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飲料中咖啡因含量第1頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日實(shí)驗(yàn)原理咖啡因又稱咖啡堿,是可可類食品及飲料,茶葉中含有的嘌呤類生物堿,是多數(shù)藥物含有的成分,它能促進(jìn)血液流通,擴(kuò)張血管,并且有利尿,興奮中樞神經(jīng)等功能咖啡因的三氯甲烷溶液在276.5nm波長下有最大吸收,其吸收值的大小與咖啡因濃度成正比,從而可進(jìn)行定量。第2頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日實(shí)驗(yàn)器材器材:紫外-可見分光光度計(jì)、石英比色皿、容量瓶、吸耳球,洗瓶,膠頭滴管,玻璃棒、燒杯藥品:三氯甲烷溶液、
1.5%高錳酸鉀溶液、亞硫酸鈉和硫氰酸鉀混合溶液、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)儲備液(配置方法:稱取0.05g咖啡因定容至100ml容量瓶中即可)第3頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日實(shí)驗(yàn)步驟1、量取20ml脫氣可樂于250ml分液漏斗中,加入1.5%高錳酸鉀溶液5ml,靜置5分鐘,加入10ml混合溶液,50m重蒸三氯甲烷溶液,振搖100次,靜置分層,收取三氯甲烷。2、再加入40ml重蒸三氯甲烷溶液搖勻,靜置分層將兩次三氯甲烷萃取溶液合并,用三氯甲烷溶液定容至
100ml,待用。第4頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日3、從0.5mg/mL的咖啡因標(biāo)準(zhǔn)儲備液中,用重蒸三氯甲烷配制成濃度分別為0,5,10,15,20g/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列,以0g/mL作參比管,調(diào)節(jié)零點(diǎn),用1cm比色皿于276.5nm下測量吸光度,作吸光度-咖啡因濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線或求出直線回歸方程。第5頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日4、在25mL比色管中,加入5g無水硫酸鈉,倒入20mL樣品的三氯甲烷制備液,搖勻,靜置。將澄清的三氯甲烷用1cm比色皿于276.5nm測出其吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(或直線回歸方程)求出樣品的吸光度相當(dāng)于咖啡因的濃度第6頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日溶液配制及吸光度數(shù)值
序號類別12345樣品咖啡因儲備液加入咖啡因儲備液0ml加入咖啡因儲備液1ml加入咖啡因儲備液2ml加入咖啡因儲備液3ml加入咖啡因儲備液4ml加入5g無水硫酸鈉三氯甲烷溶液加入三氯甲烷重蒸液20ml加入三氯甲烷重蒸液19ml加入三氯甲烷重蒸液18ml加入三氯甲烷重蒸液17ml加入三氯甲烷重蒸液16ml加入三氯甲烷制備液20ml吸光度A00.2250.5210.7341.0520.968第7頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日標(biāo)準(zhǔn)曲線第8頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日第9頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日第10頁,共12頁,2023年,2月20日,星期日第11
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