農(nóng)藥生物活性測定實驗指導(精)-2023修改整理

千里之行，始于足下讓知識帶有溫度。第第2頁/共2頁精品文檔推薦農(nóng)藥生物活性測定實驗指導(精)農(nóng)藥生物活性測定

試驗指導

游紅編

試驗一供試目標昆蟲的飼養(yǎng)

——棉鈴蟲的飼養(yǎng)

一、試驗目的：

1、明確標準目標昆蟲飼養(yǎng)在生物測定中的意義；

2、了解常見目標昆蟲的飼養(yǎng)條件及辦法；

3、學習棉鈴蟲的飼養(yǎng)辦法。

二、試驗原理：

殺蟲劑生物測定必需使用大量、群體整齊、健康程度全都，齡期全都的標準目標昆蟲，才干保證對殺蟲劑毒力的反應精確?????。因此，舉行殺蟲劑生物測定必需采納人工飼養(yǎng)標準目標昆蟲，以保證供試昆蟲的充分供給，這是農(nóng)藥毒力實驗工作中的最基本的組成部分。

飼養(yǎng)目標昆蟲的種類，除采納農(nóng)作物害蟲外，倉庫害蟲、衛(wèi)生害蟲及其他繁殖力強，便于飼養(yǎng)的昆蟲也可采納，通過飼養(yǎng)條件的控制，促使供試目標昆蟲盡量達到生理情況全都，以削減實驗中的誤差。

棉鈴蟲（HelicoverpaarmigeraH.）屬鱗翅目夜蛾科。食性雜，可長年飼養(yǎng)。但因幼蟲在三齡期以后有互相殘殺習性，故必需單頭飼養(yǎng)。對該蟲可采納自然?植物飼料，如棉蕾鈴、青豌豆、新奇玉米和辣椒等。若延續(xù)大量飼養(yǎng)，須用人工飼養(yǎng)。

三、主要儀器及試材：

1、試蟲：棉鈴蟲；

2、飼養(yǎng)用具：養(yǎng)蟲室，培養(yǎng)皿（15cm），培養(yǎng)皿（5cm）,養(yǎng)蟲缸，紗布等。

3、飼料：

（1）、飼料組成：

熟大豆粉（g）20.0玉米粉（g）30.0

大麥粉（g）30.0抗壞血酸（g）1.0

干酵母（g）8.0瓊脂（g）3.5

苯甲酸鈉（g）0.8棉油(ml)0.5

36％醋酸(ml)6.010％甲醛(ml)1.0

水(ml)200

(2)、配制辦法：

取總水量30％的水，加入玉米粉等成分攪拌；另取70％的水，以溶解瓊脂，冷卻至70℃時與上述成分混合攪拌；飼料勻稱倒入培養(yǎng)皿（15cm）內(nèi)，厚度1.0——1.5cm，冷卻后備用。

四、試驗辦法與步驟：

1、飼養(yǎng)條件：

養(yǎng)蟲室溫度保持26——28℃，相對濕度60%——70%，12小時間照。

2、飼養(yǎng)辦法：

（1）、在培養(yǎng)皿（16cm）放入約0.3——0.5mm厚的飼料若干塊，將附有卵塊的紗布放入皿內(nèi)，用黑布將皿口封住，布上壓玻璃板，缸下部對著光源，孵化的幼蟲可很快到飼料上取食。（2）、待幼蟲長到2齡后，移入裝有人工飼料的培養(yǎng)皿（5cm）內(nèi)，每皿一頭，幼蟲在內(nèi)取

食，直至老熟。

（3）、幼蟲進入預蛹期，即轉移到裝有無菌細土的養(yǎng)蟲缸內(nèi)，必需保持潮濕，以利入土化蛹和蛹的存活。

（4）、成蟲羽化后，雌雄配對，放入養(yǎng)蟲缸內(nèi)，缸內(nèi)放一個內(nèi)有10%蜂蜜液的培養(yǎng)皿，皿內(nèi)放脫脂棉，以便蛾子從潤濕的棉上吸取蜂蜜。養(yǎng)蟲缸上蒙上紗布，并用橡皮筋扎好。蛾子在缸內(nèi)交尾產(chǎn)卵，每日將產(chǎn)于紗布上的卵連同紗布取下，并換新紗布和蜂蜜。

五、試驗注重事項：

1、注重飼養(yǎng)室及飼養(yǎng)用具的清潔、消毒。

2、注重飼養(yǎng)環(huán)境的控制，棉鈴蟲的幼蟲在3齡后具有自相殘殺習性，應單獨飼養(yǎng)。

3、在棉鈴蟲飼養(yǎng)過程中，應注重準時更換新奇的飼料，以防飼料變干。配制好的飼料必需

在低溫下儲存。

六、試驗結果處理：

1、每日觀看記錄棉鈴蟲的取食、生長狀況，并仔細填寫觀看記錄。

2、觀看棉鈴蟲的蛻皮生長狀況，記錄各齡期的生長時光長短及試蟲的平均體重。

七、思量題：

1、標準目標昆蟲的飼養(yǎng)在生物測定工作中有何意義？

2、在棉鈴蟲的飼養(yǎng)過程中應當注重那些問題？并對其飼養(yǎng)條件和辦法提出改進意見。

試驗二殺蟲劑初步毒力測定

一、試驗目的：

1、通過本實驗學習把握殺蟲劑室內(nèi)毒力初篩實驗的操作技術。

2、觀看昆蟲中毒征象特征——高興、擊倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。

3、明確標準目標昆蟲代表性的有用意義。

二、試驗原理：

為了初步確定某些化學物質(zhì)是否對某些害蟲具有毒殺能力，應首先舉行一次淘汰實驗，或叫初篩實驗，又稱初步綜合殺蟲毒力實驗。這種實驗不涉及毒殺方式和毒殺能力的大小，因此，不嚴格限制用藥量和勻稱度，普通采納較高的濃度，盡量發(fā)揮綜合毒效（包括胃毒、觸殺、薰蒸等作用）。

普通農(nóng)藥初篩毒力測定辦法，按照試蟲對象不同，多采納浸漬法、噴霧法、噴粉法、飼料混藥法等。每處理需試蟲15-30頭，可以不設重復，每次實驗均要設空白對比，施藥時要注重各處理用藥等量勻稱全都，設置溫度普通在20-28℃，相對濕度60-80%，通氣良好。普通液劑在0.1-1%，粉劑1-10%。

