臨床檢驗(yàn)主管技師全微生物講義

第一節(jié)一、的基本性物中，近75%的傳染病是由引起的。（200～300nm）、中型（80～160nm）和小型（18～30nm）。的形態(tài)大致可分為：球形或近基本結(jié)構(gòu)是指的和衣殼兩部分。的充滿一種類型的核酸，即DNA或RNA，構(gòu)成病毒的組。此外，還含有少數(shù)功能蛋白，主要是早期所需的一些酶。的衣殼是包圍在輔助結(jié)構(gòu)的包膜是成熟后以出芽方式釋放包圍在核衣殼外的宿主細(xì)胞成分。包膜嵌有病毒編碼的糖蛋白，具有的特異性。無(wú)包膜的衣殼上也有些突出物。（二）的增殖必須依賴宿主細(xì)胞，以特殊的自我方式進(jìn)行增殖。的周期一般6若進(jìn)入細(xì)胞后的環(huán)境不利于它的，不能組裝或釋放有性的顆粒，稱為頓挫。由于組不完整或位點(diǎn)改變而出不完整無(wú)性的，稱為缺損。抑制另一種增殖的現(xiàn)象，稱為的干擾現(xiàn)象。干擾現(xiàn)象是機(jī)體非特異性免疫的一部分，是抗免疫的重要內(nèi)容。除干擾現(xiàn)象外，當(dāng)一個(gè)細(xì)胞受到兩種或兩種以上的時(shí)，還可出現(xiàn)雙重、互補(bǔ)、加強(qiáng)、表型混合與雜交等現(xiàn)象。（三）的遺傳和變異在增殖過(guò)程中常發(fā)生組堿基序列的置換、缺失或插入，引起3.整合某些宿主細(xì)胞的過(guò)程中，的DNA片段可插入細(xì)胞DNA中，這種組與細(xì)胞組的重組過(guò)程稱為整合。（四）噬菌體除了以動(dòng)、植物細(xì)胞為宿主的外，尚有以細(xì)菌、真菌等為宿主的，這些侵襲種特異性是極為嚴(yán)格的，可用于進(jìn)行細(xì)菌的鑒定與分型。噬菌體細(xì)菌后產(chǎn)生兩種：一是噬菌體增殖并裂解細(xì)菌，建立溶菌周期；二是噬菌體在細(xì)菌內(nèi)不增殖，其核酸整合于細(xì)菌內(nèi)，并可隨細(xì)菌分（五）非尋常非尋常是比更小更簡(jiǎn)單的致病因子，又稱為亞因子，包括類、狀腦病，俗稱瘋牛病。人類的病（CJD）和Kuru病被認(rèn)為與朊粒有關(guān)。二、的分類與命DNA、RNA、DNA和RNA反轉(zhuǎn)錄三大類。目前認(rèn)為有24個(gè)科的能人類和動(dòng)物肝炎、性熱、皰疹等。第二節(jié)的實(shí)驗(yàn)診 一、標(biāo)本、運(yùn)送及處采樣時(shí)機(jī)應(yīng)在患者急性期或發(fā)病初期標(biāo)本（二）標(biāo)本的運(yùn)送及保存大多數(shù)抵抗力較弱，在室溫中易被滅活，所以標(biāo)本要快速傳遞，立即處理和接種。和運(yùn)送過(guò)程注意冷藏。如不能立即處理和接種，可在4℃保存數(shù)小時(shí)，長(zhǎng)時(shí)間保存需置-（三）標(biāo)本處理根據(jù)不同種類的標(biāo)本，運(yùn)用不同的處理方法。凝固的血液需先離心，得到的可組織培養(yǎng)包括培養(yǎng)、組織塊培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。前兩者只是在分離某些特殊時(shí)需要，目前常用的方法是細(xì)胞培養(yǎng)。關(guān)鍵是針對(duì)不同的欲檢測(cè)，選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)根據(jù)細(xì)胞的來(lái)3雞胚接種雞胚常用于、皰疹、痘類等的原代分離。根據(jù)種類的不同，接種雞胚的部位也各異。如乙型腦炎以接種卵黃囊為最佳，羊膜腔和尿囊腔適合于流感和腮腺炎病毒，絨毛對(duì)痘類和皰疹形成痘瘡非常敏感。動(dòng)物接種常用新生小鼠或乳鼠進(jìn)行分離。根據(jù)種類不同，需選擇相應(yīng)的敏感動(dòng)物，還需接種相應(yīng)的合適部位（鼻內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、腦內(nèi)、腹腔內(nèi)、靜脈等）。如嗜神經(jīng)（流行性乙性，腺可使細(xì)胞腫脹，顆粒增多，病變細(xì)胞成葡萄狀。核酸類型測(cè)定可將DNA與RNA進(jìn)行區(qū)分，耐酸試驗(yàn)可將腸道與鼻大致區(qū)分開。