制劑分析方法的建立和驗(yàn)證詳解

制劑分析方法的建立和驗(yàn)證詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)（優(yōu)選）制劑分析方法的建立和驗(yàn)證目前二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)第一部分制劑分析方法的建立一性狀項(xiàng)

對(duì)性狀的描述很重要，既要嚴(yán)謹(jǐn)，又要實(shí)事求是、切合實(shí)際；即寬嚴(yán)適度。片劑：本品為白色片或類白色片；本品為糖衣片，除去包衣后顯白色或類白色；本品為薄膜衣片，除去包衣后顯類白色至淡黃色目前三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

注射劑：本品為無色澄明液體；本品為無色至微黃色的澄明液體；本品為無色至淡黃色的澄明油狀液體。本品為白色凍干粉末，在水或氯化鈉注射液中呈白色顆粒懸浮液，靜置后顆粒沉降于瓶底；本品為白色凍干塊狀物或粉末。膠囊劑：本品內(nèi)容物為類白色至微黃色粉末或顆粒；本品內(nèi)容物為淡黃色至淡棕黃色油狀液體；本品內(nèi)容物為白色球形小丸。目前四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)第一部分制劑分析方法的建立二鑒別項(xiàng)

藥物的鑒別試驗(yàn)(identificationtest)是用于鑒別藥物的真?zhèn)?，一般在藥品檢驗(yàn)中作為首先項(xiàng)目。鑒別試驗(yàn)主要用于證實(shí)鑒別對(duì)象是否為所標(biāo)示的藥物，但常不用于鑒別未知物。目前五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)鑒別的主要項(xiàng)目1、性狀：也可以列為鑒別項(xiàng)下，主要反映藥物特有的物理性質(zhì)，如外觀、臭、味、溶解度及其物理常數(shù)等。其中溶解度、熔點(diǎn)等項(xiàng)目受被測(cè)物晶型、顆粒大小等因素影響，會(huì)使批間有差異。主要是對(duì)原料藥的影響，但也會(huì)影響制劑的質(zhì)量。在制劑鑒別試驗(yàn)中雖較少但有時(shí)也要考慮。目前六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)鑒別的主要項(xiàng)目2、一般鑒別試驗(yàn)(generalidentificationtest)是以藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其物理化學(xué)性質(zhì)為依據(jù)，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)?。一般鑒別試驗(yàn)可能只證實(shí)為某一類藥物，而不能證實(shí)是哪一種藥物，需進(jìn)行專屬鑒別試驗(yàn)，方可確認(rèn)。目前七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)鑒別的主要項(xiàng)目3、專屬鑒別試驗(yàn)(specificidentificationtest)是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)，是根據(jù)藥物間化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其物理化學(xué)特性的不同，選用某種藥物特有的靈敏定性反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)?。目前八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)鑒別的主要項(xiàng)目IR和Raman是鑒別原輔料的首選方法，用于制劑鑒別有局限性，要考慮輔料干擾，復(fù)方制劑API相互間的干擾以及輔料的干擾更為復(fù)雜。

IR或Raman制劑鑒別應(yīng)用實(shí)例不多。前處理提純?nèi)コ蓴_是常用的方法；結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)、或采用微光譜（化學(xué)成像等）是進(jìn)行制劑鑒別新方法。其他光譜法如紫外法、理化反應(yīng)（顏色、沉淀）等在制劑鑒別中有一定的應(yīng)用，但專屬性不強(qiáng)，色譜法，特別是HPLC法的應(yīng)用實(shí)例越來越多。目前九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)第一部分制劑分析方法的建立三檢查項(xiàng)

制劑檢查項(xiàng)較多，隨劑型不同而不同。重要的有：固體制劑：重量差異、片重差異、含量均勻度，崩解、溶出度和釋放度和有關(guān)物質(zhì)（雜質(zhì)）等；液體制劑：可見異物，溶液顏色，澄清度，無菌，熱原、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法和有關(guān)物質(zhì)（雜質(zhì)）等。以含量均勻度、溶出度、可見異物檢查法為例分別討論。目前十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)1、含量均勻度檢查法含量均勻度系指小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑的每片(個(gè))含量符合標(biāo)示量的程度。各國藥典先采用計(jì)數(shù)法，USP21版將計(jì)數(shù)法改為計(jì)數(shù)-計(jì)量混合型檢查法，ChP1990年版開始采用計(jì)量法，其他國家藥典也相繼采用計(jì)量法。美國等國外藥典的含量均勻度檢查法不斷改進(jìn)。但是，ChP1990年版以后，該檢查法一直幾乎不變。目前十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)1.1USP32版檢查法初試公式：復(fù)試公式：當(dāng)條件①,②

，同時(shí)被滿足時(shí)，判定批產(chǎn)品合格；否則判為不合格。

的取值見表1。目前十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)1.2與中國藥典法比較采用相同的抽樣方式，即二次抽樣法，且抽取的樣本數(shù)相同。兩種方案的接受值(Acceptancevalue，AV)或稱待判值相同；判別式也基本相同，除USP第二階段的條件②外，均可用

描述，為接受常數(shù)，其值在兩國藥典中有明顯差異，見表2。目前十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)1.2與中國藥典法比較USP32版的初、復(fù)試兩階段的接受常數(shù)值均比ChP相應(yīng)值要大，值越大，在接受值(AV)不變的前提下，含量均勻度離散的標(biāo)準(zhǔn)差越小，表明USP32版對(duì)含量均勻度的控制要求更嚴(yán)格，其判別標(biāo)準(zhǔn)明顯高于ChP2010年版，但是，由于USP無復(fù)試的附加條件，使復(fù)試率較大。目前十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)2、溶出度檢查法2010年版藥典第二增補(bǔ)版已增加可采用光纖在線檢測(cè)的相關(guān)內(nèi)容，并規(guī)定檢測(cè)結(jié)果不得用于仲裁。以上三種測(cè)定法中，當(dāng)采用原位光纖實(shí)時(shí)測(cè)定法測(cè)定時(shí)，賦形劑的干擾應(yīng)可以忽略，或可以通過設(shè)定參比波長等方法消除；該方法特別適用于溶出曲線的測(cè)定。目前十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)目前二十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)3、可見異物檢查法該檢查法在藥典整合中遇到了問題，主要是各部原訂的限度，整合在一起時(shí)就相互不對(duì)應(yīng)，正在協(xié)調(diào)統(tǒng)一之中。目前二十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)第二部分制劑的雜質(zhì)研究雜質(zhì)研究涉及雜質(zhì)分析方法的建立與驗(yàn)證、雜質(zhì)確認(rèn)、雜質(zhì)限度的確定及雜質(zhì)控制等諸方面。目前二十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)一雜質(zhì)定義和種類ICH將藥品中雜質(zhì)按其屬性分為無機(jī)雜質(zhì)、揮發(fā)性雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)三類。包括：目前三十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

