微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制第1頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六前言

在實(shí)際工作中存在許多復(fù)雜因素影響微生物學(xué)檢驗(yàn)，可能給檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)偏差甚至錯(cuò)誤，因此必須對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的諸多因素采取控制手段保證檢驗(yàn)結(jié)果的正確性，不斷完善微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。

第2頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六

主要內(nèi)容1檢驗(yàn)人員

2儀器、設(shè)備

3檢驗(yàn)培養(yǎng)基、試劑

4檢驗(yàn)環(huán)境

5采樣

6樣品的接收和預(yù)處理

7檢驗(yàn)質(zhì)量

8校驗(yàn)的執(zhí)行

9參考菌株及其保存

10實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制11檢驗(yàn)報(bào)告及結(jié)果質(zhì)量控制第3頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六1檢驗(yàn)人員

（1）微生物檢驗(yàn)不能完全依賴全自動(dòng)鑒定儀器，檢驗(yàn)工作中每一步驟均需要有高度的主觀分析和判斷能力，與個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)、技能和微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)水平密切相關(guān)。（2）除要求微生物檢驗(yàn)人員必須具備嚴(yán)肅認(rèn)真的工作態(tài)度、精密細(xì)致的觀察和操作習(xí)慣，注重個(gè)人衛(wèi)生外，還必須熟練掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)。

第4頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六1檢驗(yàn)人員

（3）檢驗(yàn)人員應(yīng)執(zhí)行上崗前培訓(xùn)制度，上崗前培訓(xùn)合格方能上崗操作，還要主動(dòng)參加學(xué)習(xí)、培訓(xùn)、講座，學(xué)習(xí)新技術(shù)，掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)方法、標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法律法規(guī)；（4）參與編寫測(cè)試程序及儀器操作程序，學(xué)習(xí)質(zhì)量保證體系知識(shí)和計(jì)量學(xué)基本知識(shí)；

第5頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六1檢驗(yàn)人員

（5）參加各類水平測(cè)試和盲樣測(cè)試，提高檢測(cè)水平和分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力；（6）微生物學(xué)檢驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期對(duì)檢驗(yàn)人員進(jìn)行專業(yè)知識(shí)和操作熟練程度的考核，提高檢驗(yàn)人員的素質(zhì)。

第6頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2儀器、設(shè)備

大型微生物檢驗(yàn)室的主要儀器及設(shè)備包括：無(wú)菌室、微生物自動(dòng)鑒定儀、微生物快速初篩儀、顯微鏡、菌落計(jì)數(shù)器、高壓滅菌器、干熱滅菌器、離心機(jī)、蒸餾設(shè)備、培養(yǎng)箱、厭氧箱、水浴箱、冰箱、超凈工作臺(tái)、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、PCR儀、電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)等。

第7頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2儀器、設(shè)備

要求所有的儀器和設(shè)備均應(yīng)按照生產(chǎn)廠家提供的方法和有關(guān)規(guī)定正確使用。需要強(qiáng)制性定期檢定的儀器和設(shè)備，經(jīng)符合資歷的計(jì)量部門校準(zhǔn)合格后方可使用。對(duì)于常用的貴重儀器和設(shè)備，在使用前應(yīng)加以檢查，使用后要登記，要做到定期維護(hù)，以保證儀器處于良好的工作狀態(tài)。