三、主要儀器及試材：

1、試蟲：小菜蛾（3齡）。

2、供試藥劑：藥劑A、藥劑B。

3、實驗器材：養(yǎng)蟲室、potter噴霧塔、量筒、鑷子、吸管、燒杯、培養(yǎng)皿、毛筆等。

四、試驗辦法與步驟

1、藥劑配制：將A、B藥劑配成0.1%的溶液備用。

2、試蟲移?。?/p>

取小菜蛾3齡幼蟲集中混勻后，用毛筆刷入培養(yǎng)皿，每處理10頭，重復一次。

3、噴布質(zhì)量檢定

用9cm的白色園紙片來檢查噴霧霧滴的大小和噴布是否勻稱全都，如不符合要求，可調(diào)整噴頭及位置，使噴布質(zhì)量達到基本要求。

4、處理辦法：

采納噴霧法，選用potter噴霧塔，噴布藥液前，用清水及欲噴灑的藥液大量噴布。換藥前需將受藥盤及霧化室底部用布充分擦凈，然后大量噴布實驗的藥液。

在接有小菜蛾的培養(yǎng)皿中加入一定新奇菜葉后，用移液管吸取3ml藥液舉行噴布，約10秒后，待藥液所有沉降，取出培養(yǎng)皿，做好標記，空白對比只噴灑清水。待藥劑干后，將試蟲連同飼料置于恢復室內(nèi)培養(yǎng)24小時后檢查結果。

五、試驗注重事項：

1、目標試蟲的挑選：應選用具有一定的代表性及經(jīng)濟價值，耐藥性較強、生長茁壯、自然

死亡率底，蟲齡蟲體大小全都，最好采納人工飼養(yǎng)的試蟲。

2、環(huán)境條件的挑選：溫度在20-28℃，相對濕度在60%-80%，通氣良好。

3、處理設計：每處理需試蟲15-30頭，可以不設重復，每次實驗均要設空白對比，施藥時

要注重各處理用藥等量勻稱全都。

六、試驗結果處理：

處理24小時，48小時后，檢查死活蟲數(shù)，計算死亡率及校正死亡率，并比較不同藥劑的毒力大小。試蟲死活標準，普通以能正?；顒踊蝻w行的或能正常行動的作為活蟲，其余中毒的均為死蟲。

%

1001%

100?--=?=

對比死亡率對比死亡率

處理死亡率校正死亡率總蟲數(shù)死蟲數(shù)

死亡率

表1

殺蟲劑初步毒力實驗記載表實驗藥劑濃度(或劑量)

處理辦法

供試昆蟲

試蟲數(shù)

處理24小時處理48小時死蟲數(shù)

死亡率(%)

校正死亡率(%)

死蟲數(shù)

死亡率(%)

校正死亡率(%)

七、

思量題：

1、將篩選藥劑的毒力實驗結果記入殺蟲劑初步毒力實驗記載表，并寫成報告。

2、殺蟲劑初步毒力測定在殺蟲劑的篩選中有什么重要意義。

試驗三殺蟲劑毒殺作用方式的測定

一．試驗目的：

學習和把握殺蟲劑毒殺作用方式的測定技術。

二．試驗原理：

經(jīng)初篩實驗后選出殺蟲毒力高的農(nóng)藥，需進一步測定它的毒殺作用方式——觸殺、胃毒、薰蒸、內(nèi)吸、忌避以及毒殺作用強度等，進一步明確不同類型殺蟲劑的殺蟲特性。

三．主要儀器及試材：

1．供試昆蟲：小菜蛾（4齡）

2．供試藥劑：藥劑A、藥劑B

四．試驗辦法與步驟：

（一）觸殺作用方式的測定：

觸殺作用方式的測定是用來推斷毒劑通過昆蟲體壁進入蟲體的觸殺毒效。常用的辦法有浸漬法、藥膜法、直接噴撒法、微量點滴法等。本試驗采納藥膜法來鑒定農(nóng)藥的觸殺毒力作用。

1．試驗儀器及用具：養(yǎng)蟲室、濾紙（9cm）、培養(yǎng)皿（9cm）、培養(yǎng)皿（5cm）、具塞小試管等。

2．試驗辦法與步驟：

（1）藥劑的配制：使用丙酮，將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml三個濃度，每濃度5ml，裝入具塞小試管。

（2）使用藥膜法對小菜蛾（4齡）幼蟲舉行觸殺作用毒力測定。

（3）制作濾紙藥膜：取一張直徑為9cm的濾紙，放插在報紙上的三支大頭針上，不使其接觸物體表面，吸取0.5ml丙酮藥液，圍繞濾紙外緣逐漸向內(nèi)滴加，使丙酮藥液勻稱分布在濾紙上，同法每藥劑濃度及丙酮對比各制備3張濾紙藥膜。

（4）將涼干后的濾紙藥膜放在培養(yǎng)皿底，每濃度重復三次，操作時避開手摸，隨即每張藥膜放入試蟲20頭，任其爬行15-30min。

（5）處理完畢后，將處理過的試蟲置于27℃，整潔的環(huán)境中，并飼喂新奇的飼料，24小時后檢查死蟲數(shù)，以物觸其蟲體無任何反應者為死亡。

（二）胃毒作用方式的測定：

胃毒作用方式的測定是用來推斷毒劑通過昆蟲取食進入消化道的毒殺能力，測定辦法是把藥加入餌料中飼喂昆蟲，或?qū)⑺幰鹤⑷肜ハx的口腔內(nèi)，迫使所有吞食，較抱負的辦法是夾毒葉片法。其基本原理是在兩片葉中夾入勻稱簇擁的藥劑，制成夾毒葉片飼喂昆蟲，藥劑隨昆蟲取食進入消化道而發(fā)生毒殺作用。

1．試驗儀器及用具：養(yǎng)蟲室、微量注射器、培養(yǎng)皿（5cm）、淀粉糊、鑷子、剪刀、具塞小試管等。

2．試驗辦法：

（1）藥劑的配制：使用丙酮，將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml三個濃度，每濃度5ml，裝入具塞小試管。

（2）將菜葉剪成直徑2cm的小片若干張，用微量注射器將丙酮藥液定量（10ul）點滴在葉片上，待丙酮揮發(fā)后，用淀粉糊涂在無藥的葉片上，用鑷子移于帶藥的葉片上，將上

下兩張葉片粘合制成夾毒葉片，飼喂試蟲，另喂無毒葉片為對比，每濃度處理試蟲20頭，重復三次。24小時后觀看試蟲的死亡狀況。（三）內(nèi)吸作用方式的測定：

內(nèi)吸作用方式的測定是藥劑接觸植物的某一部分，如根、莖、葉或種子等，滲入到植物的內(nèi)部組織，隨植物體液傳導至全株，在一定的時光內(nèi)，當昆蟲取食帶毒的植物或吸取帶毒的汁液，而產(chǎn)生致毒反應。本試驗采納根部內(nèi)吸法。

