疑難血型分析鑒定及處理

疑難血型分析鑒定及處理第1頁/共38頁輸血前檢查輸血申請血樣、信息ABO、Rh定型交叉配血血液發(fā)放抗體篩選與鑒定第2頁/共38頁紅細(xì)胞血型系統(tǒng)簡介最重要的血型系統(tǒng)：ABO、Rh臨床意義：輸血安全、器官移植、新生兒溶血病第3頁/共38頁ABO血型臨床意義

溶血性輸血反應(yīng)新生兒溶血病器官移植

第4頁/共38頁ABO血型系統(tǒng)的血清學(xué)特點(diǎn)ABO系統(tǒng)主要的抗原、抗體血型抗原抗體AA抗BBB抗AO-抗A，抗BABA，B-第5頁/共38頁ABO血型系統(tǒng)的血清學(xué)特點(diǎn)A、B抗原的免疫性強(qiáng)規(guī)則抗體：血清中規(guī)律性的存在抗A和/或抗B抗體分泌型人的分泌液（血漿、唾液、羊水等）存在著A、B、H血型物質(zhì)紅細(xì)胞上的抗原與血清中的抗體存在相反的互補(bǔ)關(guān)系

----正反定型的理論基礎(chǔ)第6頁/共38頁ABO血型系統(tǒng)的血清學(xué)特點(diǎn)抗A、抗B抗體的特性

主要為IgM、IgGIgM抗體可被2-Me（2-巰基乙醇）破壞

IgG抗體分子量小，可通過胎盤屏障，造成新生兒溶血

！第7頁/共38頁新生兒溶血病第8頁/共38頁第9頁/共38頁ABO正反定型試驗(yàn)方法玻片法試管法：經(jīng)典微量板法：微柱凝膠法PCR方法注意：細(xì)胞濃度、血清與細(xì)胞比例第10頁/共38頁ABO正反定型結(jié)果

-A-BA細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞自身對照A型4+00>1+00B型04+>1+000O型00>1+>1+00AB型4+4+0000ABO正反定型相符：

“正反定型中有且只有2個(gè)強(qiáng)凝集反應(yīng)管”第11頁/共38頁ABO亞型/抗原抗體減弱未達(dá)到兩管強(qiáng)凝集ABO正反不符不規(guī)則抗體？除兩管強(qiáng)凝集之外還有其他凝集

提示疑難血型第12頁/共38頁疑難血型的定義

疑難血型：是指一種血型難以判定的“現(xiàn)象”實(shí)質(zhì)不是一種獨(dú)立的血型在臨床輸血中,常規(guī)只要求查ABO和Rh（D）,不要求查其它血型,因此,疑難血型只涉及ABO和RhDABO疑難血型一般是因?yàn)檎⒎炊ㄐ筒缓隙l(fā)現(xiàn)的

第13頁/共38頁ABO正反定型不符合原因試驗(yàn)因素

假陰性：未加試劑；紅細(xì)胞與血清比例不當(dāng)；試驗(yàn)溫度不當(dāng)；離心速度不夠；未判明結(jié)果為溶血；試驗(yàn)結(jié)果解讀不準(zhǔn)確。 假陽性：試劑血清、紅細(xì)胞或生理鹽水污染；應(yīng)用不潔的器皿；離心過度；試驗(yàn)結(jié)果解讀不準(zhǔn)確。

患者本身第14頁/共38頁排除人為試驗(yàn)差錯(cuò)漏加試劑紅細(xì)胞濃度過低或過高試劑污染、失效加樣槍污染離心機(jī)轉(zhuǎn)速不達(dá)標(biāo)標(biāo)本搞錯(cuò)記錄錯(cuò)誤結(jié)果判讀錯(cuò)誤第15頁/共38頁正反定型不合的三種情況正定型被干擾:抗原“變多”抗原“變少”

反定型被干擾:抗體“變多”抗體“變少”

正,反定型同時(shí)被干擾第16頁/共38頁ABO亞型年齡＜6月、老年白血病輸異型血移植輸血反應(yīng)血型物質(zhì)↑正定型，抗原減弱或缺少紅細(xì)胞抗原“變少”第17頁/共38頁1、獲得性B抗原(類B)(臨床提示感染)2、多凝集紅細(xì)胞3、自身凝集素(臨床提示AIHA)直抗（+）4、紅細(xì)胞粘附大量蛋白5、紅細(xì)胞未洗滌,血清對試劑反應(yīng)6、輸異型血(輸血史)7、造血干細(xì)胞移植(病史)

（混合視野）正定型，意外抗原反應(yīng)紅細(xì)胞抗原“變多”第18頁/共38頁新生兒、老年處理：加大血清量，降低溫度低蛋白血癥免疫抑制藥物血液病先天性免疫缺乏骨髓移植病理情況反定型、意外陰性血清抗體“變少”第19頁/共38頁緡錢狀形成（多發(fā)性骨髓瘤）冷型自身抗體同種抗體自身抗體不規(guī)則抗體反定型、意外陽性血清抗體“變多”第20頁/共38頁常見問題處理方法

