普通遺傳學實驗專家講座

普通遺傳學試驗普通遺傳學實驗專家講座第1頁試驗一細胞有絲分裂一、試驗目標與要求1.掌握植物花粉母細胞有絲分裂取材固定和染色制片方法。2.了解有絲分裂各個時期染色體改變特征。二、試驗材料、用具和藥品1.材料：玉米、小麥、蠶豆花序固定材料。2.用具：顯微鏡、解剖針、鑷子、刀片、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、染色缸、試劑瓶、酒精燈、紗布、吸水紙等。3.藥品：無水乙醇、冰醋酸、卡諾固定液、蒸餾水、醋酸洋紅、改良卡寶品紅。

普通遺傳學實驗專家講座第2頁三、試驗方法與步驟1.取材固定：將洋蔥鱗莖除去老根或者蠶豆置于濕沙上，在25℃條件下培養(yǎng)，長出幼根后于中午剪下根尖2～3cm，置于卡諾氏固定液中2～24h,后移入70%酒精中保留。2.根尖組織解離與軟化：取一枚已固定了根尖在吸水紙上吸去多出保留液后，置于載玻片上切取根尖不透明組織少許，加解離液進行解離10min，然后用蒸餾水沖洗2次。3.染色：用吸水紙吸去根尖周圍水份，加一滴醋酸洋紅或改良卡寶品紅染色10min。4.壓片：加蓋玻片，覆以吸水紙，用大拇指垂直向下均勻用力壓片5.鏡檢觀察普通遺傳學實驗專家講座第3頁四、作業(yè)1.以兩對染色體為例（一對為M型一對為T型）繪出所觀察到動物細胞有絲分裂各時期模式圖。2.固定、解離根尖作用是什么？普通遺傳學實驗專家講座第4頁普通遺傳學實驗專家講座第5頁試驗二植物細胞減數(shù)分裂一、試驗目標與要求1.掌握植物花粉母細胞減數(shù)分裂取材固定和染色制片方法。2.了解減數(shù)分裂各個時期染色體改變特征。二、試驗材料、用具和藥品1.材料：玉米、小麥、蠶豆花序固定材料。2.用具：顯微鏡、解剖針、鑷子、刀片、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、染色缸、試劑瓶、酒精燈、紗布、吸水紙等。3.藥品：無水乙醇、冰醋酸、卡諾固定液、蒸餾水、醋酸洋紅、改良卡寶品紅。

普通遺傳學實驗專家講座第6頁減數(shù)分裂過程示意圖普通遺傳學實驗專家講座第7頁三、試驗方法與步驟1.觀看玉米花粉母細胞減數(shù)分裂錄象2.制片：取兩枚不一樣發(fā)育時期玉米雄穗花苞，放在潔凈載玻片上，用鑷子和解剖針除去苞片取出花藥，滴加小滴染液后用鑷子（or刀片or解剖針）將花藥搗碎，展平，用鑷子把肉眼可見殘渣取出棄之，然后蓋上蓋玻片包被吸水紙用大拇指垂直向下勻力壓片，or用橡皮頭玻棒輕輕敲打。為了加色，可將載玻片在酒精燈火焰上略加熱。3.鏡檢：先在低倍鏡下找到花粉母細胞，再用高倍鏡觀察減數(shù)分裂各個時期染色體行為和特征。4.觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂裝片普通遺傳學實驗專家講座第8頁四、作業(yè)1.以兩對染色體為例（一對為M型一對為T型）繪出所觀察到動物細胞減數(shù)分裂各時期模式圖。（注意染色質→染色體改變，核膜和中心粒改變）2.減數(shù)分裂與有絲分裂主要區(qū)分是什么？普通遺傳學實驗專家講座第9頁試驗二玉米一對相對性狀遺傳分析一、試驗目標與要求經(jīng)過玉米一對相對性狀雜交試驗，觀察和分析雜種后代性狀表現(xiàn)，加深分離規(guī)律了解。

二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：玉米籽粒胚乳非糯性和糯性雜交F1代花粉。2.用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、計算器等。3.藥品：1％I2-KI溶液。玉米非糯和糯親本雜交F1植株形成帶有Wx和wx基因花粉對I2-KI液有不一樣顏色反應，可經(jīng)過測定得出1:1之比。普通遺傳學實驗專家講座第10頁四、試驗方法與步驟取糯性與非糯性雜交F1花粉，用1％I-KI溶液染色，低倍顯微鏡下觀察，計數(shù)藍黑色(非糯)和紅褐色(糯性)花粉粒數(shù)目。五、作業(yè)將統(tǒng)計數(shù)據(jù)全班匯總，每人進行χ2測驗，檢驗結果是否相符。普通遺傳學實驗專家講座第11頁試驗三果蠅生活史及形態(tài)觀察一、試驗目標與要求1.了解果蠅生活史各階段形態(tài)特征，觀察果蠅幾個常見突變類型。2.掌握區(qū)分雌雄果蠅方法。3.了解果蠅喂養(yǎng)方法和處理方法。

