腫瘤標志物專題知識講座

腫瘤標志物專題知識講座腫瘤標志物專題知識講座第1頁

腫瘤標志物

（TumorMarkers，TM）是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞基因表示而合成份泌或由機體對腫瘤反應而異常產生或升高，反應腫瘤存在和生長一類物質，包含蛋白質，激素，酶，多胺，及癌基因產物。腫瘤標志物專題知識講座第2頁理想腫瘤標志物特異性強:即它們只能由腫瘤組織產生，而在正常組織不存在。敏感性好:即它們可用于小腫瘤早期診療或篩選。是一類可用某種檢測伎倆檢測，能與正常組織相區(qū)分物質。腫瘤標志物專題知識講座第3頁一、TM發(fā)覺概況

第一代（腫瘤代謝產物）1846Bence-Jones尿腫瘤特異蛋白（Ig輕鏈）1928Zoudek（人絨毛膜促性腺激素）HCG1932Cushing腫瘤異位激素（ACTH）1959MarketPAP，AKP，LDH及同工酶1960Newell腫瘤畸變染色體腫瘤標志物專題知識講座第4頁第二代（腫瘤本身抗原）

1963AbelevAFP1965Gold，FreedmanCEA腫瘤標志物專題知識講座第5頁第三代（糖類抗原）

1977KatoSCC（糖蛋白）1979美KaprowskiCA19-9（糖脂）1981美NCICA72-4（糖蛋白）1983LindholmCA50（糖脂-節(jié)苷脂）1983Base，KlugCA12-5（糖蛋白）1985TobiesCA15-3（糖蛋白）

腫瘤標志物專題知識講座第6頁二、腫瘤診療1、臨床—病史、體癥2、輔助—物理檢驗：X光、CT、核磁共振、

B超、紅外掃描病理術前：穿刺、刮片、拉網術后：組織切片免疫學檢驗：腫瘤標志物和代謝物測定分子生物學檢驗：核酸分析

腫瘤標志物專題知識講座第7頁WHO提出危險信號可觸及硬結和硬變，如乳房，皮膚等。疣或黑痣發(fā)生顯著改變。連續(xù)性消化不良，便血，血尿。連續(xù)性嘶啞，干咳及吞咽困難。月經期異常大出血，月經期外或絕經期后出血。鼻、耳分泌物帶血、頸部腫、視覺障礙。不愈傷口，原因不明疼痛及體重減輕。腫瘤標志物專題知識講座第8頁

三、血清TM檢測及應用

腫瘤特異抗原腫瘤相關抗原

1、胚胎性抗原

2、腫瘤相關糖脂及糖蛋白抗原

3、激素肽、酶及蛋白

腫瘤標志物專題知識講座第9頁腫瘤相關抗原（TAA）

非腫瘤細胞全部、正常細胞上也存在抗原，只是其含量在腫瘤時顯著增加。這類抗原只表現為量改變而無嚴格腫瘤特異性。腫瘤標志物專題知識講座第10頁（一）主要腫瘤相關抗原分類：

1、胚胎抗原

2、腫瘤相關糖脂及糖蛋白抗原

3、激素肽,酶及蛋白等腫瘤標志物專題知識講座第11頁胚胎性抗原癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,CEA）甲胎蛋白抗原（a-fetoproteinantigen,AFP）胰胚抗原(POA)腫瘤標志物專題知識講座第12頁腫瘤相關糖脂及糖蛋白抗原鱗狀上皮細胞癌抗原（squamouscarcinomacellantigen,SCC）糖鏈抗原19-9（carbohydrateantigen,CA19-9）癌抗原15-3（carbohydrateantigen,CA15-3）癌抗原12-5（carbohydrate

antigen,CA12-5）前列腺特異抗原（prostatespecificantigen,PSA）腫瘤標志物專題知識講座第13頁激素肽、酶及蛋白等人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin,HCG）神經元特異性稀醇化酶（NSE）