最終鑒定在初步鑒定的基礎(chǔ)上，選擇適當(dāng)?shù)膶W(xué)方法對(duì)分離株進(jìn)行最后鑒定，方法是將分離到的和已知的參考學(xué)試驗(yàn)。學(xué)診斷方法很多，常用的有中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血 （二）抗原檢查利用特異性免疫檢測(cè)標(biāo)本中的抗原。常用方法有：免疫熒光技術(shù)、酶免疫技術(shù)等。此外還有放射免疫法、反相間接血凝和對(duì)流免疫電泳等方法。對(duì)于一些型別不多或在一般細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中尚不能成功增殖的，直接檢測(cè)抗原是快速而實(shí)用的方法。試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)及免疫擴(kuò)散等，還可以利用放射免疫法及酶聯(lián)免疫吸附法。IgM復(fù)期雙份，恢復(fù)期IgG效價(jià)必須比急性期增高4倍或4倍以上時(shí)，才有診斷意義。（四）核酸檢測(cè)利用核酸雜交和PCR技術(shù)檢測(cè)特異片段。但檢出核酸并不等于檢第三節(jié)各類的簡(jiǎn)介形態(tài)與結(jié)構(gòu)：流感屬正黏科。顆粒具有多形性，一般為球形或絲狀，絲狀多見(jiàn)于1）：位于最內(nèi)層，是由核酸和白組成，流感的核酸為分節(jié)段的單負(fù)股RNA，節(jié)段間基質(zhì)蛋白（M蛋白）：位于包膜與之間具有保護(hù)與維持外形的作用。其抗原性穩(wěn)定，分型：根據(jù)白抗原和M蛋白的不同，將流感分為甲（A）、乙（B）、丙（C）型，甲型流感根據(jù)NA和HA的抗原性不同又分為若干亞型。變異：流感易發(fā)生變異，變異的物質(zhì)基礎(chǔ)是HA和NA，兩者變異可同時(shí)出現(xiàn)，也可單獨(dú)出現(xiàn)。抵抗力：不耐熱，對(duì)干燥、日光、紫外線以及、乙醇等均敏感標(biāo)本和處理：在發(fā)病急性期，以前3天為最好。合理相應(yīng)標(biāo)本，如鼻腔洗液、咽拭子、鼻拭子等，置于Hanks液中。的標(biāo)本應(yīng)立即放入冰壺中，速送。若48小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行接若血凝時(shí)，需用雞胚盲傳1～2次，仍不出現(xiàn)血凝陽(yáng)性者，方可判斷分離。也可接種原代猴PCR學(xué)診斷：需同時(shí)檢測(cè)急性期（5天以內(nèi)）和恢復(fù)期（2～4周），在相同條件下進(jìn)行血44臨床意義流感是在呼吸道柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)，隨飛沫進(jìn)入易感者呼吸道，依靠血凝素與黏膜柱狀上皮細(xì)胞相應(yīng)受體結(jié)合，細(xì)胞。主要在呼吸道增殖，很少入血，但代謝毒素樣物質(zhì)可度及范圍不如甲型。1997年在確診有人H5N1。生物學(xué)性狀屬副黏科、副黏亞科、副黏屬。形態(tài)結(jié)構(gòu)類似流感，但體積較大，RNA，HN（hemagglutininneuraminidase），具有血凝和神經(jīng)氨酸酶活性。具有流感HA的吸附作用，另一種為F（fusion）具有使進(jìn)入宿主細(xì)胞和使在宿主細(xì)胞之間的作用。副流感抵抗力弱，不耐酸，對(duì)熱敏感。標(biāo)本和處理：發(fā)病早期標(biāo)本，成人可采取鼻咽分泌物及咽嗽液標(biāo)本，年幼患者可用咽2ml直接檢測(cè)抗原：常用方法有間接免疫熒光法，也可用ELISA、放射免疫和電鏡技術(shù)直接檢測(cè)標(biāo)本中的抗原。學(xué)診斷：由于副流感各型之間，以及與其他之間存在某些共同抗原，學(xué)試驗(yàn)常有交叉反應(yīng)。故利用學(xué)診斷往往很。臨床意義副流感經(jīng)者呼吸道分泌物通過(guò)人與人密切接觸或氣溶膠，可引起兒童和成人上呼吸道，副流感可分為4個(gè)型，其中1型和2型是主要的致病因子，而且?？