端粒酶腫瘤治療研究新方向?qū)＜抑v座

端粒酶

——腫瘤治療研究新方向班級：醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)級學(xué)生：周冰峰龍妮婭學(xué)號：01010010101008

端粒酶腫瘤治療研究新方向第1頁主要內(nèi)容背景結(jié)構(gòu)及作用機(jī)制活性檢測技術(shù)腫瘤治療方面應(yīng)用

端粒酶腫瘤治療研究新方向第2頁序言

端粒是染色體末端一段類似“帽子”特殊結(jié)構(gòu)，由GC重復(fù)序列和蛋白質(zhì)組成；端粒酶是一個核糖核蛋白體，能以本身RNA為模板合成端粒DNA，為細(xì)胞連續(xù)分裂提供遺傳基礎(chǔ)；因?yàn)槎肆：投肆Ｃ概c細(xì)胞衰老、腫瘤發(fā)生等現(xiàn)象親密相關(guān)，所以它也成為了科學(xué)家們當(dāng)前研究熱點(diǎn)。端粒酶腫瘤治療研究新方向第3頁

背景知識一端粒發(fā)覺

HermannJ.Muller（1890~1967）1946年獲NobelPrizePhysiologyorMedicine

Barbava

McClintock（1902~1992）端粒酶腫瘤治療研究新方向第4頁

背景知識二端粒酶發(fā)覺1985年由Blackburn試驗(yàn)室首次在四膜蟲細(xì)胞提取液中發(fā)覺了一個酶活性成份，能往端粒區(qū)添加重復(fù)序列TTGGGG，當(dāng)初稱之為末端轉(zhuǎn)移酶，也就是以后端粒酶。端粒酶腫瘤治療研究新方向第5頁

“染色體是怎樣被端粒和端粒酶保護(hù)”ElizabethH.Blackburn

CarolW.Greider

JackW.Szostak端粒酶腫瘤治療研究新方向第6頁端粒酶結(jié)構(gòu)端粒酶是一個自身攜帶

RNA為模板核糖核蛋白酶復(fù)合體。端粒酶腫瘤治療研究新方向第7頁

1）端粒酶RNA(TR)

2）端粒酶催化亞單位(TERT)

3）端粒酶相關(guān)蛋白質(zhì)(TP／TLP)

端粒酶腫瘤治療研究新方向第8頁端粒酶功效

端粒酶關(guān)鍵作用——延長端粒TR和TERT是端粒酶發(fā)揮作用關(guān)鍵組分，分別提供模板和逆轉(zhuǎn)錄酶合成端粒DNA端粒酶腫瘤治療研究新方向第9頁端粒酶作用機(jī)制端粒酶怎樣延長端粒？端粒酶與端粒3’端結(jié)合以5’TR為模板端識別端粒DNA3’端并逆轉(zhuǎn)錄合成新鏈

合成新鏈3’端單鏈可回折作為引物合成互補(bǔ)端粒DNA鏈端粒酶腫瘤治療研究新方向第10頁TERT在端粒酶中地位

正常組織廣泛表示hTR和hTP1，而hTERT表示被抑制，大多數(shù)端粒酶陽性腫瘤細(xì)胞和永生化細(xì)胞系中均表示hTERT；

這說明hTERT表示與端粒酶活性是平行，所以在端粒酶激活過程中hTERT在細(xì)胞中作用是決定端粒酶活性關(guān)鍵。端粒酶腫瘤治療研究新方向第11頁端粒酶活性檢測技術(shù)端粒酶慣用檢測方法有三種：1）端粒重復(fù)序列擴(kuò)增法（TRAP)2）RT-PCR法檢測hTERT表示3）用32P標(biāo)識端粒（CCCTAA）探針或用Hinf1和Ras1酶解基因組DNA雜交端粒酶腫瘤治療研究新方向第12頁端粒酶在腫瘤治療中應(yīng)用當(dāng)前主要路徑有以下幾個：（一）阻斷端粒酶RNA模板作用，包含：反義hTR、反義寡核苷酸、錘頭狀核酶和肽苷酸等；（二）針對端粒酶催化亞基抑制劑：反義hTERT抑制劑、端粒酶蛋白抗體、PKC調(diào)整劑等；端粒酶腫瘤治療研究新方向第13頁寡核苷酸介導(dǎo)治療

研究發(fā)覺，針對人端粒酶RNA（humantelomeraseRNA，hTR）11個堿基區(qū)域治療能夠直接抑制端粒酶活性，所以是寡核苷酸治療理想靶點(diǎn)。

不論端粒酶全酶結(jié)構(gòu)怎樣，hTR模板區(qū)域一定會連接到端粒重復(fù)結(jié)構(gòu)，所以就會出現(xiàn)靶寡核苷酸暴露，這為寡核苷酸介導(dǎo)治療提供了理論基礎(chǔ)。端粒酶腫瘤治療研究新方向第14頁實(shí)例以hTR為靶點(diǎn)反義寡核苷酸可降低胃癌細(xì)胞系SW480（人結(jié)腸癌細(xì)胞株）活性，并同時誘導(dǎo)其凋亡。端粒酶腫瘤治療研究新方向第15頁反義hTERT抑制劑

抑制腫瘤機(jī)制：

針對端粒酶RNA組分中含有與端粒DNA序列互補(bǔ)堿基模板序列設(shè)計(jì)反義核苷酸，含有阻斷其模板作用，從而抑制DNA端粒酶合成端粒DNA序列。所以，反義hTERT抑制劑能夠抑制腫瘤細(xì)胞端粒酶活性并造成細(xì)胞死亡。端粒酶腫瘤治療研究新方向第16頁實(shí)例

1989年美國加州大學(xué)分子生物學(xué)教授Morin首次從人宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞中發(fā)覺并判定了端粒酶存在。端粒酶腫瘤治療研究新方向第17頁

應(yīng)用反義hTERT轉(zhuǎn)染人Hela細(xì)胞，發(fā)覺端粒DNA逐步丟失，經(jīng)23～26個分裂周期后細(xì)胞就開始死亡。端粒酶腫瘤治療研究新方向第18頁總結(jié)

與傳統(tǒng)放化療對細(xì)胞毒性比較，以端粒酶為靶向治療能降低對正常細(xì)胞毒副作用。

同時腫瘤細(xì)胞端粒酶活性要高于弱陽性正常細(xì)胞，所以，端粒酶抑制劑對端粒酶活性較高、且端粒相對較短腫瘤細(xì)胞可能發(fā)揮更大作用。端粒酶腫瘤治療研究新方向第19頁

1）并不是全部腫瘤患者和腫瘤類型都能檢測到端粒酶活性，所以，這些細(xì)胞可能會對端粒酶靶向治療方法不敏感。2）當(dāng)端粒酶活性被抑制后，端粒長度需要一段時間縮短至一定程度時才能引發(fā)細(xì)胞凋亡。所以，從藥品