Microglobulin、Feritine、

ThyroglobulinCYFRA21-1

腫瘤標志物專題知識講座第14頁（二）主要血清TM腫瘤標志物專題知識講座第15頁（1）CEA存在于胚胎胃腸粘膜上皮與一些惡性組織細胞表面，是一個分子量為180KD糖蛋白。在正常人腸道，胰腺，肝臟組織中也存在有少許，其它體液中存在量極微。除結腸癌升高外，還可見于胰腺癌、乳腺癌、小細胞及非小細胞肺癌、甲狀腺髓樣癌及一些非癌患者。所以CEA診療意義不大。CEA參考范圍，MEIA為5ng/ml。腫瘤標志物專題知識講座第16頁

另外吸煙影響CEA水平，健康吸煙者參考范圍高限值為7～10ng/ml。

20～50%良性疾病患者中，CEA水平輕度升高，尤其是胰腺，肝臟和肺部疾病，如肝硬化、慢性肝炎、胰腺炎、結腸潰瘍、肺炎、支氣管炎、腎小管性腎炎、肺氣腫、本身免疫系統(tǒng)疾病，其CEA水平保持在病理值低限，極少超出10ng/ml。腫瘤標志物專題知識講座第17頁

（2）甲胎蛋白（a-fetoprotein,AFP）

是由卵黃囊及胚胎肝產生糖蛋白，分子量為70KD，胎兒六周開始合成，12—15周達高峰，出生時臍血含量為10～100mg/L，1～2年降至正常水平，正常妊娠中期可達90～500ng/ml。

腫瘤標志物專題知識講座第18頁

AFP增高：AFP是肝細胞癌和生殖細胞癌（非精原細胞癌)標志。1原發(fā)性肝癌（70～90%），是當前最好可實際用于早期診療指標，可在癥狀出現前6～12個月作出診療。2轉移性肝癌和肝外腫瘤：睪丸腫瘤、卵巢腫瘤、胃癌、胰腺癌、結腸癌、支氣管癌、腎癌、乳腺癌、白血病等可增高。3非腫瘤性疾?。合忍煨阅懙篱]鎖癥，急慢性肝炎、肝硬化等可有不一樣程度增高。4重癥肝炎時如AFP減低，則預后不良。腫瘤標志物專題知識講座第19頁

AFP與HCG聯合檢測有利于生殖細胞腫瘤分類和分期。出生前檢驗羊水中AFP也很主要，如顯著升高表明有神經導管未閉可能。 腫瘤標志物專題知識講座第20頁

乙型肝炎患者一年應測定兩次AFP水平，如AFP水平顯著升高，則首先考慮肝細胞癌可能，而不可能是伴有膽囊炎急性惡化性肝硬化。但肝炎升高常為間歇性，在病理范圍低限值（極少超出500ng/ml）。腫瘤標志物專題知識講座第21頁（3）糖鏈抗原19-9（CA19-9）

是表示在一高分子量>400KDd粘蛋白上糖類位點，是一個單延酸神經節(jié)苷脂，在各種腺癌中升高。如胰腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌及胃癌。對胰腺、胃肝膽管癌含有高敏感性，是診療胰腺癌較為可靠標志。參考范圍：高限值為37u/ml。胰腺癌時CA19-9作為首選標志物其靈敏度達82%。腫瘤標志物專題知識講座第22頁

若對患者隨診CA19-9，可在放射影像發(fā)覺前及臨床出現體征前預示腫瘤復發(fā)。另外，在胃液與血清中測定CA19-9及CEA,可提升篩選胃癌敏感性和特異性。CA19-9對于肝膽癌癥靈敏度為50～75%，對于胃癌而言,CA19-9是僅次于CEA腫瘤標志物。腫瘤標志物專題知識講座第23頁因為CA72-4引用，CA19-9顯得不那麼重要了。為了確診胃癌最好聯合測定CA72-4

