生化生命科學(xué)復(fù)習(xí)分子遺傳_第1頁(yè)
生化生命科學(xué)復(fù)習(xí)分子遺傳_第2頁(yè)
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生化生命科學(xué)復(fù)習(xí)分子遺傳_第4頁(yè)
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基礎(chǔ)知識(shí) 除了少數(shù)RNA外,DNA幾乎是所有生物遺傳信息的攜帶者 DNA分子攜帶了蛋白質(zhì)氨基酸組成的信息和選擇表達(dá)的信息 與生物學(xué)和表達(dá)有關(guān)的大部分信息存在于長(zhǎng)程力所引起的低頻振動(dòng),DNA的各部分序列間進(jìn)行長(zhǎng)距離▓☉RNA23’環(huán)式核苷酸中間產(chǎn)物,由于五元環(huán)穩(wěn)定性差,很快2’核苷酸、3’核苷酸的混合物。▓☉▓☉▓☉Marmur-Dofy關(guān)系式:G+C%30%-70%0.15MNaCl+0.015M檸檬酸鈉溶液中,Tm值為:Tm=69.3+0.41(G+C)%▓☉尿素、甲酰胺由于減少了氫鍵形成的機(jī)會(huì),Tm▓☉氫鍵有高度的方向性,供體原子、氫原子、受體原子處于同一條直線(xiàn)上時(shí),氫▓☉多聚寡核苷酸傾向于有一個(gè)三維結(jié)構(gòu)以使高度溶解的磷酸基團(tuán)與水保持最大▓☉▓☉雙鏈DNADNA中堿基的堆積程度高,是由兩條鏈配對(duì)堿基▓☉▓☉呼吸作用:▓☉在雙鏈DNA3——7個(gè)堿基對(duì)不同程度的處于單鏈狀態(tài)。這種現(xiàn)▓☉大多數(shù)原核生物都是共價(jià)封閉環(huán),CCC分子。它再螺旋化為超螺旋分子。超▓☉超螺旋密度(鏈環(huán)數(shù)比差δ=τ/α°(α-α°)/α°。每圈初級(jí)螺旋的▓☉在真核細(xì)胞中,DNA的負(fù)超螺旋是由染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)DNA在組蛋白八聚體外面纏繞的方向有利于DNA纏方向轉(zhuǎn)變。原核生物細(xì)胞中,是有TOPTOPⅡ在耗ATP過(guò)程中嵌入相鄰堿基間的試劑也改變DNA的拓?fù)錉顟B(tài)▓☉DNA3’52▓☉在PH11.5時(shí),DNARNA;鏈在幾分鐘內(nèi)2’單核苷酸、3’--單核苷酸。RNA2’3’—環(huán)式單核苷酸中間2’-單核苷酸、3’--單核苷酸混合物。▓☉酶法中,從凝膠的放射子顯影X-膠片上讀出的序列是互補(bǔ)鏈的序列。這▓☉DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)狀態(tài)的因素中,互補(bǔ)的堿基結(jié)合力、堿基堆積力DAN維持雙螺旋結(jié)構(gòu)磷酸基的靜電斥堿基分子內(nèi)能不利于DAN維持雙螺旋結(jié)構(gòu)▓☉濃度都為50μg/mlDNA的A2601.00DNA的A260為1.37;單核苷的等比例混合物的A260為1.60由于DNA變性引起的光吸收增加稱(chēng)PH>1.3使鹽濃度低于0.01Mol/L▓☉A復(fù)性是一種雙分子的二級(jí)反應(yīng)單鏈的速度為-dC/dt=KC2K為DNA▓☉92%相對(duì)濕度。A構(gòu)象的條件為:Na+、K+/Cs+75%Li+66%RNA-RNA雙鏈均采用A構(gòu)象。▓☉溝的深淺取決于螺旋軸的位置,而溝的寬窄主要決定于兩個(gè)糖苷鍵與堿基對(duì)▓☉在B、A等右手雙螺旋構(gòu)型中,糖苷鍵均為反式構(gòu)象。而Z-DNA中嘧啶▓☉翻板假說(shuō):B向Z的轉(zhuǎn)變中,鳥(niǎo)嘌呤繞糖苷鍵,由反式變?yōu)轫樖?,而胞嘧啶連▓☉A-DNAB-DNAZ-DNA▓☉螺旋槳扭轉(zhuǎn)是一個(gè)堿基對(duì)中的兩個(gè)堿基并不處于同一平面中,是兩個(gè)堿基的向扭轉(zhuǎn)。螺旋槳扭轉(zhuǎn)總定義為正值。