1．試驗儀器及用具：養(yǎng)蟲室、燒杯、吸管、培養(yǎng)皿（5cm）、剪刀、植物苗等。2．試驗辦法：

（1）藥劑的配制：將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml的水溶液各

50ml，注入燒杯中。

（2）將植物苗的根部插入藥液中，以清水為對比，2小時后，取植物苗的上部未接觸藥

液的葉片飼喂試蟲，每濃度處理試蟲20頭，重復三次，24小時后觀看試蟲死亡狀況。

（四）薰蒸作用方式的測定：

薰蒸作用方式的測定是在適當溫度下，在固定的空間蒸發(fā)成氣態(tài)，并達到一定的濃度，與試蟲接觸，在短時光內(nèi)能殺死試蟲。本試驗采納培養(yǎng)皿簡易薰蒸測定法。1．試驗儀器及用具：養(yǎng)蟲室、培養(yǎng)皿（9cm）、培養(yǎng)皿（5cm）、吸管、紗布燒杯等。2．試驗辦法：

（1）藥劑的配制：將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml的水溶液

各20ml，注入燒杯中。

（2）取直徑相同的9cm的磨口培養(yǎng)皿，皿底放10ml的藥劑，用雙層紗布密蓋皿底，其

上放試蟲20頭，每濃度重復三次，以清水為對比。

（3）2小時后，將試蟲轉入培養(yǎng)皿（5cm）中，培養(yǎng)24小時后，觀看試蟲死亡狀況。

五．試驗注重事項：

1、目標試蟲的挑選：應選用具有一定的代表性及經(jīng)濟價值，耐藥性較強、生長茁壯、自然

死亡率底，蟲齡蟲體大小全都，最好采納人工飼養(yǎng)的試蟲。

2、環(huán)境條件的挑選：溫度在20-28℃，相對濕度在60%-80%，通氣良好。

3、處理設計：每處理需試蟲15-30頭，重復三次，每次實驗均要設空白對比，施藥時要注

意各處理用藥等量勻稱全都。

4、試驗辦法的挑選：按照試驗原理挑選相宜的試驗辦法，盡可能避開其他毒殺作用方式的

干擾。

六．試驗結果處理：

觀看死活蟲數(shù)，計算死亡率及校正死亡率，推斷藥劑毒作用方式。試蟲死活標準，普通以能正?；顒踊蝻w行的或能正常行動的作為活蟲，其余中毒的均為死蟲。

%

1001%

100?--=?=

對比死亡率對比死亡率

處理死亡率校正死亡率總蟲數(shù)死蟲數(shù)

死亡率

七．思量題：

1、將篩選藥劑的毒力實驗結果記入實驗記載表，并寫成報告。

2、按照試驗結果推斷藥劑的毒殺作用方式。

3、農(nóng)藥殺蟲作用方式的測定，在生產(chǎn)實踐中有何意義。

4、比較觸殺作用方式的測定中，常用的浸漬法、藥膜法、直接噴撒法、微量點滴法的優(yōu)缺

點。

5、你認為在內(nèi)吸殺蟲作用方式測定中，哪些措施可以排解觸殺、薰蒸作用的影響。

表2毒殺作用方式試驗結果記載表

實驗藥劑濃度(或劑

量)

試驗方

法

試蟲種

類

重復次

數(shù)

供試

蟲數(shù)

處理24小時

死蟲

數(shù)

死亡率

(%)

校正死亡

率(%)

試驗四殺蟲劑精密毒力測定

——微量點滴法

一．試驗目的：

1、學習和把握觸殺毒力精密測定技術—微量點滴法。

2、學習農(nóng)藥生物測定數(shù)據(jù)的處理辦法—繪圖法，最小二乘法和機率值分析法，求出致死中量（LD50）和致死中濃度（LC50）。

3、明確殺蟲劑殺蟲毒力表示辦法的意義和應用。

二．試驗原理：

在舉行農(nóng)藥殺蟲作用方式的試驗后，了解某些化合物具有觸殺作用的基礎上，為了明確其觸殺強度以及比較幾種藥劑的觸殺毒力大小時，需采納精密觸殺毒力測定技術來求出它的致死中量（或致死中濃度）。目前許多有機合成殺蟲劑大多數(shù)都具有觸殺作用，因而觸殺毒力測定具有一定的重要性，測定辦法雖然無數(shù)，但基本上可分為兩大類：一是所有施藥法：如定量噴粉法、定量噴霧法和用一定濃度藥液浸漬法等。其優(yōu)點是操作便利，比較符合實際施藥狀況。但藥劑簡單被試蟲吞食產(chǎn)生胃毒作用。二是局部施藥法：是目前比較精確的觸殺毒力測定辦法。普通包括藥膜法和微量點滴法。微量點滴法是將一定濃度和容積的藥液點滴在試蟲體的一定部位，溶劑揮發(fā)后，藥劑即可自體壁進入體內(nèi)發(fā)揮觸殺作用，藥劑不致被試蟲吞食。本試驗采納微量點滴法來測定農(nóng)藥的觸殺毒力作用。

三．主要儀器及試材：

1、試蟲：棉鈴蟲（3齡）

2、藥劑：氯氰菊酯等

3、試驗儀器及用具：養(yǎng)蟲室、毛細管點滴器、分析天平、濾紙、通針、培養(yǎng)皿（5cm）、容量瓶、具塞小試管及試管架、鑷子、移液管、丙酮等。

四．試驗辦法與步驟：

（一）實驗前的預備工作

1、試蟲的移?。?/p>

選取3齡棉鈴蟲，大小勻稱全都的個體，放在墊有吸水紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿10頭，為一個處理。每個處理重復三次，分離在分析天平上稱重，求出平均體重，備用。

2、稱藥配藥：

將試藥當心地移入洗凈干燥的稱量瓶中，在分析天平上精確?????稱取一定量試藥，放入小燒杯內(nèi)，加少量丙酮溶解，再移入容量瓶中，加丙酮定容。搖勻即為母液，備用。

3、毛細管點滴器的質(zhì)量檢定：

檢查毛細管微量點滴器是否通暢，并練習使用。

（二）準備實驗

為了確定合適的施藥濃度（或劑量）（要求試蟲死亡率分布在20-80%范圍內(nèi)），在正式實驗前，必需先用幾個濃度或劑量（范圍較大）舉行試點滴，按照死亡結果，確定最合適的點滴濃度，準備實驗所用試蟲可以削減一半左右。