和CEA.而結腸癌時單測CEA即可,結腸癌很少有CEA陰性,如陰性可加測CA19-9。腫瘤標志物專題知識講座第24頁

（4）CA72-4

是一高分子量(>106)類粘蛋白分子，是經過以乳腺癌轉移癌細胞膜免疫所制備McAbB72.3及純化抗原后所制備第二代McAbCC49所識別抗原,可用于診療與監(jiān)測一些上皮腫瘤,尤其是胃癌。

腫瘤標志物專題知識講座第25頁CA72-4參考范圍高限值為2.5-4U/ml,含有高特異性.在胃癌患者血清中,其水平升高尤為顯著.經過對50例良性胃腸道疾病和197例處于活動期胃癌研究發(fā)覺,CA72-4對胃癌特異性為100%,靈敏度為48%.腫瘤標志物專題知識講座第26頁CA72-4測定對胃癌生長久和治療效果極為主要,最好聯合測定CA72-4和CEA。CA72-4也見于卵巢癌中。腫瘤標志物專題知識講座第27頁（5）CA15-3是監(jiān)視乳腺癌主要抗原,其生化本質為分子量400KD多形上皮粘蛋白。由抗人乳脂球(HMFG)膜McAb115D8與抗轉移乳腺癌膜成份McAbDF3所識別,存在于各種腺癌內，如乳腺癌、肺腺癌、卵巢癌及胰腺癌。腫瘤標志物專題知識講座第28頁（6）CA12-5

（cancerantigen,CA12-5）

是分子量大于200KD糖蛋白。由抗卵巢癌細胞系單克隆抗體所證實，對卵巢上皮癌敏感性高，但特異不強，因為其也存在于乳腺、肺、良性及惡性滲出液中。

腫瘤標志物專題知識講座第29頁

CA12-5水平增高與腫瘤復發(fā)相關，有利于隨訪病情，作為第二次治療主要參考。已得到美國FDA準許用于臨床，是為數極少可用于體內免疫顯像檢驗轉移發(fā)生單克隆抗體之一。腫瘤標志物專題知識講座第30頁

（7）鱗狀細胞癌抗原

（SquamousCellCarcinomaantigen,SCCA）

是48KD糖蛋白，作為鱗癌標識，特異性高，但敏感性較低，1977年制備了多克隆抗體，現已用單克隆抗體測定，可用于監(jiān)視宮頸、肺、及上皮細胞癌進展。腫瘤標志物專題知識講座第31頁（8）前列腺特異抗原

（prostatespecificantigen,PSA）

是一分子量為34KD糖蛋白，只存在于人前列腺腺泡及導管上皮細胞胞漿中，不表示于其它細胞，是前列腺較特異標志，主要用于前列腺癌診療，陽性率高于63%，用于診療前列腺癌、判別轉移性腺癌起源，以及判斷療效和預后。腫瘤標志物專題知識講座第32頁應用時應注意：1多數PSA結合于а-1-抗凝乳蛋白酶，前列腺癌患者94%呈結合狀態(tài)，前列腺增生患者78%呈結合狀態(tài)。所以，應經過測定游離PSA與結合PSA比進行分辯.2PSA參考范圍上界隨年紀上升而增加腫瘤標志物專題知識講座第33頁國外文件報道

年紀PSA含量40-49歲：2.5ng/ml50-59歲：3.5ng/ml60-69歲：4.5ng/ml70歲以上：6.5ng/ml60歲以上正常人PSA水平升高速率為每年0.04ng/ml.腫瘤標志物專題知識講座第34頁（9）人絨毛膜促性腺激素