第8頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2.1高壓滅菌器（1）操作人員應(yīng)了解蒸氣滅菌的原理并遵守操作規(guī)則。（2）放入的滅菌物品不宜放得過(guò)擠。（3）使用時(shí)，放入生物指示條或化學(xué)指示條。（4）生物指標(biāo)為嗜熱脂肪芽胞桿菌的耐受性（121℃，15min）。（5）滅菌后，再培養(yǎng)觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。（6）也可采用水銀留點(diǎn)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。第9頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2.2干熱滅菌器（1）應(yīng)遵守操作規(guī)則，放入箱內(nèi)滅菌的器皿不宜放得過(guò)擠，器皿與內(nèi)層底板不能直接接觸。（2）滅菌完畢，不能立即開門取物，須關(guān)閉電源，待溫度下降至50℃以下再開門取物。（3）帶有紙包裝的物品滅菌溫度不能超過(guò)160℃。第10頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2.3培養(yǎng)箱（1）箱內(nèi)不應(yīng)放入過(guò)熱或過(guò)冷的物品，取放物品時(shí)，應(yīng)隨手關(guān)閉箱門，以維持恒溫。（2）如培養(yǎng)物不慎潑灑到箱內(nèi)，應(yīng)馬上清潔，并采取必要的消毒措施。（3）培養(yǎng)物不宜與培養(yǎng)箱最底層直接接觸。（4）必要時(shí)，可放入裝水容器以維持箱內(nèi)的濕度。（5）每天記錄溫度及濕度的變化，觀察培養(yǎng)箱內(nèi)溫度與設(shè)定溫度是否一致。在兩次計(jì)量周期之間要進(jìn)行至少一次內(nèi)部校準(zhǔn)。第11頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2.5顯微鏡按使用說(shuō)明進(jìn)行操作。使用油鏡后先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，再用沾上二甲苯的擦鏡紙擦拭，最后用干凈擦鏡紙擦干。（建議使用無(wú)水乙醇+乙醚）注意防塵，保持清潔、干燥。第12頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2儀器、設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室需要使用的無(wú)菌器具應(yīng)能正確實(shí)施滅菌，無(wú)菌器具和器皿有明顯標(biāo)識(shí)，以便與非無(wú)菌器具和器皿加以區(qū)別。

第13頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3檢驗(yàn)培養(yǎng)基、試劑

3.1培養(yǎng)基微生物學(xué)檢驗(yàn)所用干粉培養(yǎng)基，必須由專業(yè)廠家生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量必須符合有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保存也應(yīng)符合要求，防止潮解、結(jié)塊等。干粉培養(yǎng)基易受潮變性，需要重視。一旦變質(zhì)，不得再使用。

第14頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基為保證干粉培養(yǎng)基質(zhì)量指標(biāo)，在實(shí)際工作中應(yīng)注意：（1）加強(qiáng)包裝的密封性能；（2）使用時(shí)盡量縮短開蓋時(shí)間；（3）干粉培養(yǎng)基一般放在通風(fēng)、干燥、避光的環(huán)境中保存，對(duì)于易受潮的品種，啟用后宜放入干燥器中保存；（4）由于配制水分不同、啟用次數(shù)或時(shí)間增加，干粉培養(yǎng)基的pH值可能會(huì)有所變化，應(yīng)隨時(shí)略加調(diào)整。第15頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

干粉培養(yǎng)基所要求的理化指標(biāo)，可以從下面幾個(gè)方面進(jìn)行初步檢查：（1）干粉培養(yǎng)基應(yīng)為疏松顆粒狀或粉末狀，顏色正常、一致；（2）溶解后清徹透明，無(wú)沉淀；（3）45℃時(shí)pH值為7.2士0.2；熔化溫度70℃左右，凝固溫度為35-40℃；（4）水分含量符合標(biāo)準(zhǔn)。第16頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

商品化培養(yǎng)基的平皿應(yīng)對(duì)所用培養(yǎng)基做外觀檢查，如培養(yǎng)基是否開裂、平皿有無(wú)破碎、血平板有否溶血、有否冰凍、灌注是否均勻、有否過(guò)多的氣泡，清晰度和有無(wú)污染也需要檢查。培養(yǎng)基平皿的制備商必須按照標(biāo)準(zhǔn)隨產(chǎn)品附上書面鑒定資料，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)將此鑒定書保存一定時(shí)期。第17頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

實(shí)驗(yàn)室自制培養(yǎng)基應(yīng)有質(zhì)量控制，包括：

制備數(shù)量制備日期有效日期制備者姓名還必須檢查：

培養(yǎng)基顏色均勻度厚度光潔度溶血與否有否過(guò)多氣泡是否污染

第18頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

培養(yǎng)基的配制應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行操作，并做好配制記錄。為保證培養(yǎng)基質(zhì)量，在配制時(shí)應(yīng)注意：

制備培養(yǎng)基必須在玻璃容器、搪瓷缸中進(jìn)行，如用銅、鐵等金屬器皿，可能會(huì)對(duì)微生物生長(zhǎng)有毒害作用。配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)按檢驗(yàn)項(xiàng)目規(guī)定的配方添加，不得隨意增減或更改培養(yǎng)基成分。