（三）正式實驗步驟

1、藥液的配制：

按照準備實驗結果，將容量瓶中的母液按等比級數(shù)用丙酮稀釋成5個濃度，如1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/μl等。每濃度5ml，裝入具塞小試管。并以丙酮為對比。2、稱重：

將選好的試蟲，在分析天平上稱重，每個濃度為一個處理，每個處理10頭試蟲，重復三次，將每10頭試蟲放在墊有吸水紙的整潔培養(yǎng)皿內(nèi)，待處理。3、點滴：

使用毛細管點滴器對棉鈴蟲（3齡）幼蟲舉行觸殺毒力測定。首先舉行準備練習，以毛細管點滴器吸丙酮點滴在濾紙上，反復多次，以點滴的大小勻稱全都，每次均有為嫻熟。然后點滴蟲體，先對比，再從低濃度到高濃度，每個濃度點滴蟲體的中胸背部，每蟲一滴，每濃度20頭，重復三次。點滴藥液量按照試蟲大小確定，普通以試蟲接受藥液不從體壁上流失為宜。棉鈴蟲3齡幼蟲，點滴量為0.3-0.5μl，各處理試蟲的點藥量應全都。4、培養(yǎng)：

處理完畢后，將處理過的試蟲置于27℃的環(huán)境中，飼喂新奇飼料，24小時，48小時后檢查死蟲數(shù)，以物觸其蟲體無任何反應者為死亡。

五．試驗注重事項：

1、目標試蟲的挑選：應選用具有一定的代表性及經(jīng)濟價值，耐藥性較強、生長茁壯、自然

死亡率底，蟲齡蟲體大小全都，最好采納人工飼養(yǎng)的試蟲。

2、環(huán)境條件的挑選：溫度在20-28℃，相對濕度在60%-80%，通氣良好。

3、處理設計：每處理需試蟲15-30頭，重復三次，每次實驗均要設空白對比，施藥時要注

意各處理用藥等量勻稱全都。

4、試驗中對比（CK）的死亡率最好小于10%，大于20%時試驗必需重做。

5、藥液的配制中，要求不少于5個濃度梯度，各處理的死亡率在20-80%之間為最好。

6、點滴操作過程中，點滴力度相宜，應避開力度過大而導致蟲體損傷。并隨時檢查點滴器

是否通暢。

六．試驗結果處理：

觀看死活蟲數(shù)，計算死亡率及校正死亡率，并將結果記入表中。

%

1001%

100?--=?=

對比死亡率對比死亡率

處理死亡率校正死亡率總蟲數(shù)死蟲數(shù)

死亡率

如自然死亡率超過20%，說明試蟲群體生活力差或?qū)嶒炥k法有問題，應重做。為了求得供試藥劑的致死中量、需要按照用藥濃度及體積求出每頭試蟲的受藥量，并換算出單位蟲體重的受藥量。

每頭試蟲受藥量（微克）=每微升藥液中含藥劑微克數(shù)×每頭試蟲受藥微升數(shù)

/=

每頭試蟲受藥量（微克）

單位蟲體重受藥量（微克藥量克蟲體重）試蟲平均體重（克）按照測定結果，以單位體重受藥量（或每頭受藥量）的對數(shù)值為x，校正死亡率換算成機率值為y，求毒力回歸方程y=a+bx，并求致死中量（LD50）值，且舉行牢靠性檢驗。

七．思量題：

1、求出藥量對數(shù)—死亡率機率值毒力回歸方程，求出供試藥劑的致死中量。

2、為什么要以致死中量或致死中濃度作為比較藥劑毒力的標準。

3、在試驗過程中哪些地方簡單出誤差，如何克服。

表3殺蟲劑精密毒力測定原始數(shù)據(jù)記錄表

供試藥劑

濃

度

(%)

每微升藥

液中含有

藥劑微克

數(shù)

每頭試蟲

接受藥液

微升數(shù)

每頭試蟲

接受藥量

(微克)

試蟲

平均

體重

(克)

單位蟲體重接受藥量

(微克藥量/克蟲體重)

死亡

率（%）

校正

死亡

率（%）

對比

表4殺蟲劑精密毒力測定數(shù)據(jù)換算表

供試藥劑單位蟲體重接受藥量或

每頭試蟲受藥量

(微克藥量/克蟲體重)

藥量對

數(shù)值

校正死亡

率（%）

死亡率

機率值

毒力回歸

方程

相關

系數(shù)

LD50

試驗五殺菌劑最低抑制濃度測定法

一．試驗目的：

學習和把握殺菌劑最低抑制濃度測定法的基本原理和試驗辦法。

二．試驗原理：

殺菌劑最低抑制濃度測定法，即藥劑與培養(yǎng)基混合，藥劑的濃度逐漸降低，找出抑制病菌生長的最低濃度，比較藥劑對供試菌毒力的大小。測定辦法包括混合法、劃線培養(yǎng)法、載菌培養(yǎng)基移植法。本試驗采納載菌培養(yǎng)基移植法，即把藥劑混合在培養(yǎng)基中，制成平面，然后把繁殖有供試菌種的載菌培養(yǎng)基小塊放置在含藥液培養(yǎng)基表面上，假如藥劑濃度適當，則載菌培養(yǎng)基小塊上的菌落不能擴展到含藥液的培養(yǎng)基上。

三．主要儀器及試材：

1、試驗藥劑：多菌靈，百菌清等；

2、供試菌種：棉花炭疽病菌等（培養(yǎng)皿菌種）；

3、試驗器皿：培養(yǎng)皿、容量瓶、移液管、無菌水、PDA培養(yǎng)基[注：以上器皿須經(jīng)滅菌。]

超凈工作臺、滅菌鍋、培養(yǎng)箱、打孔器、酒精燈等。

四．試驗辦法與步驟：

1、藥液的配制：

使用無菌水，將多菌靈配制成1000、500、200、50、20(μg/ml)5個濃度，另設一個無菌水對比。

2、混藥培養(yǎng)基平面的制作：

將培養(yǎng)基（已滅菌）熔化，在無菌的條件下，取培養(yǎng)基9ml，加入1ml配制的藥液于滅菌的培養(yǎng)皿，充分混合勻稱，制成混藥培養(yǎng)基平面，每濃度重復三次。

