美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第1頁(yè)提綱美國(guó)負(fù)責(zé)監(jiān)管肉類(lèi)微生物官方機(jī)構(gòu)美國(guó)官方機(jī)構(gòu)與青島局食品試驗(yàn)室對(duì)禽肉及產(chǎn)品微生物檢測(cè)依據(jù)

USDAFSIS對(duì)出口國(guó)肉類(lèi)及產(chǎn)品微生物檢測(cè)要求USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制系統(tǒng)要求美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第2頁(yè)

美國(guó)負(fù)責(zé)監(jiān)管食

品微生物官方機(jī)構(gòu)

1、美國(guó)農(nóng)業(yè)部食品安全檢驗(yàn)局（UnitedStatesDepartmentofAgricultureFoodSafetyandInspectionService,USDAFSIS，）主要負(fù)責(zé)進(jìn)出口肉類(lèi)及肉類(lèi)制品微生物監(jiān)管官方機(jī)構(gòu)。

2、美國(guó)食品食品和藥品監(jiān)督局(U.S.Food&DrugAdministration,USAFDA,)負(fù)責(zé)進(jìn)出口肉類(lèi)及肉類(lèi)制品以外食品和飲品微生物監(jiān)管官方機(jī)構(gòu)，但在FDA官方檢測(cè)規(guī)范中要求了檢測(cè)肉類(lèi)及肉類(lèi)制品中致病微生物技術(shù)。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第3頁(yè)

美國(guó)官方機(jī)構(gòu)和青島局食品實(shí)

驗(yàn)室對(duì)禽肉及產(chǎn)品微生物檢測(cè)依據(jù)1、美國(guó)官方機(jī)構(gòu)對(duì)禽肉及產(chǎn)品微生物檢測(cè)依據(jù)

USDAFSIS：《MicrobiologyLaboratoryGuidebook,MLG》(3RDEdition,1998)FDA：《BacteriologicalAnalysisManualonline,MAB》()美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第4頁(yè)

美國(guó)官方機(jī)構(gòu)和青島局食品實(shí)

驗(yàn)室對(duì)禽肉及產(chǎn)品微生物檢測(cè)依據(jù)2、青島局食品試驗(yàn)室對(duì)禽肉及產(chǎn)品微生物檢測(cè)依據(jù)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB/T4789.1~14、30-

檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：SN0168~0178、SN0184-93、SN0331-94、SN/T0937-

非標(biāo)(SOP)：好氧菌計(jì)數(shù)方法（參考FDABAMChapter3）、大腸桿菌和大腸菌群檢測(cè)方法(參考采取FDABAMChapter4)、沙門(mén)氏菌檢測(cè)（參考采取FDABAMChapter5）、霍亂弧菌等致病弧菌檢測(cè)（參考采取FDABAMChapter9）、單核增生李斯特氏菌檢驗(yàn)和計(jì)數(shù)（參考采取FDABAMChapter10）、設(shè)備校正、維護(hù)及試用驗(yàn)證（等同采取USDAFSISMLG）、試驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量確保通則（參考采取ISO/TS11133-1:(E)&NCCLSM22-A2）、取樣和樣品保留（參考采取FAOFoodandNutritionPaper-1991）、3MPetrifilmPlate測(cè)試卡計(jì)數(shù)食品中細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌、大腸菌群、腸桿菌科、金黃葡萄球菌、霉菌和酵母菌（參考采取AOAC963.33、AOAC989.10、AOAC990.12、AOAC991.14、AOAC997.02、AOAC.05、AOAC998.08）、MINI-VIDAS篩選食品中沙門(mén)氏菌、李斯特氏菌、O157、空腸彎曲菌（參考采取AOAC.07、AOAC.08、AOAC.09、AOAC999.06、AOAC996.08）、培養(yǎng)基和試劑（參考采取FDABAM&USDAFSISMLG）、致瀉性大腸桿菌檢測(cè)（參考采取FDABAMChapter4A）、菌種保藏、微生物安全手冊(cè)。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第5頁(yè)

