農(nóng)藥生物活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(精)-2023修改整理

千里之行，始于足下讓知識(shí)帶有溫度。第第2頁(yè)/共2頁(yè)精品文檔推薦農(nóng)藥生物活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(精)農(nóng)藥生物活性測(cè)定

試驗(yàn)指導(dǎo)

游紅編

試驗(yàn)一供試目標(biāo)昆蟲的飼養(yǎng)

——棉鈴蟲的飼養(yǎng)

一、試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、明確標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲飼養(yǎng)在生物測(cè)定中的意義；

2、了解常見(jiàn)目標(biāo)昆蟲的飼養(yǎng)條件及辦法；

3、學(xué)習(xí)棉鈴蟲的飼養(yǎng)辦法。

二、試驗(yàn)原理：

殺蟲劑生物測(cè)定必需使用大量、群體整齊、健康程度全都，齡期全都的標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲，才干保證對(duì)殺蟲劑毒力的反應(yīng)精確?????。因此，舉行殺蟲劑生物測(cè)定必需采納人工飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲，以保證供試?yán)ハx的充分供給，這是農(nóng)藥毒力實(shí)驗(yàn)工作中的最基本的組成部分。

飼養(yǎng)目標(biāo)昆蟲的種類，除采納農(nóng)作物害蟲外，倉(cāng)庫(kù)害蟲、衛(wèi)生害蟲及其他繁殖力強(qiáng)，便于飼養(yǎng)的昆蟲也可采納，通過(guò)飼養(yǎng)條件的控制，促使供試目標(biāo)昆蟲盡量達(dá)到生理情況全都，以削減實(shí)驗(yàn)中的誤差。

棉鈴蟲（HelicoverpaarmigeraH.）屬鱗翅目夜蛾科。食性雜，可長(zhǎng)年飼養(yǎng)。但因幼蟲在三齡期以后有互相殘殺習(xí)性，故必需單頭飼養(yǎng)。對(duì)該蟲可采納自然?植物飼料，如棉蕾鈴、青豌豆、新奇玉米和辣椒等。若延續(xù)大量飼養(yǎng)，須用人工飼養(yǎng)。

三、主要儀器及試材：

1、試蟲：棉鈴蟲；

2、飼養(yǎng)用具：養(yǎng)蟲室，培養(yǎng)皿（15cm），培養(yǎng)皿（5cm）,養(yǎng)蟲缸，紗布等。

3、飼料：

（1）、飼料組成：

熟大豆粉（g）20.0玉米粉（g）30.0

大麥粉（g）30.0抗壞血酸（g）1.0

干酵母（g）8.0瓊脂（g）3.5

苯甲酸鈉（g）0.8棉油(ml)0.5

36％醋酸(ml)6.010％甲醛(ml)1.0

水(ml)200

(2)、配制辦法：

取總水量30％的水，加入玉米粉等成分?jǐn)嚢瑁涣砣?0％的水，以溶解瓊脂，冷卻至70℃時(shí)與上述成分混合攪拌；飼料勻稱倒入培養(yǎng)皿（15cm）內(nèi)，厚度1.0——1.5cm，冷卻后備用。

四、試驗(yàn)辦法與步驟：

1、飼養(yǎng)條件：

養(yǎng)蟲室溫度保持26——28℃，相對(duì)濕度60%——70%，12小時(shí)間照。

2、飼養(yǎng)辦法：

（1）、在培養(yǎng)皿（16cm）放入約0.3——0.5mm厚的飼料若干塊，將附有卵塊的紗布放入皿內(nèi)，用黑布將皿口封住，布上壓玻璃板，缸下部對(duì)著光源，孵化的幼蟲可很快到飼料上取食。（2）、待幼蟲長(zhǎng)到2齡后，移入裝有人工飼料的培養(yǎng)皿（5cm）內(nèi)，每皿一頭，幼蟲在內(nèi)取

食，直至老熟。

（3）、幼蟲進(jìn)入預(yù)蛹期，即轉(zhuǎn)移到裝有無(wú)菌細(xì)土的養(yǎng)蟲缸內(nèi)，必需保持潮濕，以利入土化蛹和蛹的存活。

（4）、成蟲羽化后，雌雄配對(duì)，放入養(yǎng)蟲缸內(nèi)，缸內(nèi)放一個(gè)內(nèi)有10%蜂蜜液的培養(yǎng)皿，皿內(nèi)放脫脂棉，以便蛾子從潤(rùn)濕的棉上吸取蜂蜜。養(yǎng)蟲缸上蒙上紗布，并用橡皮筋扎好。蛾子在缸內(nèi)交尾產(chǎn)卵，每日將產(chǎn)于紗布上的卵連同紗布取下，并換新紗布和蜂蜜。

五、試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、注重飼養(yǎng)室及飼養(yǎng)用具的清潔、消毒。

2、注重飼養(yǎng)環(huán)境的控制，棉鈴蟲的幼蟲在3齡后具有自相殘殺習(xí)性，應(yīng)單獨(dú)飼養(yǎng)。

3、在棉鈴蟲飼養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)注重準(zhǔn)時(shí)更換新奇的飼料，以防飼料變干。配制好的飼料必需

在低溫下儲(chǔ)存。

六、試驗(yàn)結(jié)果處理：

1、每日觀看記錄棉鈴蟲的取食、生長(zhǎng)狀況，并仔細(xì)填寫觀看記錄。

2、觀看棉鈴蟲的蛻皮生長(zhǎng)狀況，記錄各齡期的生長(zhǎng)時(shí)光長(zhǎng)短及試蟲的平均體重。

七、思量題：

1、標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲的飼養(yǎng)在生物測(cè)定工作中有何意義？

2、在棉鈴蟲的飼養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)注重那些問(wèn)題？并對(duì)其飼養(yǎng)條件和辦法提出改進(jìn)意見(jiàn)。

試驗(yàn)二殺蟲劑初步毒力測(cè)定

一、試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、通過(guò)本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)把握殺蟲劑室內(nèi)毒力初篩實(shí)驗(yàn)的操作技術(shù)。

2、觀看昆蟲中毒征象特征——高興、擊倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。

3、明確標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲代表性的有用意義。

二、試驗(yàn)原理：

為了初步確定某些化學(xué)物質(zhì)是否對(duì)某些害蟲具有毒殺能力，應(yīng)首先舉行一次淘汰實(shí)驗(yàn)，或叫初篩實(shí)驗(yàn)，又稱初步綜合殺蟲毒力實(shí)驗(yàn)。這種實(shí)驗(yàn)不涉及毒殺方式和毒殺能力的大小，因此，不嚴(yán)格限制用藥量和勻稱度，普通采納較高的濃度，盡量發(fā)揮綜合毒效（包括胃毒、觸殺、薰蒸等作用）。

普通農(nóng)藥初篩毒力測(cè)定辦法，按照試蟲對(duì)象不同，多采納浸漬法、噴霧法、噴粉法、飼料混藥法等。每處理需試蟲15-30頭，可以不設(shè)重復(fù)，每次實(shí)驗(yàn)均要設(shè)空白對(duì)比，施藥時(shí)要注重各處理用藥等量勻稱全都，設(shè)置溫度普通在20-28℃，相對(duì)濕度60-80%，通氣良好。普通液劑在0.1-1%，粉劑1-10%。