A-DNA15°、B-DNA12°。▓☉通過(guò)堿基對(duì)的長(zhǎng)軸取兩個(gè)堿基平面作為堿基對(duì)平面。兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)平面▓☉DNA復(fù)性的機(jī)制包括成核作用和拉拉鏈作用▓☉DNA結(jié)構(gòu)中,溝的特征在遺傳信息的表達(dá)過(guò)程中起關(guān)鍵作用。調(diào)控蛋白質(zhì)都DNA的遺傳信息的。▓☉調(diào)控蛋白質(zhì)A-DNAB-DNAB-DNA的識(shí)別與對(duì)Z-DNA的識(shí)別方式差異要大,盡管A-DNA、B-DNA同屬于右手螺旋,而Z-DNA屬于左手螺旋。▓☉在任何時(shí)候,負(fù)超螺旋DNA中的單鏈部分的要大于其它的雙DNA。▓☉DNADNADNA的鏈環(huán)數(shù)后再連接之,兼具DNA內(nèi)切酶和DNA連接酶的功能,不能連接預(yù)先存在的斷DNA,既其斷裂反應(yīng)和連接反應(yīng)是偶聯(lián)的。▓☉除DNA積作用的試劑,特別是片狀的分子,也能改變DNA的拓?fù)錉顟B(tài)。▓☉DNA精密纏繞的分子,即坍縮DNA,它具有異常高的沉降系數(shù),達(dá)到3 一物種的單倍體的的數(shù)目為該物種的組,一個(gè)單倍體組DNA含量是固定的,它通常稱(chēng)為該物種的C值 2-4DNA分子構(gòu)成類(lèi) DNA序列相互作用而決定的,DNA雙螺旋本身固有的特性決定的。 組蛋白八聚體對(duì)于DNA的特異性識(shí)別必須是與整個(gè)DNA相互作用的結(jié)DNA序列必然要比兩側(cè)其它序列更重要。 端粒、著絲點(diǎn)(centromere)和DNA原點(diǎn)是構(gòu)成不可缺少的三要 內(nèi)元參與編碼的蛋白質(zhì)的功能又與內(nèi)元序列的刪除或擴(kuò)散密切相關(guān) 也是沒(méi)有 gene )并不集中排列 簇,而是散布 組中不同部位上。如果蠅的肌動(dòng)蛋族、微管蛋 族 ▓☉▓☉含有rRNA串聯(lián)重復(fù)單位的部分稱(chēng)核仁組織(nucleolarorganizers有多少個(gè)rRNA串聯(lián)重復(fù)區(qū)就有多少個(gè)核仁組織者。有些rRNA以獨(dú)立的外分子(extrachromosomalmolecules)形式存在,它們?nèi)源嬖谂c核內(nèi)。▓☉在某一上的排列叫遺傳圖。確定某一在上的位置叫基因的定位。其方法有:遺傳交換定位法、接合定位法、步行法和染色替跳躍法。▓☉突變?cè)谏镞M(jìn)化過(guò)程中發(fā)生和積累的速度大體上是恒定的,稱(chēng)為進(jìn)化鐘▓☉非等位的相同在遺傳過(guò)程中是作為一個(gè)單位而傳遞的,稱(chēng)為一致進(jìn)化、▓☉交換固定和轉(zhuǎn)換與擴(kuò)增共同維持了串聯(lián)重復(fù)▓☉DNA在顆粒表面的左手是真核生物DNA負(fù)超螺旋的主要來(lái)源,每個(gè)真核都有一個(gè)特殊的富A/T的著絲點(diǎn)序列,它缺乏核小體結(jié)構(gòu),而與蛋白質(zhì)結(jié)▓☉擴(kuò)增和非均等交換促進(jìn)了多拷貝的形成,在通過(guò)突變積累、重排和自然選擇等因素形成多成員的或新的。交換固定和因中某些非等位的均一性 是 ;共價(jià)延伸,即先導(dǎo)鏈共價(jià)結(jié)合到一條親本鏈上,主要是滾 ▓☉ 滾 長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生一種具有原分子若干倍的中間產(chǎn)物連環(huán)體分子。(concatemer,由拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ拆分 滾環(huán)在噬菌體DNA的、細(xì)菌交配、真核的擴(kuò)增中有重要作用 DNA、RNA的合成均不需要dUTP DNAIDNARNA引物的替換。