USDAFSIS對(duì)出口國(guó)肉類(lèi)微生物檢測(cè)要求1、商業(yè)無(wú)菌產(chǎn)品：這類(lèi)產(chǎn)品主要應(yīng)注意防止使用不合格原料，預(yù)防金黃色葡萄球菌在加工前繁殖與生長(zhǎng)。應(yīng)對(duì)這類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行感官檢驗(yàn)。試驗(yàn)室應(yīng)能夠具備檢測(cè)芽孢和非芽孢菌、需氧和厭氧菌、嗜溫和耐溫細(xì)菌以及罐體密封性檢驗(yàn)?zāi)芰Α?、對(duì)即食產(chǎn)品微生物檢測(cè)要求：美國(guó)對(duì)即食產(chǎn)品進(jìn)行分類(lèi)：A、加工過(guò)程中同時(shí)使用后致死處理和抗菌物質(zhì)或其它殺菌伎倆；B、使用上述伎倆一個(gè)；C、

僅在加工過(guò)程中采取衛(wèi)生辦法。對(duì)上述產(chǎn)品加工過(guò)程中使用殺菌伎倆效果有一定指標(biāo)要求。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第6頁(yè)

USDAFSIS對(duì)出口國(guó)肉類(lèi)微生物檢測(cè)要求

對(duì)非商業(yè)無(wú)菌即食產(chǎn)品檢測(cè)頻率是含有高風(fēng)險(xiǎn)可能產(chǎn)品單核增生李斯特氏菌每個(gè)月必須抽取一個(gè)樣品實(shí)施檢測(cè)；假如同一個(gè)工廠有其它產(chǎn)品出口美國(guó)還應(yīng)每個(gè)月在隨即抽取另外一個(gè)樣品檢測(cè)。在即食食品（不包含罐裝肉制品）中檢測(cè)單核增生李斯特氏菌，檢測(cè)樣品25克，標(biāo)準(zhǔn)為不得檢出。對(duì)非商業(yè)無(wú)菌即食產(chǎn)品中同時(shí)抽樣檢測(cè)沙門(mén)氏菌，美國(guó)對(duì)即食產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌檢測(cè)樣品培養(yǎng)量與眾不一樣，要求為325克。官方也要求了對(duì)與食品接觸臺(tái)面強(qiáng)制性實(shí)施李斯特氏菌官方檢驗(yàn)。要求加工廠試驗(yàn)室可使用國(guó)際認(rèn)可方法對(duì)食品接觸表面環(huán)境表面進(jìn)行單核增生李斯特氏、李斯特氏屬或類(lèi)似李斯特氏其中一個(gè)進(jìn)行檢驗(yàn)。但官方確認(rèn)和調(diào)查檢驗(yàn)中采取方法應(yīng)為農(nóng)業(yè)部試驗(yàn)室方法檢測(cè)單核增生李斯特氏。在從事調(diào)查過(guò)程中食品安全局還會(huì)使用脈沖凝膠電泳技術(shù)，并使用CDC（疾病控制中心）數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行判定。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第7頁(yè)

