實(shí)驗(yàn)六糖發(fā)酵試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)六糖發(fā)酵試驗(yàn)第1頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六一、目的要求了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法第2頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六二、試驗(yàn)原理糖發(fā)酵試驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌鑒定中尤為重要，絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源，但是它們在分解糖的能力上有很大的差異,有些細(xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。酸的產(chǎn)生可利用指示劑來斷定。在配制培養(yǎng)基時(shí)預(yù)先加入溴甲酚紫[pH5．2（黃色）-6．8（紫色）]，當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)，可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明第3頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六三、實(shí)驗(yàn)器材1、菌種大腸桿菌，枯草芽孢桿菌斜面各1支；2、培養(yǎng)基盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各2支（內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管）3、儀器或其他用具試管架，接種環(huán)等。第4頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六四、操作步驟

1、編號用記號筆在各試管上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。2、接種取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支，按編號1支接種大腸桿菌，另1支接種枯草芽孢桿菌，第3支不接種，作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，同樣1支接種大腸桿菌，1支接種枯草芽孢桿菌，第3支不接種，作為對照。3．將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對照管置37℃溫室中培養(yǎng)24小時(shí)。4．觀察結(jié)果。第5頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六第6頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表?！啊北硎井a(chǎn)酸產(chǎn)氣；“+”表示產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；“-”表示不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

菌名糖類發(fā)酵大腸桿菌枯草芽孢桿菌對照葡萄糖發(fā)酵乳糖發(fā)酵第7頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六六、思考題假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵試驗(yàn)應(yīng)該出現(xiàn)什么結(jié)果第8頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基葡萄糖０.５％牛肉膏０.５％蛋白胨１％氯化鈉０.３％Ｎa2HPO4?12H2O0.2％0.2％溴麝香草酚藍(lán)溶液１.２％（體積分?jǐn)?shù)）蒸餾水配制，pH７.４乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基乳糖５％蛋白胨０.２％氯化鈉０.３％Ｎa2HPO4?12H2O0.2％0.2％溴麝香草酚藍(lán)溶液１.２％（體積分?jǐn)?shù)）蒸餾水配制，pH７.４第9頁，共10頁，2023年，2月20日，星期六含有碳酸鈣的ＧＹＰ培養(yǎng)基Ａ組分：葡萄糖１％，酵母膏１％，蛋白胨０.５％，牛肉膏０.２％，NAc?7H2O0.2％,微量元素液０.５％,50mg/ml的吐溫－８０水溶液１％．Ｂ組分：CaCO30.5％,瓊脂２.５％，注：1ml微量元素液中含有：MgSO4?7H2O

４０mg,MnSO4?4H2O2mg,

FeSO4?7H2O2mg,N