)生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚特別近似的構(gòu)造，其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚近似，有胚芽、胚根、胚軸等完好構(gòu)造，就像一粒種子，又稱為細胞胚。影響花藥培育的要素引誘花粉可否成功及引誘成功率的凹凸，受多種要素影響，此中資料的選擇與培育基的構(gòu)成是主要的影響要素·親本的生理狀況：花粉初期是的花藥比后期的更簡潔產(chǎn)生花粉植株，選擇 月季的初花期?！みm合的花粉發(fā)育期間：一般來說，在單核期，細胞核由中心移向細胞一側(cè)的期間，花藥培育成功率最高·花蕾：選擇完好未開放的花蕾·親本植株的生長條件、資料的低溫預(yù)辦理以及接種密度等對引誘成功率都有必定影響·資料的選用：選擇花藥時，一般要經(jīng)過鏡檢來確立此中的花粉能否處于適合的發(fā)育期。確立花粉發(fā)育期間的最常用的方法是醋酸洋紅法。可是，某些植物的花粉細胞核不易著-鉻礬法，這類方法能將花粉細胞核染成藍黑色·資料的消毒·接種和培育：滅菌后的花蕾，要在無菌條件下除掉萼片和花瓣，并馬上將花藥接種到培育基上。在剝離花藥時，要盡量不損害花藥〔不然接種后簡潔從受傷部位長生愈傷組織〕，同時還要完全去除花絲，由于與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成，尋常每瓶接栽7～10個,25,..一般經(jīng)20～30,,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織實時轉(zhuǎn)移到分化培育基上，以便進一步分化出重生植株。假設(shè)花藥開裂開釋出胚狀體，則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大批幼小植株，肯定在花藥開裂后趕快將幼小植株分開，分別移植到的培育基上，不然這些植株將很難分開。還需要對培育出來的植株做進一步的判定和選擇。植物組織培育技術(shù)與花藥培育技術(shù)的同樣之處是：培育基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基真同樣。二者的不一樣之處在于：花藥培育的選材特別重要，需預(yù)先探究期間適合的花蕾；花藥裂開后開釋出的愈傷組織或胚狀體也要實時改換培育基；花藥培育對培育基配方的要求更加嚴格。這些都使花藥培育的難度大為增加。專題五ＤＮＡ和蛋白質(zhì)技術(shù)課題一ＤＮＡ的粗提取與判定·DNA的溶解性原理包含哪些方面？DNA在不一樣濃度NaClDNA不溶于酒精。·DNANaClDNA溶DNA析出，又需要使用什么濃度？在0.14mol/L 時溶解度最?。惠^高濃度可使 DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出?！NA2mol/LNaClDNA分子析出的方法是向DNANaClNaCl溶液。酒精是一種常用有機溶劑，DNA卻不行以溶于酒精〔95％冷卻酒精〕，但細胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。19/2320/23從理論上剖析，預(yù)冷的乙醇溶液擁有以下特長。一是抑制核酸水解酶活性，防范 DNA降解；二是降低分子運動，易于形成積淀析出；三是低溫有益于增加 斷裂?！NA不溶于酒精的原理，能夠到達什么目的？DNA和蛋白質(zhì)進一步分別?！NA還可以夠利用DNA對酶、高平和清洗劑的耐受性原理。利用該原理時，應(yīng)承受怎樣的酶和如何的溫度值？蛋白酶，由于酶擁有專一性，蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對 DNA產(chǎn)生影響。溫度值為60～80℃，由于該溫度值蛋白質(zhì)變性積淀，而 DNA不會變性。DNA的變性是指DNA80℃以上，如在PCR技術(shù)DNA95℃?！で逑碊NA中有何作用？清洗劑將細胞膜上的蛋白質(zhì)，從而崩潰細胞膜?！ぎ斉卸ㄌ崮贸龅奈顳NA時，需要使用什么指示劑進展判定？DNA遇二苯胺表