現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)方法樣品制備PPT

現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)方法樣品制備PPT課件第1頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六目的要求樣品前處理在色譜分析過程中是一個(gè)既耗時(shí)又極易引進(jìn)誤差的步驟，樣品處理的好壞直接影響色譜分析的最終結(jié)果，因此，為了提高分析測定效率，改善和優(yōu)化色譜分析樣品制備方法和技術(shù)是一個(gè)重要問題。通過本章的學(xué)習(xí)，目的是使學(xué)生掌握溶劑萃取、固相萃取、超臨界流體萃取、微波萃取以及衍生化技術(shù)等色譜分析用樣品的前處理方法，了解有關(guān)樣品前處理儀器的一些相關(guān)知識(shí)。學(xué)習(xí)要點(diǎn)溶劑萃取技術(shù)；蒸餾及精餾技術(shù)；固相萃取技術(shù)；氣體萃取技術(shù)；超臨界流體萃取技術(shù)；微波萃取技術(shù)；衍生化技術(shù)技能要點(diǎn)溶劑萃取技術(shù)；蒸餾及精餾技術(shù)；固相萃取技術(shù)；超臨界流體萃取技術(shù)；波萃取技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)習(xí)指南本節(jié)首頁退出本章第2頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六第三節(jié)固相萃取技術(shù)一、固相萃取概念二、固相萃取原理五、HPLC與SPE的比較三、裝置及操作程序

四、溶劑的選擇本節(jié)首頁退出本章六、固相微萃取七、氣體萃?。斂占夹g(shù)）

第3頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六一、固相萃取(SPE)概念本節(jié)首頁退出本章SPE：SolidPhaseExtraction是一種液相色譜分離，利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物與干擾化合物分離，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。第4頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六慢中等快淋洗液第5頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六二、固相萃取的模式及原理本節(jié)首頁退出本章反相固相萃取正相固相萃取離子交換固相萃?、訇庪x子交換②陽離子交換第6頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六（一）、反相固相萃取本節(jié)首頁退出本章流動(dòng)相：極性（水溶液）或中等極性固定相：非極性。分離對(duì)象：中等到非極性物質(zhì)。第7頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章分析物中的CH鍵+硅膠表面官能團(tuán)→吸附→極性溶液中的有機(jī)分析物→保留在SPE。用非極性溶劑解吸吸附在固定相中的目標(biāo)物質(zhì)。1、反相固相萃取原理第8頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章2、常用反相固相萃取柱LC-18、LC-8：標(biāo)準(zhǔn)的單鍵合硅膠ENVI-18、ENVI-8：聚合鍵合類填料ENVI-ChromP：苯乙烯：疏水

ENVI-Carb：含碳

第9頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章（二）、正相固相萃取流動(dòng)相：非極性、中等極性固定相：極性。分析物質(zhì)：極性、中等極性、非極性第10頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章1、正相固相萃取原理保留取決于分析物的極性官能團(tuán)與吸附劑表面的極性官能團(tuán)之間的相互作用。用比樣品本身更極性的溶劑洗脫吸附的分析物質(zhì)。第11頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章①極性官能團(tuán)鍵合硅膠LC-CN，LC-NH2，

LC-Diol②極性吸附物質(zhì)LC-Si，LC-Florisil，ENVI-Florisil，LC-Alumina2、常用正相固相萃取柱第12頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六知識(shí)窗流動(dòng)相①②第13頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章（三）、離子交換固相萃取適用于帶有電荷的化合物（水溶液、有機(jī)溶液）。原理：靜電吸引，化合物上的帶電荷基團(tuán)與鍵合硅膠上的帶電荷基團(tuán)之間的吸引。分為：陰離子交換和陽離子交換。第14頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六1、陰離子（負(fù)電荷）交換本節(jié)首頁退出本章LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季銨類鹽+硅膠第15頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六第16頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六2、陽離子交換本節(jié)首頁退出本章LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基團(tuán)第17頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六第18頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章（四）溶劑極性的影響①目標(biāo)化合物在極性/非極性溶劑中的溶解度，這主要涉及淋洗液的選擇。②目標(biāo)化合物有無可能離子化（可用調(diào)節(jié)pH值實(shí)現(xiàn)離子化）。第19頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章（四）溶劑極性的影響③目標(biāo)化合物有無可能與吸附劑形成共價(jià)鍵。④在吸附劑上吸附點(diǎn)的競爭程度，關(guān)系到能否很好分離。第20頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六三、固相萃取的裝置及操作程序本節(jié)首頁退出本章固相萃取的裝置篩板篩板篩板第21頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章1、固相萃取的裝置第22頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章1、固相萃取的裝置第23頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章2、操作程序（1）、活化吸附劑

