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2022-2023學(xué)年高二下生物期末模擬試卷注意事項(xiàng)1.考試結(jié)束后,請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請(qǐng)務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫(xiě)在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對(duì)應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿(mǎn)、涂黑;如需改動(dòng),請(qǐng)用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無(wú)效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫(xiě)清楚,線條、符號(hào)等須加黑、加粗.一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.從種植于室內(nèi)普通光照和室外強(qiáng)光光照下的同種植物分別提取葉片的葉綠體色素,用紙層析法分離,結(jié)果如圖(注顏色淺代表含量相對(duì)較少)。下列判斷正確的是A.室內(nèi)植物葉片偏黃B.室外植物葉片偏綠C.室外植物葉片胡蘿卜素含量>葉黃素含量D.室內(nèi)植物葉片葉綠素a含量>葉綠素b含量2.一種觀賞植物,純合的藍(lán)色品種與純合的紅色品種雜交,F(xiàn)1為藍(lán)色,F(xiàn)1自交,F(xiàn)2為9藍(lán)∶6紫∶1紅。若將F2中的紫色植株用紅色植株授粉,則后代表現(xiàn)型及其比例是()A.2紅∶1藍(lán) B.2紫∶1紅C.2紅∶1紫 D.3紫∶1藍(lán)3.將某一植物葉片置于適宜條件下,測(cè)得不同的細(xì)胞間隙CO2濃度下葉肉細(xì)胞中C5的含量變化如圖所示,下列推測(cè)錯(cuò)誤的是()A.AB段,葉肉細(xì)胞C3化合物的含量增加B.BC段,光合作用強(qiáng)度等于呼吸作用強(qiáng)度C.AB段,CO2固定速率比C3的還原速率快D.BC段,可能是有關(guān)酶的數(shù)量限制了光合速率4.下列對(duì)于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說(shuō)法,不正確的是()A.供體母牛必須是同一物種的良種B.受體母牛必須是同一物種的良種C.供體公牛必須是同一物種的良種D.受體母??梢允峭锓N的一般健康牛5.關(guān)于人體脂肪細(xì)胞的敘述,正確的是A.蛋白質(zhì)含量遠(yuǎn)高于肝細(xì)胞 B.ATP和ADP之間的轉(zhuǎn)化速率大于肝細(xì)胞C.含有大量糖原儲(chǔ)藏能量 D.蘇丹Ⅲ染色后可觀察到橘黃色泡狀結(jié)構(gòu)6.實(shí)驗(yàn)小組將用H218O配制的完全培養(yǎng)液栽培的某種植物和一只小鼠放入密閉的玻璃小室內(nèi),適宜條件下置于室外一晝夜。下列分析錯(cuò)誤的是A.植物和小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的[H]都來(lái)自水中的氫B.在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,小鼠體內(nèi)會(huì)出現(xiàn)含有放射性的物質(zhì)C.與白天相比,晚上植物細(xì)胞中[H]的合成可能減少D.植物傳遞給小鼠并被其利用的含有18O的物質(zhì)可能不止一種7.下圖甲、乙兩個(gè)箱子中,放置了兩種相同顏色的小球。若用裝置表示性狀分離比的模擬實(shí)驗(yàn),下列分析不正確的是A.甲、乙箱子可分別表示雌、雄生殖器官,小球代表雌、雄配子B.從箱子中抓取小球的過(guò)程模擬了等位基因的分離及雌、雄配子的隨機(jī)結(jié)合C.甲、乙箱子中兩種顏色小球數(shù)目之比均為1:1,且兩箱子中小球總數(shù)一定要相等D.若其中一個(gè)箱子換為另外兩種顏色的小球數(shù)量相同,可模擬非同源染色體上非等位基因的自由組合8.(10分)某蛋白質(zhì)分子含有N條肽鏈,已知它共有M個(gè)氨基酸組成,則此蛋白質(zhì)中至少含有的氧原子數(shù)與氮原子數(shù)共有()A.(M+N)個(gè) B.(2M-N)個(gè) C.(2N+M)個(gè) D.(2M+N)個(gè)二、非選擇題9.(10分)回答下列有關(guān)泡菜制作并檢測(cè)亞硝酸鹽含量的有關(guān)問(wèn)題。(1)泡菜的制作離不開(kāi)_______菌,其代謝類(lèi)型是_______,因此制作過(guò)程中_______(填“需要”或“不需要”)對(duì)泡菜壇進(jìn)行密封處理。有時(shí)還需要加入一些“陳泡菜水”,目的是_______。(2)在泡菜腌制過(guò)程中,有機(jī)物的干重將_______,種類(lèi)將_______,其亞硝酸鹽含量的變化規(guī)律是_______。(3)檢測(cè)亞硝酸鹽含量時(shí),對(duì)氨基苯磺酸溶解于_______中,與亞硝酸鹽發(fā)生________反應(yīng)后,與_______結(jié)合形成_______色染料。