血小板檢查的學習教案

血小板檢查的學習教案第1頁/共41頁目的要求掌握：血小板計數(shù)的原理、、方法、質量控制、參考值、方法學平價及臨床意義。重點:血小板計數(shù)難點:血小板形態(tài)第2頁/共41頁一、概述第3頁/共41頁（一）血小板的生成造血多能干細胞TPO調控分化原巨核細胞促進巨核細胞祖細胞增殖、分化、成熟與釋放plt進入血液Plt2/3在循環(huán)血，其余貯存于脾。第4頁/共41頁（二）血小板的破壞血小板的平均壽命為7~14天，具有止血功能僅開始2天。衰老的血小板在單核巨噬細胞破壞，主要在脾破壞。脾池化：全身約有1/3的血小板滯留于脾竇和脾髓的細胞間，血小板在脾內的這種滯留現(xiàn)象即“脾池化”，脾池中的血小板和循環(huán)池中的血小板可以互換。第5頁/共41頁（三）血小板檢測常用項目1、血小板計數(shù)（PLT）:手工單項或血液分析儀多項檢測2、血小板平均體積（MPV）3、血小板分布寬度(PDW)4、血小板比積(PCT)血液分析儀測第6頁/共41頁二、血小板計數(shù)（手工法）第7頁/共41頁（一）原理將血液稀釋一定倍數(shù)，充入計數(shù)池內計數(shù)，計算出每一升血中血小板數(shù)。稀釋液破壞RBC,固定Pt并防止聚集。第8頁/共41頁（二）器材光學顯微鏡；血球計數(shù)板、Hb吸管、試管、采血針等。（三）試劑：下列試劑任選一種1.草酸銨稀釋液：草酸銨1.0g,EDTA-Na20.012g，蒸餾水加至100mL.首選試劑。2.許汝和稀釋液（復方尿素稀釋液）：尿素10g，枸櫞酸鈉0.5g，40%甲醛0.1mL蒸餾水加至100mL。過濾冰箱保存。第9頁/共41頁（四）操作1.在小試管中加入plt稀釋液0.38mL。2.取末梢血20μL加入試管中，迅速搖勻。室溫放置>10分鐘。3.充池，靜置10~15分鐘。4.高倍鏡下計數(shù)中央大方格中四角及正中共5個中方格內的plt數(shù)。第10頁/共41頁（五）計算血小板數(shù)/L=5個中方格內血小板數(shù)（N）×5×10×20×106/L=5個中方格內血小板總數(shù)×109/L（六）結果報告PLT:△△△×109/L第11頁/共41頁（七）注意事項1.全部用具和稀釋液要特別清潔，防塵、防菌，以免計數(shù)時誤認。2.針刺要深，吸血及稀釋動作要快，防聚集。3.同時做多項檢查時，優(yōu)先采plt計數(shù)之血。4.充池前應充分搖勻，充池后需靜置10分鐘以上待plt全部下沉后再計數(shù)。1h內完成。第12頁/共41頁（八）方法學平價1.草酸銨法對RBC破壞力強，使視野清晰，plt形態(tài)清楚，是全國臨床檢驗操作規(guī)程推薦方法。由于Plt體積小，易粘附、聚集及破壞等，結果不甚理想。2.復方尿素法優(yōu)點是plt脹大易辨認，但不能完全溶解RBC，且尿素易分解，試劑保存時間短。第13頁/共41頁3.血液分析儀法可同時測MPV、PDW等多個指標，快速，臨床適用。但不能鑒別紅細胞碎片、灰塵等與plt大小相似之物，故計數(shù)誤差大。當直方圖出現(xiàn)變化時，應用顯微鏡計數(shù)法校準之。第14頁/共41頁4.流式細胞儀法：用血小板單克隆抗體染色標記血小板，根據(jù)熒光強度和散射光強度，用獨立的流式細胞儀檢測可得到準確性極高的血小板數(shù)。流式細胞儀法式目前血小板計數(shù)參考方法。第15頁/共41頁5.相差顯微鏡法：相差顯微鏡下，血小板立體感增強，有助于識別血小板，還可照相后核對計數(shù)結果，作為手工法血小板計數(shù)的參考方法。（九）參考值：（100~300）×109/L第16頁/共41頁（十）質量保證原則是：避免血小板被激活、破壞，避免雜物污染。1.檢測前：采血要順暢，抗凝劑選用合適，儲存時間適當；2.檢測中：手工法計數(shù)要定期檢查稀釋液質量，儀器法要質控合格；第17頁/共41頁3.檢測后：（1）用同一份標本制備學血涂片染色精簡觀察血小板數(shù)量、大小、分布情況，并注意有無異常增多的紅、白細胞碎片。（2）用參考方法核對。（3）同一份標本2次計數(shù)誤差要<10%。第18頁/共41頁（十一）臨床意義生理變化：①新生兒<嬰兒，出生后3個月達成人水平。②晨間<午后，春季<冬季，毛細血管<靜脈③運動、飽餐后上升，休息后恢復。④月經期低，經期后上升。⑤妊娠中晚期，分娩后1~2天第19頁/共41頁病理變化1.plt減少：①生成障礙：急性白血病，再障，巨幼貧等②破壞過多：ITP、脾亢、SLE等；③消耗過多：DIC、血栓性血小板減少性紫癜④分布異常：脾腫大、血液被稀釋等；⑤先天性：新生兒plt減少癥、巨大plt綜合征第20頁/共41頁2.plt增多：①原發(fā)性：慢粒、原發(fā)性plt增多癥、真性紅細胞增多癥等；②反應性：急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等；③其他：外科手術后、脾切除等。第21頁/共41頁三、plt平均體積（MPV）的臨床意義第22頁/共41頁MPV參考值：6.8~13.6fL分析MPV臨床意義需結合plt數(shù)量變化。1.鑒別plt減少癥的原因①plt，而MPV，骨髓自身正常，外周血plt破壞。②plt，而MPV,骨髓抑制損傷而造成plt第23頁/共41頁2.血小板增高性疾?、賞lt，而MPV:脾切除，慢粒等；②plt，而MPV：嚴重感染。3.血栓前狀態(tài)或血栓性疾病時MPV常增高