（h-HCG）

存在于胎盤中糖蛋白激素,分子量為45KD,當懷孕時，尿中與血中水平上升，正常血中只含微量。以特殊免疫試驗可測定HCGβ亞單位。因為高于60%非精原細胞瘤病人體內HCG上升，所以β-HCG測定可監(jiān)視非精原細胞瘤治療反應及復發(fā)情況，甚至有些腫瘤復發(fā)可在臨床體征出現前幾周或幾個月經過測定HCG查出。腫瘤標志物專題知識講座第35頁（10）神經元特異性稀醇化酶（NSE）存在于神經及神經起源細胞中，分子量為78KD，是神經細胞瘤及小細胞肺癌TM。對小細胞肺癌敏感性、特異性均高，可用于輔助診療、判別診療及對病情療效預計。腫瘤標志物專題知識講座第36頁(11）β2微球蛋白（β2microglobulin，β2MG）

表示在大多數有核細胞表面，臨床上多用于證實淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤。其水平與腫瘤細胞數量、生長速度、預后及疾病活動性相關。骨髓瘤病人β2-MG水平高于4.0mg/L時，予示生存時間短。高于6.0mg/L時，對化療反應不敏感。另外，依據β2-MG水平還能夠用于骨髓瘤病人分期。腫瘤標志物專題知識講座第37頁（12）Ferritin

是一個鐵結合蛋白，存在于各種組織，病理狀態(tài)下，釋放到血液，不是腫瘤特異標志物，在各種癌癥病人血中都有不一樣程度升高，肝癌病人陽性率在70%以上，所以，可輔助肝癌診療。另外，在進展性乳腺癌患者蛋白水平也有顯著增高，可見與病程相關。腫瘤標志物專題知識講座第38頁(13)甲狀腺球蛋白(Thyroglobulin，Tg)

是甲狀腺濾泡上皮分泌660ku糖蛋白，每個Tg約有2個甲狀腺素(T4)和0.5個三碘甲腺原氨酸(T3)分子，儲存在濾泡腔中。溶酶體水解Tg表面T4、T3并使之釋放入血，同時少許Tg也釋放入血，個別Tg經甲狀腺淋巴管分泌入血。血循環(huán)中Tg被肝臟巨噬細胞去除。刺激Tg分泌原因包含促甲狀腺素(TSH)和胰島素樣生長因子-1(IGF-1);抑制因子是γ-干擾素、α-腫瘤壞死因子和維甲酸。Tg分泌率為100mg/(60kg?d)，其血漿半衰期為(29.6±2.8)h。腫瘤標志物專題知識講座第39頁血清Tg與甲狀腺分化癌甲狀腺分化癌手術前血清Tg值對診療沒有意義，因為非甲狀腺癌甲狀腺疾病病人血Tg也能夠升高，而甲狀腺癌病人血Tg也能夠正常。甲狀腺分化癌手術前血Tg水平和腫瘤大小成正相關。

甲狀腺分化癌病人行甲狀腺全切，血清Tg升高往往提醒有剩下腫瘤組織或者轉移灶。甲狀腺乳頭狀癌和濾泡癌經甲狀腺全切除后，血Tg應該<10μg/L，若>10μg/L則表示有轉移灶存在可能，該診療敏感性為100%，特異性為80%以上。Tg測定陰性能夠降低隨訪過程中無須要全身131I掃描。

腫瘤標志物專題知識講座第40頁(14)細胞角蛋白19片段（cyfra21-1）

是正常及惡性上皮細胞支架蛋白，已知有20種，分別為鹼性蛋白及酸性蛋白，分子量為68KD0至40KD，在惡性組織中蛋白量升高。腫瘤標志物專題知識講座第41頁

CKs作為上皮組織TM已經有多年了，其向血中釋放可能是經過不一樣機制，預計其中之一是細胞分解后發(fā)生。CKs不可溶，而其片段經蛋白酶水解后是可溶，所以在血清中只能測定到其片段.抗CK19片段單克隆抗體BM19-21及Ks19-1所針正確抗原為CYFRA21-1。這是檢測非小細胞肺癌（NSCLC）首選TM。腫瘤標志物專題知識講座第42頁（三）血清TM測定方法EIA、RIA免疫細胞化學、組織化學方法免疫熒光測定（IFA）放射免疫顯影（RAID）自動化分析儀腫瘤標志物專題知識講座第43頁結果分析時應考慮原因（一）影響原因（生物原因）（二）干擾原因（外界原因）（三）試劑盒質控腫瘤標志物專題知識講座第44頁質量控制（試劑盒）