三、主要儀器及試材：

1、試蟲：小菜蛾（3齡）。

2、供試藥劑：藥劑A、藥劑B。

3、實(shí)驗(yàn)器材：養(yǎng)蟲室、potter噴霧塔、量筒、鑷子、吸管、燒杯、培養(yǎng)皿、毛筆等。

四、試驗(yàn)辦法與步驟

1、藥劑配制：將A、B藥劑配成0.1%的溶液備用。

2、試蟲移?。?/p>

取小菜蛾3齡幼蟲集中混勻后，用毛筆刷入培養(yǎng)皿，每處理10頭，重復(fù)一次。

3、噴布質(zhì)量檢定

用9cm的白色園紙片來(lái)檢查噴霧霧滴的大小和噴布是否勻稱全都，如不符合要求，可調(diào)整噴頭及位置，使噴布質(zhì)量達(dá)到基本要求。

4、處理辦法：

采納噴霧法，選用potter噴霧塔，噴布藥液前，用清水及欲噴灑的藥液大量噴布。換藥前需將受藥盤及霧化室底部用布充分擦凈，然后大量噴布實(shí)驗(yàn)的藥液。

在接有小菜蛾的培養(yǎng)皿中加入一定新奇菜葉后，用移液管吸取3ml藥液舉行噴布，約10秒后，待藥液所有沉降，取出培養(yǎng)皿，做好標(biāo)記，空白對(duì)比只噴灑清水。待藥劑干后，將試蟲連同飼料置于恢復(fù)室內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)后檢查結(jié)果。

五、試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、目標(biāo)試蟲的挑選：應(yīng)選用具有一定的代表性及經(jīng)濟(jì)價(jià)值，耐藥性較強(qiáng)、生長(zhǎng)茁壯、自然

死亡率底，蟲齡蟲體大小全都，最好采納人工飼養(yǎng)的試蟲。

2、環(huán)境條件的挑選：溫度在20-28℃，相對(duì)濕度在60%-80%，通氣良好。

3、處理設(shè)計(jì)：每處理需試蟲15-30頭，可以不設(shè)重復(fù)，每次實(shí)驗(yàn)均要設(shè)空白對(duì)比，施藥時(shí)

要注重各處理用藥等量勻稱全都。

六、試驗(yàn)結(jié)果處理：

處理24小時(shí)，48小時(shí)后，檢查死活蟲數(shù)，計(jì)算死亡率及校正死亡率，并比較不同藥劑的毒力大小。試蟲死活標(biāo)準(zhǔn)，普通以能正?；顒?dòng)或飛行的或能正常行動(dòng)的作為活蟲，其余中毒的均為死蟲。

%

1001%

100?--=?=

對(duì)比死亡率對(duì)比死亡率

處理死亡率校正死亡率總蟲數(shù)死蟲數(shù)

死亡率

表1

殺蟲劑初步毒力實(shí)驗(yàn)記載表實(shí)驗(yàn)藥劑濃度(或劑量)

處理辦法

供試?yán)ハx

試蟲數(shù)

處理24小時(shí)處理48小時(shí)死蟲數(shù)

死亡率(%)

校正死亡率(%)

死蟲數(shù)

死亡率(%)

校正死亡率(%)

七、

思量題：

1、將篩選藥劑的毒力實(shí)驗(yàn)結(jié)果記入殺蟲劑初步毒力實(shí)驗(yàn)記載表，并寫成報(bào)告。

2、殺蟲劑初步毒力測(cè)定在殺蟲劑的篩選中有什么重要意義。

試驗(yàn)三殺蟲劑毒殺作用方式的測(cè)定

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

學(xué)習(xí)和把握殺蟲劑毒殺作用方式的測(cè)定技術(shù)。

二．試驗(yàn)原理：

經(jīng)初篩實(shí)驗(yàn)后選出殺蟲毒力高的農(nóng)藥，需進(jìn)一步測(cè)定它的毒殺作用方式——觸殺、胃毒、薰蒸、內(nèi)吸、忌避以及毒殺作用強(qiáng)度等，進(jìn)一步明確不同類型殺蟲劑的殺蟲特性。

三．主要儀器及試材：

1．供試?yán)ハx：小菜蛾（4齡）

2．供試藥劑：藥劑A、藥劑B

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

（一）觸殺作用方式的測(cè)定：

觸殺作用方式的測(cè)定是用來(lái)推斷毒劑通過(guò)昆蟲體壁進(jìn)入蟲體的觸殺毒效。常用的辦法有浸漬法、藥膜法、直接噴撒法、微量點(diǎn)滴法等。本試驗(yàn)采納藥膜法來(lái)鑒定農(nóng)藥的觸殺毒力作用。

1．試驗(yàn)儀器及用具：養(yǎng)蟲室、濾紙（9cm）、培養(yǎng)皿（9cm）、培養(yǎng)皿（5cm）、具塞小試管等。

2．試驗(yàn)辦法與步驟：

（1）藥劑的配制：使用丙酮，將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml三個(gè)濃度，每濃度5ml，裝入具塞小試管。

（2）使用藥膜法對(duì)小菜蛾（4齡）幼蟲舉行觸殺作用毒力測(cè)定。

（3）制作濾紙藥膜：取一張直徑為9cm的濾紙，放插在報(bào)紙上的三支大頭針上，不使其接觸物體表面，吸取0.5ml丙酮藥液，圍繞濾紙外緣逐漸向內(nèi)滴加，使丙酮藥液勻稱分布在濾紙上，同法每藥劑濃度及丙酮對(duì)比各制備3張濾紙藥膜。

（4）將涼干后的濾紙藥膜放在培養(yǎng)皿底，每濃度重復(fù)三次，操作時(shí)避開手摸，隨即每張藥膜放入試蟲20頭，任其爬行15-30min。

（5）處理完畢后，將處理過(guò)的試蟲置于27℃，整潔的環(huán)境中，并飼喂新奇的飼料，24小時(shí)后檢查死蟲數(shù)，以物觸其蟲體無(wú)任何反應(yīng)者為死亡。

（二）胃毒作用方式的測(cè)定：

胃毒作用方式的測(cè)定是用來(lái)推斷毒劑通過(guò)昆蟲取食進(jìn)入消化道的毒殺能力，測(cè)定辦法是把藥加入餌料中飼喂昆蟲，或?qū)⑺幰鹤⑷肜ハx的口腔內(nèi)，迫使所有吞食，較抱負(fù)的辦法是夾毒葉片法。其基本原理是在兩片葉中夾入勻稱簇?fù)淼乃巹?，制成夾毒葉片飼喂昆蟲，藥劑隨昆蟲取食進(jìn)入消化道而發(fā)生毒殺作用。

1．試驗(yàn)儀器及用具：養(yǎng)蟲室、微量注射器、培養(yǎng)皿（5cm）、淀粉糊、鑷子、剪刀、具塞小試管等。

2．試驗(yàn)辦法：

（1）藥劑的配制：使用丙酮，將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml三個(gè)濃度，每濃度5ml，裝入具塞小試管。

（2）將菜葉剪成直徑2cm的小片若干張，用微量注射器將丙酮藥液定量（10ul）點(diǎn)滴在葉片上，待丙酮揮發(fā)后，用淀粉糊涂在無(wú)藥的葉片上，用鑷子移于帶藥的葉片上，將上

下兩張葉片粘合制成夾毒葉片，飼喂試蟲，另喂無(wú)毒葉片為對(duì)比，每濃度處理試蟲20頭，重復(fù)三次。24小時(shí)后觀看試蟲的死亡狀況。（三）內(nèi)吸作用方式的測(cè)定：

內(nèi)吸作用方式的測(cè)定是藥劑接觸植物的某一部分，如根、莖、葉或種子等，滲入到植物的內(nèi)部組織，隨植物體液傳導(dǎo)至全株，在一定的時(shí)光內(nèi)，當(dāng)昆蟲取食帶毒的植物或吸取帶毒的汁液，而產(chǎn)生致毒反應(yīng)。本試驗(yàn)采納根部?jī)?nèi)吸法。

