過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座

細(xì)胞中過(guò)氧化物酶顯示與觀察(

peroxisome)微體（micro-bodies）過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第1頁(yè)電鏡下過(guò)氧化物酶體電子致密關(guān)鍵是尿酸氧化酶結(jié)晶，即類核體過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第2頁(yè)peroxisome◆Peroxisomesaresimple,membrane-boundvesicles(ormicrobodies,astheyarealsocalled)◆Adiameterof0.1to1.0μmthatoftencontainadense,crystallinecoreofoxidativeenzymes◆Peroxisomesaremultifunctionalorganelles,containingmorethan50enzymesinvolvedinsuchdiverseactivities◆glyoxysome乙醛酸循環(huán)體:specializedtypeofperoxisome,presentinplants.過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第3頁(yè)過(guò)氧化物酶體包含2種酶類：◆氧化酶(oxidases)

●約占過(guò)氧化物酶體酶總量二分之一●各種氧化酶作用于不一樣底物●將氧還原成過(guò)氧化氫。

RH2+O2→R+H2O2過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第4頁(yè)◆過(guò)氧化氫酶(catalase)●是過(guò)氧化物酶體標(biāo)志酶●約占過(guò)氧化物酶體酶總量40%●作用是將過(guò)氧化氫還原成水

RH2+H2O2→R+2H2O過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第5頁(yè)過(guò)氧化物酶體增殖過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第6頁(yè)試驗(yàn)原理氧化還原酶類原位顯示：依據(jù)氧化還原原理，使無(wú)色化合物氧化成有色物質(zhì)得以定位。過(guò)氧化物酶體系能把許多胺類氧化成有色化合物。本試驗(yàn)用聯(lián)苯胺混合液處理標(biāo)本，過(guò)氧化物酶可將其氧化為藍(lán)色或棕色產(chǎn)物。依據(jù)顏色反應(yīng)，可判定過(guò)氧化物酶有沒(méi)有或多少。RH2+O2R+H2O2H2O2+R’H2R’+H2O過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第7頁(yè)試驗(yàn)步驟試驗(yàn)一：取洋蔥鱗片表皮一薄片；置于0.85％NaCl溶液中3－5分鐘。培養(yǎng)皿1浸在溶有0.1%鉬酸胺0.85％NaCl溶液中5分鐘。培養(yǎng)皿2在使用聯(lián)苯胺溶液前，每2ml加10%過(guò)氧化氫2滴。培養(yǎng)皿3浸在聯(lián)苯胺溶液中2分鐘，至切片出現(xiàn)藍(lán)色為止。培養(yǎng)皿3在0.85%NaCl溶液中洗1min。培養(yǎng)皿4將薄片置于載玻片上展開(kāi)，蓋上蓋玻片，顯微鏡檢驗(yàn)。試驗(yàn)二：

取馬鈴薯塊莖一個(gè)，用徒手切片法切取一小薄片置于載玻片上，滴加3％過(guò)氧化氫溶液。用煮熟馬鈴薯重復(fù)上述過(guò)程，結(jié)果怎樣？過(guò)氧化物酶的顯示和觀察專家講座第8頁(yè)試驗(yàn)結(jié)果1、在顯微鏡下可見(jiàn)到細(xì)胞中有一些染成藍(lán)色或棕色顆粒。即為過(guò)氧化物酶存在部位。

2、滴加了過(guò)氧化氫溶液馬鈴薯組織四面出現(xiàn)氣泡，提醒植物中過(guò)氧化氫酶存在。過(guò)氧化氫酶能使H2O2分解，生成H2O和O2H2O2