無機(jī)雜質(zhì)無機(jī)雜質(zhì)可能來源于生產(chǎn)過程，它們通常是已知和已鑒定的，包括試劑、配位體、催化劑，重金屬或其他殘留金屬，無機(jī)鹽，其他物質(zhì)（如過濾介質(zhì)、活性炭等）等。在新藥的研制過程中應(yīng)對(duì)殘留催化劑進(jìn)行評(píng)估，在標(biāo)準(zhǔn)中是否收載相應(yīng)的檢查項(xiàng)目，應(yīng)進(jìn)行分析討論。標(biāo)準(zhǔn)限度應(yīng)根據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)或已知的安全性數(shù)據(jù)來制定。目前三十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)無機(jī)雜質(zhì)采用ICP-MS分析各類陽離子，離子色譜分析陰離子的技術(shù)已相對(duì)成熟，但目前國內(nèi)對(duì)無機(jī)雜質(zhì)的控制要求仍相對(duì)簡(jiǎn)單，將是一個(gè)重要的研究方向。USP制訂藥品重金屬或限量元素總體控制解決新方案，增加三個(gè)新通則：元素雜質(zhì)-限度<232>、元素雜質(zhì)-測(cè)定法<233>、膳食補(bǔ)充劑中的污染元素<2232>。目前三十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)無機(jī)雜質(zhì)新通則<232>目的是規(guī)定藥物中元素雜質(zhì)含量的限度，這些元素以雜質(zhì)存在于原料藥和制劑（包括天然物和rDNA生物制品）、國家處方集的輔料、和《美國藥典膳食補(bǔ)充劑綱要》的膳食補(bǔ)充劑和營養(yǎng)成分中。膳食補(bǔ)充劑在通則-膳食補(bǔ)充劑中元素雜質(zhì)（2232）中另有規(guī)定。目前三十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)無機(jī)雜質(zhì)<232>中元素雜質(zhì)的每日允許暴露量（PDE）與ICHQ3D是一致的。在新通則<233>中，著重描述了測(cè)定元素雜質(zhì)的兩種常用方法：ICP-AES(方法1)和ICP-MS(方法2)，并提出選擇方法的原則。目前三十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)揮發(fā)性雜質(zhì)目前的焦點(diǎn)是殘留溶劑分析，參照ICH“Q3C雜質(zhì)：殘留溶劑的指導(dǎo)原則”，按照常用的69種有機(jī)溶劑對(duì)人體和環(huán)境的危害程度分為4類控制限度，是指在藥物合成中使用的（或用于制備溶液或混懸液的）有機(jī)或無機(jī)液體，由于它們一般具有已知毒性，故較易選擇控制方法。根據(jù)各品種生產(chǎn)工藝確定控制對(duì)象；推薦采用頂空毛細(xì)管氣相色譜法進(jìn)行分析檢測(cè)。目前三十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)有機(jī)雜質(zhì)包括：起始物、副產(chǎn)物、中間體和降解產(chǎn)物等，如何按照QbD(qualitybydesign)的指導(dǎo)思想，建立有效的分析方法并保證分析方法的耐用性則是有機(jī)雜質(zhì)譜分析的關(guān)鍵。對(duì)于藥物制劑，需要進(jìn)行控制的雜質(zhì)還包括其活性組分的降解產(chǎn)物或活性組分與賦形劑和(或)內(nèi)包裝/密封系統(tǒng)的反應(yīng)產(chǎn)物。目前三十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)有機(jī)雜質(zhì)藥物中的雜質(zhì)隨不同來源（不同生產(chǎn)廠或不同工藝過程）而異（見右圖）。目前三十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)有機(jī)雜質(zhì)人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)制定的雜質(zhì)控制指導(dǎo)原則及基本理念已經(jīng)逐步被國際社會(huì)接受。中國藥典從2005年版始在附錄中設(shè)有“藥物雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則”，中國藥典2010年版可謂是國內(nèi)近10年來藥品雜質(zhì)研究成果的集中展示。目前三十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)ICH要求（制劑中的雜質(zhì)）一般情況下，存在于原料藥中的雜質(zhì)在制劑中不需要監(jiān)控，除非它們也屬于降解產(chǎn)物。制劑中的降解產(chǎn)物是指制劑在生產(chǎn)和貯藏過程中，因如光照、溫度、pH、水或與賦形劑和/或包裝系統(tǒng)互相反應(yīng)而導(dǎo)致原料藥發(fā)生化學(xué)變化而產(chǎn)生的雜質(zhì)。目前三十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)有機(jī)雜質(zhì)丁溴東莨菪堿含有酯鍵，在一定pH溶液中發(fā)生水解生成雜質(zhì)。在注射劑工藝中用鹽酸調(diào)節(jié)pH值。采用HPLC法測(cè)定不同pH條件下丁溴東莨菪堿降解產(chǎn)物托品酸濃度，根據(jù)數(shù)據(jù)擬合降解曲線（圖2），研究穩(wěn)定性，可為生產(chǎn)和貯存提供重要的參考依據(jù)。目前四十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)制劑中的雜質(zhì)應(yīng)對(duì)制劑生產(chǎn)和/或穩(wěn)定性考察中發(fā)現(xiàn)的降解產(chǎn)物進(jìn)行綜述。包括對(duì)可能降解途徑和因與賦形劑和/或包裝容器反應(yīng)所產(chǎn)生雜質(zhì)的科學(xué)評(píng)價(jià)。應(yīng)對(duì)研究工作進(jìn)行總結(jié)，包括研發(fā)中生產(chǎn)的批次和擬上市生產(chǎn)批次的試驗(yàn)結(jié)果。應(yīng)對(duì)不屬于降解產(chǎn)物的雜質(zhì)進(jìn)行說明。應(yīng)對(duì)擬上市的有代表性批次中雜質(zhì)概況與用于研究的批次作比較，對(duì)差異進(jìn)行討論。目前四十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)制劑中的雜質(zhì)發(fā)現(xiàn)任何降解產(chǎn)物，如果大于鑒定閾值時(shí)應(yīng)予鑒定；若無法鑒定某一降解產(chǎn)物，則予以說明。在制劑標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)包括以下降解產(chǎn)物檢查項(xiàng)：目前四十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)制劑中的雜質(zhì)雜質(zhì)（或降解產(chǎn)物）的界定是獲得和評(píng)估一些數(shù)值的過程，這些數(shù)值用于建立安全閾值（水平），單個(gè)的或某些已明確的雜質(zhì)（或降解產(chǎn)物）含量在此閾值水平下是安全的。應(yīng)對(duì)設(shè)定的雜質(zhì)（降解產(chǎn)物）限度提供包括安全性在內(nèi)的依據(jù)。目前四十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)二制劑雜質(zhì)研究主要思路制劑由至少一種API添加各種輔料（或不加）按一定工藝制成，其雜質(zhì)包括原料藥帶入的雜質(zhì)，在制劑制備過程和貯藏期間產(chǎn)生的降解產(chǎn)物，以及藥物之間、藥物與輔料之間相互作用產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。由于制劑比原料藥所含雜質(zhì)的來源具有多樣性，數(shù)目也可能要多，使制劑的雜質(zhì)研究較原料藥復(fù)雜，復(fù)方制劑又較單方制劑更復(fù)雜。目前四十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)二制劑雜質(zhì)研究主要思路確定各雜質(zhì)的來源，對(duì)其定性和歸屬，限度確定必須以歸屬為基礎(chǔ)。如對(duì)于毒性雜質(zhì)，需明確歸屬才能嚴(yán)格控制，制定合理的限度。即使對(duì)于微量的未知雜質(zhì)，由于來源于不同主藥，其可接受的限量可能不同，一般也應(yīng)確定來源，除非雜質(zhì)的量小于制劑中含量最小藥物可接受的未知雜質(zhì)限量。制劑雜質(zhì)的來源歸屬是雜質(zhì)研究首先要解決的問題之一。目前四十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)二制劑雜質(zhì)研究主要思路復(fù)方制劑有關(guān)物質(zhì)控制基本原則和單方一樣，可看作是在做兩個(gè)或者三個(gè)產(chǎn)品，不過是同時(shí)分析幾個(gè)物質(zhì)。相關(guān)的指導(dǎo)原則有ICHQ3A和Q3B和FDA相關(guān)的工業(yè)指南。首先通過對(duì)原料藥化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、穩(wěn)定性等分析，初步預(yù)測(cè)制劑中可能存在的降解產(chǎn)物（雜質(zhì)的分析預(yù)測(cè)），然后通過進(jìn)一步的試驗(yàn)，對(duì)雜質(zhì)來源進(jìn)行歸屬。目前四十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)三雜質(zhì)研究方法與步驟