1．試驗(yàn)儀器及用具：養(yǎng)蟲室、燒杯、吸管、培養(yǎng)皿（5cm）、剪刀、植物苗等。2．試驗(yàn)辦法：

（1）藥劑的配制：將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml的水溶液各

50ml，注入燒杯中。

（2）將植物苗的根部插入藥液中，以清水為對(duì)比，2小時(shí)后，取植物苗的上部未接觸藥

液的葉片飼喂試蟲，每濃度處理試蟲20頭，重復(fù)三次，24小時(shí)后觀看試蟲死亡狀況。

（四）薰蒸作用方式的測(cè)定：

薰蒸作用方式的測(cè)定是在適當(dāng)溫度下，在固定的空間蒸發(fā)成氣態(tài)，并達(dá)到一定的濃度，與試蟲接觸，在短時(shí)光內(nèi)能殺死試蟲。本試驗(yàn)采納培養(yǎng)皿簡(jiǎn)易薰蒸測(cè)定法。1．試驗(yàn)儀器及用具：養(yǎng)蟲室、培養(yǎng)皿（9cm）、培養(yǎng)皿（5cm）、吸管、紗布燒杯等。2．試驗(yàn)辦法：

（1）藥劑的配制：將藥劑A和B分離配制成1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml的水溶液

各20ml，注入燒杯中。

（2）取直徑相同的9cm的磨口培養(yǎng)皿，皿底放10ml的藥劑，用雙層紗布密蓋皿底，其

上放試蟲20頭，每濃度重復(fù)三次，以清水為對(duì)比。

（3）2小時(shí)后，將試蟲轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿（5cm）中，培養(yǎng)24小時(shí)后，觀看試蟲死亡狀況。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、目標(biāo)試蟲的挑選：應(yīng)選用具有一定的代表性及經(jīng)濟(jì)價(jià)值，耐藥性較強(qiáng)、生長(zhǎng)茁壯、自然

死亡率底，蟲齡蟲體大小全都，最好采納人工飼養(yǎng)的試蟲。

2、環(huán)境條件的挑選：溫度在20-28℃，相對(duì)濕度在60%-80%，通氣良好。

3、處理設(shè)計(jì)：每處理需試蟲15-30頭，重復(fù)三次，每次實(shí)驗(yàn)均要設(shè)空白對(duì)比，施藥時(shí)要注

意各處理用藥等量勻稱全都。

4、試驗(yàn)辦法的挑選：按照試驗(yàn)原理挑選相宜的試驗(yàn)辦法，盡可能避開其他毒殺作用方式的

干擾。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

觀看死活蟲數(shù)，計(jì)算死亡率及校正死亡率，推斷藥劑毒作用方式。試蟲死活標(biāo)準(zhǔn)，普通以能正?；顒?dòng)或飛行的或能正常行動(dòng)的作為活蟲，其余中毒的均為死蟲。

%

1001%

100?--=?=

對(duì)比死亡率對(duì)比死亡率

處理死亡率校正死亡率總蟲數(shù)死蟲數(shù)

死亡率

七．思量題：

1、將篩選藥劑的毒力實(shí)驗(yàn)結(jié)果記入實(shí)驗(yàn)記載表，并寫成報(bào)告。

2、按照試驗(yàn)結(jié)果推斷藥劑的毒殺作用方式。

3、農(nóng)藥殺蟲作用方式的測(cè)定，在生產(chǎn)實(shí)踐中有何意義。

4、比較觸殺作用方式的測(cè)定中，常用的浸漬法、藥膜法、直接噴撒法、微量點(diǎn)滴法的優(yōu)缺

點(diǎn)。

5、你認(rèn)為在內(nèi)吸殺蟲作用方式測(cè)定中，哪些措施可以排解觸殺、薰蒸作用的影響。

表2毒殺作用方式試驗(yàn)結(jié)果記載表

實(shí)驗(yàn)藥劑濃度(或劑

量)

試驗(yàn)方

法

試蟲種

類

重復(fù)次

數(shù)

供試

蟲數(shù)

處理24小時(shí)

死蟲

數(shù)

死亡率

(%)

校正死亡

率(%)

試驗(yàn)四殺蟲劑精密毒力測(cè)定

——微量點(diǎn)滴法

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、學(xué)習(xí)和把握觸殺毒力精密測(cè)定技術(shù)—微量點(diǎn)滴法。

2、學(xué)習(xí)農(nóng)藥生物測(cè)定數(shù)據(jù)的處理辦法—繪圖法，最小二乘法和機(jī)率值分析法，求出致死中量（LD50）和致死中濃度（LC50）。

3、明確殺蟲劑殺蟲毒力表示辦法的意義和應(yīng)用。

二．試驗(yàn)原理：

在舉行農(nóng)藥殺蟲作用方式的試驗(yàn)后，了解某些化合物具有觸殺作用的基礎(chǔ)上，為了明確其觸殺強(qiáng)度以及比較幾種藥劑的觸殺毒力大小時(shí)，需采納精密觸殺毒力測(cè)定技術(shù)來(lái)求出它的致死中量（或致死中濃度）。目前許多有機(jī)合成殺蟲劑大多數(shù)都具有觸殺作用，因而觸殺毒力測(cè)定具有一定的重要性，測(cè)定辦法雖然無(wú)數(shù)，但基本上可分為兩大類：一是所有施藥法：如定量噴粉法、定量噴霧法和用一定濃度藥液浸漬法等。其優(yōu)點(diǎn)是操作便利，比較符合實(shí)際施藥狀況。但藥劑簡(jiǎn)單被試蟲吞食產(chǎn)生胃毒作用。二是局部施藥法：是目前比較精確的觸殺毒力測(cè)定辦法。普通包括藥膜法和微量點(diǎn)滴法。微量點(diǎn)滴法是將一定濃度和容積的藥液點(diǎn)滴在試蟲體的一定部位，溶劑揮發(fā)后，藥劑即可自體壁進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮觸殺作用，藥劑不致被試蟲吞食。本試驗(yàn)采納微量點(diǎn)滴法來(lái)測(cè)定農(nóng)藥的觸殺毒力作用。

三．主要儀器及試材：

1、試蟲：棉鈴蟲（3齡）

2、藥劑：氯氰菊酯等

3、試驗(yàn)儀器及用具：養(yǎng)蟲室、毛細(xì)管點(diǎn)滴器、分析天平、濾紙、通針、培養(yǎng)皿（5cm）、容量瓶、具塞小試管及試管架、鑷子、移液管、丙酮等。

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

（一）實(shí)驗(yàn)前的預(yù)備工作

1、試蟲的移取：

選取3齡棉鈴蟲，大小勻稱全都的個(gè)體，放在墊有吸水紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿10頭，為一個(gè)處理。每個(gè)處理重復(fù)三次，分離在分析天平上稱重，求出平均體重，備用。

2、稱藥配藥：

將試藥當(dāng)心地移入洗凈干燥的稱量瓶中，在分析天平上精確?????稱取一定量試藥，放入小燒杯內(nèi)，加少量丙酮溶解，再移入容量瓶中，加丙酮定容。搖勻即為母液，備用。

3、毛細(xì)管點(diǎn)滴器的質(zhì)量檢定：

檢查毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器是否通暢，并練習(xí)使用。

（二）準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)