DNA聚 大腸桿菌中rep2ATP DNA5% 片段的證實(shí)實(shí)驗(yàn)有:脈沖標(biāo)記實(shí)驗(yàn)、脈沖追蹤實(shí)驗(yàn) 去除U-U-APDNADNA▓☉依賴(lài)于oriC的體外起始系統(tǒng)必須有DnaA存在,而且對(duì)敏感,還DnaB、DnaC、DNA酶、DNA旋轉(zhuǎn)酶、DNAHU蛋白、拓?fù)洚悩?gòu)酶▓☉λ原點(diǎn)包含三個(gè)部分:ori40bpA/T序列;28bp的回文序列(其間4bp為不對(duì)稱(chēng)部分。由PROR發(fā)動(dòng)的轉(zhuǎn)錄是λDNA不可缺少的步▓☉結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄和翻譯都強(qiáng)烈地依賴(lài)于轉(zhuǎn)錄酶系和一整套蛋白質(zhì)合成機(jī)構(gòu),▓☉DNA▓☉DNA3-7bp常處于單鏈狀態(tài),叫綻裂,它使得一些有單鏈特▓☉DNA,而不DNA和RNA▓☉大腸桿菌中,乳糖代謝的酶有:β-半乳糖苷酶、半乳糖苷透性酶、半乳糖苷DNA序列突然橫向擴(kuò)增產(chǎn)生多個(gè)串聯(lián)▓☉ 著絲點(diǎn)序列是DNA上的一段特殊序列,能夠促進(jìn)與紡錘體的相互作130bpAT,兩端則為高度保守的序列。 5SrRNA拷貝數(shù)多,無(wú)擴(kuò)增現(xiàn)象 tRNA DNA▓☉的進(jìn)化機(jī)制:通過(guò)擴(kuò)增和非均等交換形成的多拷貝,再通過(guò)突變積累,重排和自然選擇等因素,形成多成員的或新的。▓☉缺少dUTPase的突變菌株中(dut—)中,有DNA,片段要小一些。尿嘧啶-N-糖基酶的突變株(ung—)DNA含片段,片段要大一些。 DNADNA鏈,而必須有一段引物。引物一般為一段RNA,其長(zhǎng)度和序列隨著組的種類(lèi)各異。 T7DNA的分為三個(gè)階段: 處理。這一過(guò)程所需要的酶有:T7RNA聚合酶、T7DNA聚合酶、4蛋白。 4蛋白的功能有:依賴(lài)單鏈DNA的核苷-5’-三磷酸酯酶活性,螺旋酶 DNA DNA酶為50%乙二醇洗脫 SV40(雙鏈環(huán)形DNA)是研究真核DNA的主要模型,其DNA在寄主 維持SV40DNA 所需的82bp序列中包括了:決定T抗原結(jié)合位點(diǎn)Ⅰ、Ⅱ,連續(xù)的16bpA/T序列,左向 的先導(dǎo)鏈,后隨鏈最遲的RNA-DNA轉(zhuǎn)變位點(diǎn)。 胸腺嘧啶脫氨氧化生成尿嘧啶,腺嘌呤脫氨氧化生成次黃嘌呤 胸腺嘧啶二聚體的修復(fù)機(jī)制有:活、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù)、 DNA聚合酶I、DNA連接酶。 短補(bǔ)丁修復(fù)是組成型修復(fù),長(zhǎng)補(bǔ)丁修復(fù)是DNA損傷誘導(dǎo)出來(lái)的功能 重組修復(fù)所涉及的大多數(shù)是細(xì)胞內(nèi)正常遺傳重組所需要的 CDNA,這時(shí)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生一系列的變化,包括DNA的修復(fù)能力迅速增強(qiáng)、誘變率提高、細(xì) 停止及λ噬菌體誘導(dǎo)釋放,這些反應(yīng)統(tǒng)稱(chēng)為SOS反應(yīng) Ala-Gly肽鍵,將底物一分為二。 受LexA控制的17個(gè),如recA、lexA、uvrA、uvrB、umvC、himA等din,又稱(chēng) 。其操作子上有20bp的LexA結(jié)合位點(diǎn),稱(chēng)SOS框 受其產(chǎn)物L(fēng)exA 的模板鏈,SOS修復(fù)是產(chǎn)生連續(xù)的子鏈,SOS修復(fù)是唯一導(dǎo)致突變的修復(fù)。 DNADNA。▓☉型名稱(chēng)均用3個(gè)小寫(xiě)斜體字母或小寫(xiě)字母加下橫線(xiàn)表示,具體在后3個(gè)正體字母表示,第一個(gè)字母大寫(xiě)。