3.1文獻(xiàn)調(diào)研和資料收集⑴API生產(chǎn)廠的技術(shù)資料，一般有DMF的會(huì)提供可公開的部分，包括工藝流程，合成路徑和所有潛在雜質(zhì)的信息。⑵同品種在USP、EP中的情況，如雜質(zhì)種類和限量。⑶初步了解制劑中可能存在的潛在雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。⑷了解原研單位的相關(guān)資料和如何控制雜質(zhì)的，如仿制藥的進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)是非常重要的信息。目前四十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)3.2雜質(zhì)來源的分析預(yù)測(cè)原料藥引入的雜質(zhì)不是制劑雜質(zhì)研究重點(diǎn)，主要關(guān)注降解產(chǎn)物。通過對(duì)各原料藥化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、穩(wěn)定性等分析，初步預(yù)測(cè)可能存在的降解產(chǎn)物。如酯鍵、酰胺鍵易水解，通過分析可確定水解產(chǎn)生的雜質(zhì)。原料藥及單方制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)對(duì)（復(fù)方）制劑中雜質(zhì)的預(yù)測(cè)具重要參考意義，原料藥及單方制劑貯藏中易出現(xiàn)的降解產(chǎn)物在（復(fù)方）制劑中一般也會(huì)存在。如對(duì)原料藥穩(wěn)定性及降解研究有助于確定不同制劑工藝（如是否接觸水分、是否經(jīng)高溫處理、是否避光等）可產(chǎn)生的雜質(zhì)；通過對(duì)各原料藥化學(xué)結(jié)構(gòu)分析，可初步判斷主藥間是否存在作用而產(chǎn)生雜質(zhì)。目前四十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

3.3建立可靠的分析方法分析方法是獲取雜質(zhì)信息的重要手段，因此，要選擇合適的分析方法。分析方法的建立是一個(gè)復(fù)雜工程，原則就是方法要簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)。方法應(yīng)能有效分離各雜質(zhì)，靈敏度除應(yīng)符合一般要求外，還要關(guān)注對(duì)制劑中含量較小的藥物所產(chǎn)生雜質(zhì)的檢出能力。方法必須具有穩(wěn)定性指示功能（stabilityindicating），含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)都有穩(wěn)定性指示功能的要求，因此，含量和有關(guān)物質(zhì)測(cè)定一般采用相同的色譜條件。評(píng)價(jià)方法是否具有穩(wěn)定性指示功能的主要依據(jù)就是stressstudy(破壞實(shí)驗(yàn))。目前四十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