3、接種：

使用打孔器打取菌塊，用鑷子將載菌的培養(yǎng)基小塊放置在含藥液的培養(yǎng)基表面，作好標簽后，恒溫培養(yǎng)。

五．試驗注重事項：

1、本試驗要注重無菌操作，囫圇試驗操作過程在無菌操作臺上完成。

2、藥液和培養(yǎng)基混合時注重培養(yǎng)基的溫度（70-80℃），并保證混合勻稱；接種（菌塊）前

要冷卻，接種時菌塊的菌絲面對上。

3、用打孔器打菌塊時注重打孔器溫度不要太高，以免影響菌種的生長。

4、用打孔器打菌塊時應在菌落的外緣打菌塊，因外緣的生長力強，且差異小。

六．試驗結果處理：

供試菌培養(yǎng)2-3天后，檢查病菌生長狀況。培養(yǎng)皿內(nèi)無病菌生長者用“-”號表示，有病菌生長者用“+”號表示，在“+”與“-”之間的藥劑濃度即為抑制病菌所需藥劑的最低濃度，普通取中間濃度為準。假如對比無病菌生長，此試驗必需重做。

七．思量題：

1、將最低抑制濃度檢查結果記載于結果記載表中，并按照試驗結果完成試驗報告。

2、比較各種藥劑對病菌的毒力。

3、研究本試驗辦法的特點。

表5殺菌劑最低抑制濃度測定結果記載表

供試菌種供試藥劑

藥劑濃度

（μg/ml）

供試病菌生長狀況

有無雜菌備注

123

對比

試驗六殺菌劑抑菌圈測定法

一．試驗目的：

1、了解殺菌劑抑菌圈測定法的基本原理及應用范圍；

2、認識殺菌劑抑菌圈測定法的試驗辦法。

二．試驗原理：

抑菌圈法又叫水平蔓延法，此法最早曾廣泛應用于抗菌素的效價測定，隨后也被用于農(nóng)業(yè)殺菌劑的毒力測定。其基本原理是在已接種供試菌的瓊脂培養(yǎng)基上施以少量抗菌性物質(zhì)或殺菌劑，使其接觸培養(yǎng)基或病原菌，經(jīng)過適當初間的培養(yǎng)后，接觸部分的周圍因為抗菌物質(zhì)或殺菌劑的滲透蔓延作用，殺死病菌的養(yǎng)分體（菌絲體）、繁殖體（孢子）或抑制其在培養(yǎng)基上生長，而產(chǎn)生抑菌圈。

試驗證實，在一定濃度范圍內(nèi)的藥劑濃度與抑菌圈直徑大小有一定的關系，即殺菌劑在一定范圍內(nèi)抑制菌圈直徑或其平方與濃度的對數(shù)成直線函數(shù)關系，以抑菌圈直徑或直徑平方為縱軸，藥劑濃度的對數(shù)為橫軸，可繪成直線。假如被測的幾種藥劑所繪成的直線互相平行，則可按照一定濃度下抑菌圈大小舉行不同藥劑毒力大小的比較。

抑菌圈法已被國際上通用的抗菌素效價測定辦法。

三．主要儀器及試材：

1、供試菌種：棉花炭疽病菌；

2、供試藥劑：多菌靈，百菌清等；

3、試驗器皿：無菌水，容量瓶，移液管，培養(yǎng)皿（9cm，5cm），PDA培養(yǎng)基，牛津杯（或濾紙片（0.5cm）），鑷子，[注：以上器皿需經(jīng)滅菌]，超凈工作臺、滅菌鍋、培養(yǎng)箱、分析天平，顯微鏡，接種環(huán)，記號筆，酒精燈等。

四．試驗辦法與步驟：

1、藥液配制：

使用無菌水，將多菌靈和百菌清分離配制成160、80、40、20、10μg/ml，定容至10ml。以無菌水為對比。

2、制備菌懸液：

取培養(yǎng)7天左右的供試試管菌種，加入少量無菌水（約6-8ml），用接種環(huán)輕刮斜面培養(yǎng)基上的孢子和菌絲體，制備孢子懸液，將孢子懸液用無菌雙層紗布過濾于滅菌三角瓶內(nèi)，并用滅菌棉塞塞口。然后用滅菌吸管吸取少量孢子懸液于載玻片上，在低倍（15×10）顯微鏡下檢查每個視野中孢子數(shù)目，要求在80個左右。

3、制備載菌培養(yǎng)基平面：

將熔化的培養(yǎng)基（已滅菌）冷卻到45-50℃時，在無菌條件下，吸培養(yǎng)基9ml，加入1ml菌液于滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)，充分混合勻稱，制成載菌培養(yǎng)基平面。

4、藥劑處理：

在載菌培養(yǎng)基平面上放置牛津杯，（或?qū)⑴浜玫乃巹┑谷霚缇男∨囵B(yǎng)皿內(nèi)，用消毒鑷子將已滅菌的濾紙片放入藥液中浸泡1分鐘后取出，放在消毒濾紙上，使濾紙片上多余的藥劑被吸去，在無菌條件下，放入載菌培養(yǎng)基平面上）。共需要4只載菌培養(yǎng)皿，2只為一組，分成二組。在每只培養(yǎng)皿放6個牛津杯（或濾紙片），放置位置如下圖所示，圖中O代表牛

津杯（或濾紙片），1，2，3，4，5分離代表配制的160、80、40、20、10μg/ml5種藥劑濃度，每個牛津杯內(nèi)加入藥液0.2ml，并作好標記。

圖1牛津杯（或濾紙片）在培養(yǎng)基上的羅列

5、培養(yǎng)：處理的培養(yǎng)皿，先放置在2-4℃的冰箱內(nèi)4-6小時，待藥劑在培養(yǎng)基中充分蔓延后，

再放入28℃培養(yǎng)。

五．試驗注重事項：

1、本試驗要注重無菌操作，囫圇試驗操作過程在無菌操作臺上完成。

2、藥液和培養(yǎng)基混合時注重培養(yǎng)基的溫度（45-50℃，溫度過高會燙死病菌，過低培養(yǎng)基會

凝固），并保證混合勻稱。

3、檢查結果時十字交錯量抑菌圈直徑，取其平均值。（以毫米為單位）

六．試驗結果處理：

處理的培養(yǎng)皿，先放置在2-4℃的冰箱內(nèi)4-6小時，待藥劑在培養(yǎng)基中充分蔓延后，再放入28℃培養(yǎng)，30-40小時后檢查結果，用尺十字交錯測量抑菌圈直徑（以毫米為單位），取平均值。將每個培養(yǎng)皿中的40μg/ml的抑菌圈直徑（共8個）求出總平均值；求出每組（2個）培養(yǎng)皿中40μg/ml直徑（共4個）的平均值。總平均值與各組平均值的差數(shù)即為該組培養(yǎng)皿的校正當。用校正當來校正本組其他濃度的抑菌圈直徑（比總平均值小的加上校正當，比總平均值大的則減去校正當）。以藥劑濃度對數(shù)為橫軸，以抑菌圈直徑為縱軸繪制曲線，假如各曲線平行，按照藥量反應曲線上的中等濃度比較不同的的藥劑的抑菌圈大小，以此來判定藥劑毒力大小。