Ts表示溫度(UAGOc(UAAOpal(UGA▓☉▓☉啟動(dòng)子突變體和組成型突變體是研究調(diào)控的▓☉▓☉自發(fā)的回復(fù)突變頻率是正突變的1/10、▓☉第二點(diǎn)回復(fù)突變稱(chēng)為抑制突變分為內(nèi)抑制突變間抑制突(直接、▓☉▓☉移框突變的回復(fù)突變幾乎完全是第二點(diǎn)突變,即內(nèi)抑制突變▓☉突變劑可以提高內(nèi)抑制突變的頻率▓☉正向突變的無(wú)義突變、錯(cuò)義突變、移框突變都可以為另一上的突變所抑或與tRNA功能有關(guān)的上,又稱(chēng)抑制。▓☉tRNAtRNA▓☉UAA的抑制突變有選擇負(fù)勢(shì)和致死傾向 凡能使某一突變產(chǎn)物在一定程度上完成其應(yīng)有使命的其它突變都是 間接抑制突變和它所抑制的突變間在結(jié)構(gòu)或功能上密切相關(guān) BuTDNAA?T→G?CDNA2輪才能產(chǎn)生穩(wěn)定的遺傳突變。2-AP只產(chǎn)生A?T→G?C的轉(zhuǎn)換。 HNO2 DNA SOS 紫外線(xiàn)、電離輻射、絲裂霉素C、黃曲霉素均可引起SOS 5’- 轉(zhuǎn)錄的起始核苷酸一般是嘌呤核苷三磷酸,即pppA或pppG 用三氯醋酸沉淀法追蹤RNA的合成 利福霉素類(lèi)藥抑制RNA合成的起始,利鏈霉溶菌素抑制RNA鏈的延伸。肝 不同的種類(lèi)有不同的輔助因子 包括結(jié)構(gòu)和控制區(qū)及調(diào)節(jié)的整個(gè)核苷酸序列叫元 元中,從mRNA開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的位點(diǎn)以上,都是啟動(dòng)子序列。整個(gè)啟動(dòng)子分為CAP-cAMP結(jié)合位點(diǎn)和RNA聚合酶進(jìn)入位點(diǎn)兩個(gè)部分。▓☉Pribnowbox位于-4——-13范圍,序列為T(mén)ATAATRNA聚合酶的牢固結(jié)合位點(diǎn)。tamabox位于-35TTGACARNA聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)。Pribnowbox的堿基序列通過(guò)影響開(kāi)放性啟動(dòng)子復(fù)合物的形成速度而控制轉(zhuǎn)錄。 各特異序列趨向于一致序列的突變及Pribnowbox、tama box間的距離趨向17bp的突變君表現(xiàn)為上升突變。 RNA聚合酶Ⅲ可轉(zhuǎn)錄5SrRNA、tRNA、部分snRNA、腺病毒VA。。▓☉只有腺嘌呤核苷三磷酸充填了起始位點(diǎn),另一個(gè)核苷三磷酸充填了延長(zhǎng)位點(diǎn)并與模板互補(bǔ),才能合成第一個(gè)磷酸二酯鍵,這一步為利福霉素SV抑制則抑制。▓☉RNATATATFⅡD▓☉▓☉ρ因子的活性有促進(jìn)轉(zhuǎn)錄終止的活性,NTPase▓☉λ噬菌體共有四個(gè)元:λ阻遏蛋白元左向早期元右向早期操縱元、右向晚期元。▓☉加polyA的酶為RNA末端嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)移酶,所需的RNA 分布在富余G-C序列中的寡聚T(4bp以上)是真核生物RNA聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄 胞質(zhì)內(nèi),mRNA的polyA尾巴與蛋白質(zhì)結(jié)合形成mRNP RNARNA,2bp▓☉tRNA的加工酶有:tRNARNA酶PRNA酶D、RNARNA酶P4 tRNA的位于tRNA反loop上▓☉第I5’-U↓……G↓-3P-Q-R-S▓☉內(nèi)元中能與兩個(gè)拼接點(diǎn)邊界序列配對(duì)的一般序列為內(nèi)部引導(dǎo)序列(IGS RNAPRNA為M1RNAC5▓☉36——12bp序列保守,為PyPuPyPyTa*Py▓☉核mRNA的拼接點(diǎn)序列為5’-↓GU……AG↓-3,內(nèi)元3’端保守序列PyXPyT*Py。