高三生物一輪復(fù)習(xí)教案DNA的粗提取與鑒定

DNA粗取鑒教學(xué)的1．初掌DNA粗取和鑒定的法。2．觀提出來的DNA物質(zhì)實驗理1．DNANaCl液中的解度是隨NaCl的濃度化而改變的DNA在014mol/L的NaCl溶液中的溶解度低，據(jù)此使溶解于溶液中的DNA析。2．不溶于酒精液胞中某物質(zhì)可以溶于酒精溶液可取雜質(zhì)較的DNA。3．＋苯胺

藍(lán)色（用于DNA的鑒定）實驗驟1．材料制0.1G/ml檸酸鈉100ml燒→璃棒攪1000r/min心2min→去上清液→活雞血180ml即得雞血細(xì)胞也可將上述燒杯于冰箱中置一天使雞血細(xì)胞自行沉淀）2．方法步取血細(xì)胞液5-10ml＋20ml蒸餾，玻璃棒一個方快速攪拌（1）提取細(xì)胞核物紗布過濾，濾液中含DNA和他核物質(zhì)如蛋白質(zhì)原理血胞細(xì)胞膜核膜吸水破玻璃棒快速拌機(jī)械加速血細(xì)胞破裂（2）溶解內(nèi)DNA濾液＋2mol/LNaCl溶40ml，璃棒沿一個方向攪拌（3）析出DNA的稠物：向述溶液中緩加入蒸水，并輕輕地沿一個方向攪，出現(xiàn)絲狀物，當(dāng)絲物不再增時，停止加水（此時NaCl溶液相當(dāng)于稀釋0．14mol/L）（4）濾取DNA的稠物：用層紗布過，含DNA的粘物留在紗布（5）DNA粘稠物溶解：20ml2mol/LNaCl溶液燒，上述粘稠物緩攪拌3min（6）過濾DNA的溶：用2層布過濾濾液中含DNA（7）提取雜質(zhì)較少：上述溶液95%精，緩慢攪拌，現(xiàn)乳白色狀物，玻璃棒將絲裝物卷起（8）DNA鑒定：實驗鍵：本實驗成功的關(guān)是獲取較凈的DNA，因此應(yīng)注意：1．充分?jǐn)囯u血細(xì)胞DNA存在于雞細(xì)胞核。將雞血胞與蒸餾混合以后，應(yīng)用玻璃棒沿一個方快速攪拌使血細(xì)胞加速破裂釋放出DNA2．沉淀DNA必須冷精。實驗前必須準(zhǔn)備好大量95%的精，并在箱中5℃下）至少存放24小時。3．正確攪含有懸浮的溶液在第3驟，玻璃棒要直插杯底部，攪拌要輕緩以獲較完整的DNA分在（7玻璃棒插入燒杯溶液中，用手緩轉(zhuǎn)動5-10min。

【針訓(xùn)練】A.礎(chǔ)訓(xùn)1的提取與鑒的驗中分別使用2mol／L／L／L、0.015mol的氯化鈉液，其作分別是）A．溶解、出、溶解溶解．解、溶解、出、溶B．析出、解、析出溶解．解、析出、解、析2．下列圖中能反映DNA溶度與NaCI溶液度之間關(guān)的是（）3．DNA在下列哪濃度的溶液中溶解度低（）A．2．00mol/L．0．14mol/L．0．015mol/LD．0．10mol/L4．在的提取過程中，初析出DNA提取較凈的DNA所用的藥的濃度和稱分別是（）①0g/ml的檬酸鈉溶液②2．00mol/L的NaCl溶③0mol/L的NaCl溶④體積分?jǐn)?shù)為95%的酒溶液⑤0．015mol/L的NaCl溶⑥0的溶A．①③⑤B．③④．④D②③④5．與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘，不正確是（）A．操作時緩滴加蒸水，降DNA的解度B．在操作A，用玻璃棒輕緩拌，以保DNA分完整C．加蒸餾可同時降DNA蛋白質(zhì)的溶解度，兩均可析出D．當(dāng)絲狀稠物不再加時，時NaCl的濃約為0.14mol/L.B.高訓(xùn)6的提取與鑒定實驗”中三次過濾（1）過濾蒸餾水稀過的雞細(xì)胞液。（2）過濾粘稠物的0.14mol/LNaCl.（3）過濾解有的NaCl.以上三次過濾分為了獲得）A．含核物的濾液、布上的稠物、含DNA的液B．含核物的濾液、液中DNA粘稠、DNA的濾液C．含核物的濾液、液中DNA粘稠、布中DNAD．含較純DNA濾、紗布上稠物、含DNA的液7．為獲取純凈的DNA，采集的血樣可蛋白酶理，然后有機(jī)溶劑去蛋白質(zhì)。下列有關(guān)敘述，正的是（）A．除去血中的蛋白．去染色體上蛋白質(zhì)C．除去血胞表面的白質(zhì)．去血細(xì)胞中有的蛋質(zhì)8．在DNA的粗提與鑒定實驗”中和“使用白酶從染體中提DNA中的蛋白酶具有相似作用的物是（）A溶．蒸餾水C．檬酸鈉D．卻的酒精9．DNA不溶于下何種溶液）

A溶．KCl液C．MgCl溶D．精溶液10．下不同濃度的NaCl溶中，使DNA析出最徹底和溶解度最高的是）①0.14mol/L②2mol/L③0.25mol/L④0.015mol/LA．①和②．②和．和③．②和④11．下操作中，對DNA的取量影響較小的是（）A．使雞血胞在蒸餾中充分裂，放出DNA等物質(zhì)B．?dāng)嚢钑r要用玻璃沿一個向輕緩攪C．在析出DNA粘稠物時，要緩加入蒸餾，直至液中粘稠不再增多D．在用酒沉淀DNA時，要使冷酒精，至再將合液放入箱中冷卻E．在的溶解和再溶解時，充分?jǐn)嚢鐲.力訓(xùn)12．在DNA的粗提取與定實驗中：（1）實驗兩次使用餾水，一次目的，第二次目的是（2）說明同濃度的NaCl溶液的作用：