SP—Specificity

SE—Sensitive

ER—EfficiencyRate

腫瘤標志物專題知識講座第45頁2、TM應用范圍

理想TM既能用于腫瘤治療前后病情監(jiān)測及術后有沒有復發(fā)、轉移預測也能用于普通人群篩查。腫瘤標志物專題知識講座第46頁（1）敏感性

（真陽性率或陽性率）

真陽性數敏感性=×100%

（SE）真陽性數+假陰性數真陽性率（腫瘤病人組）腫瘤標志物專題知識講座第47頁（2）特異性

（真陰性率或陰性率）

特異性=真陰性數×100%(SP)真陰性數+假陽性數

真陰性率（健康對照組）腫瘤標志物專題知識講座第48頁（3）準確率有效率（efficiencyrate）

真陽性數+真陰性數準確率=×100%

總測定數腫瘤標志物專題知識講座第49頁2、應用范圍：理想TM既能用于腫瘤治療前后病情監(jiān)測及術后有沒有復發(fā)、轉移預測，也能用于普通人群篩查。除極少數（AFP、PSA）外，均不適于人群普查。腫瘤標志物專題知識講座第50頁TM最主要臨床應用分析病程指導治療及判斷預后監(jiān)測復發(fā)或轉移腫瘤標志物專題知識講座第51頁3、血清TM最正確組合：對于某一特定腫瘤檢測，可同時選擇幾個特異性和敏感性均較滿意標志，即檢驗腫瘤細胞表面不一樣抗原決定族，只要有一個是陽性即可判斷為陽性，以此來相互補充，提升診療陽性率。腫瘤標志物專題知識講座第52頁3、血清TM常見組合

結直腸癌CEA+CA19-9+CA724+CA242乳腺癌CEA+CA153+CA12-5胃癌CEA+CA72-4+CA199+CA242胰腺癌CA19-9+CEA+CA242肺癌CEA+CA19-9/NSECYFRA21-1前列腺癌F-PSA/PSA+CEA肝癌AFP+CEA+AFU+CA242卵巢癌CA12-5+AFP/-HCG+CEA

腫瘤標志物專題知識講座第53頁4、綜合分析

因為TM檢驗其特異性和敏感性均受限，所以，必須與病人情況、體癥檢驗、X線、內窺鏡及超聲波等各種診療伎倆結果綜合分析、判斷，單一檢測不能作為診療腫瘤疾病唯一依據。腫瘤標志物專題知識講座第54頁三、組織腫瘤標志

腫瘤診療除了臨床病史、體征、物理檢驗、免疫血清學檢驗、分子生物學檢驗診療標準外，還迫切需要指導治療標準，這應從對治療反應得到。而此反應很大程度上取決于腫瘤生物學特征。檢測細胞及組織內TM對于認識腫瘤類型及形成治療生物靶位均含有幫助。腫瘤標志物專題知識講座第55頁（一）分類

1、分化標志：乳腺激素受體：ER、PR2、增殖標志：Ki67、MIBI、PCNA、CMYC3、轉移潛在性標志：蛋白酶、基因產物、黏附因子及相關基因integrinsCD44及VEGF）等