▓☉snRNA中僅UsnRNA5’端序列能與mRNA▓☉Y型結(jié)構(gòu)▓☉I類(lèi)內(nèi)元的磷酸酯轉(zhuǎn)移反應(yīng)由鳥(niǎo)苷或鳥(niǎo)苷酸的親核進(jìn)攻引起,第Ⅱ類(lèi)內(nèi)元的磷酸酯轉(zhuǎn)移反應(yīng)由A*-2-OH發(fā)動(dòng),核mRNA內(nèi)元的磷酸酯轉(zhuǎn)移反應(yīng)由A-2OH發(fā)▓☉tRNA均具有三葉草的二級(jí)結(jié)構(gòu)和倒L攜帶(DHUG?U配對(duì), 3/4tRNA3-5bptRNA13-31bp的附加臂,稱(chēng)第二類(lèi)tRNA。 無(wú)義子并非總是無(wú)義的,是稀有氨基酸如磷酸絲氨酸、硒半胱氨酸摻入 配對(duì)的搖擺性完全是由tRNA反子臂loop的空間結(jié)構(gòu)所決定的 一組同功tRNA由同一氨酰tRNA 許多抑制都是由含量低的少數(shù)tRNA突變而成▓☉氨酰tRNA合成酶與L形tRNADHU、▓☉tRNA分子上決定攜帶氨基酸的區(qū)域稱(chēng)為副子(paracodon。副子比▓☉氨酰tRNAtRNA反應(yīng),參與校對(duì)的方式包括動(dòng)力學(xué)校對(duì)、構(gòu)象校▓☉真核生物的偏愛(ài)子差異比原核裁軍生物要小一些。子使用的頻率與胞內(nèi)tRNA含量(tRNA豐度)呈正相關(guān)。相應(yīng)于主要同功tRNA的子的使用頻率幾▓☉需要量少的蛋白中具有較多的與含有少量tRNA相應(yīng)的子,用以控▓☉在同一種tRNA所識(shí)別的幾種同義子中,其使用頻率也有明顯的差異,這可能由子與反子的作用強(qiáng)度決定。▓☉線(xiàn)粒體終止子有AGA、AGG、UAA、UAG。內(nèi)部Met子有AUG、AUUMetAUN(四個(gè)。▓☉根據(jù)搖擺配對(duì)學(xué)說(shuō),使用通用子的有機(jī)體至少需要32種tRNA分子▓☉線(xiàn)粒體tRNAtRNA▓☉早期進(jìn)化過(guò)程中,采用RNY的自身互補(bǔ)形式。R為嘌呤核苷酸,Y為嘧啶核苷酸,N為任意核苷酸。▓☉真核細(xì)胞中核糖體數(shù)目,其蛋白、RNA占總蛋白、總RNA的比例較原▓☉55個(gè)蛋白,34個(gè)在大亞基中,2116SrRNA10個(gè)甲基化位點(diǎn),23SrRNA2082個(gè)蛋白,49個(gè)在大亞基中,33個(gè)在小亞基中。18SrRNA43個(gè)甲基化位點(diǎn),28SrRNA74個(gè)甲基化位點(diǎn)。這些甲基化與核糖體RNA轉(zhuǎn)錄處理過(guò)程中的酶的識(shí)別有關(guān)。▓☉原核生物核糖體小亞基RNA26S、23S前體;大亞基RNA43S、32S前▓☉春日與16SrRNA3’末端的保守序列G-m26A-m26A結(jié)合 30S亞基的作用位點(diǎn)有:mRNA結(jié)合位點(diǎn)、P mRNA在兩個(gè)子之間發(fā)生扭轉(zhuǎn),使兩個(gè)tRNA從不同的方向與mRNA結(jié)合。mRNA對(duì)于核糖體的移動(dòng)的本質(zhì)是tRNA的移動(dòng)。 AUG識(shí)別的是tRNAfMetAUG識(shí)別的是tRNAmMet▓☉SD序列不完全相同,從而控制單位時(shí)間內(nèi)起始復(fù)合物形成的數(shù)目,最終控制▓☉GTP同系物:GMP-PCP,其中,C代表連接αγ▓☉黃霉素抑制EF-Tu的功能。甾酸霉素能使核糖體停在轉(zhuǎn)位后的狀態(tài),是因?yàn)樗€(wěn)定了EF-G、GDP與核糖體的復(fù)合物,使下一個(gè)氨基酸不能加到肽鏈中來(lái)。硫鏈絲 Ts循環(huán):EF-Ts的作用就在于使使用EF-Tu?GDP能夠轉(zhuǎn)變?yōu)槿缓驟F-Ts又被GTP置換出來(lái)生成EF-Tu?GTP,而EF-Ts又可以進(jìn)行下一次循環(huán)。