第19頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

使用專用的角匙取藥品，避免交叉污染。使用蒸餾水或去離子水配制，不得使用自來(lái)水，因其中含有氯等抗菌物質(zhì)。不同類型的微生物對(duì)pH值的要求不同，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)測(cè)定pH值，如測(cè)定結(jié)果與所要求的pH值不符，則用lmol/LNaOH或lmol/LHCl溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。

第20頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

制備好的培養(yǎng)基應(yīng)及時(shí)使用，使用不完的，如無(wú)特殊需求，可室溫或2-8℃冷藏保存。

如用塑料袋密封，保存期可延長(zhǎng)，發(fā)生變質(zhì)等被污染跡象或干裂現(xiàn)象的則不能再使用。

第21頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六表1培養(yǎng)基在2-8℃冷藏條件下保存的有效期培養(yǎng)基種類保存條件有效期平板培養(yǎng)基不裝塑料袋2周塑料袋密封8周試管（棉塞）培養(yǎng)基不裝塑料袋2周-1個(gè)月塑料袋密封2個(gè)月試管（螺旋蓋）培養(yǎng)基不裝塑料袋2個(gè)月塑料袋密封4個(gè)月第22頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

每批自制培養(yǎng)基必須做無(wú)菌試驗(yàn)和規(guī)定的質(zhì)控菌株測(cè)試，對(duì)各種不同培養(yǎng)基規(guī)定了專門的質(zhì)控測(cè)試菌株。無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)可將滅菌后的培養(yǎng)基放入37℃的培養(yǎng)箱培養(yǎng)24～48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。第23頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.1培養(yǎng)基

效果試驗(yàn)是指按不同的培養(yǎng)基接種相應(yīng)的菌株，觀察細(xì)菌的發(fā)育、菌落形態(tài)、色素、溶血等特征，據(jù)此判斷培養(yǎng)基是否符合要求。第24頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.2檢驗(yàn)試劑及藥品檢驗(yàn)藥品、試劑須在分析純(AR)級(jí)以上。在利用藥品、試劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液、染色液、緩沖液及其他試劑時(shí)應(yīng)注意：(1)按要求選取溶劑；(2)用帶塞的試劑瓶盛裝；(3)易分解的試劑宜用棕色瓶；(4)揮發(fā)性的試劑其瓶口應(yīng)予密封；(5)如發(fā)現(xiàn)溶液有變質(zhì)現(xiàn)象，應(yīng)停止使用；(6)標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)定時(shí)標(biāo)定。

第25頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.2檢驗(yàn)試劑及藥品

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保存的試劑應(yīng)定期進(jìn)行清點(diǎn)，過(guò)期或變質(zhì)的試劑應(yīng)棄去；注意試劑在保存條件下的使用有效期以及最佳保存方式。第26頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.3染色液染色液配制后，必須選用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)菌株作陽(yáng)性及陰性對(duì)照來(lái)鑒定染色液的性能，如革蘭氏染色選用枯草桿菌、葡萄球菌和大腸桿菌作為對(duì)照，鞭毛染色液采用普通變形桿菌和福氏志賀氏菌作為對(duì)照。對(duì)經(jīng)驗(yàn)不足者，每次染色時(shí)均應(yīng)作對(duì)照染色。第27頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.4診斷血清沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、致病性大腸埃希氏菌等診斷血清，使用時(shí)應(yīng)注意有效期及效價(jià)。每月用相應(yīng)的菌株檢查其有效性，過(guò)期血清和變混濁的血清不應(yīng)繼續(xù)使用。診斷血清一般放普通冰箱內(nèi)保存，使用時(shí)應(yīng)以最短的時(shí)間暴露于空氣中。最好備有兩個(gè)生物制品研究所生產(chǎn)的診斷血清，以便互相對(duì)照，檢查其可靠性。第28頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六4檢驗(yàn)環(huán)境