⑴關(guān)注不同方法間的互補(bǔ)與驗(yàn)證HPLC-UV法被認(rèn)為是一種理想的檢測(cè)手段，在雜質(zhì)研究中普遍采用，但是，對(duì)于雜質(zhì)檢測(cè)來講，得到的色譜圖不一定能真實(shí)反映實(shí)際情況。①極性太強(qiáng)化合物可能被掩蓋(與溶劑峰重疊)，極性太小化合物保留在柱上難以被洗脫。②無紫外吸收不能被檢出，或在檢測(cè)波長處吸收相差較大的多種化合物不能被同時(shí)有效檢出。如圖A是某注射液穩(wěn)定性考察中286nm檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)的色譜圖，圖B為改用230nm檢測(cè)的色譜圖。目前五十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

⑴關(guān)注不同方法間的互補(bǔ)與驗(yàn)證目前五十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)⑴關(guān)注不同方法間的互補(bǔ)與驗(yàn)證檢測(cè)波長應(yīng)兼顧主藥和各雜質(zhì)的吸收情況來選擇，必要時(shí)在分別在特定波長下檢測(cè)特定雜質(zhì)。對(duì)無紫外吸收的雜質(zhì)，可改用其他類型檢測(cè)器，如選擇蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，其靈敏度高于示差折光檢測(cè)器。ECD檢測(cè)器對(duì)于無紫外吸收的雜質(zhì)檢測(cè)在靈敏度方面更具優(yōu)勢(shì)，如USP30中阿奇霉素有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)在原HPLC-UV方法基礎(chǔ)上增加HPLC-ECD方法，并作為檢測(cè)結(jié)果的仲裁方法。目前五十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)⑴關(guān)注不同方法間的互補(bǔ)與驗(yàn)證HPLC-MS應(yīng)用已非常廣泛，但在標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)用實(shí)例還不多，要從必要性、實(shí)用性和經(jīng)濟(jì)性等方面考慮選擇。應(yīng)注意不同原理的分析方法間的相互補(bǔ)充與驗(yàn)證，如HPLC與TLC的互相補(bǔ)充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補(bǔ)充，HPLC不同檢測(cè)器的相互補(bǔ)充等。藥物雜質(zhì)多樣性決定了有時(shí)以現(xiàn)有技術(shù)難以使用一種檢測(cè)手段同時(shí)檢測(cè)所有雜質(zhì)，如采用TLC法檢測(cè)無紫外吸收且極性過大的雜質(zhì)，用HPLC法檢測(cè)其他雜質(zhì)。目前五十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

⑵

關(guān)注不同雜質(zhì)色譜行為的差異雜質(zhì)比較復(fù)雜且多是未知物，極性、油/水分配等特性有時(shí)相差較大，等度洗脫法難以在較短時(shí)間完全洗脫所有雜質(zhì)，梯度洗脫法可在較短時(shí)間內(nèi)有效分離極性相差懸殊的物質(zhì)。合適的梯度不僅可優(yōu)化各物質(zhì)保留時(shí)間，較短時(shí)間內(nèi)全部洗脫各種雜質(zhì)，同時(shí)還可改善峰形，提高檢測(cè)靈敏度。在國外雜質(zhì)研究中廣為應(yīng)用，呈現(xiàn)出逐步取代等。但與等度法相比，梯度法操作復(fù)雜，可引起色譜基線漂移，影響結(jié)果精密度。如果等度法可有效檢出相關(guān)雜質(zhì)，應(yīng)作為首選，但方法學(xué)驗(yàn)證中，梯度法在驗(yàn)證等度法是否有效檢出所有相關(guān)雜質(zhì)時(shí)具有重要意義。目前五十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

⑶采用新的雜質(zhì)檢測(cè)手段國際上雜質(zhì)研究不斷吸納分析科學(xué)新成就，色譜儀器越來越專業(yè)化（凝膠色譜、離子色譜、逆流色譜等相繼用于檢測(cè)），色譜與光譜聯(lián)用技術(shù)越來越成熟，如HPLC-UV、HPLC-MS、HPLC-NMR、GC-MS、GC-IR等已經(jīng)成為最重要的方法，但是，在雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分析鑒定中，各種光譜技術(shù)（UV、IR、MS、NMR和X-射線衍射法等）仍然是不可或缺的方法。各類數(shù)據(jù)庫越來越豐富，聯(lián)機(jī)智能化解析系統(tǒng)越來越普及，為雜質(zhì)研究提供了更為完善的利器。目前五十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