USDAFSIS對(duì)出口國(guó)肉類(lèi)微生物檢測(cè)要求3、意在降低病原菌污染HACCP驗(yàn)證檢驗(yàn)：沙門(mén)氏菌檢測(cè)是USDA官方試驗(yàn)室重點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目，通常對(duì)于生禽肉在連續(xù)生產(chǎn)日抽取51個(gè)樣品檢測(cè)，陽(yáng)性樣品不得超出12個(gè)，以此作為驗(yàn)證工廠實(shí)施HACCP實(shí)際效果。對(duì)于熟雞肉（RTE食品），檢測(cè)樣品325克，不得檢出。罐裝食品不做沙門(mén)氏菌檢測(cè)?？偞竽c桿菌普通由工廠自己檢測(cè)或委托非政府試驗(yàn)室檢測(cè)，檢測(cè)方法為加入400mlBPW，震蕩，取緩沖液檢測(cè)，用計(jì)數(shù)法；要求檢測(cè)13個(gè)樣品，其中大于100個(gè)/g樣品數(shù)不超出3個(gè)，大于1000個(gè)/g樣品數(shù)0個(gè)（n=13，m=3，M=0）。也有一些企業(yè)利用數(shù)理統(tǒng)計(jì)技術(shù)評(píng)定其偏離程度。酮體檢測(cè)取樣要求要求使用無(wú)菌海面抽取樣品，主要使用于牛和豬，但對(duì)家禽酮體沙門(mén)氏菌抽樣為用一只屠宰加工好雞，將400毫升冷卻BPW到入雞腹腔，震蕩無(wú)菌取出淋洗液，然后取30毫升淋洗液再加30毫升BPW共60毫升用于培養(yǎng)。

美國(guó)當(dāng)前沒(méi)有針對(duì)鵝和鴨既往檢測(cè)數(shù)據(jù)資料庫(kù)，這類(lèi)產(chǎn)品沒(méi)有檢測(cè)沙門(mén)氏菌需要。提議做大腸菌群檢測(cè)并使用數(shù)理統(tǒng)計(jì)技術(shù)分析。對(duì)鵝淋洗提議使用600毫升，鴨使用400毫升。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第8頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求一、檢測(cè)方法二、試驗(yàn)室質(zhì)量確保體系三、能力驗(yàn)證四、人員培訓(xùn)五、動(dòng)物種別判定六、儀器設(shè)備維護(hù)、校正和驗(yàn)證美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第9頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——檢測(cè)方法沙門(mén)氏菌:

沙門(mén)氏菌是USDAFSIS官方試驗(yàn)室重點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目，同時(shí)也要求企業(yè)試驗(yàn)室實(shí)施該項(xiàng)目標(biāo)檢測(cè)。對(duì)于生肉連續(xù)抽取51個(gè)樣品檢測(cè)，陽(yáng)性樣品不得超出12個(gè)；對(duì)于熟雞肉（RTE食品），檢測(cè)樣品325克，不得檢出。罐裝食品不做沙門(mén)氏菌檢測(cè)。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第10頁(yè)SN0170-92美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第11頁(yè)GB/T4789.4-美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第12頁(yè)

細(xì)菌學(xué)分析手冊(cè)

（BAM）

第五章沙門(mén)氏菌屬樣品（20類(lèi)）25g225mL乳糖肉湯（LB）or胰酪胨大豆肉湯（TSB）or煌綠溶液（BG）or通用前增菌肉湯（UPB）or營(yíng)養(yǎng)肉湯（NB）or再造脫脂奶粉or四硫酸鹽煌綠（TT）pH6.8±0.224±2h35℃RVTT

43±0.2℃or35±2.0℃24±2h

24±2h42±0.2℃BS&XLD&HE24±2h35℃TSI&LIA非沙門(mén)氏菌沙門(mén)氏菌非沙門(mén)氏菌LIA+LIA－TSIK/ALIA－TSIA/A&尿素酶，H抗原（多價(jià)H抗血清或Spicer-Edwardsflagellar(H)test），賴氨酸脫羧酶，酚紅衛(wèi)矛醇肉湯，色氨酸肉湯（KCN，丙二酸鹽，吲哚），O抗原酚紅乳糖肉湯，酚紅蔗糖肉湯，MR－VP,西蒙氏檸檬酸鹽5種商業(yè)生化判定系統(tǒng)（API20E,EnterotubeII,

