DB4405T 240-2022鷓鴣菜人工育苗技術規(guī)程

ICS65.150CCSB054405代替DB440500/T240-2014IDB4405/T240—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件與DB440500/T240-2014相比，除編輯性修改外主要技術變化如下：——修改了“培養(yǎng)用水海水鹽度”的內(nèi)容（見4.3和5.2.1）；——修改了“附苗基”的內(nèi)容（見5.1，6.3和6.4.2）；——修改了“培育條件”的內(nèi)容（見6.4.1）。本文件由汕頭市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件起草單位：汕頭市水產(chǎn)技術推廣中心站、中國科學院汕頭海洋植物實驗站。本文件主要起草人：馬慶濤、陳加雄、李偉濱、林傳旭、陳楷亮、洪偉澤。本文件代替了DB440500/T240-2014。1DB4405/T240—2022鷓鴣菜人工育苗技術規(guī)程本標準規(guī)定了鷓鴣菜（Caloglossaleprieurii(Montagne)J.I)人工育苗的術語和定義、育苗場所的環(huán)境條件、育苗前準備、培育管理等。本標準適用于汕頭市轄區(qū)內(nèi)的鷓鴣菜人工育苗。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB11607漁業(yè)水質(zhì)標準NY5052無公害食品海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1四分孢子由一個母細胞經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生的4個具單倍染色體數(shù)的不動孢子，四分孢子由四分孢子囊包裹集生于鷓鴣菜孢子體葉尖處。3.2囊果鷓鴣菜雌性生殖器官果胞受精后，在母體上發(fā)育形成的一種球型的二倍體結構，生于分枝點上部或中肋的內(nèi)面。3.3孢子體褐色葉狀，扁平，個體較大，葉尖平直，呈不規(guī)則的叉狀分枝，叉點處有時可見新生小葉；在四分孢子形成期可見葉尖處或交叉點小葉集生大量四分孢子。本標準中選用的鷓鴣菜均為其孢子體。3.4配子體褐色葉狀，扁平，個體較小，葉尖微曲，呈不規(guī)則的叉狀分枝，在囊果形成期可見葉尖處、中肋內(nèi)面或叉點處附著有球狀黑褐色囊果。4育苗場所4.1育苗場選址2DB4405/T240—2022育苗場應選擇在水質(zhì)環(huán)境好，海水獲取方便，有淡水水源，交通便利的出?？谔幗ⅰ?.2育苗室育苗室建于透光的室內(nèi)，光照強度和溫度可調(diào)，光照強度范圍從1000Lux～10000Lux，溫度控制范圍從10℃~30℃。4.3海水要求海水水質(zhì)要求鹽度為8‰～18‰，pH7.9～8.4，其他理化指標應符合GB11607和NY5052要4.4育苗設備及工具光照培養(yǎng)箱、解剖鏡、天平、溫度計、比重計、解剖刀、噴壺、吸管、量杯及量筒、藥匙、塑料桶等。金屬和玻璃器具用蒸汽高壓消毒，塑料用具用75%乙醇擦洗消毒后備用。5育苗前準備5.1附苗基處理選用純棉質(zhì)斜紋布，根據(jù)培養(yǎng)容器裁剪成適合大小，使用前用淡水洗凈并在開水中煮沸30min后晾干備用。5.2育苗用水處理5.2.1育苗用水育苗用水應符合GB11607和NY5052要求，鹽度控制在8‰～18‰范圍內(nèi)。5.2.2培養(yǎng)基配制培苗用水添加營養(yǎng)鹽及植物激素按表1配比調(diào)配，用0.22μm孔徑的無菌微孔濾膜過濾作為培養(yǎng)基。表1培養(yǎng)基添加成分含量表添加劑種類含量(×10-6）NaNO35～10KH2PO40.5～1.06-芐氨基嘌呤0.05～0.1二氯苯氧乙酸0.05～0.1萘乙酸0.05～0.15.3消毒液的配制用青霉素鈉溶于培苗用水，使其溶液濃度為20TU/L～60TU/L即為消毒液。5.4種藻的來源及選擇3DB4405/T240—2022鷓鴣菜種藻采自河口潮間帶，應在每年3月中旬～4月上旬鷓鴣菜生長旺盛期采摘，必須具備明顯的種特征，藻體細嫩且健壯。6.1種藻的處理用培苗用水洗去雜藻和浮泥，晾干，在消毒液中浸泡滅菌20min～40min后，用解剖鏡挑選形態(tài)完整、細嫩、無四分孢子、無囊果的藻體作為組織塊供體，備用。6.2組織塊的制備在解剖鏡下將作為供體的鷓鴣菜切割成1mm～3mm大小的組織塊，然后用消毒水漂洗干凈。6.3組織塊的附著將切好的鷓鴣菜組織塊移放到準備好的純棉質(zhì)斜紋布上，純棉質(zhì)斜紋布將作為組織塊的附著基，用噴壺向排列好的組織塊多次少量噴灑培養(yǎng)液，保持純棉質(zhì)斜紋布濕潤3h～4h，使組織塊粘連在純棉質(zhì)斜紋布上。6.4培養(yǎng)管理6.4.1培育條件培養(yǎng)溫度為20℃~25℃,光照強度前5d為1500Lux～2000Lux，第6d開始至出苗前為2000Lux~3500Lux，光照周期D/N=12h：12h，組織塊每天至少露干3h～5h。6.4.2培養(yǎng)基的添加量培養(yǎng)的前5d培養(yǎng)液遵循少量多次的添加原則，使組織塊牢固附著在純棉質(zhì)斜紋布上。第6d開始，培養(yǎng)液添加量可改為2次/d，以淹沒組織塊為宜。6.4.3培養(yǎng)液的更換每4d～5d徹底更換1次培養(yǎng)液，具體