微生物學(xué)檢驗(yàn)均在檢驗(yàn)室進(jìn)行，既不能讓微生物散布出去，又必須使樣品不再受污染，更不能允許病原菌感染檢驗(yàn)人員，為此，檢驗(yàn)室的環(huán)境要求和衛(wèi)生管理制度非常重要。實(shí)驗(yàn)室總體布局和各部位的安排應(yīng)減少潛在的對(duì)樣本的污染和對(duì)人員的危害。第29頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六4檢驗(yàn)環(huán)境微生物學(xué)檢驗(yàn)室要求內(nèi)外環(huán)境整潔，布局合理，操作區(qū)域與辦公區(qū)域分開。洗滌室、培養(yǎng)室、消毒間、無(wú)菌室應(yīng)分開，設(shè)有專室。無(wú)菌室要設(shè)有套間或緩沖間，最好設(shè)推拉門，以防空氣振蕩過(guò)大。微生物檢驗(yàn)室應(yīng)備有自動(dòng)或腳踩式洗手池和固定的消毒設(shè)施。第30頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六4檢驗(yàn)環(huán)境微生物檢驗(yàn)室應(yīng)制定合理、完善的衛(wèi)生管理制度，工作人員必須每天堅(jiān)持做好環(huán)境衛(wèi)生工作，防止灰塵飛揚(yáng)，定期對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行消毒。對(duì)經(jīng)培養(yǎng)后的培養(yǎng)基、培養(yǎng)液、用過(guò)的檢樣及其他廢棄物，應(yīng)投入指定的容器內(nèi)，經(jīng)無(wú)害化處理后方可排放，禁止亂扔亂放，以防某些病原微生物散布。第31頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六4檢驗(yàn)環(huán)境對(duì)需在無(wú)菌條件下工作的區(qū)域應(yīng)以明確標(biāo)識(shí)并能有效地控制、監(jiān)測(cè)和記錄；檢驗(yàn)人員應(yīng)待無(wú)菌室過(guò)濾凈化裝置開機(jī)0.5－1h后，再進(jìn)入無(wú)菌室工作；每天記錄環(huán)境檢測(cè)報(bào)告，并經(jīng)常進(jìn)行空氣落菌實(shí)驗(yàn)：空氣落菌以營(yíng)養(yǎng)瓊脂開上皿15min后蓋上蓋子，36±1℃培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)；定期對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行室內(nèi)環(huán)境消毒，空氣消毒可采用甲醛熏蒸法，甲醛與高錳酸鉀比例2:1。第32頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六5采樣

（1）采樣工具和容器宜選用耐消毒滅菌的材料，如玻璃、陶瓷、搪瓷、鋁、不銹鋼等，使用之前應(yīng)進(jìn)行認(rèn)真清洗、干燥和相應(yīng)的滅菌處理。采樣工具和容器不能用消毒劑消毒，樣品中也不得加入防腐劑，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確性。（2）在嚴(yán)格無(wú)菌操作的條件下，按國(guó)家規(guī)定的樣品采集標(biāo)準(zhǔn)均勻而準(zhǔn)確地取樣，并及時(shí)封口，使樣品具有準(zhǔn)確性和代表性。第33頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六5采樣

（3）每件樣品封口后，貼上標(biāo)簽，做好記錄(如樣品名稱、采樣地點(diǎn)、時(shí)間、數(shù)量、儲(chǔ)藏情況、采集或送檢單位及姓名、采樣現(xiàn)場(chǎng)溫度、濕度及衛(wèi)生狀況等)。采集后的樣品，一般可保存在2-8℃的環(huán)境中，如果樣品是冷凍食品，應(yīng)保持在冷凍狀態(tài)，并及時(shí)送檢。（4）采樣數(shù)量不能少于全部檢驗(yàn)需要量的3倍，以供檢驗(yàn)、復(fù)檢、備查。

第34頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六6樣品的接收和預(yù)處理

樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)檢查樣品標(biāo)記是否與樣品相符，樣品包裝狀況是否正常。若存在下述情況，應(yīng)考慮拒收樣品：（1）抽樣后樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間太遲，使其不能在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)；（2）樣品溫度太高；（3）在轉(zhuǎn)運(yùn)中樣品遭到破損或受到污染。

第35頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六6樣品的接收和預(yù)處理

若對(duì)這些樣品進(jìn)行分析，應(yīng)將情況記錄并在分析報(bào)告中加以說(shuō)明。檢驗(yàn)前，冷凍食品應(yīng)在最高溫度為4℃下解凍，不超過(guò)18h；較小、易解凍的樣品可放置于最高溫度為37℃的恒溫箱內(nèi)最長(zhǎng)達(dá)15min。第36頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六6樣品的接收和預(yù)處理