為了確定合適的施藥濃度（或劑量）（要求試蟲死亡率分布在20-80%范圍內(nèi)），在正式實(shí)驗(yàn)前，必需先用幾個(gè)濃度或劑量（范圍較大）舉行試點(diǎn)滴，按照死亡結(jié)果，確定最合適的點(diǎn)滴濃度，準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所用試蟲可以削減一半左右。

（三）正式實(shí)驗(yàn)步驟

1、藥液的配制：

按照準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將容量瓶中的母液按等比級(jí)數(shù)用丙酮稀釋成5個(gè)濃度，如1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/μl等。每濃度5ml，裝入具塞小試管。并以丙酮為對(duì)比。2、稱重：

將選好的試蟲，在分析天平上稱重，每個(gè)濃度為一個(gè)處理，每個(gè)處理10頭試蟲，重復(fù)三次，將每10頭試蟲放在墊有吸水紙的整潔培養(yǎng)皿內(nèi)，待處理。3、點(diǎn)滴：

使用毛細(xì)管點(diǎn)滴器對(duì)棉鈴蟲（3齡）幼蟲舉行觸殺毒力測(cè)定。首先舉行準(zhǔn)備練習(xí)，以毛細(xì)管點(diǎn)滴器吸丙酮點(diǎn)滴在濾紙上，反復(fù)多次，以點(diǎn)滴的大小勻稱全都，每次均有為嫻熟。然后點(diǎn)滴蟲體，先對(duì)比，再?gòu)牡蜐舛鹊礁邼舛龋總€(gè)濃度點(diǎn)滴蟲體的中胸背部，每蟲一滴，每濃度20頭，重復(fù)三次。點(diǎn)滴藥液量按照試蟲大小確定，普通以試蟲接受藥液不從體壁上流失為宜。棉鈴蟲3齡幼蟲，點(diǎn)滴量為0.3-0.5μl，各處理試蟲的點(diǎn)藥量應(yīng)全都。4、培養(yǎng)：

處理完畢后，將處理過(guò)的試蟲置于27℃的環(huán)境中，飼喂新奇飼料，24小時(shí)，48小時(shí)后檢查死蟲數(shù)，以物觸其蟲體無(wú)任何反應(yīng)者為死亡。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、目標(biāo)試蟲的挑選：應(yīng)選用具有一定的代表性及經(jīng)濟(jì)價(jià)值，耐藥性較強(qiáng)、生長(zhǎng)茁壯、自然

死亡率底，蟲齡蟲體大小全都，最好采納人工飼養(yǎng)的試蟲。

2、環(huán)境條件的挑選：溫度在20-28℃，相對(duì)濕度在60%-80%，通氣良好。

3、處理設(shè)計(jì)：每處理需試蟲15-30頭，重復(fù)三次，每次實(shí)驗(yàn)均要設(shè)空白對(duì)比，施藥時(shí)要注

意各處理用藥等量勻稱全都。

4、試驗(yàn)中對(duì)比（CK）的死亡率最好小于10%，大于20%時(shí)試驗(yàn)必需重做。

5、藥液的配制中，要求不少于5個(gè)濃度梯度，各處理的死亡率在20-80%之間為最好。

6、點(diǎn)滴操作過(guò)程中，點(diǎn)滴力度相宜，應(yīng)避開力度過(guò)大而導(dǎo)致蟲體損傷。并隨時(shí)檢查點(diǎn)滴器

是否通暢。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

觀看死活蟲數(shù)，計(jì)算死亡率及校正死亡率，并將結(jié)果記入表中。

%

1001%

100?--=?=

對(duì)比死亡率對(duì)比死亡率

處理死亡率校正死亡率總蟲數(shù)死蟲數(shù)

死亡率

如自然死亡率超過(guò)20%，說(shuō)明試蟲群體生活力差或?qū)嶒?yàn)辦法有問(wèn)題，應(yīng)重做。為了求得供試藥劑的致死中量、需要按照用藥濃度及體積求出每頭試蟲的受藥量，并換算出單位蟲體重的受藥量。

每頭試蟲受藥量（微克）=每微升藥液中含藥劑微克數(shù)×每頭試蟲受藥微升數(shù)

/=

每頭試蟲受藥量（微克）

單位蟲體重受藥量（微克藥量克蟲體重）試蟲平均體重（克）按照測(cè)定結(jié)果，以單位體重受藥量（或每頭受藥量）的對(duì)數(shù)值為x，校正死亡率換算成機(jī)率值為y，求毒力回歸方程y=a+bx，并求致死中量（LD50）值，且舉行牢靠性檢驗(yàn)。

七．思量題：

1、求出藥量對(duì)數(shù)—死亡率機(jī)率值毒力回歸方程，求出供試藥劑的致死中量。

2、為什么要以致死中量或致死中濃度作為比較藥劑毒力的標(biāo)準(zhǔn)。

3、在試驗(yàn)過(guò)程中哪些地方簡(jiǎn)單出誤差，如何克服。

表3殺蟲劑精密毒力測(cè)定原始數(shù)據(jù)記錄表

供試藥劑

濃

度

(%)

每微升藥

液中含有

藥劑微克

數(shù)

每頭試蟲

接受藥液

微升數(shù)

每頭試蟲

接受藥量

(微克)

試蟲

平均

體重

(克)

單位蟲體重接受藥量

(微克藥量/克蟲體重)

死亡

率（%）

校正

死亡

率（%）

對(duì)比

表4殺蟲劑精密毒力測(cè)定數(shù)據(jù)換算表

供試藥劑單位蟲體重接受藥量或

每頭試蟲受藥量

(微克藥量/克蟲體重)

藥量對(duì)

數(shù)值

校正死亡

率（%）

死亡率

機(jī)率值

毒力回歸

方程

相關(guān)

系數(shù)

LD50

試驗(yàn)五殺菌劑最低抑制濃度測(cè)定法

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

學(xué)習(xí)和把握殺菌劑最低抑制濃度測(cè)定法的基本原理和試驗(yàn)辦法。

二．試驗(yàn)原理：

殺菌劑最低抑制濃度測(cè)定法，即藥劑與培養(yǎng)基混合，藥劑的濃度逐漸降低，找出抑制病菌生長(zhǎng)的最低濃度，比較藥劑對(duì)供試菌毒力的大小。測(cè)定辦法包括混合法、劃線培養(yǎng)法、載菌培養(yǎng)基移植法。本試驗(yàn)采納載菌培養(yǎng)基移植法，即把藥劑混合在培養(yǎng)基中，制成平面，然后把繁殖有供試菌種的載菌培養(yǎng)基小塊放置在含藥液培養(yǎng)基表面上，假如藥劑濃度適當(dāng)，則載菌培養(yǎng)基小塊上的菌落不能擴(kuò)展到含藥液的培養(yǎng)基上。

三．主要儀器及試材：

1、試驗(yàn)藥劑：多菌靈，百菌清等；

2、供試菌種：棉花炭疽病菌等（培養(yǎng)皿菌種）；

3、試驗(yàn)器皿：培養(yǎng)皿、容量瓶、移液管、無(wú)菌水、PDA培養(yǎng)基[注：以上器皿須經(jīng)滅菌。]

超凈工作臺(tái)、滅菌鍋、培養(yǎng)箱、打孔器、酒精燈等。

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

1、藥液的配制：

使用無(wú)菌水，將多菌靈配制成1000、500、200、50、20(μg/ml)5個(gè)濃度，另設(shè)一個(gè)無(wú)菌水對(duì)比。

2、混藥培養(yǎng)基平面的制作：

將培養(yǎng)基（已滅菌）熔化，在無(wú)菌的條件下，取培養(yǎng)基9ml，加入1ml配制的藥液于滅菌的培養(yǎng)皿，充分混合勻稱，制成混藥培養(yǎng)基平面，每濃度重復(fù)三次。