⑶采用新的雜質(zhì)檢測(cè)手段雜質(zhì)檢測(cè)逐步呈現(xiàn)出全面檢出（梯度洗脫，多檢測(cè)手段互補(bǔ)、明確靈敏度要求）、有效分離（規(guī)定最難分離物質(zhì)對(duì)色譜峰的分離度）、目標(biāo)明確（特定雜質(zhì)、非特定雜質(zhì)）、準(zhǔn)確定量（外標(biāo)、校正因子、歸一法相結(jié)合）的趨勢(shì)。反觀國內(nèi)雜質(zhì)研究情況則基本沿用十幾年一貫制的反相HPLC-UV組合的檢測(cè)方法，色譜柱仍局限于C8、C18及-CN等常規(guī)填料，洗脫方式基本采用簡(jiǎn)單的等度洗脫法，對(duì)雜質(zhì)定量也多為自身對(duì)照法，差距較為明顯。目前五十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)4雜質(zhì)譜分析與雜質(zhì)確認(rèn)以雜質(zhì)譜為主線，以安全性為核心，將雜質(zhì)研究與化學(xué)、生產(chǎn)與控制、藥理毒理及臨床安全性研究等環(huán)節(jié)密切聯(lián)系，通盤考量。遺傳毒性雜質(zhì)對(duì)細(xì)胞DNA產(chǎn)生損傷，不能僅研究主成分、還應(yīng)包括雜質(zhì)的遺傳毒性。雜質(zhì)譜含所有雜質(zhì)種類、含量、來源及結(jié)構(gòu)等信息。通過雜質(zhì)譜分析較為全面地掌握雜質(zhì)概貌（包括來源和結(jié)構(gòu))；應(yīng)確保雜質(zhì)有效檢出和確認(rèn)；跟蹤雜質(zhì)譜對(duì)安全性或臨床試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響，評(píng)估雜質(zhì)可接受水平；結(jié)合生產(chǎn)時(shí)雜質(zhì)譜的變化，評(píng)估雜質(zhì)安全性風(fēng)險(xiǎn)，確立安全的雜質(zhì)控制水平。目前五十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)4雜質(zhì)譜分析與雜質(zhì)確認(rèn)從制備工藝和產(chǎn)品結(jié)構(gòu)分析入手，評(píng)估、預(yù)測(cè)可能存在的副產(chǎn)物、中間體、降解物以及試劑、催化劑等大體雜質(zhì)概況，考證建立的分析方法是否能夠?qū)⑺鼈冎鹨粰z出，并進(jìn)行相應(yīng)的驗(yàn)證工作，是雜質(zhì)研究的主動(dòng)思維，而傳統(tǒng)的被動(dòng)行為僅從建立的一種檢測(cè)方法所檢出的有關(guān)物質(zhì)歸屬其來源情況，容易出現(xiàn)雜質(zhì)漏檢的情況，難以全面掌握雜質(zhì)譜。雜質(zhì)譜分析對(duì)于合理確定雜質(zhì)限度、降低雜質(zhì)安全性風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義。目前五十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)4雜質(zhì)譜分析與雜質(zhì)確認(rèn)雜質(zhì)控制理念變遷為三個(gè)主要階段：純度控制：通過對(duì)純度控制間接實(shí)現(xiàn)雜質(zhì)控制。雜質(zhì)限度控制：?jiǎn)渭兊摹跋薅瓤刂啤崩砟畲嬖谌毕?。雜質(zhì)譜：諸雜質(zhì)的種類與含量被總稱為雜質(zhì)譜(impurityprofiles)。理想的控制理念是針對(duì)藥品中每一個(gè)雜質(zhì)，依據(jù)藥理、毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果和生理活性逐一制定其質(zhì)控限度。在標(biāo)準(zhǔn)中按“雜質(zhì)譜控制”的理念對(duì)藥品中雜質(zhì)進(jìn)行控制是雜質(zhì)控制的最終目標(biāo)，而對(duì)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)的推斷則是雜質(zhì)研究/控制過程中最重要環(huán)節(jié)。目前五十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

5雜質(zhì)限度確定的基本思路綜合藥學(xué)、藥理毒理及臨床研究結(jié)果綜合判定，

除用含雜質(zhì)的

樣品也可用該雜質(zhì)進(jìn)行毒理試驗(yàn)，為雜質(zhì)限度的確定提供依據(jù)。某已知雜質(zhì)的毒性文獻(xiàn)記載，可作為雜質(zhì)限度確定的依據(jù)之一。對(duì)雜質(zhì)的控制及其限度：還應(yīng)考慮①非臨床安全性和臨床研究用樣品的雜質(zhì)概況，②工藝穩(wěn)定的具有一定代表性批次大生產(chǎn)產(chǎn)品的雜質(zhì)概況匯總和分析。目前六十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

5雜質(zhì)限度確定的基本思路確定雜質(zhì)限度的基本原則是AsLowAsReasonablePracticable(ALARP)，包括：⑴雜質(zhì)的活性或毒性，是評(píng)估雜質(zhì)可接受水平的核心要素，限度確定的首要依據(jù)。⑵工藝、生產(chǎn)中正常波動(dòng)和制備工藝耐用性反映出的產(chǎn)品質(zhì)量批內(nèi)一致性和批間重復(fù)性。⑶分析方法能達(dá)到的檢測(cè)水平，可接受的誤差和精密度。⑷穩(wěn)定性，產(chǎn)品儲(chǔ)運(yùn)過程中控制降解的方法和措施，以及擬定貯藏條件下能使產(chǎn)品保持其規(guī)定質(zhì)量指標(biāo)的有效期。目前六十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)藥物的異構(gòu)體也常是藥物的雜質(zhì)，應(yīng)在藥品標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行控制。⑴手性異構(gòu)體雜質(zhì)控制手性藥物質(zhì)量研究的一個(gè)關(guān)鍵就是對(duì)藥物光學(xué)純度的控制。分析手性藥物光學(xué)純度的常用方法有：比旋度法、圓二色光譜法和手性色譜法。比旋度法較為簡(jiǎn)單，但影響比旋度數(shù)值的因素較多，必要時(shí)，可采用圓二色光譜法和手性色譜法，可以更為準(zhǔn)確直觀地反映各立體異構(gòu)體雜質(zhì)的變化情況。目前六十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)⑵互變異構(gòu)體分析有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)在兩種官能團(tuán)異構(gòu)體間產(chǎn)生平衡互相轉(zhuǎn)換，相應(yīng)的異構(gòu)體稱為互變異構(gòu)體。大多數(shù)互變異構(gòu)都涉及氫原子或質(zhì)子的轉(zhuǎn)移，以及單鍵向雙鍵的轉(zhuǎn)變?；プ儺悩?gòu)體在平衡中的分布與具體的因素有關(guān)，包括溫度、溶劑和pH值等。常見的互變異構(gòu)包括：酮-烯醇，例如酮-烯醇互變異構(gòu)。酰胺-亞胺酸，例如腈水解反應(yīng)。內(nèi)酰胺-內(nèi)酰亞胺，雜環(huán)中的酰胺-亞胺酸互變異構(gòu)，例如鳥嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶。烯胺-亞胺，烯胺-烯胺，例如磷酸吡哆醛催化的酶反應(yīng)。目前六十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)⑵互變異構(gòu)體分析研究互變異構(gòu)體的常用方法有NMR、拉曼和紫外等光譜方法。目前六十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)⑵互變異構(gòu)體分析平衡體系中互變異構(gòu)體組分的變化引起了熒光發(fā)射峰的位置發(fā)生大幅度位移。目前六十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)⑵互變異構(gòu)體分析在常溫下蘭索拉唑以I和II式兩種構(gòu)型同時(shí)存在于溶液中，兩種構(gòu)型間不斷翻轉(zhuǎn)互變，從而使部分BNR譜線變寬。溫度上升，兩種異構(gòu)體翻轉(zhuǎn)互變速度不斷加快，I式與II式構(gòu)型中某些信號(hào)化學(xué)位移逐步靠近，寬峰變窄，甚至合并成單峰；溫度的下降，兩種異構(gòu)體翻轉(zhuǎn)互變速度下降，在丙酮中溫度降到－70C后，化合物以一種穩(wěn)定構(gòu)型存在。目前六十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)⑵互變異構(gòu)體分析