七．思量題：

1、將試驗結果記載于抑菌圈測定結果記載表上，收拾的結果在方格紙上或?qū)?shù)紙上繪成藥量反應曲線。以藥劑濃度對數(shù)為橫軸，以抑菌圈直徑為縱軸繪成曲線。假如各曲線平行，按照藥量反應曲線上的中等濃度比較不同的藥劑的抑菌圈大小，以此來推斷藥劑毒力。并完成試驗報告。

2、水平蔓延法包括哪些實驗辦法，各有何特點。

3、影響實驗結果有哪些關鍵因子，應從哪些地方注重操作才干避開。

表6抑菌圈測定結果記載表

供試菌種供試

藥劑

組別藥劑濃度抑菌圈直徑

（mm）

平均

值

總平

均值

校正

值

校正后

的數(shù)值μg/ml對數(shù)值

第一

組

其次

組

試驗七殺菌劑溫室盆栽試驗

——棉籽藥劑拌種試驗

一．試驗目的：

1、了解殺菌劑溫室盆栽試驗的基本原理及應用范圍；

2、認識殺菌劑藥劑拌種試驗的試驗辦法。

二．試驗原理：

藥劑拌種的作用是殺死或抑制附著在種子表面或潛育在種子內(nèi)部的病菌，庇護幼苗不被病菌侵染而發(fā)病。藥劑拌種可用于多種作物，如禾谷類小麥、高粱、玉米等可用藥劑拌種防治附著在種子表面的黑穗病和黑粉病菌；用于棉花種子上，可防治棉花炭疽、立枯病菌等。

室內(nèi)藥劑拌種實驗的辦法有兩種：1）、利用人工保存菌種處理種子，將帶菌種子用藥劑舉行處理，處理后的種子放在有瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或放在細菌難以生長的培養(yǎng)基中，并放在病菌相宜的溫度下保持7-10天，觀看種子周圍有無此病菌生長，是何狀態(tài)，推斷藥劑效果。2）、利用自然?帶菌種子，以各種不同藥劑處理后，播種在盆缽土壤內(nèi)，一定時光后觀看種子發(fā)芽率、發(fā)病率、苗高及有無病斑。

本試驗采納的供試種子是棉花種子，供試菌種為棉花炭疽病菌，用第一種辦法舉行人工接種，制成帶菌種子。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：多菌靈等

2、供試病菌：棉花炭疽病菌

3、供試種子：棉籽

4、試驗器皿：溫室（或生化培養(yǎng)箱）、超凈工作臺、滅菌鍋、培養(yǎng)箱、分析天平，燒杯，搪瓷盤，顯微鏡，無菌水，移液管，培養(yǎng)皿（9cm），PDA培養(yǎng)基[注：以上器皿需經(jīng)滅菌]，鑷子，接種環(huán)，記號筆，酒精燈等。

四．試驗辦法與步驟：

1、選種：

選取粒大、飽滿、色澤全都、茁壯無病蟲的棉花種子，每個處理稱取20克，共稱8份。

2、溫湯浸種：

將選擇的棉花種子（留1份作對比）放在溫水（45℃左右）浸泡一下潮濕絨毛，然后撈出棉籽放入50-55℃溫水中燙30分鐘，并不斷上下翻動棉籽，使受熱勻稱。30分鐘后撈出棉籽，涼至七成干。

3、菌液拌種：

取在棉桿上培養(yǎng)15天（或在試管斜面上培養(yǎng)7天）的棉花炭疽病菌，用無菌水制成孢子懸浮液，用紗布過濾，在顯微鏡下檢查孢子數(shù)目，低倍鏡下每個視野30-100個左右，共制備150ml菌液。將晾至七成干的棉花種子（留1份不拌菌液作對比）放入裝有一定量菌液的燒杯中，用玻棒攪拌，使棉籽表面勻稱的附著棉花炭疽病菌的孢子，取出晾至七成干，分離舉行藥劑處理。

4、藥劑處理：

分離稱取多菌靈等藥劑，藥量分離為種子分量的0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%，按

種子分量分離計算所需藥量。用分析天平稱取所需藥劑，放入拌種容器內(nèi)，再加入晾至7成干的帶菌棉籽（留1份不拌藥劑作對比），用玻棒攪拌使藥劑勻稱附著在棉籽上。5、種子的哺育：

（1）室內(nèi)培養(yǎng)基培養(yǎng)帶菌種子：

將溶化的馬鈴薯培養(yǎng)基勻稱地倒入滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)（每個培養(yǎng)皿15ml），凝固后放入藥劑處理的種子，每皿放10粒，每處理設三個重復。對比共三個：1）、未經(jīng)任何處理的棉籽；2）、溫湯浸種未拌菌液的種子；3）、溫湯浸種拌菌液但未拌藥劑的種子。每個處理完成后，應作好標記，放入25-28℃下培養(yǎng)7天以后觀看種子的發(fā)芽率和發(fā)病率。（2）溫室?guī)ЬN子哺育的辦法：

將經(jīng)過高壓滅菌的土壤裝入花盆內(nèi)（每盆裝土為花盆的2/3），用自來水澆濕土壤，等水滲透后，用鑷子夾取處理的棉籽播種于花盆內(nèi)，每盆播種20粒，先播對比，再播種藥劑處理的種子，然后在種子上蓋一層干的滅菌土壤。每個處理作好標記，放在25℃下哺育，經(jīng)過2周左右觀看種子的發(fā)芽率和發(fā)病率。

五．試驗注重事項：

1、植物種子的挑選，應選取飽滿，大小全都，健康無病蟲害的種子。

2、藥劑拌種一定要勻稱。

3、種子哺育過程中，要注重無菌操作，盡量削減雜菌污染。

六．試驗結果處理：

（1）室內(nèi)培養(yǎng)基培養(yǎng)帶菌種子：

處理后的棉籽培養(yǎng)7天以后，檢查種子的發(fā)芽率和發(fā)病率。打算種子是否帶菌，看種子周圍的培養(yǎng)基上有無病菌生長，此病菌是何狀態(tài)。在培養(yǎng)基上生長的棉花炭疽病菌的孢子為淡紅色的粘液（象細菌的菌落，菌絲為灰白色）。假如用肉眼難以鑒別，可以通過鏡檢確定。觀看棉芽的胚根或胚莖上是否長有紅色的縱裂痕或褐色病斑，檢查結果與對比相比較，確定藥效和藥劑對種子發(fā)芽有無不良影響。