梢鹣?。3型常引起下呼吸道，4型只引起輕型上呼吸道。生物學(xué)性狀屬副黏科、肺亞科、肺屬。電鏡負(fù)染色呈球形，單個(gè)顆粒具有多形性。核酸為單負(fù)股RNA，不分節(jié)段。包膜上的G蛋白作用類似于流感的血凝素蛋白HA，包膜上的F蛋白是融合蛋白，介導(dǎo)穿入和細(xì)胞融合。G、F蛋白均具有較強(qiáng)的免疫原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體。在中和方面，抗F抗體比抗G抗體更強(qiáng)。標(biāo)本和處理：可采用鼻腔洗液或鼻咽拭子，置轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中冷藏（4℃）運(yùn)送至，盡離培養(yǎng)鑒定呼吸道合胞，不在雞胚中增殖，可在人類上皮細(xì)胞傳細(xì)胞系內(nèi)增殖37學(xué)診斷：常用中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)和酶免疫試驗(yàn)檢查中IgG、IgM及IgA。中和試驗(yàn)需雙份，檢測(cè)IgG滴度變化。檢測(cè)患者IgM、IgA可進(jìn)行早期診斷。臨床意義是引起嬰幼兒下呼吸道疾病的最常見(jiàn)的。最常見(jiàn)的途徑是經(jīng)飛沫傳染，最易引起嬰幼兒細(xì)支氣管炎和細(xì)支氣管，若不及時(shí)處理，率較高，較大兒童和成人主要引起上呼吸道感1生物學(xué)性狀是中等大小的無(wú)包膜，為單一線形雙股DNA。核衣殼呈20面體立體對(duì)稱。腺病毒不能在雞胚中增殖，只能在人源的組織細(xì)胞中增殖。細(xì)胞病變?yōu)槟[脹、變形、成葡萄串狀，細(xì)胞核中形成嗜堿性包涵體。腺對(duì)酸和乙醚不敏感，對(duì)低溫耐受，但56℃30分鐘可被滅活。標(biāo)本：在患者急性期內(nèi)標(biāo)本，如鼻咽拭子、鼻咽吸取物、直腸拭子、拭子或?qū)m頸直接檢測(cè)抗原：可以利用電鏡或免疫電鏡檢查，也可以利用免疫熒光技術(shù)及酶免疫技術(shù)，如EIA進(jìn)行抗原檢測(cè)。還可利用PCR技術(shù)或核酸探針進(jìn)行鑒定。分離與鑒定：適合于腺分離的細(xì)胞有傳代人細(xì)胞系HeLa、KB、A549以及原代人胚腎細(xì)胞等。2473～4測(cè)抗原的方法均可進(jìn)行鑒定。一般用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和EIA試驗(yàn)對(duì)腺進(jìn)行分屬。以中和試驗(yàn)或血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行型鑒定。3.臨床意義腺可常年流行，在各均有發(fā)現(xiàn)，常引起呼吸道疾病，上呼吸道多得對(duì)同型的持久免疫力。生物學(xué)性狀屬副黏科、麻疹屬。呈球形，為單負(fù)鏈RNA，三種衣殼蛋白（L、P、N），M（H）和融合蛋白（F）。H受體CD46結(jié)合，宿主。抵抗力不強(qiáng)，對(duì)陽(yáng)光和一般劑敏感。直接檢測(cè)：HE或Wright染色可見(jiàn)受細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞融合和多核巨細(xì)胞，胞質(zhì)和胞核內(nèi)有嗜酸性包涵體?？梢岳秒婄R或免疫電鏡檢查顆粒，也可以利用免疫熒光技術(shù)及酶免疫技術(shù)，如EIA進(jìn)行抗原檢測(cè)。還可利用PCR技術(shù)或核酸探針進(jìn)行鑒定。分離與鑒定：HeLa、Vero胚腎細(xì)胞等。鏡下觀察是否有細(xì)胞病變出現(xiàn)。以上直接檢測(cè)抗原的方法均可進(jìn)行鑒定。學(xué)診斷：雙份作補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，酶免疫測(cè)定及血凝抑制試驗(yàn)等。此外用ELISA法檢測(cè)IgM臨床意義麻疹是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的急性呼吸道傳染病。通過(guò)飛沫直接，冬春季易發(fā)。