目前六十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)6異構(gòu)體雜質(zhì)⑵互變異構(gòu)體分析考察中性和質(zhì)子化可樂定分子構(gòu)型的構(gòu)象，比較處于優(yōu)勢(shì)構(gòu)象時(shí)互變異構(gòu)體的相對(duì)穩(wěn)定性，進(jìn)一步尋找構(gòu)象異構(gòu)化和互變異構(gòu)化過渡態(tài)，探討質(zhì)子化和水溶劑化效應(yīng)對(duì)異構(gòu)化過程的幾何結(jié)構(gòu)和能量的影響等。

目前六十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)⑶穩(wěn)定性研究穩(wěn)定性研究對(duì)于手性異構(gòu)體和互變異構(gòu)體藥物都是非常重要的。目前六十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四雜質(zhì)歸屬研究的注意事項(xiàng)1分別測(cè)定各原料藥、原料藥按處方比例混合物、輔料、原輔料混合物、制劑樣品在確定的雜質(zhì)檢查色譜條件下的HPLC圖譜，對(duì)上述圖譜進(jìn)行對(duì)比研究，以確定制劑色譜圖中輔料峰、由各原料藥引入的雜質(zhì)峰。另外，可通過比較各原料藥的HPLC圖譜與原料藥混合物的HPLC圖譜初步確定原料藥之間是否有相互作用；通過比較原料藥混合物的HPLC圖譜、輔料的HPLC圖譜以及原輔料混合物的HPLC圖譜，可初步確定原輔料之間是否有相互作用；通過比較原輔料混合物的HPLC圖譜與制劑的HPLC圖譜，可初步確定制劑過程是否引起主藥的降解和雜質(zhì)的增加。目前七十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四雜質(zhì)歸屬研究的注意事項(xiàng)2對(duì)各原料藥、原料藥按處方比例混合物、輔料、原輔料混合物、制劑分別進(jìn)行光、熱、濕影響因素試驗(yàn)，測(cè)定試驗(yàn)前后樣品的HPLC圖譜并進(jìn)行比較分析，可明確制劑中藥物在強(qiáng)光、高溫、高濕條件下的主要降解產(chǎn)物，對(duì)（復(fù)方）制劑中的降解產(chǎn)物進(jìn)行歸屬，并可通過上述比較研究，基本確定藥物與藥物之間、藥物與輔料之間在劇烈條件下是否存在相互作用，是否產(chǎn)生新的雜質(zhì)。目前七十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四雜質(zhì)歸屬研究的注意事項(xiàng)3對(duì)各原料藥、原料藥混合物、輔料、原輔料混合物、制劑分別進(jìn)行穩(wěn)定性加速試驗(yàn)（試驗(yàn)條件一般選擇40℃，相對(duì)濕度75％），測(cè)定不同時(shí)間樣品的HPLC圖譜并進(jìn)行比較分析，并與制劑長期留樣試驗(yàn)樣品的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。通過這些研究工作，可進(jìn)一步明確（復(fù)方）制劑中各雜質(zhì)的歸屬，明確藥物在加速試驗(yàn)條件下及一般貯藏條件下的主要降解產(chǎn)物，為確定貯藏條件及質(zhì)量控制重點(diǎn)建立基礎(chǔ)。目前七十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四雜質(zhì)歸屬研究的注意事項(xiàng)4盡可能地采用雜質(zhì)對(duì)照品定位和測(cè)定，其次采用加校正因子定量法，再其次是主成分自身對(duì)照法，要逐一進(jìn)行單個(gè)雜質(zhì)的測(cè)定，一般不要以總雜質(zhì)作為雜質(zhì)指標(biāo)。如果兩個(gè)成分響應(yīng)值相差很大，自身對(duì)照外標(biāo)法也不可靠。選擇可行的方法。要注意觀察樣品外觀性狀、主藥含量等變化，以與雜質(zhì)檢查結(jié)果相互印證。國外標(biāo)準(zhǔn)常采用相對(duì)保留時(shí)間對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行歸屬，但是在國內(nèi)重現(xiàn)性非常差。如一個(gè)品種參照國外藥典制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，把各個(gè)成分的降解產(chǎn)物分別計(jì)算，但是在復(fù)核時(shí)沒有重現(xiàn)性，最后才確定為總雜質(zhì)。目前七十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)第三部分分析方法驗(yàn)證藥品檢驗(yàn)方法驗(yàn)證的重要性設(shè)計(jì)的檢驗(yàn)方法應(yīng)能達(dá)到預(yù)期的效果，保證測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，確保藥品的安全有效。CHP藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則，藥審中心-化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法，USP通則1225藥典分析方法驗(yàn)證、通則1226藥典分析方法確認(rèn)，均依照ICHQ2(R1)。USP明確規(guī)定：分析方法驗(yàn)證：建立方法要驗(yàn)證，修訂方法要驗(yàn)證；分析方法確認(rèn)：應(yīng)用方法時(shí)要確認(rèn)方法是否適用。目前七十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