微生物學(xué)檢驗(yàn)室在收到樣品后，必須及時(shí)準(zhǔn)備條件、組織力量進(jìn)行檢驗(yàn)。送檢的樣品，一般需保持在2～8℃的環(huán)境中，對(duì)于冷凍食品應(yīng)保持在冷凍狀態(tài)，直到檢驗(yàn)為止。

第37頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六6樣品的接收和預(yù)處理

凍藏的樣品應(yīng)盡快放在冷藏的溫度下解凍，亦可放在適宜溫度(37℃)下短時(shí)間(15min)使其解凍，但溫度必須較低，以防止病原菌死亡。凍結(jié)樣品化凍時(shí)，必須小心放置于細(xì)菌生長(zhǎng)溫度之下以免使細(xì)菌數(shù)量增加。從容器中取出樣品、稱取樣品應(yīng)注意無(wú)菌操作。第38頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量

除按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)所需檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)外，在實(shí)際工作中還應(yīng)注意以下幾個(gè)方面，否則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性：第39頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量

（1）在定量檢驗(yàn)時(shí)用重量法還是用體積法，檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)有誤差，因?yàn)楸戎夭坏扔?的樣品，1mL和1g的檢驗(yàn)結(jié)果絕不會(huì)相等。一般固態(tài)的樣品宜用重量法，液體樣品宜用體積法。但對(duì)于粘性液體(如酸牛奶)，如用體積法，會(huì)粘附一定量的樣品在吸管上，因此此類樣品最好用重量法。

第40頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量（2）如檢樣需用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水稀釋，則最好用勻質(zhì)器或組織搗碎機(jī)，以8000～10000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速處理1min，制成均勻的菌懸液。第41頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量（3）樣品稀釋時(shí)，常會(huì)滯留少量樣品在吸管內(nèi)外，應(yīng)多加注意。吸管插入樣品或稀釋液中應(yīng)深淺一致，否則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果；吸入液體后，應(yīng)沿管壁慢慢注入遞增的稀釋液中，特別注意此時(shí)吸管尖端切不可碰到稀釋液中。

第42頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量（4）在培養(yǎng)基傾注入檢樣、菌懸液時(shí)，注意培養(yǎng)基溫度宜在45-50℃之間，并使培養(yǎng)基與檢樣、菌懸液充分混合。（5）微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)根據(jù)要求選擇正確的培養(yǎng)溫度和時(shí)間。

第43頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量

（6）應(yīng)用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水作空白對(duì)照，如果在空白對(duì)照中檢出細(xì)菌，則可認(rèn)為培養(yǎng)基質(zhì)量存在問(wèn)題或在操作過(guò)程中存在污染情況。另外，采用標(biāo)準(zhǔn)菌種作陽(yáng)性對(duì)照，觀察培養(yǎng)基的質(zhì)量情況。第44頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六7檢驗(yàn)質(zhì)量（7）整個(gè)檢驗(yàn)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。（8）及時(shí)檢查結(jié)果，做好原始數(shù)據(jù)記錄。

第45頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六8校驗(yàn)的執(zhí)行

儀器設(shè)備檔案應(yīng)包含以下內(nèi)容:（1）儀器名稱、編號(hào)、啟用日期。（2）常規(guī)校驗(yàn)的方法和校驗(yàn)周期。（3）可以接受的操作范圍。（4）儀器功能上的缺陷，如有克服缺陷的步驟應(yīng)詳細(xì)列出。（5）常規(guī)維修的日期(按制造商的推薦意見)

。第46頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六8校驗(yàn)的執(zhí)行

儀器只要不報(bào)廢，維修記錄均應(yīng)保存。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)預(yù)先制定儀器校驗(yàn)計(jì)劃，并按計(jì)劃對(duì)需要強(qiáng)制性定期檢定的儀器和設(shè)備經(jīng)符合資歷計(jì)量部門校驗(yàn)，根據(jù)校驗(yàn)結(jié)果決定對(duì)儀器設(shè)備繼續(xù)使用、降級(jí)使用或停止使用。第47頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六8校驗(yàn)的執(zhí)行

實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)需要對(duì)部分儀器進(jìn)行自校以節(jié)約成本，但用于自校的計(jì)量工具必須經(jīng)過(guò)計(jì)量部門校準(zhǔn)方可使用。