病毒侵入上呼吸道和瞼結(jié)膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，通過(guò)局部淋巴組織入血，出現(xiàn)第一次血癥，隨血流侵膜、呼吸道、消化道、血管等。麻疹還可引起較為少見(jiàn)的遠(yuǎn)期并發(fā)癥是亞急性硬化性全腦炎（SSPE） 為單正鏈RNA，外被包膜。包膜表面有血凝素 分離與鑒定：Vero學(xué)診斷：雙份作血凝抑制試驗(yàn)等。用ELISA法檢測(cè)特異性IgM可協(xié)助診斷?；純撼錾鷷r(shí)中有抗風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體和從獲得的IgG抗體，或羊水中有IgM抗體可判定為性臨床意義風(fēng)疹是要注意全身麻疹樣出疹伴耳后及枕下淋腫大為特征的急性呼吸道傳染病。病可引起性風(fēng)疹綜合征。出生后患性心臟病、耳聾、失明、智力等。（七）冠狀冠狀可能是成人和較大兒童上呼吸道的重要病因。主要引起普通感冒和咽炎。大約10%～30%的普通感冒由該引起。嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）可能是冠狀變種所（八）是甲型流感的一種亞型，可引起禽流行冒。目前發(fā)現(xiàn)最易感染人類的高致病性亞型有H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3等，其中H5N1亞型的患者病情個(gè)別的原因可能是發(fā)生了變異的。變異的可能性一是兩種以上的進(jìn)入同一細(xì)胞發(fā)生重組；二是位點(diǎn)由于某種因素的影響而發(fā)生突變使獲得了人的能力。常規(guī)全血、動(dòng)物的內(nèi)臟等。采用雞胚培養(yǎng)法分離。也可作抗原、抗體及核酸的檢腸道屬小RNA科腸道屬。由糞-口途徑。主要包括脊髓灰質(zhì)炎、、?？珊鸵恍┬履c道。（一）生物學(xué)性狀腸道由簡(jiǎn)單的衣殼和單股RNA組成。能在猴腎、人胚腎、人羊膜細(xì)胞、存數(shù)月。對(duì)酸及乙醚穩(wěn)定，對(duì)紫外線、干燥及熱敏感，56℃30標(biāo)本與處理合理相應(yīng)標(biāo)本，如腦脊液、血液、尿液、直腸拭子、咽喉拭子、鼻腔洗液復(fù)期的全血，分離置-20℃保存供檢測(cè)抗體用。直接檢測(cè)電鏡檢查及酶免疫可直接檢測(cè)腸道。但PCR在腸道檢測(cè)方面更具優(yōu)分離猴細(xì)胞系對(duì)脊髓灰質(zhì)炎，B組和ECHO具有良好的敏感性。人類二倍體成纖維細(xì)胞，如WI-38和HELF適合于A組的分離。將不同的標(biāo)本進(jìn)行相應(yīng)的處理，接種至三種試驗(yàn)只有中和試驗(yàn)較特異，但操作繁瑣。故學(xué)試驗(yàn)在腸道診斷方面的作用極其有限。（三）臨床意義腸道是人類最常見(jiàn)最重要的。腸道雖然以胃腸道作為開始，但卻很少引起胃腸道疾病。的靶以神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉和其他系統(tǒng)為主。其中脊髓灰質(zhì)炎可損害脊髓、ECHO等與脊髓灰質(zhì)炎相似，以幼年兒童最常見(jiàn)。和嚴(yán)重性隨年泌尿生殖道等部位的標(biāo)本中檢出腸道，就意味著真正的侵入。輪狀生物學(xué)性狀輪狀呈球形，含雙鏈RNA，外被雙層衣殼，內(nèi)層核衣殼的殼粒呈放射狀排列，電鏡下猶如車輪狀外形。常用的細(xì)胞為原代猴腎細(xì)胞和傳代猴腎細(xì)胞。抵抗力強(qiáng)，耐酸堿，耐乙醚。56℃30分鐘可滅活。可被劑滅活。ELISA臨意義輪是起嬰幼急性瀉主要病因在發(fā)展國(guó)家高。發(fā)病和幼兒病死率僅于呼吸A組引起嬰幼兒急胃腸炎，以溫帶地區(qū)的秋冬季為。B組引起人腹瀉黃曾歸類為蟲媒B組。此類是指一大群通過(guò)的節(jié)肢動(dòng)物而疾病的CE分離培養(yǎng)與鑒定：將患者或患者腦組織懸液上清接種乳鼠腦內(nèi)，接種后幾天便，細(xì)胞吸附試驗(yàn)證實(shí)的增殖，陽(yáng)性即可傳代或鑒定。