4、癌基因及抗癌基因

癌基因（myc、H-ras、erbB）及抗癌基因（p53、Rb、DCC）等

腫瘤標志物專題知識講座第56頁（二）ER、PR

雌二醇受體（ER）、孕酮受體（PR）屬類固醇激素類受體。主要存在于特定靶組織細胞內。1967年Jensen等在乳癌漿細胞內發(fā)覺有與性類固醇相結合特異性蛋白,稱為ER.1973年TerenlusD等用3H標識孕酮,發(fā)覺他能結合到雌激素受體陽性乳癌細胞,稱為PR.ER、PR分布于乳腺、肝、口腔、鼻粘膜及皮膚等組織。也在乳癌、子宮癌、胃癌、前列腺癌等腫瘤組織中表示。腫瘤標志物專題知識講座第57頁臨床意義ER、PR檢出率與腫瘤分化程度相關，受體水平高，復發(fā)少。淋巴結轉移病人原發(fā)病PR陽性復發(fā)率為0%，而ER陰性復發(fā)率為33。3%，與乳腺癌預后關系：。ERPR陽性患者，與陰性患者相比，緩解期長，受體水平越高，復發(fā)越少。腫瘤標志物專題知識講座第58頁端粒酶（Telomerase）

是一個端粒重建酶，除少數更新活躍組織外，正常組織不表示或少數組織低水平表示端粒酶活性。端粒酶是一個大核糖核酸蛋白體，含短RNA成份（200bp），少數蛋白質，包含逆轉錄酶個別和端粒酶特征蛋白。腫瘤標志物專題知識講座第59頁

因為缺乏端粒酶活性，體細胞染色體端粒會隨細胞分裂而逐步縮短，直至染色體完全性受損，細胞分裂停頓，衰老死亡。一些尚不明了原因可使極少數體細胞經過激活端粒酶而無限分裂，其生存延長可給其它基因損傷提供機會，從而使細胞進行性向腫瘤發(fā)展。

腫瘤標志物專題知識講座第60頁

因為腫瘤疾病發(fā)生是一個多原因多步驟病理過程，除癌癥多基因突變說外，在癌癥發(fā)生過程中，端粒酶激活是一個先決條件。腫瘤標志物專題知識講座第61頁臨床意義

（1）正常人血標本端粒酶活性有低水平表示在人正常少數組織有絲分裂活躍細胞，如增生基底膜高水平表示。（2）以端粒酶活性作腫瘤診療標志意義在于：可區(qū)分疾病不一樣階段：大腸、膀胱、甲狀腺癌?？蓞^(qū)分前列腺良性增生與癌。（3）端粒酶作為腫瘤治療目標：

大多數腫瘤生成中都有端粒酶再活化

抑制端粒酶恢復端?？s短活化細胞老化路徑因端粒酶是腫瘤生長必須，抑制腫瘤治療理想目標。腫瘤標志物專題知識講座第62頁

P53基因

當前認為腫瘤是一個基因疾病，與癌基因激活和抑癌基因失活相關。癌基因激活與基因突變（DNA重排、點突變、基因擴增）或基因活性及調控相關。自1976年Bishop等首次提出癌基因概念以來，已經有近百種癌基因被認識?；蛟\療已成為腫瘤診療研究中一個新熱點。腫瘤標志物專題知識講座第63頁

1981年被Crawford等發(fā)覺，以后Hinds，Finlay等經過研究發(fā)覺轉染了myc或ras癌基因細胞中若存在野生型P53基因，則出現生長抑制。所以提出P53基因，屬于抑癌基因。P53基因定位于第17號染色體17P13區(qū)，由11個外顯子和10個內含子組成。編碼393個氨基酸殘基蛋白質即P53蛋白。腫瘤標志物專題知識講座第64頁

P53功效為轉錄因子，生物學功效為G1期DNA損壞檢驗點。人類腫瘤中P53基因突變主要在高度保守區(qū)內，以175，248，249，273，282位點突變率最高，不一樣種類腫瘤其突變類型不一樣。另外P53改變形式還有缺失、基因重排、與腫瘤病毒癌蛋白結合而失活。腫瘤標志物專題知識講座第65頁腫瘤標志物專題知識講座第66頁檢測方法

(1)PCR-SSCR、DEEG、PCR-ASO及測序技術,檢測點突變。

(2)RT-PCR、PCR(3)PCR-RFLP(限制片段長度多態(tài)性