(4)下圖是制備的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)顯色液,其中①號(hào)管中不含亞硝酸鹽,作為_(kāi)______對(duì)照。(5)將制備的無(wú)色透明的泡菜樣品處理液顯色反應(yīng)后,與上述已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行目測(cè)比較,找出與標(biāo)準(zhǔn)液最_______的顏色,記錄對(duì)應(yīng)的亞硝酸鈉含量,可以_______出泡菜中亞硝酸鹽的含量。10.(14分)由臘梅凝集素基因控制合成的某種蛋白質(zhì)能與蚜蟲(chóng)腸道粘膜上的受體結(jié)合,從而抑制蚜蟲(chóng)吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。通過(guò)基因工程將臘梅凝集素基因轉(zhuǎn)入煙草,可增強(qiáng)其抗蚜蟲(chóng)的能力。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,能以臘梅凝集素基因產(chǎn)生的mRNA作為模板按照______________原則獲得cDNA片段,以獲取臘梅凝集素基因片段。為使臘梅凝集素基因在煙草細(xì)胞中高效表達(dá),需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的__________和_________之間。(2)將表達(dá)載體導(dǎo)入煙草細(xì)胞常用的方法是______________,在該過(guò)程中需添加酚類(lèi)物質(zhì),目的是______________。將臘梅凝集素基因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞內(nèi)并成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)的過(guò)程,在基因工程中稱(chēng)為_(kāi)_____________。(3)將轉(zhuǎn)基因煙草幼苗與非轉(zhuǎn)基因煙草幼苗隔區(qū)種植,并接種等量的蚜蟲(chóng),一定時(shí)間后用______________法統(tǒng)計(jì)蚜蟲(chóng)的種群密度,若___________________________,則說(shuō)明轉(zhuǎn)基因煙草具有抗蚜蟲(chóng)能力。11.(14分)基因工程能夠賦予生物新的遺傳特性,創(chuàng)造出符合人們需要的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)從基因文庫(kù)中提取的目的基因可通過(guò)PCR進(jìn)行擴(kuò)增,簡(jiǎn)要敘述擴(kuò)增目的基因的大致過(guò)程:目的基因受熱變性后解鏈為單鏈,________與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在Tap酶作用下延伸,如此重復(fù)循環(huán)多次。在PCR過(guò)程中,兩個(gè)引物是___________的結(jié)合位點(diǎn),也是子鏈延伸的起點(diǎn),dNTP在此過(guò)程中的作用是__________________________________________。(2)目前在PCR反應(yīng)中使用Tap酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶,其主要原因是________(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插入到植物細(xì)胞染色體的DNA上,這種方法的目的是_________。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞采用最多的方法是顯微注射法,該過(guò)程采用顯微注射器直接將_________注入到受精卵細(xì)胞中。(4)“中心法則”是基因工程興起的基礎(chǔ)理論之一,克里克提出的“中心法則”闡明的遺傳信息的流動(dòng)方向是__________________(用連接)。12.植物細(xì)胞受損后通常會(huì)釋放出酚氧化酶,使無(wú)色的酚氧化生成褐色的物質(zhì)。人們利用酚氧化酶的功能和特性加工制作商品。請(qǐng)分析回答問(wèn)題:(1)植物細(xì)胞中的酚類(lèi)物質(zhì)與酚氧化酶在細(xì)胞質(zhì)中是分隔開(kāi)的,是因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)具有____________________系統(tǒng)。(2)把含有酚氧化酶的提取液作如下表的處理:步驟試管①酚氧化酶提取液的處理②加入緩沖液③加入酚類(lèi)底物實(shí)驗(yàn)后的顏色A不作處理2mL2mL褐色B加入蛋白酶,10min2mL2mL無(wú)色C加入三氯乙酸(強(qiáng)酸),10min2mL2mL?酚氧化酶的作用機(jī)理是_____________________。實(shí)驗(yàn)后試管C中的顏色為_(kāi)_________________。試管A、B對(duì)照,說(shuō)明酚氧化酶的化學(xué)本質(zhì)是_______________。試管A、C對(duì)照,能獲得的結(jié)論是_____________。(3)茶樹(shù)葉細(xì)胞中存在眾多種類(lèi)的酚類(lèi)物質(zhì)與酚氧化酶。顏色為綠色的茶制取過(guò)程中必須先進(jìn)行_______________(手工或機(jī)械揉搓;熱鍋高溫炒制;曬干、炒干)工藝過(guò)程,這一過(guò)程的原理是_______________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
