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第第頁(yè)MTT法觀察細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

MTT法繪制生長(zhǎng)曲線

一細(xì)胞生長(zhǎng)曲線：

A、目的：學(xué)習(xí)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定方法，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)基本規(guī)律。

B、背景知識(shí)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線是觀察細(xì)胞生長(zhǎng)基本規(guī)律的重要方法。只有具備自身穩(wěn)定生長(zhǎng)特性的細(xì)胞才適合在觀察細(xì)胞生長(zhǎng)變化的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用。因而在細(xì)胞系細(xì)胞和非建系細(xì)胞生長(zhǎng)特性觀察中，生長(zhǎng)曲線的測(cè)定是最為基本的指標(biāo)。

原理（選填項(xiàng)目）：

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定一般可利用細(xì)胞計(jì)數(shù)法進(jìn)行。

C、材料

（一）儀器

1.凈化工作臺(tái)

2.離心機(jī)

3.恒溫水浴箱

4.冰箱（4℃、-20℃）

5.倒置相差顯微鏡

6.培養(yǎng)箱（37℃、5%CO2、飽和濕度）

（二）玻璃器皿

1.吸管（彎頭）

2.培養(yǎng)瓶

3.玻璃瓶（250ml、100ml）

4.廢液缸

（三）塑料器皿

1.吸頭

2.槍頭

3.24培養(yǎng)板

4.膠塞

（四）其他物品

1.微量加樣槍

2.紅血球計(jì)數(shù)板

（五）試劑

1.D-Hanks液

2.小牛血清

3.RPMI1640

4.雙抗（青霉素、鏈霉素）

5.0.08%胰酶

（四）、操作步驟

1.取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞，采用一般傳代方法進(jìn)行消化，制成細(xì)胞懸液；

2.計(jì)數(shù)，精確地將細(xì)胞分別接種于21～30個(gè)大小一致的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)或培養(yǎng)孔（以24孔培養(yǎng)板為宜），每瓶或孔細(xì)胞總數(shù)要求一致，加入培養(yǎng)液的量也要一致。

3.每天或

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