結(jié)核分支桿菌的檢驗

結(jié)核分支桿菌的檢驗第1頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四一般特性G＋桿菌，偶有分支，抗酸染色；需氧，營養(yǎng)要求特殊，生長大多緩慢；致病多為慢性

病變，常有肉芽腫；無鞭毛、無芽胞、無莢膜，不產(chǎn)生外毒素或內(nèi)毒素，其致病性與菌體成分有關(guān)；第2頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四分類：分支桿菌屬主要有3種：結(jié)核分支桿菌（M.tuberculosis）牛分支桿菌（M.bovis）禽分支桿菌（M.avium）第3頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四一、形態(tài)染色1.形態(tài)細長,著色不勻,排列成分枝索狀2.抗酸性染色（結(jié)核桿菌為紅色，其他細菌為藍色）。第4頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四結(jié)核分支桿菌牛分支桿菌禽分支桿菌致病性人++++++++-牛++++++家禽--++++豚鼠++++++++-家兔-++++++++染色革蘭氏染色陽性；抗酸染色陽性（結(jié)合桿菌為紅色，其他細菌為藍色）形態(tài)染色在陳舊培養(yǎng)基或干酪變性病變組織，菌體可見分支。病灶組織中，菌形比較一致，單個，成雙，間或成叢。無莢膜，無芽胞。細長、正直或微彎桿菌，長1.5~4um,寬0.2~0.6um比結(jié)核分支桿菌短而粗具有多形性，可呈桿狀、球菌狀、鏈球狀。培養(yǎng)特性專性需氧，營養(yǎng)要求嚴格，最適pH6.5~6.8，最適溫度37~37.5℃，在含有雞蛋、血清、牛乳、馬鈴薯和甘油（牛型菌除外）易于生長。1~2周開始生長，3~4周才能旺盛發(fā)育。生長速度居中最慢較快42℃發(fā)育--+硝酸鹽還原+--尿素酶++-煙酸形成性+--甘油促進生長+-+抗原性具有相同的抗原性具有單獨的抗原結(jié)構(gòu)抵抗力含大量類脂和蠟質(zhì)成分，抵抗力較強，干痰中可存活6~8個月；對濕熱抵抗力弱(60℃30min)，對低溫抵抗力強，射線可影響其活力（陽光直射4h可殺滅）。一般消毒劑對其殺菌力不大，鏈霉素、環(huán)絲氨酸、異煙肼、對氨水楊酸、利福平為常用藥。第5頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四禽分支桿菌結(jié)核分支桿菌第6頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四禽分支桿菌第7頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四結(jié)核分支桿菌肺結(jié)核(TEMx48,185)第8頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四牛型結(jié)核桿菌M.

bovisBCG

第9頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四二、培養(yǎng)特性1.營養(yǎng)要求高；2.需氧，加6%8%CO2可促進生長；3.生長緩慢。第10頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四三、抵抗力

1.強的方面:抗干燥；抗酸、堿或染料；抗一般化學(xué)試劑。

2.弱的方面:怕熱、怕酒精、怕陽光。第11頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四四、致病性1.感染途徑(1)呼吸道為主(2)消化道(3)破損皮膚粘膜2.致病作用(1)在細胞內(nèi)寄生且頑強增殖(2)菌體成分致病：脂類、蛋白質(zhì)和多糖質(zhì)脂類，含量愈高毒力愈強。肺結(jié)核——肺組織第12頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四3.可通過呼吸道、消化或皮膚損傷侵入易感機體,其中肺結(jié)核為最多。慢性纖維空洞性肺結(jié)核干酪樣肺炎粟粒性肺結(jié)核第13頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四五、免疫性1.以細胞免疫為主,與變態(tài)反應(yīng)同時存在。2.傳染性免疫(帶菌免疫)。第14頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四六、微生物學(xué)檢驗標本的采集根據(jù)病變部位的不同，可采取痰、胸腹水、尿、腦脊液、糞、分泌物及組織等。痰最好是清晨第一口痰，尿為清晨中、后段。標本的處理用4%的硫酸或3%的鹽酸處理20min或4%氫氧化鈉30min。第15頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四痰,尿,腦脊液,糞便等，直接涂片，萋-尼二氏染色法。抗酸性細菌能抵抗含酸酒精脫色作用，而染為紅色，非抗酸性細菌和組織細胞被鹽酸酒精脫色，美藍復(fù)染成藍色

。分離培養(yǎng)：初次分離常用潘曲吉尼氏培養(yǎng)基、青霉素血液瓊脂等。初次培養(yǎng)的可疑菌落（抗酸染色陽性）移植于改良Herrold培養(yǎng)基上進行傳代。結(jié)核分枝桿菌一般生長較慢，需2~4周才能發(fā)育好，菌落呈干燥、不規(guī)則、堅硬表面呈粗糙的顆粒狀。第16頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四動物試驗：豚鼠腹腔或皮下接種0.5ml，經(jīng)2~3周局部淋巴結(jié)腫大、變硬，逐漸變成潰瘍，有膿性排出物，始終不愈合。5~6周后病變擴展至全身，動物因衰弱而死。全身淋巴結(jié)、肝、脾、肺均有彌漫性結(jié)核結(jié)節(jié)。變態(tài)反應(yīng)診斷法：我國常用皮內(nèi)法和點眼法，可檢出95~98%的結(jié)核病牛。第17頁，共18頁，2023年，2月20日，星期四七、防治原則1、防——接種卡介苗（1月齡免疫，20天產(chǎn)生抗體，可維持1~1.5年）。

2、治——抗結(jié)核藥,聯(lián)合用藥。