提取葉片的葉綠體色素,用紙層析法分離,濾紙條上從上到下四條色素帶分別是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b?!驹斀狻客ㄟ^(guò)圖示可知,室內(nèi)植物葉綠素較多,葉片偏綠,A錯(cuò)誤;通過(guò)圖示可知,室外植物葉綠素較少,室外植物葉片偏黃,B錯(cuò)誤;室外植物葉片胡蘿卜素含量<葉黃素含量,C錯(cuò)誤;室內(nèi)植物葉片葉綠素a含量>葉綠素b含量,D正確。【點(diǎn)睛】學(xué)生對(duì)葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)理解不清葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)結(jié)果2、B【解析】
試題分析:設(shè)用A、a和B、b這兩對(duì)基因表示,根據(jù)F2為藍(lán):紫:紅=9:6:1的比例可以確定雙顯性的為藍(lán)色,雙隱性的為紅色,其它均為紫色.由此可確定F2中的紫色植株的基因型有1/16AAbb、2/16Aabb、1/16aaBB、2/16aaBb,即比例為1:2:1:2,它與aabb的紅色植株授粉,后代只有紫色植株和紅色植株,其中紅色植株有2/6×1/2+2/6×1/2=1/3,則紫色植株為2/3,則后代表現(xiàn)型及其比例是紫色:紅色=2:1,故選B?!军c(diǎn)睛】本題考查基因分離定律和自由組合規(guī)律的應(yīng)用,意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn),通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力;理論聯(lián)系實(shí)際,綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問(wèn)題的能力。3、B【解析】
光合作用的暗反應(yīng)過(guò)程中,二氧化碳首先與五碳化合物結(jié)合形成三碳化合物,三碳化合物經(jīng)過(guò)還原后形成碳水化合物或五碳化合物。據(jù)圖分析:在一定的范圍內(nèi)隨葉肉細(xì)胞間的二氧化碳濃度的升高,五碳化合物的含量逐漸減小,超過(guò)一定的范圍(二氧化碳飽和點(diǎn))五碳化合物含量會(huì)維持在一定的水平上?!驹斀狻緼、AB段,隨葉肉細(xì)胞間隙的二氧化碳相對(duì)濃度升高,二氧化碳的固定加快,C3化合物的含量增加?,A正確;B、BC段,葉肉細(xì)胞間隙的二氧化碳的相對(duì)濃度較高,C5含量基本維持不變,表示達(dá)到二氧化碳飽和點(diǎn),此時(shí)光合速率應(yīng)大于呼吸速率,葉片的凈光合速率大于零,B錯(cuò)誤;C、AB段,C5含量降低,說(shuō)明CO2固定速率比C3的還原速率快,C正確;D、BC段CO2濃度不再是光合作用的限制因素,可能是有關(guān)酶的數(shù)量或光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP的數(shù)量限制了光合速率,D正確。故選B。4、B【解析】供體母牛和公牛必須是同一物種的良種,這樣才可以提供良種的胚胎,A、C項(xiàng)正確;受體母牛需要有健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力,這樣才能完成繁重而漫長(zhǎng)的妊娠和育仔的任務(wù),因此受體母牛不必是同一物種的良種,可以是同物種的一般健康牛,B項(xiàng)錯(cuò)誤,D項(xiàng)正確。【考點(diǎn)定位】胚胎移植?!久麕燑c(diǎn)睛】理解胚胎移植的概念,熟記供體和受體必備的條件即可準(zhǔn)確作答。5、D【解析】
脂肪遇蘇丹Ⅲ呈橘黃色,遇蘇丹Ⅳ呈紅色?!驹斀狻緼.脂肪細(xì)胞中脂肪含量遠(yuǎn)高于肝細(xì)胞,A錯(cuò)誤;B.肝細(xì)胞中ATP和ADP之間的轉(zhuǎn)化速率大于脂肪細(xì)胞,B錯(cuò)誤;C.脂肪細(xì)胞中不含有糖原,C錯(cuò)誤;D.蘇丹Ⅲ染色后可觀察到橘黃色泡狀結(jié)構(gòu),D正確。故選D。6、A【解析】