（2）溫室?guī)ЬN子的哺育：

播種于花盆內(nèi)的棉籽，經(jīng)14天左右如幼苗已所有長出就將幼苗所有拔出，用清水沖洗后檢查（棉花炭疽病多發(fā)生在莖部），輕時為紅色的縱裂痕，嚴峻時為褐色病斑以至根腐爛而死，有時子葉也發(fā)病，在子葉邊緣發(fā)生半圓形暗褐色病斑。記載出苗株數(shù)，求出出苗率，發(fā)病率，死苗率和防治效果，比較不同藥劑的防效。

%100%?=總苗數(shù)

有病苗數(shù)

）發(fā)芽率（

%10031%?-=））發(fā)病率

對比處理組發(fā)病率

（）防治效果（

七．思量題：

1、將試驗結果記載于測定結果記載表上，并完成試驗報告。

2、按照實驗結果比較不同藥劑的防治效果。

3、高濃度下棉籽不出芽或出芽后生長不好，說明是什么緣由？對比不出芽或出芽后很快死去又是什么緣由？

4、重復間結果是否相差很大，試分析影響的可能因子。

表7不同藥劑處理棉籽實驗結果記載表

藥劑種類處理

方式

藥劑劑量（種

子分量的%）

種子總數(shù)發(fā)芽率%發(fā)病率%防治

效果

備

注

123平

均

123

平

均

123

平

均

室內(nèi)

處理

盆載

處理

試驗八、除草劑室內(nèi)毒力測定

——小杯法測定除草劑毒力

一．試驗目的：

學習種子發(fā)芽法測定除草劑生物活性的辦法。

二．試驗原理：

種子發(fā)芽法是按照種子發(fā)芽率、根與莖的生長量、伸長度或形態(tài)的變化在一定范圍內(nèi)與藥劑劑量呈相關性而測定除草劑的生物活性，種子發(fā)芽法適用于醚類、酰胺類、氨基甲酸酯類、激素類等除草劑，所用植物種子主要有小麥、油菜、水稻、稗草等。主要實驗辦法包括黃瓜幼苗形態(tài)法，小杯法，高粱法和稗草中胚軸法等。本試驗采納小杯法舉行除草劑室內(nèi)毒力測定。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：穩(wěn)殺得、殺草丹等

2、供試植物：稻種等

3、試驗器皿：溫室（或生化培養(yǎng)箱），分析天平，燒杯（150毫升、50毫升），移液管，洗耳球，玻棒，記號筆，鑷子，培養(yǎng)皿（12cm）等

四．試驗辦法與步驟：

1．選種：

選取大小、色澤全都，健康無病蟲害的稻種，在28℃條件下浸種24小時，催芽48小時，致種子破胸露白即可。

2．藥液的配制：

將藥劑配制成0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/ml5個濃度的藥液各50毫升于燒杯中，以水為空白對比。

3．制作發(fā)芽床：

取50ml的燒杯，在底部放一張圓濾紙片（假如用小麥、油菜等旱地作物為試材時，需在濾紙下面放入10-20粒小玻璃球或者大砂粒）。

4．滴加藥液：

用5ml移液管分離將所測藥液自低至高濃度滴加于鋪有濾紙的小燒杯中，寫好標記，重復4次。

5．播種：

用鑷子挑取萌發(fā)全都的催芽種子，每杯中放入水稻種子10粒，勻稱放在燒杯內(nèi)濾紙上并作好標記。

6．培養(yǎng)：

將處理過的小燒杯放入28℃培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，白天賦予日光燈光照，注重天天加一定量的蒸餾水，以補足其水分蒸發(fā)（或用150ml燒杯扣在50ml燒杯上）。

7．觀看測量：

約5天后藥效癥狀顯然時，分離測量株高（或稱鮮重），計算株高（或鮮重）抑制率。

五．試驗注重事項：

1、植物種子的挑選，應選取飽滿，大小全都，健康無病蟲害的種子。

2、把握植物種子的浸種、催芽辦法，選取剛萌發(fā)的種子來舉行試驗。

3、應挑選相宜的發(fā)芽床。

4、注重種子發(fā)芽法適用的除草劑、植物種子的范圍。

5、每種除草劑往往都有其最相宜的測定植物和測定辦法。

六．試驗結果處理：

培養(yǎng)約5天后檢查試驗結果，以直尺量取各稻種的株高（或稱鮮重），計算株高（或鮮重）抑制率。

%100%

=?株高（或鮮重）抑制率（）

對比處理的平均株高（或鮮重）-藥劑處理的平均株高（或鮮重）

對比處理的平均株高（或鮮重）

按照測定結果，以藥劑濃度的對數(shù)值為x，株高（或鮮重）抑制率換算成機率值為y，求毒力回歸方程y=a+bx，并求抑制中濃度（IC50）值，且舉行牢靠性檢驗。

表8除草劑種子發(fā)芽法測定結果記載表供試

藥劑處理濃度（μg/ml）稻種總數(shù)株高（cm）平均株高（cm）株高抑制率（%）

對比

表9

除草劑種子發(fā)芽法測定結果數(shù)據(jù)換算表

供試藥劑濃度

（μg/ml）濃度對數(shù)值

株高抑制率（%）株高抑制率機率值

毒力回歸方程相關系數(shù)

IC50

七．思量題：

1、求出濃度對數(shù)—株高（或鮮重）抑制率機率值毒力回歸方程，求出供試藥劑的抑制中濃度，并按照試驗結果完成試驗報告。

2、在試驗過程中哪些地方簡單出誤差，如何克服。

試驗九除草劑溫室盆栽試驗

——葉面處理法

一．試驗目的：

防除雜草，庇護作物是應用除草劑的目的，因此，除草劑的挑選性就顯得特殊重要。本試驗是通過一些除草劑對水稻和花生舉行莖葉處理，比較不同的除草劑對不同的植物的作用差異，了解除草劑的挑選毒性及除草效果。