第24頁/共41頁4.MPV↑可作為判斷骨髓功能恢復的較早指標：①骨髓功能衰退時，MPV、PLT同時，抑制越重，MPV越。②當骨髓功能恢復時，MPV先于PLT，是功能恢復的第一指標。第25頁/共41頁5.作為出血程度的監(jiān)護指標:有出血傾向者MPV顯著低于無出血傾向者，即使嚴重的PLT者，如MPV>6.4fL，出血發(fā)生率也低。第26頁/共41頁四、血小板分布寬度(PDW)和血小板比積(PCT）第27頁/共41頁1PDW：是血液分析儀對血小板分布情況進行數(shù)據(jù)處理得到的血小板體積的變異系數(shù)。2PCT：是血小板計數(shù)值和MPV經過計算得到的，其值的大小與PLT和MPV值有關。PCT=PLT×MPV第28頁/共41頁3、參考值：PDW：15.5%～18.1%PCT:成人：0.108%～0.282%1～15歲兒童：0.221%～0.406%4、臨床意義：暫未用于臨床，須與其他參數(shù)聯(lián)合應用第29頁/共41頁五、血小板形態(tài)檢查第30頁/共41頁形態(tài)檢查內容①血小板大小：有無巨大血小板或小型血小板；②形態(tài)：胞質的顏色，顆粒有無、分布、粗細，空泡；③PLT分布。第31頁/共41頁(一)正常形態(tài)1.5~3μm，呈圓形、橢圓形、逗點形或不規(guī)則形；胞質呈淡藍或粉紅，中心有若干細小紫紅色顆粒，無細胞核，血片上3~5成群。第32頁/共41頁血小板（血涂片）第33頁/共41頁第34頁/共41頁(二)異常形態(tài)

1、大小異常（1）大血小板：直徑4~7μm，巨型血小板直徑>7.5μm。見于ITP、巨大血小板綜合征、脾切除等。（2）小血小板：直徑<1.5μm，主要見于缺鐵貧、再障等。第35頁/共41頁巨大血小板第36頁/共41頁2.形態(tài)異常（1）幼稚形：顆粒少。（2）老年形:邊緣不規(guī)則，顆粒粗，呈離心分布，有空泡。（3）病理幼稚形：體積大，胞質淡藍，幾乎無顆粒。第37頁/共41頁（4）病理刺激形：體積增大，形態(tài)不一，胞質呈淡藍/紫紅，顆粒多而大小一致。（5）退化形：大小、形態(tài)不一，有大空泡，無顆粒或顆粒聚集。正常人異常plt<2%，異常plt>10%才有意義。第38頁/共41頁（6）血小板衛(wèi)星現(xiàn)象：血小板粘附、圍繞于中性粒細胞（或偶