GZ041 檢驗(yàn)檢疫技術(shù)賽項(xiàng)技能賽題（模塊2 臨床基本檢驗(yàn)試卷）-2023年全國職業(yè)院校技能大賽擬設(shè)賽項(xiàng)賽題

全國職業(yè)院校檢驗(yàn)檢疫技術(shù)技能競賽臨床基本檢驗(yàn)-白細(xì)胞計數(shù)和分類試卷（高職組、本科組）一、競賽說明：1.主要考核醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)、衛(wèi)生檢驗(yàn)與檢疫技術(shù)專業(yè)學(xué)生規(guī)范操作血細(xì)胞觀察等專業(yè)能力。2.項(xiàng)目滿分100分，完成時30分鐘；3.獨(dú)立完成，不得相互詢問或討論。4.考核成績?yōu)椴僮鬟^程評分、操作結(jié)果和考核時間評分、職業(yè)素養(yǎng)之和。5．全部操作過程時間和操作后處理時間計入時間限額，超過規(guī)定時間將終止操作。二、實(shí)驗(yàn)原理1.血細(xì)胞分析儀工作原理：吸入一定體積的抗凝全血，血標(biāo)本在稀釋液和溶血劑的作用下制成一定濃度的白細(xì)胞懸液，根據(jù)流體力學(xué)鞘流技術(shù)原理，當(dāng)細(xì)胞通過儀器檢測器受到固定波長的激光照射，根據(jù)光的折射、反射、前向角等信號識別和計數(shù)細(xì)胞。分別在儀器內(nèi)WBC計數(shù)區(qū)和RBC/PLT計數(shù)區(qū)及Hb測定區(qū)檢測分析，得出每升血液中WBC、RBC、PLT和Hb結(jié)果，并通過內(nèi)置軟件運(yùn)算處理，計算出血細(xì)胞相關(guān)參數(shù)。2.手工白細(xì)胞計數(shù)原理：用白細(xì)胞稀釋液將抗凝全血稀釋一定的倍數(shù)，同時破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液注入血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下計數(shù).一定體積的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出1L血液中的白細(xì)胞總數(shù)。3.血涂片制備原理：將一小滴血液均勻涂在玻片上，呈單層分布，制成薄血片。用瑞氏染液進(jìn)行染色。細(xì)胞中的堿性物質(zhì)如RBC中的血紅蛋白及嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性顆粒等與酸性染料伊紅結(jié)合染成紅色；細(xì)胞中的酸性物質(zhì)如淋巴細(xì)胞胞質(zhì)及嗜堿性粒細(xì)胞質(zhì)中的嗜堿性顆粒等與堿性染料亞甲藍(lán)結(jié)合染成藍(lán)色；中性粒細(xì)胞的中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和亞甲藍(lán)均可結(jié)合，染成淡紫紅色。三、實(shí)驗(yàn)器材和試劑1.血細(xì)胞分析儀：五分類全自動血細(xì)胞分析儀，已大保養(yǎng)、已校準(zhǔn)，可打印出三種血細(xì)胞直方圖。2.數(shù)碼攝像顯微鏡、計算器等。3.耗材：一次性小試管、試管架、改良血細(xì)胞計數(shù)板、計數(shù)板專用血蓋片、1.00ml刻度吸管、洗耳球、20μl微量吸管、乳膠頭（有孔和無孔可自選）、干棉球、擦鏡紙、紗布等，簽字筆、記號筆、吸水紙、草稿紙、免洗消毒洗手液、面盆、抹布、廢液缸、銳器盒和醫(yī)用污物缸。4.試劑：（1）血細(xì)胞分析儀配套試劑：溶血素、稀釋液、清洗液等。（2）白細(xì)胞稀釋液：2%冰乙酸溶液中加入10g/L結(jié)晶紫（或亞甲藍(lán)）3滴過濾后使用。四、實(shí)驗(yàn)標(biāo)本血細(xì)胞分析儀全血質(zhì)控物、新鮮EDTA-K2抗凝全血。五、操作步驟1.血液常規(guī)檢驗(yàn)（儀器法）（1）開機(jī)前準(zhǔn)備：①檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期;試劑管路是否彎折，連接是否可靠。②各電源線是否正確連接。③廢液桶是否清空。④打印紙安裝是否正確，是否足夠。（以上內(nèi)容需逐項(xiàng)口頭報告）（2）開機(jī)：按廠家培訓(xùn)進(jìn)行，儀器初始化過程結(jié)束后，系統(tǒng)自動進(jìn)入“計數(shù)”界面。