二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：野生型和常見突變型果蠅。2.用具：體視顯微鏡、放大鏡、小鑷子、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、白瓷板、培養(yǎng)皿、毛筆。3.藥品：乙醚、瓊脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。果蠅形體小，生長快速，繁殖率高，喂養(yǎng)簡便，突變性狀多，是遺傳學研究極好材料。普通遺傳學實驗專家講座第12頁四、試驗方法與步驟1.果蠅培養(yǎng)基配制玉米粉培養(yǎng)基2.果蠅生活史觀察3.果蠅麻醉乙醚麻醉0.5min后轉入培養(yǎng)皿中，如觀察中清醒，可在培養(yǎng)皿內(nèi)放一個滴有乙醚濾紙條補救。

4.果蠅性狀觀察五、作業(yè)1.描述果蠅生活史。2.怎樣區(qū)分雌雄果蠅？普通遺傳學實驗專家講座第13頁試驗四果蠅唾腺染色體觀察一、試驗目標與要求1.掌握果蠅幼蟲唾腺解剖方法和唾腺染色體制片方法。2.觀察果蠅唾腺染色體，加深對染色體結構和功效認識。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：果蠅三齡幼蟲。2.用具：體視顯微鏡、光學顯微鏡、解剖針、鑷子、載玻片等。3.藥品：1％醋酸洋紅、0.7％生理鹽水、1NHCl、蒸餾水等。果蠅唾腺染色體是果蠅幼蟲期唾腺細胞核內(nèi)染色線連續(xù)復制，但細胞核不分裂，而形成多線染色體，又稱為巨型染色體。普通遺傳學實驗專家講座第14頁四、試驗方法與步驟1.取材取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上，滴加0.7％生理鹽水2.剖取果蠅唾腺3.染色壓片4.鏡檢五、作業(yè)1.繪出所觀察到果蠅唾腺染色體圖像，標明染色中心和5條臂。2.果蠅唾腺染色體與其它染色體在形態(tài)結構上有什么區(qū)分？普通遺傳學實驗專家講座第15頁試驗五果蠅雙因子雜交試驗一、試驗目標與要求經(jīng)過果蠅兩對相對性狀雜交試驗結果分析，驗證獨立分配規(guī)律。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：長翅、黑檀體與殘翅、灰體果蠅。2.用具：體視顯微鏡、喂養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、解剖針、鑷子、毛筆等。3.藥品：乙醚、酒精等。長翅黑檀體雌蠅與殘翅、灰體雄蠅交配(或反交)，F(xiàn)1代自交而得F2產(chǎn)生性狀分離和重組，出現(xiàn)四種表現(xiàn)型，百分比為9:3:3:1。普通遺傳學實驗專家講座第16頁四、試驗方法與步驟1.麻醉2.選取長翅、黑檀體處女蠅和殘翅、灰體雄蠅5~6對(或反交)，一起放入事先裝有培養(yǎng)基喂養(yǎng)瓶內(nèi)。3.一周后倒出親本果蠅，等F1羽化后進行觀察、統(tǒng)計。4.任意選取正交或反交組合F1雌雄果蠅(雌蠅必須處女蠅)7~8對，放入一個培養(yǎng)瓶中。5.一周后倒去F1果蠅，待F2羽化后10天進行觀察統(tǒng)計。五、作業(yè)1.對觀察資料進行χ2測驗，討論試驗結果是否符合獨立分配規(guī)律。2.果蠅雜交時應注意哪些事項？普通遺傳學實驗專家講座第17頁試驗六果蠅伴性遺傳一、試驗目標與要求經(jīng)過性連鎖個體正、反交試驗結果分析，認識由性染色體上基因所控制性狀分離規(guī)律以及了解伴性遺傳在正、反交中差異。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：果蠅紅眼和白眼品系。2.用具：放大鏡、喂養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、解剖針、鑷子、毛筆等。3.藥品：乙醚、酒精等。普通遺傳學實驗專家講座第18頁四、試驗方法與步驟1.麻醉2.選取紅眼或白眼處女蠅5~6只，選取相對性狀雄果蠅5~6只，一起放入事先裝有培養(yǎng)基喂養(yǎng)瓶內(nèi)。3.一周后倒出親本果蠅，等F1羽化后進行觀察、統(tǒng)計。4.任意取正、反雜交組合F1雌雄果蠅(雌雄無須處女蠅)7~8對放入同一個喂養(yǎng)瓶中。5.一周后倒去F1果蠅，待F2羽化后10天進行觀察統(tǒng)計。五、作業(yè)1.對統(tǒng)計結果作χ2測驗，檢驗是否與理論比值相符。如不符，找出原因。2.伴性遺傳與常染色體遺傳有什么差異？普通遺傳學實驗專家講座第19頁試驗七果蠅連鎖交換與基因定位一、試驗目標與要求經(jīng)過果蠅性染色體上已知位點相近三個隱性基因個體與其相正確野生型個體雜交試驗，驗證連鎖遺傳規(guī)律，并依據(jù)三點測驗結果進行基因定位。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：紅眼、長翅、直剛毛和白眼、小翅、焦剛毛果蠅。2.用具：體視顯微鏡、喂養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、解剖針、鑷子、毛筆等。3.藥品：乙醚、酒精等。普通遺傳學實驗專家講座第20頁四、試驗方法與步驟1.選取所需三隱性處女蠅和野生型雄蠅5~6對，一起放入盛有飼料瓶中培養(yǎng)。2.一周后倒出親本果蠅，等F1羽化后進行觀察、統(tǒng)計。3.取F1雌、雄蠅7~8對(雌蠅無須處女蠅)，放入另一新喂養(yǎng)瓶中。4.一周后倒去F1果蠅，待F2羽化后10天進行觀察統(tǒng)計。五、作業(yè)