3、接種：

使用打孔器打取菌塊，用鑷子將載菌的培養(yǎng)基小塊放置在含藥液的培養(yǎng)基表面，作好標(biāo)簽后，恒溫培養(yǎng)。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、本試驗(yàn)要注重?zé)o菌操作，囫圇試驗(yàn)操作過(guò)程在無(wú)菌操作臺(tái)上完成。

2、藥液和培養(yǎng)基混合時(shí)注重培養(yǎng)基的溫度（70-80℃），并保證混合勻稱；接種（菌塊）前

要冷卻，接種時(shí)菌塊的菌絲面對(duì)上。

3、用打孔器打菌塊時(shí)注重打孔器溫度不要太高，以免影響菌種的生長(zhǎng)。

4、用打孔器打菌塊時(shí)應(yīng)在菌落的外緣打菌塊，因外緣的生長(zhǎng)力強(qiáng)，且差異小。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

供試菌培養(yǎng)2-3天后，檢查病菌生長(zhǎng)狀況。培養(yǎng)皿內(nèi)無(wú)病菌生長(zhǎng)者用“-”號(hào)表示，有病菌生長(zhǎng)者用“+”號(hào)表示，在“+”與“-”之間的藥劑濃度即為抑制病菌所需藥劑的最低濃度，普通取中間濃度為準(zhǔn)。假如對(duì)比無(wú)病菌生長(zhǎng)，此試驗(yàn)必需重做。

七．思量題：

1、將最低抑制濃度檢查結(jié)果記載于結(jié)果記載表中，并按照試驗(yàn)結(jié)果完成試驗(yàn)報(bào)告。

2、比較各種藥劑對(duì)病菌的毒力。

3、研究本試驗(yàn)辦法的特點(diǎn)。

表5殺菌劑最低抑制濃度測(cè)定結(jié)果記載表

供試菌種供試藥劑

藥劑濃度

（μg/ml）

供試病菌生長(zhǎng)狀況

有無(wú)雜菌備注

123

對(duì)比

試驗(yàn)六殺菌劑抑菌圈測(cè)定法

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、了解殺菌劑抑菌圈測(cè)定法的基本原理及應(yīng)用范圍；

2、認(rèn)識(shí)殺菌劑抑菌圈測(cè)定法的試驗(yàn)辦法。

二．試驗(yàn)原理：

抑菌圈法又叫水平蔓延法，此法最早曾廣泛應(yīng)用于抗菌素的效價(jià)測(cè)定，隨后也被用于農(nóng)業(yè)殺菌劑的毒力測(cè)定。其基本原理是在已接種供試菌的瓊脂培養(yǎng)基上施以少量抗菌性物質(zhì)或殺菌劑，使其接觸培養(yǎng)基或病原菌，經(jīng)過(guò)適當(dāng)初間的培養(yǎng)后，接觸部分的周圍因?yàn)榭咕镔|(zhì)或殺菌劑的滲透蔓延作用，殺死病菌的養(yǎng)分體（菌絲體）、繁殖體（孢子）或抑制其在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而產(chǎn)生抑菌圈。

試驗(yàn)證實(shí)，在一定濃度范圍內(nèi)的藥劑濃度與抑菌圈直徑大小有一定的關(guān)系，即殺菌劑在一定范圍內(nèi)抑制菌圈直徑或其平方與濃度的對(duì)數(shù)成直線函數(shù)關(guān)系，以抑菌圈直徑或直徑平方為縱軸，藥劑濃度的對(duì)數(shù)為橫軸，可繪成直線。假如被測(cè)的幾種藥劑所繪成的直線互相平行，則可按照一定濃度下抑菌圈大小舉行不同藥劑毒力大小的比較。

抑菌圈法已被國(guó)際上通用的抗菌素效價(jià)測(cè)定辦法。

三．主要儀器及試材：

1、供試菌種：棉花炭疽病菌；

2、供試藥劑：多菌靈，百菌清等；

3、試驗(yàn)器皿：無(wú)菌水，容量瓶，移液管，培養(yǎng)皿（9cm，5cm），PDA培養(yǎng)基，牛津杯（或?yàn)V紙片（0.5cm）），鑷子，[注：以上器皿需經(jīng)滅菌]，超凈工作臺(tái)、滅菌鍋、培養(yǎng)箱、分析天平，顯微鏡，接種環(huán)，記號(hào)筆，酒精燈等。

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

1、藥液配制：

使用無(wú)菌水，將多菌靈和百菌清分離配制成160、80、40、20、10μg/ml，定容至10ml。以無(wú)菌水為對(duì)比。

2、制備菌懸液：

取培養(yǎng)7天左右的供試試管菌種，加入少量無(wú)菌水（約6-8ml），用接種環(huán)輕刮斜面培養(yǎng)基上的孢子和菌絲體，制備孢子懸液，將孢子懸液用無(wú)菌雙層紗布過(guò)濾于滅菌三角瓶?jī)?nèi)，并用滅菌棉塞塞口。然后用滅菌吸管吸取少量孢子懸液于載玻片上，在低倍（15×10）顯微鏡下檢查每個(gè)視野中孢子數(shù)目，要求在80個(gè)左右。

3、制備載菌培養(yǎng)基平面：

將熔化的培養(yǎng)基（已滅菌）冷卻到45-50℃時(shí)，在無(wú)菌條件下，吸培養(yǎng)基9ml，加入1ml菌液于滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)，充分混合勻稱，制成載菌培養(yǎng)基平面。

4、藥劑處理：

在載菌培養(yǎng)基平面上放置牛津杯，（或?qū)⑴浜玫乃巹┑谷霚缇男∨囵B(yǎng)皿內(nèi)，用消毒鑷子將已滅菌的濾紙片放入藥液中浸泡1分鐘后取出，放在消毒濾紙上，使濾紙片上多余的藥劑被吸去，在無(wú)菌條件下，放入載菌培養(yǎng)基平面上）。共需要4只載菌培養(yǎng)皿，2只為一組，分成二組。在每只培養(yǎng)皿放6個(gè)牛津杯（或?yàn)V紙片），放置位置如下圖所示，圖中O代表牛

津杯（或?yàn)V紙片），1，2，3，4，5分離代表配制的160、80、40、20、10μg/ml5種藥劑濃度，每個(gè)牛津杯內(nèi)加入藥液0.2ml，并作好標(biāo)記。

圖1牛津杯（或?yàn)V紙片）在培養(yǎng)基上的羅列

5、培養(yǎng)：處理的培養(yǎng)皿，先放置在2-4℃的冰箱內(nèi)4-6小時(shí)，待藥劑在培養(yǎng)基中充分蔓延后，

再放入28℃培養(yǎng)。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、本試驗(yàn)要注重?zé)o菌操作，囫圇試驗(yàn)操作過(guò)程在無(wú)菌操作臺(tái)上完成。

2、藥液和培養(yǎng)基混合時(shí)注重培養(yǎng)基的溫度（45-50℃，溫度過(guò)高會(huì)燙死病菌，過(guò)低培養(yǎng)基會(huì)