H218O可以同時(shí)參與植物的光合作用和呼吸作用,小鼠只能進(jìn)行呼吸作用,故H218O只能參與小鼠的呼吸作用。【詳解】A、植物可以進(jìn)行呼吸作用和光合作用,[H]來(lái)自于水和呼吸底物如葡萄糖,小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的[H]來(lái)自水和葡萄糖中的氫,A錯(cuò)誤;B、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,H218O可以參與小鼠體內(nèi)的呼吸作用,會(huì)出現(xiàn)含有放射性的物質(zhì)如二氧化碳,B正確;C、與白天相比,晚上植物細(xì)胞只能進(jìn)行呼吸作用,[H]的合成可能減少,C正確;D、植物傳遞給小鼠并被其利用的含有18O的物質(zhì)可能有氧氣、水、有機(jī)物等,D正確。故選A。7、C【解析】實(shí)驗(yàn)中甲、乙容器分別代表某動(dòng)物的雌、雄生殖器官,兩個(gè)容器內(nèi)的小球分別表示雌、雄配子,A正確;隨機(jī)從兩個(gè)小桶(代表雌、雄生殖器官)中抓取兩個(gè)小球(代表配子)模擬的是遺傳因子組成各有兩種(D和d)的雌雄配子隨機(jī)結(jié)合,B正確;兩小桶中小球數(shù)可以不相等,但每個(gè)小桶中兩種顏色的小球數(shù)目必須相等,C錯(cuò)誤;若其中一個(gè)箱子換為另外兩種顏色的小球球數(shù)量相同,可以表示兩對(duì)等位基因,即可模擬非同源染色體上非等位基因,D正確。8、D【解析】
已知某蛋白質(zhì)分子含有N條肽鏈,由M個(gè)氨基酸組成,則共形成M-N個(gè)肽鍵,每個(gè)肽鍵含有一個(gè)氧原子,每條肽鏈的末端含有一個(gè)羧基(兩個(gè)氧原子),該蛋白質(zhì)至少含有M-N+2N=M+N個(gè)氧原子;每個(gè)肽鍵含有一個(gè)氮原子,每條肽鏈的起始端含有一個(gè)氨基,所以蛋白質(zhì)至少含有M-N+N=M個(gè)氮原子,因此蛋白質(zhì)中至少含有的氧原子數(shù)與氮原子數(shù)共有的個(gè)數(shù)為M+N+M=2M+N,D正確。故選D。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是根據(jù)原子守恒定律進(jìn)行計(jì)算,注意肽鍵中含有一個(gè)氧原子和一個(gè)氮原子,且每條肽鏈至少含有一個(gè)羧基和一個(gè)氨基。二、非選擇題9、乳酸(異養(yǎng))厭氧型需要提供乳酸菌菌種(接種)減少增加先增加后減少鹽酸溶液重氮化N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽玫瑰紅空白相近大致估算(計(jì)算)【解析】
1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌,代謝類(lèi)型是異養(yǎng)厭氧型,在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/p>
2、泡菜的制作流程是:選擇原料、配制鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。
3、泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測(cè)定,即在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽,重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料?!驹斀狻浚?)制作泡菜所用的菌體主要是乳酸菌,其代謝類(lèi)型為異養(yǎng)厭氧型。因此制作過(guò)程中需要對(duì)泡菜壇進(jìn)行密封處理,以保證乳酸菌的代謝。“陳泡菜水”中含有乳酸菌,制作泡菜過(guò)程中加入一些“陳泡菜水”,目的是提供乳酸菌菌種(接種)。(2)制作泡菜的過(guò)程中,乳酸菌的生命活動(dòng)消耗有機(jī)物,將有機(jī)物轉(zhuǎn)變成其他物質(zhì),因此有機(jī)物的干重減少,菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類(lèi)增加。在泡菜制作過(guò)程中,亞硝酸鹽含量的變化趨勢(shì)是先增加后減少,一般是在腌制10天后亞硝酸鹽的含量開(kāi)始下降的。(3)檢測(cè)亞硝酸鹽含量時(shí),對(duì)氨基苯磺酸溶解于鹽酸溶液中,與亞硝酸鹽發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。(4)①號(hào)管中不含亞硝酸鹽,作為空白對(duì)照。(5)根據(jù)測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理可知,將制備的無(wú)色透明的泡菜樣品處理液顯色反應(yīng)后,與上述已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行目測(cè)比較,找出與標(biāo)準(zhǔn)液最接近的顏色,記錄對(duì)應(yīng)的亞硝酸鈉含量,可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。【點(diǎn)睛】本題考查泡菜制作的相關(guān)知識(shí),意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn),把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力;能運(yùn)用所學(xué)知識(shí),準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力,屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。