▓☉沒(méi)有一個(gè)tRNA能與終止子作用,而是由特殊的蛋白質(zhì)因子促成終止作 不管原核生物還是真核生物,釋放因子都是作用于A位點(diǎn),并且需要P被肽基-tRNA所占據(jù)。同樣需要肽基的轉(zhuǎn)移及把空載的RNA▓☉如果兩個(gè)AUG屬于同一個(gè)閱讀框,則形成兩個(gè)長(zhǎng)短不同的蛋白質(zhì)。如果兩個(gè)合成兩種蛋白質(zhì),因此稱(chēng)雙功能mRNA(bifunctionalmRNA)▓☉絕大多數(shù)真核生物表達(dá)過(guò)程中,總是識(shí)別第一個(gè)AUG,是由于真核生物tRNAiMet反子3’端的一個(gè)相鄰堿基A的烷基化阻礙了它與AUG配對(duì)的搖擺性。▓☉從昆蟲(chóng)到人類(lèi),泛素的氨基酸序列全部相同,這類(lèi)大多是首尾相連的形▓☉信號(hào)識(shí)別顆粒是小的RNARNA7SLRNA6種▓☉可變表面糖蛋白(VSG)通過(guò)一種非蛋白質(zhì)錨錨定于膜的表面,它是糖基-磷 N末端的α-氨基、賴(lài)氨酸的ε-氨基;甲基化主要發(fā)生在αεC-末αεSer-COOHThr、Tyr-COOH;泛素化主要發(fā)生在α-氨基、εN-α-氨基;多聚ADP糖基化主要發(fā)生在Arg-胍基;糖基化可通過(guò)N-糖苷鍵連接于Asn的酰胺鍵,也可通過(guò)O-糖苷鍵連接于Ser、Thr-OH的及Hyl、Hyp-OH,也可以通過(guò)S-糖苷鍵▓☉▓☉正控制系統(tǒng)和負(fù)控制系統(tǒng)是按照沒(méi)有調(diào)節(jié)蛋白存在的情況下元對(duì)新加入▓☉負(fù)控制提供了一個(gè)萬(wàn)一保安機(jī)制,即萬(wàn)一調(diào)節(jié)蛋白失活,酶系統(tǒng)可以照樣合▓☉細(xì)胞在獲得任何調(diào)控機(jī)制之前,就應(yīng)該具有使這些表達(dá)的能力▓☉▓☉異丙基-β-D-(IPTG)被稱(chēng)為安慰誘導(dǎo)物(gratuitousinducer▓☉乳糖進(jìn)入細(xì)胞后,由β-半乳糖苷酶催化變?yōu)檎T導(dǎo)物別乳糖(allolactose▓☉阻遏蛋白結(jié)合位點(diǎn)的DNA序列的對(duì)稱(chēng)性與阻遏蛋白四聚體的對(duì)稱(chēng)性是相應(yīng)的,以+116bp的對(duì)稱(chēng)序列。▓☉阻遏蛋白與LacO的結(jié)合而提高了少數(shù)嘌呤堿基對(duì)甲基化的敏感程度。由于DNA-阻遏蛋白的復(fù)合物中形成了一個(gè)憎水的口袋,從而加強(qiáng)了甲基化作用。 用胰蛋白酶在阻遏蛋白59-60位切斷得抗胰蛋白酶和長(zhǎng)頭片段,N-端 20-30Lac酶系 is、it cAMP-CAP不僅調(diào)控乳糖、半乳糖、糖等糖類(lèi)代謝有關(guān)的酶,而且三▓☉▓☉由一個(gè)調(diào)節(jié)控制的幾個(gè)元稱(chēng)調(diào)控元(regulon▓☉AraC蛋白有兩種形式。沒(méi)有糖存在時(shí),表現(xiàn)為對(duì)AraBAD和AraC有阻遏作用,這種形式稱(chēng)為Crep。有糖存在時(shí),表現(xiàn)為對(duì)AraBAD和AraC的誘導(dǎo)作用,這種形式稱(chēng)為Cind。▓☉cAMP-CAP時(shí),AraC也能以很低的本底水平表達(dá)很快會(huì)被Crep所阻遏,這種作用叫自身調(diào)控。▓☉的表達(dá)按一定時(shí)間順序而展現(xiàn)的,這種調(diào)控機(jī)制稱(chēng)時(shí)序調(diào)控,的時(shí)序調(diào)控大多是通過(guò)一種或幾種蛋白因子與RNA聚合酶的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。▓☉在熱反應(yīng)中大量表達(dá)的稱(chēng)熱高鹽環(huán)境重金屬離子極度干燥等均能引起熱反應(yīng)廣義上講它們均為應(yīng)急反(stressresponse由δ32參與構(gòu)成的RNA聚合酶全酶識(shí)別熱啟動(dòng)子。。 