凝固），并保證混合勻稱。

3、檢查結(jié)果時(shí)十字交錯(cuò)量抑菌圈直徑，取其平均值。（以毫米為單位）

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

處理的培養(yǎng)皿，先放置在2-4℃的冰箱內(nèi)4-6小時(shí)，待藥劑在培養(yǎng)基中充分蔓延后，再放入28℃培養(yǎng)，30-40小時(shí)后檢查結(jié)果，用尺十字交錯(cuò)測(cè)量抑菌圈直徑（以毫米為單位），取平均值。將每個(gè)培養(yǎng)皿中的40μg/ml的抑菌圈直徑（共8個(gè)）求出總平均值；求出每組（2個(gè)）培養(yǎng)皿中40μg/ml直徑（共4個(gè)）的平均值。總平均值與各組平均值的差數(shù)即為該組培養(yǎng)皿的校正當(dāng)。用校正當(dāng)來(lái)校正本組其他濃度的抑菌圈直徑（比總平均值小的加上校正當(dāng)，比總平均值大的則減去校正當(dāng)）。以藥劑濃度對(duì)數(shù)為橫軸，以抑菌圈直徑為縱軸繪制曲線，假如各曲線平行，按照藥量反應(yīng)曲線上的中等濃度比較不同的的藥劑的抑菌圈大小，以此來(lái)判定藥劑毒力大小。

七．思量題：

1、將試驗(yàn)結(jié)果記載于抑菌圈測(cè)定結(jié)果記載表上，收拾的結(jié)果在方格紙上或?qū)?shù)紙上繪成藥量反應(yīng)曲線。以藥劑濃度對(duì)數(shù)為橫軸，以抑菌圈直徑為縱軸繪成曲線。假如各曲線平行，按照藥量反應(yīng)曲線上的中等濃度比較不同的藥劑的抑菌圈大小，以此來(lái)推斷藥劑毒力。并完成試驗(yàn)報(bào)告。

2、水平蔓延法包括哪些實(shí)驗(yàn)辦法，各有何特點(diǎn)。

3、影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果有哪些關(guān)鍵因子，應(yīng)從哪些地方注重操作才干避開。

表6抑菌圈測(cè)定結(jié)果記載表

供試菌種供試

藥劑

組別藥劑濃度抑菌圈直徑

（mm）

平均

值

總平

均值

校正

值

校正后

的數(shù)值μg/ml對(duì)數(shù)值

第一

組

其次

組

試驗(yàn)七殺菌劑溫室盆栽試驗(yàn)

——棉籽藥劑拌種試驗(yàn)

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、了解殺菌劑溫室盆栽試驗(yàn)的基本原理及應(yīng)用范圍；

2、認(rèn)識(shí)殺菌劑藥劑拌種試驗(yàn)的試驗(yàn)辦法。

二．試驗(yàn)原理：

藥劑拌種的作用是殺死或抑制附著在種子表面或潛育在種子內(nèi)部的病菌，庇護(hù)幼苗不被病菌侵染而發(fā)病。藥劑拌種可用于多種作物，如禾谷類小麥、高粱、玉米等可用藥劑拌種防治附著在種子表面的黑穗病和黑粉病菌；用于棉花種子上，可防治棉花炭疽、立枯病菌等。

室內(nèi)藥劑拌種實(shí)驗(yàn)的辦法有兩種：1）、利用人工保存菌種處理種子，將帶菌種子用藥劑舉行處理，處理后的種子放在有瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或放在細(xì)菌難以生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中，并放在病菌相宜的溫度下保持7-10天，觀看種子周圍有無(wú)此病菌生長(zhǎng)，是何狀態(tài)，推斷藥劑效果。2）、利用自然?帶菌種子，以各種不同藥劑處理后，播種在盆缽?fù)寥纼?nèi)，一定時(shí)光后觀看種子發(fā)芽率、發(fā)病率、苗高及有無(wú)病斑。

本試驗(yàn)采納的供試種子是棉花種子，供試菌種為棉花炭疽病菌，用第一種辦法舉行人工接種，制成帶菌種子。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：多菌靈等

2、供試病菌：棉花炭疽病菌

3、供試種子：棉籽

4、試驗(yàn)器皿：溫室（或生化培養(yǎng)箱）、超凈工作臺(tái)、滅菌鍋、培養(yǎng)箱、分析天平，燒杯，搪瓷盤，顯微鏡，無(wú)菌水，移液管，培養(yǎng)皿（9cm），PDA培養(yǎng)基[注：以上器皿需經(jīng)滅菌]，鑷子，接種環(huán)，記號(hào)筆，酒精燈等。

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

1、選種：

選取粒大、飽滿、色澤全都、茁壯無(wú)病蟲的棉花種子，每個(gè)處理稱取20克，共稱8份。

2、溫湯浸種：

將選擇的棉花種子（留1份作對(duì)比）放在溫水（45℃左右）浸泡一下潮濕絨毛，然后撈出棉籽放入50-55℃溫水中燙30分鐘，并不斷上下翻動(dòng)棉籽，使受熱勻稱。30分鐘后撈出棉籽，涼至七成干。

3、菌液拌種：

取在棉桿上培養(yǎng)15天（或在試管斜面上培養(yǎng)7天）的棉花炭疽病菌，用無(wú)菌水制成孢子懸浮液，用紗布過(guò)濾，在顯微鏡下檢查孢子數(shù)目，低倍鏡下每個(gè)視野30-100個(gè)左右，共制備150ml菌液。將晾至七成干的棉花種子（留1份不拌菌液作對(duì)比）放入裝有一定量菌液的燒杯中，用玻棒攪拌，使棉籽表面勻稱的附著棉花炭疽病菌的孢子，取出晾至七成干，分離舉行藥劑處理。

4、藥劑處理：

分離稱取多菌靈等藥劑，藥量分離為種子分量的0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%，按

種子分量分離計(jì)算所需藥量。用分析天平稱取所需藥劑，放入拌種容器內(nèi)，再加入晾至7成干的帶菌棉籽（留1份不拌藥劑作對(duì)比），用玻棒攪拌使藥劑勻稱附著在棉籽上。5、種子的哺育：

（1）室內(nèi)培養(yǎng)基培養(yǎng)帶菌種子：

將溶化的馬鈴薯培養(yǎng)基勻稱地倒入滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)（每個(gè)培養(yǎng)皿15ml），凝固后放入藥劑處理的種子，每皿放10粒，每處理設(shè)三個(gè)重復(fù)。對(duì)比共三個(gè)：1）、未經(jīng)任何處理的棉籽；2）、溫湯浸種未拌菌液的種子；3）、溫湯浸種拌菌液但未拌藥劑的種子。每個(gè)處理完成后，應(yīng)作好標(biāo)記，放入25-28℃下培養(yǎng)7天以后觀看種子的發(fā)芽率和發(fā)病率。（2）溫室?guī)ЬN子哺育的辦法：

將經(jīng)過(guò)高壓滅菌的土壤裝入花盆內(nèi)（每盆裝土為花盆的2/3），用自來(lái)水澆濕土壤，等水滲透后，用鑷子夾取處理的棉籽播種于花盆內(nèi)，每盆播種20粒，先播對(duì)比，再播種藥劑處理的種子，然后在種子上蓋一層干的滅菌土壤。每個(gè)處理作好標(biāo)記，放在25℃下哺育，經(jīng)過(guò)2周左右觀看種子的發(fā)芽率和發(fā)病率。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、植物種子的挑選，應(yīng)選取飽滿，大小全都，健康無(wú)病蟲害的種子。

2、藥劑拌種一定要?jiǎng)蚍Q。

3、種子哺育過(guò)程中，要注重?zé)o菌操作，盡量削減雜菌污染。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

