甾體激素類藥物的分析藥物分析詳解演示文稿

甾體激素類藥物的分析藥物分析詳解演示文稿目前一頁\總數六十六頁\編于二十二點（優(yōu)選）甾體激素類藥物的分析藥物分析目前二頁\總數六十六頁\編于二十二點基本結構：環(huán)戊烷駢多氫菲ABCD12345678910111213141516171819概述目前三頁\總數六十六頁\編于二十二點分類：甾體激素腎上腺皮質激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素目前四頁\總數六十六頁\編于二十二點腎上腺皮質激素氫化可的松目前五頁\總數六十六頁\編于二十二點腎上腺皮質激素醋酸地塞米松目前六頁\總數六十六頁\編于二十二點腎上腺皮質激素曲安息龍目前七頁\總數六十六頁\編于二十二點腎上腺皮質激素地塞米松磷酸鈉目前八頁\總數六十六頁\編于二十二點雄性激素甲睪酮目前九頁\總數六十六頁\編于二十二點雄性激素丙酸睪酮目前十頁\總數六十六頁\編于二十二點蛋白同化激素苯丙酸諾龍目前十一頁\總數六十六頁\編于二十二點孕激素黃體酮目前十二頁\總數六十六頁\編于二十二點孕激素醋酸甲地孕酮目前十三頁\總數六十六頁\編于二十二點雌性激素炔雌醇目前十四頁\總數六十六頁\編于二十二點雌性激素雌二醇目前十五頁\總數六十六頁\編于二十二點炔諾酮此外目前十六頁\總數六十六頁\編于二十二點炔諾孕酮返回目前十七頁\總數六十六頁\編于二十二點一、結構與性質

1.腎上腺皮質激素主要活性基團性質△4–3–酮UV、與羰基試劑反應

C17

–

α–醇酮基還原性目前十八頁\總數六十六頁\編于二十二點2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團性質△4–3–酮UV、與羰基試劑反應

C17–

β–羥基可成酯目前十九頁\總數六十六頁\編于二十二點3.孕激素主要活性基團性質△4–3–酮UV、與羰基試劑反應C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化納反應目前二十頁\總數六十六頁\編于二十二點4.雌性激素主要活性基團性質A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應C17–乙炔基與AgNO3反應C17–羥基可成酯返回目前二十一頁\總數六十六頁\編于二十二點二、鑒別試驗（一）與強酸的呈色反應甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）目前二十二頁\總數六十六頁\編于二十二點與硫酸顯色反應

顯色熒光加水稀釋潑尼松龍深紅

絮狀↓灰潑尼松橙

黃→藍綠炔雌醚橙紅

黃綠

↓紅色

炔雌醇橙紅

黃綠

絮狀↓玫紅醋酸可的松黃或微褪色并澄

帶橙清目前二十三頁\總數六十六頁\編于二十二點(二)官能團的反應腎上腺皮質激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ1、C17

–

α–醇酮基還原性呈色反應此外還有斐林試液、多倫試液目前二十四頁\總數六十六頁\編于二十二點甾酮類激素藥物呈色羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼目前二十五頁\總數六十六頁\編于二十二點具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物呈色亞硝基鐵氰化納間二硝基酚芳香醛3.甲酮基目前二十六頁\總數六十六頁\編于二十二點黃體酮藍紫色亞硝基鐵氰化納其他甾體淡橙色不顯色目前二十七頁\總數六十六頁\編于二十二點有機氟Fˉ有機破壞有機氯Clˉ4.有機鹵素茜素氟藍

硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色

目前二十八頁\總數六十六頁\編于二十二點雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基目前二十九頁\總數六十六頁\編于二十二點含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基的沉淀反應↓目前三十頁\總數六十六頁\編于二十二點

(三)制備衍生物測定m.p.鹽酸氨基脲苯丙酸諾龍△縮氨基脲衍生物1.縮氨基脲的生成m.p.約180℃（分解）2.酯的水解丙酸睪酮堿性條件睪酮m.p.為150℃~156℃目前三十一頁\總數六十六頁\編于二十二點△４-3-酮、苯環(huán)、其他共軛結構（四）UV法1.結構依據240nm左右280nm左右目前三十二頁\總數六十六頁\編于二十二點2.示例曲安西龍丙酸倍氯米松溶劑甲醇乙醇20μg/ml濃度20μg/ml結果判斷在238nm處有最大吸收在239nm處有最大吸收，A為0.57～0.60，在239nm與263nm處的吸收度比值為2.25～2.45目前三十三頁\總數六十六頁\編于二十二點結構特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇（五）IR法目前三十四頁\總數六十六頁\編于二十二點1505cm-1ν3505cm-13300cm-1ν1590cm-13610cm-1ν酚羥基醇羥基1615cm-1苯環(huán)的骨架振動目前三十五頁\總數六十六頁\編于二十二點黃體酮結構特征：△４-3-酮、C17-酮基目前三十六頁\總數六十六頁\編于二十二點1700cm-1C=O20位酮基1665cm-13位酮基1615cm-1870cm-1C-H雙鍵目前三十七頁\總數六十六頁\編于二十二點（七）TLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別

方法：對照品法要求供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液的主斑點相同。目前三十八頁\總數六十六頁\編于二十二點（八）HPLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）

方法：對照品法要求在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對照品峰的tR一致。返回目前三十九頁\總數六十六頁\編于二十二點三、特殊雜質檢查（一）其他甾體的檢查

檢查意義：其他甾體與甾體激素藥物結構相似，也有一定的藥理作用而又互不相同.