10、堿基互補(bǔ)配對(duì)啟動(dòng)子終止子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法吸引農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞轉(zhuǎn)化樣方轉(zhuǎn)基因煙草幼苗區(qū)內(nèi)的蚜蟲(chóng)密度低于非轉(zhuǎn)基因煙草幼苗區(qū)【解析】試題分析:熟記并理解基因工程的基本操作程序等相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息,對(duì)相關(guān)問(wèn)題情境進(jìn)行解答。(1)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以臘梅凝集素基因產(chǎn)生的mRNA作為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則獲得cDNA片段,進(jìn)而獲取臘梅凝集素基因片段。為使臘梅凝集素基因在煙草細(xì)胞中高效表達(dá),需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間。(2)將表達(dá)載體導(dǎo)入煙草細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,在該過(guò)程中需添加酚類(lèi)物質(zhì),目的是吸引農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞(因?yàn)榉宇?lèi)化合物能夠吸引農(nóng)桿菌向其移動(dòng))。將臘梅凝集素因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞內(nèi)并成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)的過(guò)程,在基因工程中稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。(3)蚜蟲(chóng)的活動(dòng)能力極弱,可采用樣方法調(diào)查其種群密度。將轉(zhuǎn)基因煙草幼苗與非轉(zhuǎn)基因煙草幼苗隔區(qū)種植,并接種等量的蚜蟲(chóng),一定時(shí)間后統(tǒng)計(jì)蚜蟲(chóng)的種群密度,若轉(zhuǎn)基因煙草幼苗區(qū)內(nèi)的蚜蟲(chóng)密度低于非轉(zhuǎn)基因煙草幼苗區(qū),則說(shuō)明轉(zhuǎn)基因煙草具有抗蚜蟲(chóng)能力。11、引物Taq酶提供合成DNA的原料和能量Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活使目的基因的遺傳特性在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)基因表達(dá)載體【解析】
1、克里克的中心法則內(nèi)容描述的是DNA復(fù)制和基因表達(dá)過(guò)程中的遺傳信息流動(dòng)的過(guò)程。2、基因工程技術(shù)的基本步驟:目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。其中目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等,構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是:使目的基因的遺傳特性在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法?!驹斀狻浚?)PCR擴(kuò)增目的基因的大致過(guò)程為:目的基因(DNA)受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在熱穩(wěn)定性DNA聚合酶作用下延伸,如此重復(fù)循環(huán)多次。在PCR過(guò)程中,兩個(gè)引物是Taq酶的結(jié)合位點(diǎn),也是子鏈延伸的起點(diǎn),dNTP在此過(guò)程中的作用是提供合成DNA的原料。(2)在PCR反應(yīng)中由于反應(yīng)溫度較高,因此使用耐高溫的Tap酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶,大腸桿菌DNA聚合酶在高溫條件下容易變性失活。(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程,稱(chēng)為轉(zhuǎn)化,所以轉(zhuǎn)化的目的是使目的基因的遺傳特性在受體細(xì)胞中維持穩(wěn)定和表達(dá)。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前需要先將目的基因和
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