動(dòng)物接種或細(xì)胞培養(yǎng)陽(yáng)性者以中和試驗(yàn)、血凝抑制臨床意義流行性乙型腦炎可通過(guò)三帶喙庫(kù)蚊叮咬，引起流行性乙型腦炎，簡(jiǎn)稱乙腦。豬有少數(shù)發(fā)生腦炎。侵入腦組織內(nèi)增殖，造成腦實(shí)質(zhì)病變，表現(xiàn)為高熱、驚厥或癥狀。生物學(xué)特性森林腦 微生物檢驗(yàn)與乙型腦炎相似臨床意義森林腦炎可經(jīng)蜱，引起人類森林腦炎。森林硬蜱為主要媒介和宿主。高熱、頭痛、腦膜刺激征、等。生物學(xué)性狀形態(tài)結(jié)構(gòu)與乙腦相似，根據(jù)抗原性不同，可分為1、2、3、4，四個(gè)型。微生物檢驗(yàn)取患者第1～3天的接種白紋伊蚊C6/36株細(xì)胞等以分離?；颊?4倍或4倍以上增高則有診斷意義，也可利用ELISA及斑點(diǎn)免疫測(cè)定法檢測(cè)特異性IgM抗體，這有助于登臨床意義登革于人類和猴，通過(guò)埃及伊蚊和白紋伊蚊等。后，可在毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞中增殖，然后液播散，引起發(fā)熱、肌肉和關(guān)節(jié)酸痛、淋腫脹及皮膚出血、休克等。臨分為普通型登革熱和登革熱/登革休克綜合征兩個(gè)類型。前者病情較輕，后者病生物學(xué)性狀單純皰疹為有包膜的DNA，組由兩個(gè)互相連接的長(zhǎng)片段（L）和短片胞等。細(xì)胞被后很快發(fā)生病變。如細(xì)胞腫脹、變圓、出現(xiàn)嗜酸性核內(nèi)包涵體。該可的動(dòng)物種類較多，如家兔、豚鼠、小鼠等。該有兩種型，HSV-1和HSV-2。兩型的DNA有5%同源性。標(biāo)本和處理：合理相應(yīng)標(biāo)本，皰液、唾液、尿液、血液、腦脊液、或?qū)m頸拭直接檢查：采用皰疹液、皮膚黏膜病灶刮取物、活檢組織等，利用免疫電鏡檢查顆粒片，采用直接免疫熒光法或酶免疫法進(jìn)行抗原檢測(cè)。分離及鑒定：分離培養(yǎng)是HSV診斷的最敏感的方法，HSV-1和HSV-2在細(xì)胞培HSVELISAHSVHSV-1HSV-2反應(yīng)，該試驗(yàn)難以區(qū)分兩型的。由于HSV抗體出現(xiàn)的特點(diǎn)，學(xué)試驗(yàn)無(wú)助于早期診斷及指導(dǎo)抗臨床意義HSV可通過(guò)直接密切接觸和性接觸，也可經(jīng)飛沫及垂直。HSV-1常局限在口咽部，通過(guò)唾液或呼吸道分泌物，引起口咽部皰疹、皰疹性角結(jié)膜炎、腦炎等。HSV-1的感染多見(jiàn)于半歲以后的嬰幼兒，大多數(shù)呈隱染。HSV-2的多見(jiàn)于以后的患者，主要通過(guò)生殖道途徑，主要表現(xiàn)為皰瘆。孕婦在胚胎期HSV，有引起、早產(chǎn)、死胎或畸形、智力低下等生物學(xué)性狀水痘帶狀皰疹（VZV）的基本特性與HSV相似。此只有一個(gè)型，為線狀雙股DNA 。一般實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及雞胚對(duì)VZV均不敏感。VZV能在人胚二倍體腎細(xì)胞（HFDK）或人胚二倍體肺（1）直接檢測(cè)或抗原：刮取新鮮病灶基底部細(xì)胞涂片，用直接或間接免疫熒光法檢測(cè)病變細(xì)胞PCRVZV。（2）分離：取水痘內(nèi)容物（要求4天以內(nèi)的內(nèi)容物）及腸炎活檢組織接種人胚腎或人胚肺3～7臨床意義VZV可引起水痘和帶狀皰疹。前者為引起，后者為復(fù)發(fā)所致。水痘主要發(fā)生于兒童，兒童初次VZV大約有1周的潛伏期，然后皮膚出現(xiàn)斑疹、水皰疹，可進(jìn)一步發(fā)展為膿皰疹并生物學(xué)性狀巨細(xì)胞（CMV）的形態(tài)與組結(jié)構(gòu)與HSV極為相似，但的宿主范圍及細(xì)胞范圍均狹窄，且種屬特異性高，即人CMV（HCMV）只能人。體外培養(yǎng)HCMV只有在人成纖維細(xì)胞中才能增殖。在細(xì)胞培養(yǎng)中增殖緩慢，初次分離需經(jīng)2～6可出現(xiàn)細(xì)胞病變，細(xì)胞病變特點(diǎn)為腫脹、核變大形成巨大細(xì)胞，核內(nèi)有致密的嗜堿性包涵體，形似貓頭鷹眼特征56℃30pH、乙CMV標(biāo)本：分離可采取患者尿液、口腔拭子、外周血白細(xì)胞等。