（1）室內(nèi)培養(yǎng)基培養(yǎng)帶菌種子：

處理后的棉籽培養(yǎng)7天以后，檢查種子的發(fā)芽率和發(fā)病率。打算種子是否帶菌，看種子周圍的培養(yǎng)基上有無(wú)病菌生長(zhǎng)，此病菌是何狀態(tài)。在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的棉花炭疽病菌的孢子為淡紅色的粘液（象細(xì)菌的菌落，菌絲為灰白色）。假如用肉眼難以鑒別，可以通過(guò)鏡檢確定。觀看棉芽的胚根或胚莖上是否長(zhǎng)有紅色的縱裂痕或褐色病斑，檢查結(jié)果與對(duì)比相比較，確定藥效和藥劑對(duì)種子發(fā)芽有無(wú)不良影響。

（2）溫室?guī)ЬN子的哺育：

播種于花盆內(nèi)的棉籽，經(jīng)14天左右如幼苗已所有長(zhǎng)出就將幼苗所有拔出，用清水沖洗后檢查（棉花炭疽病多發(fā)生在莖部），輕時(shí)為紅色的縱裂痕，嚴(yán)峻時(shí)為褐色病斑以至根腐爛而死，有時(shí)子葉也發(fā)病，在子葉邊緣發(fā)生半圓形暗褐色病斑。記載出苗株數(shù)，求出出苗率，發(fā)病率，死苗率和防治效果，比較不同藥劑的防效。

%100%?=總苗數(shù)

有病苗數(shù)

）發(fā)芽率（

%10031%?-=））發(fā)病率

對(duì)比處理組發(fā)病率

（）防治效果（

七．思量題：

1、將試驗(yàn)結(jié)果記載于測(cè)定結(jié)果記載表上，并完成試驗(yàn)報(bào)告。

2、按照實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較不同藥劑的防治效果。

3、高濃度下棉籽不出芽或出芽后生長(zhǎng)不好，說(shuō)明是什么緣由？對(duì)比不出芽或出芽后很快死去又是什么緣由？

4、重復(fù)間結(jié)果是否相差很大，試分析影響的可能因子。

表7不同藥劑處理棉籽實(shí)驗(yàn)結(jié)果記載表

藥劑種類處理

方式

藥劑劑量（種

子分量的%）

種子總數(shù)發(fā)芽率%發(fā)病率%防治

效果

備

注

123平

均

123

平

均

123

平

均

室內(nèi)

處理

盆載

處理

試驗(yàn)八、除草劑室內(nèi)毒力測(cè)定

——小杯法測(cè)定除草劑毒力

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

學(xué)習(xí)種子發(fā)芽法測(cè)定除草劑生物活性的辦法。

二．試驗(yàn)原理：

種子發(fā)芽法是按照種子發(fā)芽率、根與莖的生長(zhǎng)量、伸長(zhǎng)度或形態(tài)的變化在一定范圍內(nèi)與藥劑劑量呈相關(guān)性而測(cè)定除草劑的生物活性，種子發(fā)芽法適用于醚類、酰胺類、氨基甲酸酯類、激素類等除草劑，所用植物種子主要有小麥、油菜、水稻、稗草等。主要實(shí)驗(yàn)辦法包括黃瓜幼苗形態(tài)法，小杯法，高粱法和稗草中胚軸法等。本試驗(yàn)采納小杯法舉行除草劑室內(nèi)毒力測(cè)定。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：穩(wěn)殺得、殺草丹等

2、供試植物：稻種等

3、試驗(yàn)器皿：溫室（或生化培養(yǎng)箱），分析天平，燒杯（150毫升、50毫升），移液管，洗耳球，玻棒，記號(hào)筆，鑷子，培養(yǎng)皿（12cm）等

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

1．選種：

選取大小、色澤全都，健康無(wú)病蟲害的稻種，在28℃條件下浸種24小時(shí)，催芽48小時(shí)，致種子破胸露白即可。

2．藥液的配制：

將藥劑配制成0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/ml5個(gè)濃度的藥液各50毫升于燒杯中，以水為空白對(duì)比。

3．制作發(fā)芽床：

取50ml的燒杯，在底部放一張圓濾紙片（假如用小麥、油菜等旱地作物為試材時(shí)，需在濾紙下面放入10-20粒小玻璃球或者大砂粒）。

4．滴加藥液：

用5ml移液管分離將所測(cè)藥液自低至高濃度滴加于鋪有濾紙的小燒杯中，寫好標(biāo)記，重復(fù)4次。

5．播種：

用鑷子挑取萌發(fā)全都的催芽種子，每杯中放入水稻種子10粒，勻稱放在燒杯內(nèi)濾紙上并作好標(biāo)記。

6．培養(yǎng)：

將處理過(guò)的小燒杯放入28℃培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，白天賦予日光燈光照，注重天天加一定量的蒸餾水，以補(bǔ)足其水分蒸發(fā)（或用150ml燒杯扣在50ml燒杯上）。

7．觀看測(cè)量：

約5天后藥效癥狀顯然時(shí)，分離測(cè)量株高（或稱鮮重），計(jì)算株高（或鮮重）抑制率。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、植物種子的挑選，應(yīng)選取飽滿，大小全都，健康無(wú)病蟲害的種子。

2、把握植物種子的浸種、催芽辦法，選取剛萌發(fā)的種子來(lái)舉行試驗(yàn)。

3、應(yīng)挑選相宜的發(fā)芽床。

4、注重種子發(fā)芽法適用的除草劑、植物種子的范圍。

5、每種除草劑往往都有其最相宜的測(cè)定植物和測(cè)定辦法。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

培養(yǎng)約5天后檢查試驗(yàn)結(jié)果，以直尺量取各稻種的株高（或稱鮮重），計(jì)算株高（或鮮重）抑制率。

%100%

=?株高（或鮮重）抑制率（）

對(duì)比處理的平均株高（或鮮重）-藥劑處理的平均株高（或鮮重）

對(duì)比處理的平均株高（或鮮重）

按照測(cè)定結(jié)果，以藥劑濃度的對(duì)數(shù)值為x，株高（或鮮重）抑制率換算成機(jī)率值為y，求毒力回歸方程y=a+bx，并求抑制中濃度（IC50）值，且舉行牢靠性檢驗(yàn)。

表8除草劑種子發(fā)芽法測(cè)定結(jié)果記載表供試

藥劑處理濃度（μg/ml）稻種總數(shù)株高（cm）平均株高（cm）株高抑制率（%）

對(duì)比

表9

除草劑種子發(fā)芽法測(cè)定結(jié)果數(shù)據(jù)換算表

供試藥劑濃度

（μg/ml）濃度對(duì)數(shù)值

株高抑制率（%）株高抑制率機(jī)率值

毒力回歸方程相關(guān)系數(shù)

IC50

七．思量題：

1、求出濃度對(duì)數(shù)—株高（或鮮重）抑制率機(jī)率值毒力回歸方程，求出供試藥劑的抑制中濃度，并按照試驗(yàn)結(jié)果完成試驗(yàn)報(bào)告。

2、在試驗(yàn)過(guò)程中哪些地方簡(jiǎn)單出誤差，如何克服。

試驗(yàn)九除草劑溫室盆栽試驗(yàn)

——葉面處理法

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

防除雜草，庇護(hù)作物是應(yīng)用除草劑的目的，因此，除草劑的挑選性就顯得特殊重要。本試驗(yàn)是通過(guò)一些除草劑對(duì)水稻和花生舉行莖葉處理，比較不同的除草劑對(duì)不同的植物的作用差異，了解除草劑的挑選毒性及除草效果。

二．試驗(yàn)原理：

作物與雜草同時(shí)發(fā)生，而絕大多數(shù)雜草同作物一樣屬于高等植物，因此，要求除草劑具備特別挑選性或采納恰當(dāng)?shù)氖褂梅绞降榷钩輨┇@得挑選性。除草劑的挑選性原理大致可劃分為5個(gè)方面：位置與時(shí)差挑選性，形態(tài)挑選性，生理挑選性，生物化學(xué)挑選性以及除草劑利用庇護(hù)物質(zhì)或平安劑獲得挑選性。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：10%草甘膦水劑、50%丁草胺乳油、12.5%蓋草能乳油等。