驗(yàn)證的目的（CHP）“是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測(cè)要求。在建立藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，分析方法需經(jīng)驗(yàn)證；在藥品生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、中藥處方變更、原分析方法進(jìn)行修訂時(shí)，則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進(jìn)行驗(yàn)證。方法驗(yàn)證理由、過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明或修訂說明中。生物制品質(zhì)量控制中采用的方法包括理化分析方法和生物學(xué)測(cè)定方法，其中理化分析方法的驗(yàn)證原則與化學(xué)藥品基本相同，所以可參照本指導(dǎo)原則進(jìn)行，但在進(jìn)行具體驗(yàn)證時(shí)還需要結(jié)合生物制品的特點(diǎn)考慮；生物學(xué)測(cè)定有更多的影響因素，一般要使用動(dòng)物、細(xì)胞或生物分子，因此對(duì)于生物學(xué)測(cè)定的判斷標(biāo)準(zhǔn)另作說明?！蹦壳捌呤屙揬總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

需驗(yàn)證的項(xiàng)目和內(nèi)容（CHP）分析項(xiàng)目：鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)限度檢查或定量檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測(cè)定，以及制劑中其他成分(如防腐劑等，中藥中如殘留物、添加劑等）的測(cè)定。藥品溶出度、釋放度等檢査中，其溶出量等的測(cè)試方法也應(yīng)進(jìn)行必要驗(yàn)證。驗(yàn)證內(nèi)容：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍和耐用性。視具體方法擬訂驗(yàn)證的內(nèi)容。ICH需驗(yàn)證的分析類型（項(xiàng)目）和驗(yàn)證的分析特性(內(nèi)容)和中國藥典相似。目前七十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

一準(zhǔn)確度（1含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度）原料藥可用已知純度的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可在處方量空白輔料中，加入已知量被測(cè)物（原文可用含已知量被測(cè)物的各組分混合物）進(jìn)行測(cè)定。如不能得到制劑輔料的全部組分，可向待測(cè)制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。如已測(cè)試并求出了精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度也可推算出來的情況下，此項(xiàng)可豁免驗(yàn)證。目前七十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

一準(zhǔn)確度（2雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度）可向原料藥或制劑處方量空白輔料中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物對(duì)照品，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。在不能測(cè)得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測(cè)得對(duì)主成分（原料藥）的相對(duì)響應(yīng)因子的情況下，可用主成分（原料藥）的響應(yīng)因子。應(yīng)明確表明單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（%）或面積比（%）。目前七十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

一準(zhǔn)確度（3中藥測(cè)定方法的準(zhǔn)確度）可用已知純度的對(duì)照品進(jìn)行加樣回收率測(cè)定，即于已知被測(cè)成分含量的供試品中再精密加入一定量的已知純度的被測(cè)成分對(duì)照品，依法測(cè)定。用實(shí)測(cè)值與供試品中含有量之差，除以加入對(duì)照品量計(jì)算回收率。在加樣回收試驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品中被測(cè)成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi)；加入的對(duì)照品的量要適當(dāng)，過小則引起較大的相對(duì)誤差，過大則干擾成分相對(duì)減少，真實(shí)性差。回收率％=（C-A）/B×100%式中A為供試品所含被測(cè)成分量；B為加入對(duì)照品量；C為實(shí)測(cè)值。目前七十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

一準(zhǔn)確度（4校正因子的準(zhǔn)確度）待測(cè)定物質(zhì)與所選定的參照物質(zhì)的絕對(duì)校正因子之比，即為相對(duì)校正因子。用于化學(xué)藥有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定、中藥材及其復(fù)方制劑中多指標(biāo)成分的測(cè)定。校正因子的表示方法很多，本文氣GC法和HPLC法中相對(duì)重量校正因子。可采用實(shí)測(cè)的相對(duì)校正因子與替代物（對(duì)照品）和被替代物（待測(cè)物）標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率比值進(jìn)行比較方法；采用紫外檢測(cè)器時(shí)，可將實(shí)測(cè)的相對(duì)校正因子與替代物（對(duì)照品）和被替代物（待測(cè)物）在指定的波長和溶劑條件下吸收系數(shù)比值進(jìn)行比較。準(zhǔn)確度（％）=A/B×100%A為替代物（對(duì)照品）標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率（UV吸收系數(shù)）；B為被替代物（待測(cè)物）標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率（UV吸收系數(shù)）。目前八十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

一準(zhǔn)確度（5數(shù)據(jù)要求）在規(guī)定范圍內(nèi)，取相當(dāng)于100%濃度水平的供試品，用至少6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度分別制備3份供試品溶液，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)?；瘜W(xué)藥，一般中間濃度加入量與待測(cè)定成分量之比控制在1:1左右，高、中、低濃度對(duì)照品加入量在1.2:1，1:1，0.8:1左右，應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率（%），或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限；對(duì)于中藥，一般中間濃度加入量與所取供試品中待測(cè)定成分量之比控制在1:1左右，高、中、低濃度對(duì)照品加入量與所取供試品中待測(cè)定成分量之比在1.5:1，1:1，0.5:1左右，應(yīng)報(bào)告供試品取樣量、供試品中含有量、對(duì)照品加入量、測(cè)定結(jié)果和回收率（%）計(jì)算值，以及回收率（%）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）或可信限（置信度，又稱置信水平，設(shè)定值是95%。）。對(duì)于校正因子，應(yīng)報(bào)告測(cè)定方法、測(cè)定結(jié)果和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）。目前八十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

一準(zhǔn)確度（

樣品中待測(cè)成分含量與回收率限度）目前八十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)二精密度精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性；在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱為中間精密度；在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性。含量測(cè)定和雜質(zhì)的定量測(cè)定應(yīng)考慮方法的精密度。目前八十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)二精密度1.重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度（相當(dāng)于100%濃度水平）的供試品，用至少測(cè)定6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。2.中間精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，應(yīng)設(shè)計(jì)方案進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。目前八十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)二精密度3.重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如，建立藥典分析方法時(shí)，通過協(xié)同檢驗(yàn)獲得重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗(yàn)的目的、過程和重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用樣品質(zhì)量的一致性及貯存運(yùn)輸中的環(huán)境對(duì)該一致性的影響（原文：應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用樣品本身質(zhì)量的均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素），以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。4.數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。樣品中待測(cè)定成分含量和精密度RSD可接受范圍參考表2。目前八十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