反應(yīng)不需要δ70,但它在▓☉ADPRT(ADP核糖基轉(zhuǎn)移酶)ADPRNA聚合酶α亞基的精氨酸胍基上,經(jīng)修飾的α亞基使酶對(duì)寄主α亞基親和力降低,而與T4所編碼的蛋白Mot親和力提高。▓☉寄主拮抗溶源化的功能即hfl的表達(dá)受到cAMP的負(fù)調(diào)控 從Pm起始轉(zhuǎn)錄的CImRNA沒(méi)任何前導(dǎo)序列,缺少核糖體結(jié)合位點(diǎn)(S-D序列 溶原化過(guò)程是λ噬菌體的attatt位點(diǎn)進(jìn)行位點(diǎn)特異性重組 λ噬菌體的烈性突變是由操作子的突變引起的,只進(jìn)行裂解生長(zhǎng) 14個(gè)氨基酸的 在某些元中,衰減子可以對(duì)不止一種氨基酸饑餓作出反應(yīng) 當(dāng)前導(dǎo)肽翻譯作用不存在時(shí),mRNA 負(fù)責(zé)合成嘧啶核苷酸的也有衰減子結(jié)構(gòu) 在色氨酸元的衰減子結(jié)構(gòu)中,先導(dǎo)肽的終止子位于終止子上游方向約45bp處,而在天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶元(pyrBI)中,先導(dǎo)肽的終止子位于終止子下游方向約25bp處;色氨酸元中,是由于缺少色氨酸而使核糖體在連續(xù)的兩個(gè)色氨酸子處停頓而影響了終止子結(jié)構(gòu)的形成其調(diào)控位點(diǎn)是兩個(gè)連續(xù)的色氨酸子,而在pyrBI元中,是由于缺少UTP使聚合酶在暫停位點(diǎn)發(fā)生停頓,使翻譯核糖體裁追趕上RNA聚合酶。▓☉反義RNA通過(guò)互補(bǔ)的堿基與特定的mRNAmRNA上的S-D序列、起始子AUG和部分N端的子,從而抑制mRNA的翻譯,這類(lèi)RNA稱(chēng)為干擾mRNA的互補(bǔ)RNA(micRNA,可用于研究的功能。 終止子結(jié)構(gòu)的意義不僅僅在于轉(zhuǎn)錄的終止,還決定mRNA的 由于sib位點(diǎn)位于整合酶的下游,而且整合酶mRNA的降解是從3’向5sib(rtrorgulation 細(xì)菌中參與mRNA的降解的內(nèi)切酶主要是RNase mRNARNasemRNA3 mRNAmRNA也有其結(jié)合 RF2mRNA RF2的氨基酸子不處于同一閱讀框中 EF-Tu10倍,RNA聚合酶的每種亞基數(shù)目要比核糖 有獨(dú)立S-D序列的,表達(dá)不受調(diào)節(jié)蛋白的控制▓☉細(xì)菌對(duì)不良營(yíng)養(yǎng)條件產(chǎn)生的一系列反應(yīng)叫嚴(yán)謹(jǐn)反應(yīng)(stringentresponse調(diào)控了蛋白合成、轉(zhuǎn)錄、DNA等。反映觸發(fā)器是位于核糖體A位上的無(wú)負(fù)載▓☉無(wú)負(fù)載tRNAA位后,無(wú)法形成新的肽鍵,GTP卻在不斷的消耗,形成空轉(zhuǎn)反應(yīng)(idlingreaction▓☉生成魔斑的反應(yīng)需relA產(chǎn)物核糖體蛋白質(zhì)L11及tRNA的TψC區(qū)▓☉碳源不足時(shí),細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生cAMPppGpp、pppGpp。真核叉停頓時(shí),產(chǎn)生ApppA,刺激真核DNA聚合酶α的活性以促進(jìn)DNA的合成。▓☉真核表達(dá)的研究有重組DNA技術(shù)、組織培養(yǎng)技術(shù)、定向誘變技術(shù)▓☉RNADNA▓☉Cot1/2為C/CO=1/2Cot的值,Cot1/2=1/K,K為復(fù)性二級(jí)反應(yīng)常數(shù)。Rot1/2為某一cDNA組分半數(shù)分子與mRNA形成雙鏈雜合體所需的Rot值。RotRNA濃度與反應(yīng)時(shí)間的乘積。CotDNA濃度與反應(yīng)時(shí)間的乘積。