依據(jù)觀察結果，計算各基因間交換值，繪制連鎖遺傳圖。普通遺傳學實驗專家講座第21頁試驗八細胞核內(nèi)DNA定性判定一、試驗目標與要求學習用孚爾根染色法判定細胞內(nèi)DNA基本原理和方法。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：萌發(fā)蠶豆、大麥等根尖。2.用具：普通生物顯微鏡、恒溫水浴鍋、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、試管、小玻璃瓶等。3.藥品：希夫試劑、漂洗液、1NHCl、45％醋酸等。細胞經(jīng)60℃、1NHCl處理后，核內(nèi)DNA形成含醛基無嘌呤結構物，醛基與無色希夫試劑相遇展現(xiàn)紫紅色。普通遺傳學實驗專家講座第22頁四、試驗方法與步驟1.取材固定2.1NHCl室溫浸2~5min，然后移入60℃1NHCl12min。3.加希夫試劑置暗處染色0.5~3h。4.漂洗液漂洗三次，每次5~10min，后用蒸餾水漂洗。5.壓片鏡檢五、作業(yè)1.分別制作經(jīng)孚爾根染色和對照處理暫時片2張，并依據(jù)鏡檢結果繪圖。2.經(jīng)60℃1NHCl處理后制片與對照處理制片有何區(qū)分？為何？普通遺傳學實驗專家講座第23頁試驗九植物多倍體誘發(fā)與判定一、試驗目標與要求1.掌握人工誘發(fā)多倍體植物原理、方法及其在植物育種上意義。2.觀察多倍體植物，判別植物染色體數(shù)目標改變。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：蠶豆、大麥或其它植物種子。2.用具：顯微鏡、生化培養(yǎng)箱、冰箱、天平、鑷子、解剖針、刀片、載玻片、蓋玻片、燒杯、量筒、吸水紙。3.藥品：秋水仙素、95%酒精、冰醋酸、鹽酸、碘化鉀等。普通遺傳學實驗專家講座第24頁四、試驗方法與步驟1.秋水仙素溶液配制2.材料處理、固定、保留3.壓片4.鏡檢五、作業(yè)繪出蠶豆根尖多倍性細胞中期染色體圖像。普通遺傳學實驗專家講座第25頁試驗十蠶豆根尖微核檢測技術一、試驗目標與要求1.了解微核測試原理和毒理遺傳學意義。2.學習蠶豆根尖微核測試技術。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品1.材料：蠶豆種子。2.用具：顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯等。3.藥品：卡諾固定液、鹽酸酒精解離液、改良苯酚品紅染液、NaN3等。微核是真核生物細胞經(jīng)各種理化因子作用后引發(fā)染色體畸變，在間期細胞中一個表現(xiàn)形式。普通遺傳學實驗專家講座第26頁四、試驗方法與步驟1.浸種催芽2.用被檢測液處理根尖3.根尖細胞恢復4.根尖細胞固定、酸解、染色5.顯微鏡下觀察五、作業(yè)1.在蠶豆根尖細胞微核測試中，為何要進行恢復培養(yǎng)？2.產(chǎn)生微核根尖細胞在產(chǎn)生前分裂中期可能出現(xiàn)什么樣中期分裂圖像？普通遺傳學實驗專家講座第27頁試驗十一人群中PTC味盲基因頻率分析一、試驗目標與要求1.學習和掌握群體中基因頻率分析方法。2.經(jīng)過對人體遺傳性狀分析及基因頻率計算，了解選擇對改變基因頻率作用。二、試驗原理三、試驗材料、用具和藥品PTC溶液人體對苯硫脲(PTC)嘗味能力是由一對等位基因(Tt)所決定遺傳性狀，其中T對t為不完全顯性。在不一樣人群中對該物質嘗味能力不一樣。普通遺傳學實驗專家講座第28頁四、試驗方法與步驟1.讓受試者坐于椅子上，仰頭張嘴。用滴管滴5～10滴14號液于受試者舌根部，讓受試者漸漸咽下品味，然后用蒸餾水作一樣試驗。2.問詢受試者能否判別此兩種溶液味道，若不能判別或判別不準確，則依次用13號，12號……溶液重復試驗，直至能明確判別出PTC苦味為止。