學(xué)診斷可采取患者血直接檢查：活檢組織切片或其他標(biāo)本涂片，用HE等染色觀察巨大細(xì)胞和細(xì)胞核內(nèi)的包涵HCMVPCRHCMV過(guò)多種途徑。有性或獲得性細(xì)胞免疫缺陷的兒童或成人，如及移植患者，CMV很免疫功能缺損的：高危人群包括移植的受者、接受化療放療的患者等。HCMV所致的間質(zhì)性是骨髓移植受者的首位死因。AIDS患者HCMV，以肺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道最為常見(jiàn)。1）：妊娠時(shí)，發(fā)生CMV，經(jīng)胎盤傳至引起產(chǎn)后：多數(shù)產(chǎn)后主要是通過(guò)與排的密切接觸而獲得（四）EB生物學(xué)性狀 相似 養(yǎng)系統(tǒng)，不能用常規(guī)的皰疹培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。一般用人臍巴細(xì)胞或從外周血分離的B淋巴細(xì)胞根據(jù)抗原表達(dá)時(shí)所處的增殖周期的不同階段，將EBV抗原分為3類。1）潛伏期表達(dá)的抗EBV（VCA）EBV（MA）。（1）直接檢查：利用抗補(bǔ)體免疫熒光法檢查淋巴細(xì)胞或上皮細(xì)胞EB核抗原。利用核酸雜交和PCR或RT-PCR技術(shù)檢測(cè)。巴細(xì)胞對(duì)EB進(jìn)行分離培養(yǎng)，孵育4周，陽(yáng)性培養(yǎng)物，通過(guò)抗補(bǔ)體免疫熒光法進(jìn)行EB鑒定。（3）學(xué)診斷：嗜異性抗體檢測(cè)可用于輔助診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥。進(jìn)行針對(duì)VCA、EA和EBNA的抗體測(cè)定，不同疾病患者的體內(nèi)針對(duì)EBV不同的抗原成分所產(chǎn)生的抗體的組成及水平均有一定臨床意義EBV流行廣泛，幼兒后多數(shù)無(wú)明顯癥狀，但終生攜帶，或引起輕度咽炎和上呼吸道。發(fā)生，約有50%出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥。主要通過(guò)唾液，也可因輸血傳染。EBV主要B細(xì)胞，與EB有關(guān)的疾病主要有：傳染性單核細(xì)胞增多癥、非洲兒童惡性生物學(xué)性狀甲型肝炎（HAV）屬小RNA科，無(wú)包膜，為單正股RNA。目前世界上分離的HAV均為一個(gè)型。HAV的抵抗力較其他小RNA強(qiáng)，60℃加熱10～12小時(shí)后仍具有性，85℃加熱立即滅活pH3微生物檢驗(yàn)甲型肝炎患者病期不長(zhǎng)，預(yù)后良好，一般不需要進(jìn)行病原學(xué)檢查。微生物檢驗(yàn)以測(cè)定抗原或抗體為主。早期一般可用RIA或ELISA檢測(cè)患者中抗-HAVIgM。它出現(xiàn)早，快，是HAV新近的重要指標(biāo)。對(duì)于了解既往史或進(jìn)行流行病學(xué)，需檢測(cè)抗-HAVIgG。也可利用ELISAEIA、RT-PCR、核酸雜交技術(shù)直接檢測(cè)抗原。臨床意義HAV可引起甲型肝炎，HAV主要通過(guò)糞-口，傳染源多為人類，潛伏期15～50天，平均28天。常在患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）升高前5～6天就存在于患者的和糞便中，2～3周后，隨特異性抗體的產(chǎn)生，和糞便的傳染性逐漸。甲型肝炎患者的糞便污染水源、食物以及形態(tài)與結(jié)構(gòu)：乙型肝炎（HBV）的患者，在電鏡下可見(jiàn)3種特有顆粒。①大球形顆粒：為具有性的HBV完整顆粒，呈球形，又稱Dane顆粒。它的外衣殼，相當(dāng)于一般的包膜，HBV的表面抗原（HBsAg）鑲嵌于包膜的脂質(zhì)雙層中。去除的外衣殼，即出殼，它是HBV的抗原成分：HBVHBsAg、HBcAgHBeAg。1）HBsAg是HBV的主要標(biāo)志，由DNA的S區(qū)編碼。 