EnterobacteriaceaeII,MICRO-ID,orVitekGNI）&O抗原&H抗原美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第13頁(yè)肉、禽和蛋品中沙門(mén)氏菌分離和判定USDA/FSISMLG4.02樣品BPWorBPW（含結(jié)晶紫）35±1℃20±24hBGS&DMLIAorXLT442±0.5℃22~24h0.5±0.05mL＋10mLTT0.1±0.02mL＋10mLmRV42±0.5℃22~24h35±1℃18~24h&48hTSI&LIA血清學(xué)試驗(yàn)商業(yè)生化試劑盒或自動(dòng)判定系統(tǒng)or傳統(tǒng)生化判定（AOACOfficialMethod967.27or"EdwardsandEwing'sIdentificationofEnterobacteriaceae"）匯報(bào)結(jié)果美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第14頁(yè)FDABAM&USDAFSISMLG美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第15頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——檢測(cè)方法李斯特氏菌:

只在即食食品中檢測(cè)，檢測(cè)樣品25克，標(biāo)準(zhǔn)為不得檢出。對(duì)此致病微生物檢測(cè)，F(xiàn)SIS要求官方試驗(yàn)室和企業(yè)試驗(yàn)室均應(yīng)實(shí)施檢測(cè)。罐裝食品不做該項(xiàng)目檢測(cè)。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第16頁(yè)GB/T4789.30-

檢樣

EB增菌液25mlLB1增菌液225mlLB2增菌液225ml選擇性培養(yǎng)基（MMASIM動(dòng)力培養(yǎng)基TSI瓊脂TSA-YE培養(yǎng)基

革蘭氏染色顯微鏡下觀察運(yùn)動(dòng)MR-VP試驗(yàn)硝酸鹽還原試驗(yàn)過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)甘露醇試驗(yàn)?zāi)咎窃囼?yàn)鼠李糖試驗(yàn)七葉苷試驗(yàn)溶血試驗(yàn)協(xié)同溶血試驗(yàn)小鼠致病性試驗(yàn)美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第17頁(yè)美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第18頁(yè)美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第19頁(yè)不一樣檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中培養(yǎng)基對(duì)比

培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)前增菌增菌分離培養(yǎng)FDA標(biāo)準(zhǔn)BLEB(不含抗菌素)BLEB增菌液OXA、PALCAM、改良LPM培養(yǎng)基、MOX培養(yǎng)基、李氏菌顯色培養(yǎng)基USDA-FSIS標(biāo)準(zhǔn)UVM肉湯FRASER肉湯MOX瓊脂ISO標(biāo)準(zhǔn)Half-Fraser肉湯Fraser肉湯PALCAM瓊脂SN標(biāo)準(zhǔn)MBPEB增菌液MMA瓊脂、OXA瓊脂GB標(biāo)準(zhǔn)EB增菌液、LB1肉湯、LB2肉湯MMA瓊脂美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第20頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——檢測(cè)方法

大腸桿菌O157:H7

USDA

FSIS及企業(yè)普通只對(duì)絞碎牛肉檢測(cè)該項(xiàng)目。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第21頁(yè)檢樣25g225mLm(EC)nm肉湯增菌41oC24h10-3、10-4、10-5、三個(gè)稀釋度0.1mL，涂布SMAC(山梨醇麥康凱瓊脂平板)37oC24h挑5-8個(gè)無(wú)色菌落SN/T0937-腸出血性大腸桿菌O157可按儀器生產(chǎn)廠說(shuō)明採(cǎi)用：VIDAS快速篩選法45min可獲初步結(jié)果陽(yáng)性反應(yīng)者作進(jìn)一步証實(shí)接種MUG

LST發(fā)酵管培養(yǎng)基37oC24h挑陰性培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種普通管養(yǎng)瓊脂血清凝集鑒定生化反應(yīng)鑒定EHEC乳膠凝集試驗(yàn)大腸桿菌O157:H7檢測(cè)程序或美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第22頁(yè)美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第23頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——檢測(cè)方法