（賽時已開機(jī)選手需口頭報告是否開機(jī)）（3）稀釋液本底檢查：賽時已進(jìn)行本地檢測，（選手需口頭報告本底是否正常）。（4）檢測模式選擇：選全血模式。（選手需口頭報告檢測模式）（5）全血質(zhì)控物檢測與審核：質(zhì)控物放至室溫15～30min，平衡至室溫，手動混勻質(zhì)控物。結(jié)果在控時方可檢測標(biāo)本。（賽時質(zhì)控已做需選手口頭報告質(zhì)控在控情況）（6）標(biāo)本檢測與結(jié)果打?。喝〕鰳?biāo)本觀察有無凝集，無凝集時上下顛倒混勻5～8次，上機(jī)檢測并打印報告，檢測后標(biāo)本放原位。（7）關(guān)機(jī)：一般以先清洗后關(guān)機(jī)為原則。（賽時無需關(guān)機(jī)但需口頭報告清洗操作）2．白細(xì)胞計數(shù)（手工法）（1）準(zhǔn)備稀釋液取小試管1支，加入白細(xì)胞稀釋液0.38ml。（2）取血用微量吸管準(zhǔn)確吸取EDTA-K2抗凝全血20μl。（3）稀釋擦去管外余血，將其插入小試管中稀釋液底部，輕輕將血放出，并吸取上清液漱洗吸管2～3次，注意不能沖渾稀釋液，最后輕搖試管，使之均勻。（4）充池檢查計數(shù)板和血蓋片，必要時用擦鏡紙擦拭干凈，將血蓋片蓋在計數(shù)板上，待紅細(xì)胞完全破壞，用微量吸管吸取混勻的白細(xì)胞懸液，充入計數(shù)池中，靜置2～3min，待血細(xì)胞下沉。（5）計數(shù)用低倍鏡計數(shù)四角4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，對壓線的白細(xì)胞，按“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則計數(shù)。（此處顯微鏡已連電腦屏幕，選手需按評委指令把相應(yīng)的計數(shù)區(qū)域調(diào)到視野中央便于評委核對）3．血涂片制備及觀察（1）血涂片制備選擇載玻片，正確編號（場號+工位號+標(biāo)本號），左手拇指、食指和中指持載玻片的兩端，右手拇指、食指和中指握住推片的兩邊，將推片的前端下緣放于血滴的前方，然后從血滴前方向后慢慢移動，接觸血滴后左右輕輕擺動，使血液沿推片下緣散開，以30°～45°快速、平穩(wěn)地將推片向前推進(jìn)至載玻片的另一端，則血液在載玻片上形成一厚薄適宜，頭、體、尾分明，兩端和兩側(cè)留有空隙的舌型血膜。（2）瑞氏染色①加Ⅰ液制備好的血涂片充分干燥后，用蠟筆在血膜兩端畫線，以防染色時染液外溢。然后將血涂片平放于染色架上，滴加Ⅰ液3～5滴，以覆蓋整個血膜為度，靜置0.5～1min。②加Ⅱ液滴加約與Ⅰ液等量的Ⅱ液，輕輕搖動血涂片或用吸耳球?qū)?zhǔn)血涂片吹氣，使Ⅰ液和Ⅱ液充分混合并完全覆蓋血膜，室溫下染色5～10min。③沖洗平持血涂片，用流水緩緩沖去染液，直至沖洗干凈。④干燥（可用吸水紙）（3）白細(xì)胞分類觀察①用10×物鏡觀察血涂片全片，觀察染色及細(xì)胞分布情況。（顯微鏡連電腦屏幕）②在體尾交界處、100×物鏡下選擇血涂片細(xì)胞分布均勻、著色良好的區(qū)域，按一定的方向順序找到不少于三種白細(xì)胞，如：中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞，請評委復(fù)核。全國職業(yè)院校檢驗(yàn)檢疫技術(shù)技能競賽臨床基本檢驗(yàn)-白細(xì)胞計數(shù)和分類答題卷（高職組、本科組）一、血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果1.書寫標(biāo)本編號、粘貼檢測結(jié)果檢驗(yàn)者簽名（寫選手工位號）報告日期得分裁判簽名二、手工法白細(xì)胞計數(shù)1．?dāng)?shù)據(jù)記錄在下列空格中寫上與計數(shù)板位置（以免與裁判計數(shù)不對應(yīng)）相應(yīng)大方格的白細(xì)胞數(shù)。并計算出白細(xì)胞總數(shù)。（裁判抽查對角2個大方格WBC數(shù),與選手相應(yīng)大方格內(nèi)WBC結(jié)果進(jìn)行比較，根據(jù)誤差進(jìn)行扣分）1

2432．計算白細(xì)胞濃度（寫出計算公式及計算過程）（取小數(shù)點(diǎn)后2