IgG在中持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，抗-HBcIgM提示HBV處于狀態(tài)HBeAg為可溶性蛋白質(zhì)，游離在血中，其消長(zhǎng)與體及DNA多聚酶的消長(zhǎng)基本一致，故HBeAg已作為HBV及具有強(qiáng)性的一個(gè)指標(biāo)。由DNA的CORF編碼。檢查方法：臨床目前主要靠RIA和ELISA等學(xué)方法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、抗-HBs、-HBc、抗-HBe。其中HBsAg的檢測(cè)最為重要，可發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀攜帶者，是獻(xiàn)血者篩選的必檢指標(biāo)。近年來(lái)PCRHBVDNA臨床意義乙型肝炎可致乙型肝炎。是通過(guò)破損的皮膚和黏膜侵入機(jī)體，傳染源是HBV攜帶者和患者的血液、唾液、和分泌物等。HBV的途徑大致可分為血液、血制品、性傳生物學(xué)性狀丙型肝炎（HCV）是小的有包膜的單正股RNA，可黑猩猩并在體內(nèi)連續(xù)傳HCV20型。其抗原成分主要包括核衣殼蛋白，包膜蛋白及非結(jié)構(gòu)蛋白。HCV微生物檢驗(yàn)?zāi)壳芭R常用的HCV檢測(cè)方法主要有兩類：學(xué)方法及PCR方法。學(xué)方法主要是以EIA測(cè)定抗-HCV。分子生物學(xué)方法檢測(cè)HCVRNA。HCV抗體檢測(cè)主要是ELISA法作為篩選試驗(yàn)，采HCV的亞臨床，臨無(wú)自覺(jué)癥狀，而ALT不正常，是丙型肝炎的主要傳染源。丙型肝炎根據(jù)臨生物學(xué)特性丁型肝炎（HDV）為球形，外被HBsAg包繞，含HDV抗原（HDAg）和HDV-RNA組，組為一單負(fù)鏈環(huán)狀RNA。HDV不能獨(dú)立，需要HBV輔助才能增殖。對(duì)HDV敏感的動(dòng)物有微生物檢驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)HDV的學(xué)標(biāo)志物以及HDVRNA，結(jié)合HBV的檢測(cè)，可作出的診斷HDVRNART-PCRHDVRNAIgG出現(xiàn)較遲，在恢復(fù)期出現(xiàn)。丁型肝炎抗體不能清除，如持續(xù)高效價(jià)，可作為慢性的指標(biāo)。利用ELISA等方法檢測(cè)患者中抗-HDVIgM或抗-HDVIgG。通過(guò)檢測(cè)抗-HBsIgM或IgG以及HBeAg和抗-HBe，作出同步和的診斷。臨床意義HDV可引起與HBV相關(guān)聯(lián)的急性和慢性肝病。HDV通常引起嚴(yán)重和進(jìn)行性的肝病。HDV方式主要是，也可通過(guò)密切接觸與母嬰間垂直。HDV只有在了HBV的人群或是與HBV同時(shí)侵入才能發(fā)生。根據(jù)與HBV的關(guān)系，可將HDV分為兩種類型：同步指與HBV同時(shí)或者先后；指在慢性HBV的基礎(chǔ)上發(fā)生HDV。極易導(dǎo)致慢性化。生物學(xué)特性戊型肝炎（HEV）為球形，無(wú)包膜，組為正單股RNA，體外培養(yǎng)不易獲得成功，敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為靈長(zhǎng)目。特別是獼猴和黑猩猩。HEVHEVPCRHEVRNA，但臨床常用的診斷方法是檢測(cè)中的抗HEVIgM或IgG。臨床意義HEV可引起戊型肝炎。HEV主要經(jīng)糞-口途徑，患者多見(jiàn)于成人，未成年者大多為隱染。戊型肝炎的潛伏期約為10～60天，潛伏期末和急性期初的患者糞便中量較大，傳染性最反轉(zhuǎn)錄科的因帶有以RNA為模板合成DNA的反轉(zhuǎn)錄酶而得名。分為三個(gè)亞科七個(gè)屬人類免疫缺陷人類免疫缺陷（HIV）在分類學(xué)上屬反轉(zhuǎn)錄科慢亞科慢屬。已發(fā)現(xiàn)有HIV-1和HIV-2兩型。HIV-1是引起全球流行的病原體，HIV-2主要局限于西部非洲。