總大腸桿菌

普通由企業(yè)自行檢測(cè)，隨機(jī)抽樣全雞，并將整只全雞放到塑料袋中，加入400mlBPW，震蕩，取緩沖液檢測(cè)，用計(jì)數(shù)法；要求檢測(cè)13個(gè)樣品，其中大于100個(gè)/g樣品數(shù)不超出3個(gè)，大于1000個(gè)/g樣品數(shù)0個(gè)（n=13，m=3，M=0），假如超出上述標(biāo)準(zhǔn)，則可判定企業(yè)對(duì)大腸桿菌污染控制不佳。罐裝食品不做大腸桿菌檢測(cè)。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第24頁(yè)

SN0169-92:25g肉類(lèi)樣品十倍稀釋LSTECEMB營(yíng)養(yǎng)瓊脂生化試驗(yàn)（色氨酸肉湯、MR-VP試驗(yàn)、Koser氏枸櫞酸鹽肉湯、LST肉湯、革蘭氏染色）（3管-MPN法）

SN/T1059.2-:進(jìn)出口食品中大腸菌群、大腸桿菌計(jì)數(shù)濾膜MUG法

USDAFSIS推薦方法:全雞十倍稀釋3管-MPN法（AOAC17.2.01-17.2.02,AOAC17.4.01）、3MPlatefilm法（AOAC17.3.04）濾膜計(jì)數(shù)法（AOAC17.3.09）比較：

1、SN方法取樣和制樣與USDAFSIS方法不一樣；

2、3管-MPN法和濾膜計(jì)數(shù)法基礎(chǔ)步驟大同小異；

3、USDAFSIS推薦方法不但有傳統(tǒng)方法，而且有當(dāng)代化快速檢測(cè)技術(shù)（3MPlatefilm法），但青島局食品試驗(yàn)室已將3MPlatefilm法制訂為試驗(yàn)室SOP.美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第25頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——檢測(cè)方法

食用鴨總大腸菌檢測(cè)

在美國(guó)因?yàn)闃O少人食用鴨,當(dāng)前對(duì)上述微生物檢測(cè)無(wú)專門(mén)對(duì)鴨肉及制品檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn),只對(duì)總大腸菌參考雞總大腸菌檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行監(jiān)測(cè),假如使用上述方法發(fā)覺(jué)試驗(yàn)數(shù)據(jù)有較大波動(dòng),提醒企業(yè)應(yīng)注意檢驗(yàn)生產(chǎn)各步驟衛(wèi)生控制。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第26頁(yè)小結(jié)

1、當(dāng)前我國(guó)微生物檢測(cè)方法在增菌培養(yǎng)和選擇性分離上存在不足，我國(guó)檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)現(xiàn)在所使用SN標(biāo)準(zhǔn)和GB標(biāo)準(zhǔn)是美國(guó)多年前老方法，與現(xiàn)有檢驗(yàn)方法無(wú)法對(duì)應(yīng)，難以確認(rèn)其與現(xiàn)行美國(guó)USDA或FDA方法效果比較。另外我國(guó)GB和SN中提到使用小白鼠毒力試驗(yàn)判別菌株試驗(yàn)不符合美國(guó)法律要求，必須更改。

2、

在日常檢測(cè)過(guò)程中必須在前增菌步驟就設(shè)置低劑量陽(yáng)性和陰性對(duì)照，并在整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中給予判定。同時(shí)還應(yīng)對(duì)未進(jìn)行接種使用培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)。參觀美國(guó)農(nóng)業(yè)部試驗(yàn)室專門(mén)有2人天天負(fù)責(zé)對(duì)使用培養(yǎng)基質(zhì)量控制。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第27頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——

質(zhì)量確保體系

為把試驗(yàn)室管理納入法制化、科學(xué)化和規(guī)范化管理軌道，從而提升食品微生物檢測(cè)試驗(yàn)室整體質(zhì)量管理水平和檢測(cè)技術(shù)能力，要求試驗(yàn)室應(yīng)經(jīng)過(guò)ISO/IEC17025標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可，并提供認(rèn)可證書(shū)，更主要是日常工作應(yīng)嚴(yán)格按照ISO/IEC1702523個(gè)要素進(jìn)行管理、操作和統(tǒng)計(jì)，操作和統(tǒng)計(jì)應(yīng)對(duì)應(yīng)。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第28頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——