第48頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六9標(biāo)準(zhǔn)菌株及其保存

標(biāo)準(zhǔn)菌株可以從國(guó)際菌種保藏中心（ATCC）、國(guó)內(nèi)具有資質(zhì)菌種保藏中心（CMCC、AS、MIG等等）或室間質(zhì)控活動(dòng)中獲得，準(zhǔn)確鑒定過(guò)的分離株也可使用。實(shí)驗(yàn)室要準(zhǔn)備好足夠種類和數(shù)量的標(biāo)準(zhǔn)菌株，滿足培養(yǎng)基、試劑盒和試劑質(zhì)量測(cè)試的需要。

第49頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存

保存菌株要定期傳代，注意無(wú)菌操作，使菌株不污染、不死亡、不丟失；應(yīng)設(shè)專人妥善保管，菌株保存箱應(yīng)加鎖放置適宜環(huán)境，取出使用應(yīng)登記；第50頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存

保存菌株應(yīng)建冊(cè)登記，基本項(xiàng)目應(yīng)包括菌種名稱、分離來(lái)源、分離日期、傳代日期、保存方法、主要性狀、保管者、領(lǐng)用者等；對(duì)保存菌種，經(jīng)傳代數(shù)次后應(yīng)進(jìn)行一次系統(tǒng)生化反應(yīng)、血清學(xué)特性等生物學(xué)性狀觀察，檢查其是否發(fā)生變異。第51頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存常見的參考菌株保存方法如下：第52頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六

細(xì)菌(1)營(yíng)養(yǎng)要求不高的需氧細(xì)菌在胰胨大豆瓊脂斜面上能存活1年。(2)需氧或厭氧菌的長(zhǎng)期儲(chǔ)存需冷凍干燥，或存放在-70℃冰箱。(3)營(yíng)養(yǎng)要求不高的凍干菌種每隔5年要解凍分離重新凍干，好氧菌每隔3年重新凍干。(4)細(xì)菌低溫冰凍保存時(shí)可懸浮于消毒去脂牛奶、含15%甘油的胰胨大豆肉湯或無(wú)菌馬血中。第53頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六

真菌(1)酵母菌按營(yíng)養(yǎng)要求不高的細(xì)菌同樣處理。(2)霉菌在馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）斜面上，于4℃儲(chǔ)存可達(dá)6個(gè)月，斜面上覆蓋消毒石蠟油可在室溫下較長(zhǎng)時(shí)間存放。第54頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六10實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制

10.1內(nèi)部質(zhì)量控制為保證實(shí)驗(yàn)室連續(xù)評(píng)價(jià)結(jié)果的可靠性和精密度，必須對(duì)所用方法的重復(fù)性及再現(xiàn)性定期測(cè)定。對(duì)于不同的控制系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室必須建立限值，超過(guò)限值應(yīng)采取糾偏措施。第55頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六10.1內(nèi)部質(zhì)量控制實(shí)踐中內(nèi)部質(zhì)量控制可包括：（1）系統(tǒng)地使用一式雙份的菌落計(jì)數(shù)測(cè)定；（2）由同一檢驗(yàn)人員和幾個(gè)檢驗(yàn)人員作平行樣；（3）定期或不定期進(jìn)行盲樣測(cè)試。

（實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部比對(duì)試驗(yàn)）

第56頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六10.2外部質(zhì)量控制

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動(dòng)，對(duì)其開展的每一項(xiàng)檢測(cè)均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。（實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)）對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室或管理機(jī)構(gòu)發(fā)出的測(cè)試樣品應(yīng)嚴(yán)格地當(dāng)作普通樣品一樣處理，這樣一種方法有助于實(shí)驗(yàn)室每天測(cè)試的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，是對(duì)實(shí)驗(yàn)室所用的方法、試劑、設(shè)備和人員能力的測(cè)試。實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證

（CNAS、CNCA、CMA等組織的比對(duì)試驗(yàn)）

第57頁(yè)，共64頁(yè)，2023年，2月20日，星期六10實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制

從室間樣品測(cè)試中的錯(cuò)誤可以發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的不足之處，對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)、教育，可以提高實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量。對(duì)反饋的室間測(cè)定評(píng)級(jí)中存在的問(wèn)題應(yīng)當(dāng)召集全體人員討論，改進(jìn)措施(包括方法的改變、員工的改變、員工的再訓(xùn)練、培養(yǎng)基和試劑購(gòu)買來(lái)源的更換等)