二．試驗原理：

作物與雜草同時發(fā)生，而絕大多數(shù)雜草同作物一樣屬于高等植物，因此，要求除草劑具備特別挑選性或采納恰當?shù)氖褂梅绞降榷钩輨┇@得挑選性。除草劑的挑選性原理大致可劃分為5個方面：位置與時差挑選性，形態(tài)挑選性，生理挑選性，生物化學挑選性以及除草劑利用庇護物質(zhì)或平安劑獲得挑選性。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：10%草甘膦水劑、50%丁草胺乳油、12.5%蓋草能乳油等。

2、生物材料：水稻+稗草+鴨舌草、花生+稗草+水稻+野莧。

3、試驗用具：手壓式噴霧器、燒杯、量筒、吸管、天平、花盆等。

四．試驗辦法與步驟：

1、供試植物的哺育：

從稻田取回表層泥土，曬干，打碎后裝入口徑18cm的花盆內(nèi)，加水浸泡2-3天，用小鐵鏟攪拌呈漿，沉淀后倒出水層，播入經(jīng)催芽的稻種、稗種和鴨舌草。另外種花生的盆只需泥土濕潤，即可種入花生種子，并同時播種稻種、稗種和野莧等。2、藥劑處理：

當作物和雜草處于3-5片葉時，每小組分離挑選水稻和花生各6盆，調(diào)查記錄每盆的水稻株數(shù)和雜草株數(shù)（不同雜草種類分離記錄）記于一小塑料標簽上并插回該盆中，每次處理盡量使作物株數(shù)和雜草株數(shù)大致相等，然后分離用手壓式噴霧器噴10%草甘膦11.25kg/ha；50%丁草胺1.5kg/ha；12.5%蓋草能0.75kg/ha。水稻和花生各噴一盆，另兩盆僅噴清水作為對比，每畝以噴60kg的藥液量計，即每盆噴5ml。3、結果觀看記載：

噴藥后7天調(diào)查實驗效果。

五．試驗注重事項：

1、植物種子的挑選，應選取飽滿，大小全都，健康無病蟲害的種子。

2、把握植物種子的浸種、催芽及哺育辦法。

六．試驗結果處理：

藥后7天調(diào)查活株數(shù)，按照總雜草株數(shù)及藥后活株數(shù)計算雜草死亡率（%），防治效果及挑選（受害）指數(shù)等。

%100=?施藥前雜草株數(shù)-施藥后活株數(shù)

雜草死亡率（）施藥前雜草株數(shù)

%±=

±處理組雜草死亡率（%）對比組雜草死亡率（%）

防除效果（）100%對比組雜草死亡率（%）

式中“+”表示對比組在施藥后7天雜草數(shù)比施藥前增強%時用“+”；反之則用“-”。?=

?∑

（受害級別該級株數(shù)）挑選受害指數(shù)檢查總株數(shù)最高級別代表值

作物受害分級如下：0級——與對比同；

1級——植物枯死1/4以下；2級——植物枯死1/4-2/4；3級——植物枯死1/2-3/4；4級——植物枯死3/4以上。

七．思量題：

1、對各種供試除草劑對供試作物的挑選毒性作出評價。

2、比較供試各種除草劑對各類雜草的毒殺效果。

試驗十殺蟲劑田間藥效實驗

一．試驗目的：

1、明確田間藥效試驗的目的和基本原則；

2、把握田間藥效試驗的基本步驟和辦法；

3、認識田間藥效試驗的藥效調(diào)查辦法和結果計算辦法。

二．試驗原理：

甜菜夜蛾是一種重要的十字花科蔬菜害蟲。使用除盡防治甜菜夜蛾有優(yōu)良的防治效果。本試驗以不同濃度的除盡對甜菜夜蛾舉行田間防治，以比較不同濃度除盡對甜菜夜蛾的田間防治效果。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：除盡

2、防治對象：甜菜夜蛾

3、用具：背負式噴霧器、桶、量筒、米尺等

4、實驗地點：十字花科蔬菜地

四．試驗辦法與步驟：

1、實驗田的挑選：

挑選長勢大體全都，地勢凹凸全都，肥力全都的有代表性的田塊作為田間藥效試驗地。

2、供試藥劑：

除盡1：500倍，1：1000倍，1：2000倍；另設空白對比，共4個處理。

3、田間實驗設計：

按實驗要求劃分小區(qū)，每小區(qū)面積為20-50m2，各小區(qū)采納隨機區(qū)組羅列，四次重復。

4、基數(shù)調(diào)查：

處理之前每小區(qū)“Z”字形五點取樣，計數(shù)每點5-10株作物上不同齡期的活幼蟲數(shù)，調(diào)查囫圇植株并記錄。

5、施藥：

施藥適期普通選在幼蟲2齡期較好。噴藥時光一天中以上午露水干后開頭為好，每畝噴灑藥液量可按照植株的籠罩狀況，普通為75-150kg。

6、藥效調(diào)查：

施藥后1d、3d、7d、14d各調(diào)查一次，調(diào)查辦法同基數(shù)調(diào)查。

五．試驗注重事項：

1、實驗處理各小區(qū)之間留有一定面積的庇護行，小區(qū)的羅列可采納挨次或隨機羅列。

2、噴藥時勻稱周到，噴藥量全都。

3、換藥時，應充分洗滌噴霧器及噴頭。

六．試驗結果處理：

施藥后1d、3d、7d、14d，每小區(qū)采納“Z”字形五點取樣，計數(shù)每點5-10株作物上不同齡期的活幼蟲數(shù)，調(diào)查囫圇植株并記錄。按下列公式計算結果：

%100

%100

100PTCK

CK=

?-=?-施藥前蟲數(shù)-施藥后蟲數(shù)

蟲口減退率（）施藥前蟲數(shù)防治效果（）

PT藥劑處理區(qū)蟲口減退率CK空白對比區(qū)蟲口減退率

最后用鄧肯氏新復極差檢驗法舉行統(tǒng)計分析，比較各處理的防治效果。

七．思量題：

1、將實驗結果舉行收拾并作分析。

2、你認為影響本實驗結果的因素有哪些，應實行什么措施來克服或削減這些因子的影響。

試驗十一殺菌劑田間藥效實驗

一．試驗目的：

1、明確田間藥效試驗的目的和基本原則；

2、把握田間藥效試驗的基本步驟和辦法；

3、認識田間藥效試驗的藥效調(diào)查辦法和結果計算辦法。

二．試驗原理：

小麥赤霉病是一個“氣候型”病害，在小麥抽穗揚花期多雨濕潤的天氣，易發(fā)生病害。小麥赤霉病引起產(chǎn)量嚴峻降低，造成經(jīng)濟損失；同時，病麥粒包含對人畜有害的毒素，小麥籽粒中含有病麥粒，造成