能力驗(yàn)證活動(dòng)

能力驗(yàn)證是利用試驗(yàn)室間分析比對(duì)來(lái)確定試驗(yàn)室檢測(cè)能力活動(dòng)，是判定試驗(yàn)室能力必要伎倆，是試驗(yàn)室經(jīng)過(guò)外部辦法補(bǔ)充其內(nèi)部質(zhì)量控制方法技術(shù)，是維持認(rèn)可機(jī)構(gòu)間國(guó)際互認(rèn)基礎(chǔ)之一。分析測(cè)試試驗(yàn)室經(jīng)過(guò)參加比對(duì)，除了能夠客觀地評(píng)價(jià)自己分析能力、改進(jìn)自己質(zhì)量控制程序外，同時(shí)也能借此提升試驗(yàn)室聲譽(yù)，增強(qiáng)本身競(jìng)爭(zhēng)力。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第29頁(yè)

USDAFSIS教授主要問(wèn)詢中方是否參加能力驗(yàn)證，組織機(jī)構(gòu)名稱、項(xiàng)目（尤其是沙門(mén)氏菌、單核增生李斯特氏菌、大腸桿菌（尤其是O157：H7），參加能力驗(yàn)證頻率，樣品名稱。是否參加過(guò)國(guó)際機(jī)構(gòu)組織肉類(lèi)產(chǎn)品能力驗(yàn)證試驗(yàn)，并提供匯報(bào)。青島局食品試驗(yàn)室已參加過(guò)食品微生物能力驗(yàn)證活動(dòng)，測(cè)試項(xiàng)目包括到細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、單核增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌等：

年：組織者為CCIBLAC

年：組織者為APLAC（亞太試驗(yàn)室認(rèn)可組織）

年9月：組織者為CNAL

年9月：英國(guó)FEPAS

另外，年、年青島局食品試驗(yàn)室組織了山東檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)和個(gè)別出口注冊(cè)企業(yè)參加食品微生物能力驗(yàn)證美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第30頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——

人員培訓(xùn)

為確保微生物檢驗(yàn)人員熟練掌握微生物檢測(cè)技術(shù)、實(shí)際分析調(diào)查技術(shù)和深入在此基礎(chǔ)上對(duì)數(shù)據(jù)解釋，從而確保微生物檢驗(yàn)人員能得到有利于實(shí)現(xiàn)試驗(yàn)室目標(biāo)有意義數(shù)據(jù)，應(yīng)依據(jù)實(shí)際情況不定時(shí)對(duì)不一樣對(duì)象（微生物檢驗(yàn)員、輔助檢驗(yàn)員）進(jìn)行培訓(xùn)，需紀(jì)錄培訓(xùn)時(shí)間、講課老師、培訓(xùn)對(duì)象、培訓(xùn)內(nèi)容(如研究對(duì)象生物危害性、規(guī)范無(wú)菌操作技術(shù)、去污染正確技術(shù)、緊急情況處理程序、微生物安全手冊(cè)全部方面、參加醫(yī)療監(jiān)護(hù)程序等等)、培訓(xùn)方法甚至培訓(xùn)成績(jī)，最少一年一次或六個(gè)月一次將質(zhì)量確保程序作為正式機(jī)制一個(gè)別，對(duì)全體員工微生物綜合檢測(cè)能力進(jìn)行考評(píng)和評(píng)定，并將考評(píng)和評(píng)定時(shí)間、對(duì)象、內(nèi)容、方式、成績(jī)登記入歸檔。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第31頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——

動(dòng)物種別判定

是否能開(kāi)展食品中動(dòng)物成份判定試驗(yàn)美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第32頁(yè)USDAFSIS對(duì)試驗(yàn)室質(zhì)量控制要求——

