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靜脈和肌肉注射磺胺二甲基嘧啶藥代動力學(xué)參數(shù)的測定(二)2015.6.2實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握靜脈和肌肉注射的給藥方法。2.掌握血樣的采集、處理方法。3.掌握房室模型的判斷及相關(guān)藥代動力學(xué)參數(shù)的計(jì)算方法。
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容家兔靜注及肌注SM2鈉鹽藥動學(xué)參數(shù)測定實(shí)驗(yàn)步驟:取空白血→給藥(靜注或肌注)→按規(guī)定時(shí)間點(diǎn)取血→血樣處理→測定→計(jì)算參數(shù)。(1)給藥途徑、劑量及取血時(shí)間給藥途徑給藥部位藥物藥量采血時(shí)間i.v.耳緣靜脈緩慢注射10%SM2鈉鹽溶液200mg/kg0’、2’、5’、10’、15’、20’、30’、45’、60’、120’i.m.臀部肌肉深度注射10%SM2鈉鹽溶液200mg/kg0’、
5’、10’、20’、30’、40’、60’、80’、100’、120’(2)血樣采集:在非給藥側(cè)耳朵耳緣靜脈處把毛剪去,使靜脈顯露。每次取血前用燈照幾分鐘,在燈光的熱量作用下耳血管充分充盈后,在耳緣靜脈處把皮切開一個(gè)小口,露出靜脈,把靜脈切開一半(不要切斷),血液從切口處流出,置于含有肝素的瓷孔,用針頭略攪拌以達(dá)最好的抗凝效果。測定SM2需要血樣0.2ml,通常在瓷孔中有5~7滴血就足夠使用。取血畢用棉花置于切口,再用彈簧夾夾住,防止出血。下次取血前取去彈簧夾和棉花,用干棉球輕揉切口,抹去血痂,即可取血,不必另作切口。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(3)血樣本處理:用移液槍吸取0.2ml抗凝血置于裝有3.2ml蒸餾水的試管中(溶血),輕搖后靜置5’,加入0.6ml的三氯醋酸(沉淀蛋白),搖勻后靜置3’。1500rpm離心5’。取上清液2ml置于另一支試管,加入亞硝酸鈉2滴(重氮化反應(yīng)),振搖后靜置3’,加氨基磺酰胺1ml(破壞過剩的亞硝酸)。搖勻、靜置2’。再加入2mlN-(1-萘)-乙二胺(顯色)。顯色過程需要5’。顯色后在1小時(shí)內(nèi)測量(紫紅色)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(4)血藥濃度測定:取經(jīng)處理的紫紅色樣本(給藥前的樣本作參比)。在分光光度計(jì)530nm中測量。測得的吸光度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求出SM2藥物濃度。(5)參數(shù)計(jì)算房室模型判斷:用EXCEL做藥-時(shí)曲線半對數(shù)圖,縱坐標(biāo)(濃度)格式選用對數(shù)刻度,采用圖解法進(jìn)行判斷。參數(shù)計(jì)算:根據(jù)房室模型進(jìn)行參數(shù)計(jì)算。參考:參數(shù)計(jì)算.pdf以及《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》第二篇第二章、第三章。注意事項(xiàng)1.5組靜注,5組肌注,組內(nèi)成員注意分工;1組肌注與1組靜注結(jié)對,數(shù)據(jù)共用。2.取兔子后先稱重,計(jì)算給藥劑量(200mg/kg,藥物濃度為100mg/ml)。3.取血前先在白瓷孔板上編上時(shí)間點(diǎn),試管(2套)編號,第1套試管加入3.2ml蒸餾水并且驗(yàn)漏。4.先取空白血,再給藥,給完藥要洗手,以免污染取血側(cè)耳朵,給藥側(cè)及取血側(cè)耳朵做好標(biāo)記,切勿弄混。5.在瓷孔中滴入5~7滴血,攪拌后及時(shí)轉(zhuǎn)移0.2ml至試管,以免污染。6.每次取血后要更換棉球,洗玻璃棒,以免污染。7.給
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