2、生物材料：水稻+稗草+鴨舌草、花生+稗草+水稻+野莧。

3、試驗(yàn)用具：手壓式噴霧器、燒杯、量筒、吸管、天平、花盆等。

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

1、供試植物的哺育：

從稻田取回表層泥土，曬干，打碎后裝入口徑18cm的花盆內(nèi)，加水浸泡2-3天，用小鐵鏟攪拌呈漿，沉淀后倒出水層，播入經(jīng)催芽的稻種、稗種和鴨舌草。另外種花生的盆只需泥土濕潤(rùn)，即可種入花生種子，并同時(shí)播種稻種、稗種和野莧等。2、藥劑處理：

當(dāng)作物和雜草處于3-5片葉時(shí)，每小組分離挑選水稻和花生各6盆，調(diào)查記錄每盆的水稻株數(shù)和雜草株數(shù)（不同雜草種類分離記錄）記于一小塑料標(biāo)簽上并插回該盆中，每次處理盡量使作物株數(shù)和雜草株數(shù)大致相等，然后分離用手壓式噴霧器噴10%草甘膦11.25kg/ha；50%丁草胺1.5kg/ha；12.5%蓋草能0.75kg/ha。水稻和花生各噴一盆，另兩盆僅噴清水作為對(duì)比，每畝以噴60kg的藥液量計(jì)，即每盆噴5ml。3、結(jié)果觀看記載：

噴藥后7天調(diào)查實(shí)驗(yàn)效果。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、植物種子的挑選，應(yīng)選取飽滿，大小全都，健康無(wú)病蟲害的種子。

2、把握植物種子的浸種、催芽及哺育辦法。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

藥后7天調(diào)查活株數(shù)，按照總雜草株數(shù)及藥后活株數(shù)計(jì)算雜草死亡率（%），防治效果及挑選（受害）指數(shù)等。

%100=?施藥前雜草株數(shù)-施藥后活株數(shù)

雜草死亡率（）施藥前雜草株數(shù)

%±=

±處理組雜草死亡率（%）對(duì)比組雜草死亡率（%）

防除效果（）100%對(duì)比組雜草死亡率（%）

式中“+”表示對(duì)比組在施藥后7天雜草數(shù)比施藥前增強(qiáng)%時(shí)用“+”；反之則用“-”。?=

?∑

（受害級(jí)別該級(jí)株數(shù)）挑選受害指數(shù)檢查總株數(shù)最高級(jí)別代表值

作物受害分級(jí)如下：0級(jí)——與對(duì)比同；

1級(jí)——植物枯死1/4以下；2級(jí)——植物枯死1/4-2/4；3級(jí)——植物枯死1/2-3/4；4級(jí)——植物枯死3/4以上。

七．思量題：

1、對(duì)各種供試除草劑對(duì)供試作物的挑選毒性作出評(píng)價(jià)。

2、比較供試各種除草劑對(duì)各類雜草的毒殺效果。

試驗(yàn)十殺蟲劑田間藥效實(shí)驗(yàn)

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、明確田間藥效試驗(yàn)的目的和基本原則；

2、把握田間藥效試驗(yàn)的基本步驟和辦法；

3、認(rèn)識(shí)田間藥效試驗(yàn)的藥效調(diào)查辦法和結(jié)果計(jì)算辦法。

二．試驗(yàn)原理：

甜菜夜蛾是一種重要的十字花科蔬菜害蟲。使用除盡防治甜菜夜蛾有優(yōu)良的防治效果。本試驗(yàn)以不同濃度的除盡對(duì)甜菜夜蛾舉行田間防治，以比較不同濃度除盡對(duì)甜菜夜蛾的田間防治效果。

三．主要儀器及試材：

1、供試藥劑：除盡

2、防治對(duì)象：甜菜夜蛾

3、用具：背負(fù)式噴霧器、桶、量筒、米尺等

4、實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：十字花科蔬菜地

四．試驗(yàn)辦法與步驟：

1、實(shí)驗(yàn)田的挑選：

挑選長(zhǎng)勢(shì)大體全都，地勢(shì)凹凸全都，肥力全都的有代表性的田塊作為田間藥效試驗(yàn)地。

2、供試藥劑：

除盡1：500倍，1：1000倍，1：2000倍；另設(shè)空白對(duì)比，共4個(gè)處理。

3、田間實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

按實(shí)驗(yàn)要求劃分小區(qū)，每小區(qū)面積為20-50m2，各小區(qū)采納隨機(jī)區(qū)組羅列，四次重復(fù)。

4、基數(shù)調(diào)查：

處理之前每小區(qū)“Z”字形五點(diǎn)取樣，計(jì)數(shù)每點(diǎn)5-10株作物上不同齡期的活幼蟲數(shù)，調(diào)查囫圇植株并記錄。

5、施藥：

施藥適期普通選在幼蟲2齡期較好。噴藥時(shí)光一天中以上午露水干后開頭為好，每畝噴灑藥液量可按照植株的籠罩狀況，普通為75-150kg。

6、藥效調(diào)查：

施藥后1d、3d、7d、14d各調(diào)查一次，調(diào)查辦法同基數(shù)調(diào)查。

五．試驗(yàn)注重事項(xiàng)：

1、實(shí)驗(yàn)處理各小區(qū)之間留有一定面積的庇護(hù)行，小區(qū)的羅列可采納挨次或隨機(jī)羅列。

2、噴藥時(shí)勻稱周到，噴藥量全都。

3、換藥時(shí)，應(yīng)充分洗滌噴霧器及噴頭。

六．試驗(yàn)結(jié)果處理：

施藥后1d、3d、7d、14d，每小區(qū)采納“Z”字形五點(diǎn)取樣，計(jì)數(shù)每點(diǎn)5-10株作物上不同齡期的活幼蟲數(shù)，調(diào)查囫圇植株并記錄。按下列公式計(jì)算結(jié)果：

%100

%100

100PTCK

CK=

?-=?-施藥前蟲數(shù)-施藥后蟲數(shù)

蟲口減退率（）施藥前蟲數(shù)防治效果（）

PT藥劑處理區(qū)蟲口減退率CK空白對(duì)比區(qū)蟲口減退率

最后用鄧肯氏新復(fù)極差檢驗(yàn)法舉行統(tǒng)計(jì)分析，比較各處理的防治效果。

七．思量題：

1、將實(shí)驗(yàn)結(jié)果舉行收拾并作分析。

2、你認(rèn)為影響本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有哪些，應(yīng)實(shí)行什么措施來(lái)克服或削減這些因子的影響。

試驗(yàn)十一殺菌劑田間藥效實(shí)驗(yàn)

一．試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、明確田間藥效試驗(yàn)的目的和基本原則；

2、把握田間藥效試驗(yàn)的基本步驟和辦法；

3、認(rèn)識(shí)田間藥效試驗(yàn)的藥效調(diào)查辦法和結(jié)果計(jì)算辦法。

二．試驗(yàn)原理：

小麥赤霉病是一個(gè)“氣候型”病害，在小麥抽穗揚(yáng)花期多雨濕潤(rùn)的天氣，易發(fā)生病害。小麥赤霉病引起產(chǎn)量嚴(yán)峻降低，造成經(jīng)濟(jì)損失；同時(shí)，病麥粒包含對(duì)人畜有害的毒素，小麥籽粒中含有病麥粒，造成