儀器設(shè)備維護(hù)、校正和驗(yàn)證

詳見(jiàn)USDAFSIS《MLGChapter36》美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第33頁(yè)總結(jié)-關(guān)于微生物檢測(cè)依據(jù)1、我國(guó)微生物檢測(cè)多采取于80年代后期國(guó)際公布方法，多年來(lái)對(duì)方法有效性維護(hù)不夠，即便是GB-版方法也只是在標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)格式和字體上進(jìn)行了修改，實(shí)質(zhì)性內(nèi)容沒(méi)有得到根本改變，尤其是多年來(lái)微生物檢驗(yàn)中出現(xiàn)了許多靈敏度高選擇性好培養(yǎng)基，在咱們現(xiàn)有方法中沒(méi)有及時(shí)加以采取，所以顯著含有一定硬傷。尤其是咱們一些方法早期不一樣形式上采取了美國(guó)FDA甚至USDA方法，美方教授很輕易發(fā)覺(jué)我國(guó)方法陳舊過(guò)期問(wèn)題。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第34頁(yè)

2、對(duì)即食禽肉類(lèi)產(chǎn)品檢測(cè)沙門(mén)氏菌檢測(cè)看法：美國(guó)農(nóng)業(yè)部提供檢測(cè)即食食品中沙門(mén)氏菌方法在取樣量方面與其它有所不一樣，它要求培養(yǎng)樣品量為325克，主要目標(biāo)是為了提升沙門(mén)氏菌檢出率。我國(guó)假如要求對(duì)美國(guó)出口熟制禽肉制品就必須按照美國(guó)要求實(shí)施檢測(cè)。

3、檢測(cè)家禽酮體沙門(mén)氏菌取樣有所不一樣：美國(guó)要求對(duì)家禽酮體檢測(cè)沙門(mén)氏菌應(yīng)使用淋洗腹腔方式抽取培養(yǎng)樣品，這于我國(guó)做法不一樣。同時(shí)美國(guó)要求全部從事對(duì)美國(guó)出口產(chǎn)品檢驗(yàn)檢驗(yàn)檢疫試驗(yàn)室都應(yīng)該使用一樣方法，而不應(yīng)各自為政。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第35頁(yè)4、我國(guó)GB和SN方法在檢測(cè)李斯特菌都提到使用小鼠毒力試驗(yàn)，美方認(rèn)為一這種判定不準(zhǔn)確，另外美國(guó)現(xiàn)行法律不允許使用小鼠毒力試驗(yàn)。美方指出等效評(píng)定要求全部方法都必須以文件化方式在食品安全局公共健康辦公室立案，經(jīng)過(guò)確認(rèn)才能認(rèn)可使用?？紤]到時(shí)間問(wèn)題中方能夠選擇美國(guó)農(nóng)業(yè)部公布方法或認(rèn)可方法如ISO6579和ISO11129-1方法檢測(cè)沙門(mén)氏菌和李斯特菌，但使用ISO6578檢測(cè)沙門(mén)氏菌前增菌和取樣量時(shí)最好采取美國(guó)農(nóng)業(yè)部做法，之后能夠按照ISO6578方法檢測(cè)。ISO方法多為傳統(tǒng)培養(yǎng)法，檢測(cè)技術(shù)和設(shè)備要求不高，只是對(duì)檢測(cè)人員經(jīng)驗(yàn)技能有一定要求。美國(guó)農(nóng)業(yè)部檢測(cè)方法多采取快速篩選和傳統(tǒng)培養(yǎng)相結(jié)合方法，快速篩選法對(duì)檢測(cè)設(shè)備要求高，資金投入大。不論是ISO還是美國(guó)現(xiàn)行方法都是公開(kāi)公布方法，如ISO方法在各局資料室都能查到，我國(guó)試驗(yàn)室應(yīng)該含有對(duì)應(yīng)應(yīng)用能力。

美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第36頁(yè)