二精密度樣品中待測(cè)定成分含量和精密度RSD可接受范圍目前八十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)三專屬性鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢査和含量測(cè)定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法專屬性不夠，應(yīng)采用多種不同原理的方法予以補(bǔ)充。1.鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測(cè)成分的供試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，應(yīng)均呈負(fù)反應(yīng)。2.含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明方法的專屬性，并應(yīng)標(biāo)明諸成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。目前八十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)三專屬性在雜質(zhì)對(duì)照品可獲得的情況下，對(duì)于含量測(cè)定，試樣中可加入雜質(zhì)或輔料，考察測(cè)定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)或輔料的試樣比較測(cè)定結(jié)果。對(duì)于雜質(zhì)檢查，也可向試樣中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)之間能否得到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測(cè)定，與另一個(gè)經(jīng)驗(yàn)證了的方法或藥典方法比較結(jié)果。用強(qiáng)光照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑。含量測(cè)定方法應(yīng)比對(duì)二法的結(jié)果，雜質(zhì)檢查應(yīng)比對(duì)檢出的雜質(zhì)個(gè)數(shù)，必要時(shí)可采用光二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)，進(jìn)行峰純度檢查。目前八十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四檢測(cè)限檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。鑒別試驗(yàn)和雜質(zhì)檢查法，均應(yīng)通過測(cè)試確定方法的檢測(cè)限。常用的方法如下。1.直觀法（原文：非儀器分析目測(cè)法）用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。2.信噪比法用于能顯示基線噪聲的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。目前八十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四檢測(cè)限3.基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法DL=3.3δ/S（δ：響應(yīng)值的偏差；S：標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率）δ可以通過一系列方法測(cè)得，如：（1）測(cè)定空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差；（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或是截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差來代替剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差SE（即通過線性回歸法計(jì)算縱坐標(biāo)預(yù)測(cè)值所產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)誤差），在Excel中的函數(shù)是STEYX。目前九十頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)四檢測(cè)限4.數(shù)據(jù)要求上述計(jì)算方法獲得的檢測(cè)限數(shù)據(jù)需用實(shí)際樣品進(jìn)行驗(yàn)證。應(yīng)附測(cè)試圖譜，說明測(cè)試過程和檢測(cè)限結(jié)果。目前九十一頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)五定量限指試樣中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定方法的定量限。常用的方法如下。1.直觀法用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地定量測(cè)定的最低濃度或量。2.信噪比法用于能顯示基線噪聲的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地定量的最低濃度或量。一般以信噪比為10:1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限。目前九十二頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)五定量限3.基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法QL=10δ/S（δ：響應(yīng)值的偏差；S：標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率）δ可以通過一系列方法測(cè)得，如：（1）測(cè)定空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差；（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或是截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差來代替。4.數(shù)據(jù)要求上述計(jì)算方法獲得的定量限數(shù)據(jù)需用實(shí)際樣品進(jìn)行驗(yàn)證。應(yīng)附測(cè)試圖譜，說明測(cè)試過程和定量限結(jié)果。目前九十三頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)六線性線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系?？捎猛粚?duì)照品（或工作對(duì)照品）貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱取同一對(duì)照品（或工作對(duì)照品），制備一系列對(duì)照品（或工作對(duì)照品）溶液的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5份測(cè)試樣品。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算。必要時(shí)，還可采用描述濃度-響應(yīng)關(guān)系的非線性模型。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖（或其它數(shù)學(xué)模型）。目前九十四頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)七范圍指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。原料藥和制劑含量測(cè)定，范圍一般為測(cè)試濃度的80%~120%；制劑含量均勻度檢査，范圍一般為測(cè)試濃度的70%~130%,特殊劑型，如氣霧劑和噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬；溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定，范圍一般為限度的±20%，如規(guī)定了限度范圍，則應(yīng)為下限的-20%至上限的+20%；雜質(zhì)測(cè)定，范圍應(yīng)根據(jù)初步實(shí)際測(cè)定數(shù)據(jù)，擬訂為規(guī)定限度的±20%。如果含量測(cè)定與雜質(zhì)檢查同時(shí)進(jìn)行，用百分歸一化法，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。目前九十五頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)七范圍在中藥分析中，范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果及要求確定。對(duì)于有毒的、具特殊功效或藥理作用的成分，其驗(yàn)證范圍應(yīng)大于被限定含量的區(qū)間。溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定，范圍一般為限度的±20%。校正因子測(cè)定時(shí)，范圍一般應(yīng)根據(jù)其應(yīng)用對(duì)象的測(cè)定范圍確定。目前九十六頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)八耐用性耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為所建立的方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明，并注明可以接受變動(dòng)的范圍，可以先采用均勻設(shè)計(jì)確定主要影響因素，再通過單因素分析等確定變動(dòng)范圍。典型的變動(dòng)因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時(shí)間等。液相色譜法中典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成和pH值、不同廠牌或不同批號(hào)的同類型色譜柱、柱溫、流速等。氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相、不同類型的擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說明小的變動(dòng)能否通過設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以確保方法有效。目前九十七頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)分析方法驗(yàn)證表目前九十八頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)

已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需驗(yàn)證中間精密度。如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補(bǔ)充。視具體情況予以驗(yàn)證。美國藥典：分析方法驗(yàn)證是通過實(shí)驗(yàn)室研究建立工作特性滿足目標(biāo)分析要求的方法的過程。目前九十九頁\總數(shù)一百零七頁\編于五點(diǎn)第四部分穩(wěn)定性研究的關(guān)注點(diǎn)一、概述穩(wěn)定性是指藥物保持物理、化學(xué)、生物學(xué)和微生物學(xué)特性的能力。研究基于對(duì)生產(chǎn)工藝的系統(tǒng)研究和理解，通過設(shè)計(jì)試驗(yàn)獲得原料藥或制劑的質(zhì)量特性在各種環(huán)境因素（如溫度、濕度、光照等）的影響下隨時(shí)間變化的規(guī)律，并據(jù)此為處方、工藝、包裝、貯藏條件和復(fù)驗(yàn)期/有效期的確定提供支持性信息