。2mol/L的作用0.14mol/L的作用0.015mol/LNaCl作用

；；；（3DNA原理是試為。攪拌要，目的。（4）能否哺乳動物液代替簡述理由。13．此驗中有幾次用玻璃棒攪拌，次攪拌的向是一的；但每攪拌的度不同，請就此予以說明（1）提取血細(xì)胞核物質(zhì)時應(yīng)攪拌，目的是。（2含核物質(zhì)的2mol/LNaCl溶液滴加蒸餾水析出DNA稠物時攪拌，目的是。（3粘物溶解于2mol/LNaCl溶液時攪的。（495%的卻酒精取含雜質(zhì)少的DNA時攪拌是。14．以是有關(guān)DNA的粗取實驗的讀材料：a．核酸極穩(wěn)定，在為劇烈化學(xué)、物因素和酶作用下很容易降解。在制備DNA時要加入酶水解DNA酶）的抑劑檸檬酸，以除去Mg，防止酶的激。b核中的DNA和RNA在生物內(nèi)均以核蛋（核酸和白質(zhì)組成形存在DNA核蛋白在1mol/LNaCl溶液中溶解很大在0.14mol/LNaCl液中溶解度很低RNA核蛋白溶于0.14mol/L溶。c．用苯酚理，可使白質(zhì)變，且留在酚層內(nèi)；液中加入2倍體積，濃度為的酒精，可將DNA分離來此時十分粘，可用玻璃棒攪成團(tuán)出。d．DNA在酸性環(huán)境下，水解生脫氧核等小分子質(zhì)，它與二苯胺酸性溶液反，能生成藍(lán)色化合物e實驗材料與器械檸酸溶液石英砂0.14mol/LNaCl溶液1mol/LNaCl溶、苯酚95%酒精、二胺試劑濃硫酸、椰菜、研、燒杯、漏斗、玻璃棒、量、石棉網(wǎng)、酒精燈、管、試管。以下是粗取實驗的步，請根據(jù)以上閱讀材料回答關(guān)問題：

（1）研磨取克花椰加適量的、和石英砂，研磨成勻漿（2）過濾（3）將濾稀釋，其目的：

。（4）離心理，產(chǎn)生淀。（5）取沉物，置于2毫mol/LNaCl溶中使核蛋白再次解，再加2毫苯酚充分震蕩后止，待其層后棄其上層苯酚。這一步目的是除。（6）如何剩余溶液的DNA取出來？（7）如何明提取物確實是DNA分子

。。其實驗過程的要是向放有DNA的管中加入適該試劑均勻后管置于中5min待試管后，觀察試中的顏色化。這實驗也說DNA耐溫，前次溫度有利于，后次溫度有利于DNA。15的粗取與鑒定實驗中BDE五小組除下表中所列理方法不外，其他操作步驟均同，而且確，但實驗結(jié)果卻不同。組別實驗材

提取核物質(zhì)時加入的溶液

去除雜質(zhì)時加入的溶液

DNA鑒定時加入的試劑ABC

雞血菜花人血漿

蒸餾水蒸餾水蒸餾水

95％的精(25C)95％的精(冷卻)95％的精(冷卻)

二苯胺雙縮脲，二苯胺D

人血細(xì)胞2mol的化鈉

0．14mol／L的氯化鈉

雙縮脲E

雞血

蒸餾水

95％的精(冷卻)

二苯胺(1)實驗材料選擇錯誤的組別是因是。(2)實驗步(包括實驗材均正確，但得不到DNA的組別是。(3)沸水浴中試管顏色變藍(lán)的組是；藍(lán)色較淡的是，其原因是

。(4)B組實驗不成功的最主要原因是

。16.“DNA的粗提取與定的驗中有學(xué)按書本知識和己的思路試做如下實驗，請你判斷實結(jié)果。(1)他把與檸檬酸鈉混合的新鮮液放在幾紗布上過，紗布上最主要的結(jié)構(gòu)是。(2)他在含有DNA及蛋白質(zhì)等的混合物中加入大量物質(zhì)的量度為0mol/L的氯化鈉溶液后通攪拌后在幾層紗布上過他得的濾液中定含有驗?zāi)康闹幸崛〉某煞质恰?3)他在上述濾液中加入冷酒(體積分?jǐn)?shù)為95％)并用玻璃棒—個方向拌，溶中的絲狀物的主要成是。(4)他把含有DNA、RNA、蛋白質(zhì)與化鈉的混溶液稀釋物質(zhì)的量濃度為0．14mol/L的氯化鈉溶液后，在幾層紗上過濾，他得到的濾液中含最多的成是。17請利用如下驗材料做相關(guān)實驗再擇其中的一實驗材料設(shè)計一個實驗以展示你的科學(xué)素養(yǎng)和新才能。

．．(1)如用上述材料做觀察植物細(xì)的有絲分、葉綠體色素的提取和分離、觀察植的向性運(yùn)動等實驗。選擇的最材料依次(圖中序號即可。(2)如用紫色洋蔥表皮做完細(xì)胞質(zhì)壁分離復(fù)原實驗，又用此裝片觀察細(xì)胞分裂結(jié)果未觀察到處于分期的細(xì)胞請解釋原因。(3