5、主動(dòng)開(kāi)展肉類(lèi)產(chǎn)品中不一樣動(dòng)物品種判別方法研究：美方在最終還提到關(guān)于中方是否具備判別不一樣動(dòng)物品種能力。這主要是美國(guó)考慮到肉類(lèi)產(chǎn)品中可能存在摻假可能性以及存在不應(yīng)含有組織成份。因?yàn)樵摲N檢測(cè)基于免疫學(xué)和分子生物學(xué)伎倆，且國(guó)外已經(jīng)有對(duì)應(yīng)試劑盒銷(xiāo)售，中方完全具備對(duì)應(yīng)能力，應(yīng)安排今后對(duì)美國(guó)有出口產(chǎn)品當(dāng)?shù)貦z驗(yàn)檢疫局結(jié)合本身產(chǎn)品情況適時(shí)開(kāi)展開(kāi)驗(yàn)工作。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第37頁(yè)總結(jié)-關(guān)于儀器設(shè)備校準(zhǔn)、計(jì)量、使用、維護(hù)統(tǒng)計(jì)

1、作為質(zhì)量體系一個(gè)別，試驗(yàn)室應(yīng)按成文規(guī)程對(duì)試驗(yàn)室儀器設(shè)備進(jìn)行維護(hù)、校準(zhǔn)、性能測(cè)試。

2、試驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備維護(hù)應(yīng)依據(jù)使用頻率定時(shí)進(jìn)行。保留詳細(xì)統(tǒng)計(jì)。

儀器設(shè)備校準(zhǔn)、計(jì)量、使用、維護(hù)統(tǒng)計(jì)在USDAFSIS《MLGChapter36》中已詳細(xì)要求。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第38頁(yè)總結(jié)-關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)菌株1、依據(jù)ISO11133-1：指導(dǎo)，將參考菌株傳代培養(yǎng)，以提供參考原種，純度和生化檢驗(yàn)應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。提議使用深度冰凍或凍干法儲(chǔ)存分裝參考原種。參考原種繼代培養(yǎng)便是日常微生物檢測(cè)所需工作菌種。一旦參考原種被解凍，不可重新冷凍和再次使用。

2、工作菌種不應(yīng)傳代，不然需要有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法或試驗(yàn)室提供檔案證實(shí)其在任何相關(guān)性質(zhì)上沒(méi)有改變。工作菌種不能繼代培養(yǎng)以代替參考菌種。參考菌株商業(yè)衍生物僅能夠用作工作菌種。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第39頁(yè)總結(jié)-關(guān)于試劑和培養(yǎng)基

1、試驗(yàn)室有對(duì)試劑進(jìn)行檢驗(yàn)、接收/拒收和貯存程序和標(biāo)準(zhǔn)，確保包括到試劑質(zhì)量適合用于檢驗(yàn)。試驗(yàn)室人員應(yīng)該在起初和保留期限內(nèi)，使用我國(guó)或國(guó)際認(rèn)可陽(yáng)性對(duì)照微生物和陰性對(duì)照微生物，檢驗(yàn)對(duì)食品微生物檢測(cè)起決定性作用每一批試劑適用性，在確定這些物品到達(dá)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格，或已到達(dá)對(duì)應(yīng)規(guī)程中所制訂標(biāo)準(zhǔn)之前，不得使用，并統(tǒng)計(jì)歸檔。2、應(yīng)建立一套供貨清單控制系統(tǒng)，該系統(tǒng)中應(yīng)該包含全部相關(guān)試劑、質(zhì)控材料以及校準(zhǔn)品批號(hào)、試驗(yàn)室接收日期、以及這些材料投入使用日期。全部這些質(zhì)量統(tǒng)計(jì)應(yīng)在試驗(yàn)室管理評(píng)審中提供。

3、試驗(yàn)室應(yīng)對(duì)影響檢驗(yàn)質(zhì)量主要試劑供給方、供給品以及服務(wù)情況進(jìn)行評(píng)價(jià)，而且保留這些評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)和經(jīng)核準(zhǔn)清單。美國(guó)微生物檢查要求和微生物監(jiān)控體系第40頁(yè)