★了解患者一般情況?！镌谧鲞M(jìn)一步試驗(yàn)之前，先進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)?！镉迷嚬芊?洗滌細(xì)胞?！锔鼡Q新的試劑?！餃缁钛a(bǔ)體。第21頁/共38頁常見問題處理方法初步檢查：再取一份患者新鮮標(biāo)本 紅細(xì)胞洗滌后配成2～5%濃度 重復(fù)進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn) 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 用O及自身細(xì)胞檢測血清 判定結(jié)果之前，實(shí)驗(yàn)管至少在室溫和4℃放置30分鐘，陰性者用顯微鏡觀察結(jié)果第22頁/共38頁進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)增加試劑血清：抗A1、抗H、抗AB增加細(xì)胞：自身、O細(xì)胞、臍血細(xì)胞唾液血型物質(zhì)鑒定吸收試驗(yàn)放散試驗(yàn)直接抗球蛋白試驗(yàn)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)第23頁/共38頁實(shí)例分析和處理方法第24頁/共38頁

實(shí)例分析（一）1、病史：患者，女，37歲，子宮肌瘤，既往妊娠史：G2P1，無輸血史。-A-B-D自身cAcBc室溫±04+004+分析：A亞型？A型（A抗原減弱）？其它可能第25頁/共38頁2、補(bǔ)充試驗(yàn)（人源抗A/B、抗H）-A（人源）-B（人源）-AB（人源）室溫±0±4℃1+01+OcPcA1c抗H4+4+±H抗原強(qiáng)弱：Oc>大部分亞型>Ac第26頁/共38頁3、吸收放散試驗(yàn)：

1份Pc（生理鹽水三洗后）+1份抗A4℃吸收30-60min4℃生理鹽水洗6次熱放散后取上層放散液放散液的檢測：Pc放散液Oc放散液A細(xì)胞IS2+04℃3+0通過吸收放散試驗(yàn)在Pc上檢測出A抗原第27頁/共38頁4、結(jié)論綜上所述：可判斷為A亞型，但還不能確定亞型的具體分型輸血：A型紅細(xì)胞、血小板第28頁/共38頁ABO亞型的檢測人源抗A/B抗-H抗-AB

抗A1吸收放散ABO亞型檢測項(xiàng)目第29頁/共38頁實(shí)例分析（二）-A-B-D自身cAcBc室溫4+2+4+2+2+4+分析：患者的血型可能是A型。巨球蛋白血癥或部分多發(fā)性骨髓瘤患者，血液中異常球蛋白升高，導(dǎo)致緡錢狀凝集對策：核對患者診斷和用藥情況；鹽水替代：A型輸血：A型紅細(xì)胞、血小板第30頁/共38頁實(shí)例分析（三）-A-B-D自身cAcBc室溫2+2+4+000患者是新生兒，抗體未出，反定無效正定型未出現(xiàn)2管強(qiáng)凝集血型可能是O型，臍帶血中有Wharton膠。洗滌被檢細(xì)胞后正定型凝集消失：O型輸血：O型血第31頁/共38頁ABO正反定型不符需要關(guān)注的問題患者的年齡？細(xì)胞是否三洗？患者是否血漿蛋白濃度低？患者的疾病類型？（白血病，胃腸道腫瘤）血樣是否是輸血后采集？第32頁/共38頁ABO正反定型不符思路整理正定型意外（—）意外（+）洗滌RBC，降低溫度，延長孵育時(shí)間用不同來源的抗體試驗(yàn)，鏡檢人源試劑，吸收放散試驗(yàn)（加對照）可能的亞型;因?yàn)槟挲g、診斷或用藥造成的抗原減弱洗滌RBC

冷抗體或緡錢狀凝集用不同來源的抗體試驗(yàn)，研究病人的輸血史和診斷直抗（+）獲得性B、多凝集第33頁/共38頁ABO正反定型不符思路整理反定型意外（—）意外（+）加大血清量，降低溫度，延長孵育時(shí)間，鏡檢與A(A1、A2)和B細(xì)胞反應(yīng)，加自身對照（—）因?yàn)槟挲g、診斷或用藥造成的抗體減弱抗體篩選自身對照A1c（+）A2c和篩選c自c(-)，所有細(xì)胞呈（+）包括自身對照部分篩選（+）自身（-）含抗A1的A或AB亞型抗體鑒定自身抗體和同種抗體第34頁/共38頁交叉配血

交叉配血中遇到的問題如果在血型鑒定中做了反定型，在血型鑒定中就能發(fā)現(xiàn)問題，如果血型鑒定中找到原因，配血問題自然能解決。第35頁/共38頁試驗(yàn)結(jié)果

可能的解釋

討論解決主側(cè)+自身對照-抗體篩選-（1）患者或獻(xiàn)血者的ABO定型不正確（2）患者血清中的同種抗體與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞上的抗原發(fā)生反應(yīng)，但在篩選細(xì)胞上無此抗原存在。（3）獻(xiàn)血者細(xì)胞可能有DAT陽（1）重復(fù)ABO實(shí)驗(yàn)：查對抗體是否一致。（2）增加抗體篩選和鑒定的細(xì)胞，進(jìn)一步檢查病人血清中的抗體（3）做獻(xiàn)血者直抗，如陽性，此血不能用于臨床，廢棄。主側(cè)+自身對照-抗體篩選+患者血清中的同種抗體與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞及篩選細(xì)胞上的抗原發(fā)生反應(yīng)

對患者血清進(jìn)行抗體鑒定，篩選對應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞重做交叉配血。主側(cè)+自身對照+抗體篩選