目前四十頁\總數六十六頁\編于二十二點檢查方法（具有一定分離能力）TLC法（高低濃度對比法）HPLC法（類似高低濃度對比法）目前四十一頁\總數六十六頁\編于二十二點（1）TLC法（高低濃度對比法）

判定方法：

規(guī)定雜質斑點數目

規(guī)定雜質斑點顏色目前四十二頁\總數六十六頁\編于二十二點例：氫化可的松中其他甾體的檢查供試液：本品+氯仿-甲醇（9：1）濃度：3.0mg/ml對照液：供試液（3.0mg/ml）+氯仿-甲醇（9：1）60μg/ml層析：供試液點樣、展開、斑點檢出。

對照液判斷：供試液如顯雜質斑點，不得多于3個，其顏色與對照液的主斑點比較，不得更深。目前四十三頁\總數六十六頁\編于二十二點（2）HPLC法（主成分自身對照法）判定方法：

規(guī)定雜質峰數目規(guī)定雜質峰面積目前四十四頁\總數六十六頁\編于二十二點硒的檢查（二）來源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫有毒方法藥物氧瓶燃燒二氨基萘比色法測定目前四十五頁\總數六十六頁\編于二十二點（三）有機溶劑殘留量的檢查（靈敏度法）甲醇不得出峰檢測限=3.1ng丙酮≤5.0%內標法+校正因子以地塞米松磷酸鈉為例GC法目前四十六頁\總數六十六頁\編于二十二點地塞米松磷酸鈉檢查甲醇和丙酮精密稱取本品0.16g，置10ml量瓶中，精密加內標溶液2ml，加水稀釋至刻度，作為供試液；另精密量取甲醇10μl(≈7.9mg)與丙酮100μl(≈79mg)置100ml量瓶中，精密加內標溶液20ml，加水至刻度，作為對照液。照氣相色譜法測定，含丙酮不得過5.0%，并不得出現(xiàn)甲醇峰。目前四十七頁\總數六十六頁\編于二十二點（二）游離磷酸鹽的檢查地塞米松磷酸鈉對照品比色法供試液+鉬酸銨+1-氨基-2-萘酚-4-磺酸鉬藍：740nm對照液：同上目前四十八頁\總數六十六頁\編于二十二點（對照液0.0035%KH2PO4）返回目前四十九頁\總數六十六頁\編于二十二點（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多內標法）（甾體激素類藥物常含有結構相似的其他甾體雜質，對利用結構特征設計的比色法有干擾）四、含量測定測定對象：甾體激素類藥物的原料和制劑。目前五十頁\總數六十六頁\編于二十二點示例：黃體酮的含量測定

色譜條件：固定相ODS，流動相甲醇-水（65:35），檢測波長254nm，內標物己烯雌酚系統(tǒng)適用性試驗：n>1000，R符合規(guī)定。

目前五十一頁\總數六十六頁\編于二十二點測定樣品：黃體酮原料、注射液。

定量方法：內標法目前五十二頁\總數六十六頁\編于二十二點（二）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素、口服避孕藥苯環(huán)280nm（±）雌激素目前五十三頁\總數六十六頁\編于二十二點示例：醋酸地塞米松片的含量測定（1）配制供試液

（2）測定：240nm

（3）計算

目前五十四頁\總數六十六頁\編于二十二點腎上腺皮質激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基（1）原理異煙腙（黃）酮基異煙肼-3CHCl（縮合）1.異煙肼比色法（三）比色法目前五十五頁\總數六十六頁\編于二十二點異煙腙（黃色）目前五十六頁\總數六十六頁\編于二十二點（2）方法對照品法55℃異煙肼?lián)]去乙醇對照液供試液A暗45′目前五十七頁\總數六十六頁\編于二十二點（3）討論反應速度（反應專屬性）A.C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應反應專屬性C3－酮基目前五十八頁\總數六十六頁\編于二十二點B.溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇目前五十九頁\總數六十六頁\編于二十二點C.水分、溫度、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時→O2與光線無影響t℃↑→ν↑目前六十頁\總數六十六頁\編于二十二點D.酸的種類和濃度及異煙肼的濃度酸:異煙肼=2:1鹽酸濃度0.0074mol/L異煙肼濃度0.00365mol/L最大A目前六十一頁\總數六十六頁\編于二十二點

腎上腺皮質激素類C17-α－醇酮基強還原性（1）原理2.四氮唑比色法有色甲瓚四氮唑鹽醇酮基-a-