▓☉RNA飽和雜交試驗(yàn)中,是稀少mRNADNA▓☉測(cè)定組織中mRNA的重復(fù)情況可用加性飽和雜交試驗(yàn)及組織過(guò)量mRNA與非重復(fù)DNA雜交。 凡能mRNADNA叫mDNA▓☉在發(fā)育過(guò)程中,表達(dá)的數(shù)目逐漸減少▓☉持家和奢侈在各種細(xì)胞類(lèi)型中的功能表達(dá)范圍及表達(dá)強(qiáng)度不同,細(xì)▓☉引起同形異位現(xiàn)象的突變稱(chēng)同形異位突變(homeoticmutations▓☉只引起觸角末段部分轉(zhuǎn)變?yōu)槟_的相應(yīng)末端部分,其余部分與觸角相同,這種▓☉果蠅中,有兩個(gè)同形異位簇,一個(gè)叫ANT-C,包括Dfd、Scr、FtzAntp四個(gè),另一個(gè)叫BX-C,包括Ubx、αbd-A、αbd–B三個(gè)互補(bǔ)群,每個(gè)互補(bǔ)群有一個(gè)以上的。同形異位中,含有高度保守的180bp的DNA序列,構(gòu)成同形異位框(homeobox 未擴(kuò)增的rDNADNA2 非穩(wěn)定系中擴(kuò)增的dhfr在 組外以雙小形式存在;穩(wěn)定系中擴(kuò)增的dhfr位置染色時(shí)表現(xiàn)為均一 rgion, rRNA大多是活躍轉(zhuǎn)錄的。在整個(gè)核仁區(qū)內(nèi),大部分DNA以游離狀態(tài)存 SP6RNA聚合酶和RNA 1HMG10-20DnaseI DNA 組蛋白一般在細(xì)胞周期的某一時(shí)刻發(fā)生,在另一時(shí)刻 哺乳動(dòng)物離體細(xì)胞H1磷酸化發(fā)生在有絲期,每一個(gè)H1分子可以接受 泛素以C末的Gly的羥基與H2A上Lys-119遠(yuǎn)端氨基形成異肽鍵。泛素修飾的H2A(UH2A)基本不存在染色質(zhì)內(nèi),而主要位于活躍 用MspI鑒定CCGG的存在HapCCGG是否甲基化 DNA Britten-Dauidson模型中的調(diào)控方式有: UPE的種類(lèi)和數(shù)目。 ▓☉只有當(dāng)某種組織或細(xì)胞具備增強(qiáng)子所需的全部反式作用因子時(shí)(1-4種,該▓☉在天然存在的增強(qiáng)子和啟動(dòng)子中,有些DNA序列及其反式作用因子是共同▓☉SP1GGGCGG,是非對(duì)稱(chēng)的,其作用是雙方向的,SP1無(wú)組織特異性均結(jié)合于GC框的大溝中位于DNA栓螺旋的同一側(cè)啟動(dòng)子的GC框上有無(wú)SP1,10-25倍。▓☉CTF結(jié)合于CCAATDNA▓☉可誘導(dǎo)的順式作用成分有:對(duì)熱、重金屬、生長(zhǎng)因子、固醇類(lèi)▓☉不同物種的同一種可誘導(dǎo)的順式調(diào)控成分有很大的保守性▓☉各個(gè)▓☉IgDNA序列有:B細(xì)胞特異性的增強(qiáng)子、Ig啟動(dòng)子、細(xì)胞專(zhuān)▓☉Kappa的誘導(dǎo)表達(dá)試劑有:脂多糖(LPS、phorbol酯類(lèi)、環(huán)己亞胺NF-κB的修飾是磷酸化▓☉真核rRNA啟動(dòng)子分兩個(gè)部分:-40——+150稱(chēng)近啟動(dòng)子,確定轉(zhuǎn)錄起始的精確位置;-165——-40為遠(yuǎn)啟動(dòng)子,影響轉(zhuǎn)錄的頻率。▓☉RNA聚合酶Ⅲ的啟動(dòng)子可位于-3上游,也可位于+50▓☉真核生物不同RNA聚合酶使用共同的轉(zhuǎn)錄因子。U系列RNA的轉(zhuǎn)錄由▓☉增強(qiáng)子能增強(qiáng)所有三種RNA▓☉啤酒酵母中,不同氨基酸合成途徑處于通用機(jī)制的控制之下,這一交叉調(diào)控▓☉不同組織的調(diào)控自己的mRNA水平主要的是對(duì)hnRNA▓☉RNPRNA▓☉mRNA的選擇性拼接有七種類(lèi)型:匣子型、互斥型、內(nèi)部拼接點(diǎn)

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