萃取之前要用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟葱≈?，以使吸附劑保持濕潤，可以吸附目?biāo)化合物或干擾化合物。第24頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章2、操作程序（2）、上樣（吸附）樣品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空，加壓或離心的方法使樣品進(jìn)入吸附劑。第25頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章2、操作程序3、洗滌（去除雜質(zhì)）在樣品進(jìn)入吸附劑，目標(biāo)化合物被吸附后，可先用較弱的溶劑將弱保留干擾化合物洗掉。第26頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章2、操作程序4、洗脫和收集再用較強(qiáng)的溶劑將目標(biāo)化合物洗脫下來，加以收集。第27頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章活化吸附劑進(jìn)樣洗滌洗脫我來說！第28頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六四、SPE分離機(jī)制與溶劑的選擇分離機(jī)制典型的弱溶劑（保留條件）典型的強(qiáng)溶劑（洗脫條件）反相SPE緩沖液或低濃度的甲醇或乙腈乙腈、甲醇或溶劑與水的混合物正相SPE正己烷、甲苯等二氯甲烷、甲醇等陽離子交換SPE低離子強(qiáng)度緩沖液(<0.1mol/L)高離子強(qiáng)度緩沖液（＞0.1mol/L)低反離子強(qiáng)度高反離子強(qiáng)度陰性離子交換SPE低離子強(qiáng)度緩沖液（<0.1mol/L)高離子強(qiáng)度緩沖液(>0.1mol/L)第29頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章五、HPLC與SPE的比較HPLCSPE硬件（柱子）不銹鋼柱塑料柱顆粒度(um)540顆粒形狀球型(均勻）球型（不均勻）塔板數(shù)20～25，000＜100第30頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六1、柱子的比較柱接頭螺帽柱管過濾片型號(hào)：C18柱管篩板固定相尖端？第31頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六N=L/H2、塔板數(shù)的比較第32頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章六、固相微萃取

SPME不是將待測物質(zhì)全部分離出來，通過在樣品與固相涂層間的平衡來達(dá)到分離。方法：玻璃纖維浸入樣品中→殘留農(nóng)藥→擴(kuò)散→吸附→平衡→取出玻璃纖維→洗脫→分析。第33頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章固相微萃取裝置第34頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章固相微萃取裝置關(guān)鍵：石英纖維上涂吸附劑原則：目標(biāo)化合物是非極性時(shí)選擇非極性涂層；目標(biāo)化合物是極性時(shí)選擇極性涂層。第35頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六使用方法第36頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章七、氣體萃?。斂占夹g(shù)）第37頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章七、氣體萃?。斂占夹g(shù)）第38頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章七、氣體萃?。斂占夹g(shù)）取樣品基質(zhì)（液體和固體）上方的氣相部分進(jìn)行色譜分析。用途：痕量高揮發(fā)性物質(zhì)的分析測定，氣體是揮發(fā)性物質(zhì)的最理想的溶劑。第39頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章1、特點(diǎn)①操作簡單②可自動(dòng)化③可變因素多④靈敏度高：檢出限可達(dá)10-12水平。第40頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章2、分類靜態(tài)頂空：在一個(gè)密閉的容器中，樣品與樣品上方氣體（1/2）達(dá)到平衡。動(dòng)態(tài)頂空：

“連續(xù)氣體萃取”方法，不必兩相達(dá)到平衡。經(jīng)捕集濃縮后進(jìn)行測定。第41頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章3、靜態(tài)頂空過程第42頁，共45頁，2023年，2月20日，星期六本節(jié)首頁退出本章4、動(dòng)態(tài)頂空過程捕集阱中捕集濃縮?！昂婵尽保狠d氣的流動(dòng)方向與熱解吸時(shí)的流動(dòng)方向