形態(tài)結(jié)構(gòu)：為RNA，呈球形，含有RNA、反轉(zhuǎn)錄酶和核衣殼蛋白，外被脂蛋白包膜，gp120gp41gP120CD4gp41（2）組結(jié)構(gòu)：由兩條拷貝的單股正鏈RNA在5’端通過(guò)氫鍵結(jié)合而形成的二聚體。組從5’至3’端依次排列為L(zhǎng)TR、gag、pol、env、LTR，還有6個(gè)調(diào)節(jié)，即tat、rev、nef、vif、vpr、vpu/vpx。gag編碼的蛋白，其中衣殼蛋白p24特異性最強(qiáng)。pol編碼所需的類。env編碼合成兩種包膜糖蛋白gp120和gp41。（3）的：包膜糖蛋白gP120與細(xì)胞上的CD4受體結(jié)合，包膜與細(xì)胞膜發(fā)生融合。核衣殼進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)脫殼，釋放RNA。在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以RNA為模板進(jìn)行。子代RNA與一些合成的結(jié)構(gòu)蛋白裝配成核衣殼，從宿主細(xì)胞膜獲得包膜組成完整的有性的子代，以出芽方受體與細(xì)胞親嗜性：HIVCD4T巨噬細(xì)胞亞群。皮膚的Langerhans細(xì)胞、淋濾泡的樹突狀細(xì)胞、腦小膠質(zhì)細(xì)胞等也是的對(duì)象。CD4分子是HIV的主要受體，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)兩種輔助受體CXCR4和CCR5。前者是HIV的親T細(xì)胞株的輔助受體，后者是HIV的親巨培養(yǎng)特性：HIV的宿主范圍和細(xì)胞范圍較窄。在體外僅表面有CD4受體的T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。常用新鮮分離的正常人T細(xì)胞或患者自離的T細(xì)胞培養(yǎng)。抵抗力：抵抗力較弱，56℃30分鐘可滅活?？杀粍缁睢５谑覝鼗钚钥杀３郑?）標(biāo)志是指培養(yǎng)或用分子生物學(xué)方法直接從者體內(nèi)分離HIV或其物質(zhì)抗體檢測(cè)：抗蛋白p24及其前體P55的抗體在中出現(xiàn)最早，隨后出現(xiàn)抗包膜糖蛋白②確證試驗(yàn)免疫印跡試驗(yàn)（Westernbolt，WB）臨床意義HIV是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS，）的病原體。AIDS是以CD4細(xì)胞為者和患者。途徑主要有：性接觸、血液、母嬰。從HIV到發(fā)展為典型AIDS分為4個(gè)時(shí)期，即急染期、無(wú)癥狀期、相關(guān)綜合征、（完全型）。HIVHIVCD4T；HIV能；HIV誘發(fā)自身免疫性疾病及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；HIV導(dǎo)致CD8T細(xì)胞喪失抗活性等。機(jī)體HIV后可產(chǎn)生多種抗體，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答，但依然無(wú)法清除，這與（一）生物學(xué)性狀狂犬病外形似狀，體內(nèi)含單負(fù)股RNA，外面是脂蛋白包膜，其表面有許多糖蛋白刺突，與的性和毒力有關(guān)。是一種嗜神經(jīng)毒。該可的動(dòng)物范圍較廣。在觀察動(dòng)物人類被犬和其他動(dòng)物咬傷后，將該動(dòng)物觀察，若7～10天不發(fā)病，一般認(rèn)為該印片、切片檢查若以上動(dòng)物在觀察期間發(fā)病，即將其殺死，取海馬回部組織作切片或涂片，用HE染色檢查內(nèi)基小體或用直接熒光抗體法（DFA）檢測(cè)抗原，或用ELISA法查抗原。細(xì)胞培養(yǎng)將的動(dòng)物或人類的相應(yīng)組織懸液接種敏感細(xì)胞，培養(yǎng)40～48小時(shí)后，用DFA進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)，如果進(jìn)行第二代培養(yǎng)，經(jīng)3～4天，再用DFA檢查是否有生長(zhǎng)，如果二次培養(yǎng)均陰（三）臨床意義狂犬病可引起人類狂犬病，人類狂犬