臨床微生物標本的采集與送檢

主要內(nèi)容1、標本采集的意義和原則2、標本的運送與拒收原則3、各種標本的采集血液、骨髓標本尿液糞便痰及上呼吸道標本穿刺液標本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本生殖道標本目前一頁\總數(shù)六十三頁\編于點

標本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細胞等標本進行檢驗，以反映機體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。

標本采集目前二頁\總數(shù)六十三頁\編于點

標本采集60%以上的實驗誤差發(fā)生在分析前！標本采集正確與否與檢驗結(jié)果的準確性有密切的關(guān)系!因此，我們應掌握正確的標本采集方法。目前三頁\總數(shù)六十三頁\編于點標本采集的意義正確的微生物標本采集和運送是準確的病原學診斷的前提目前四頁\總數(shù)六十三頁\編于點掌握正確的標本采集方法

為保證標本的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應掌握正確的標本采集方法、采集量和采集時間并應及時送檢，特殊標本還需注明采集時間。目前五頁\總數(shù)六十三頁\編于點基本原則1.及時采集微生物標本作病原學檢查2.在抗菌藥物使用前采集標本3.采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.混有正常菌群標本，不可置肉湯培養(yǎng)6.標本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。7.送檢標本應注明來源和檢驗目的目前六頁\總數(shù)六十三頁\編于點標本的運送原則1、所有的標本都必須立即送往實驗室，最好在2h內(nèi),保存時間不應超過24h.2、最佳的臨床標本送檢首先取決于所獲取標本的量.量少的標本應在采集后15-30min內(nèi)送檢.3、對環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對低溫敏感）應立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標本。目前七頁\總數(shù)六十三頁\編于點標本的拒收原則無標簽、無檢驗單不檢測，并與送檢的醫(yī)生和護士聯(lián)系。送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗要求的標本.目前八頁\總數(shù)六十三頁\編于點臨床微生物檢驗常見標本血液、骨髓標本尿液糞便痰及上呼吸道標本穿刺液標本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本生殖道標本目前九頁\總數(shù)六十三頁\編于點一、血培養(yǎng)標本采集目前十頁\總數(shù)六十三頁\編于點血培養(yǎng)送檢指征病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時具備以下幾種臨床表現(xiàn)時應采集血培養(yǎng)。1、發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）2、寒戰(zhàn)3、白細胞增多（＞10×109/L，特別有“核左移”時）4、粒細胞減少（成熟的多形核白細胞＜1×109/L）5、血小板減少6、皮膚、粘膜出血7、昏迷8、多器官衰竭9、血壓降低10、呼吸加快11、特殊情況：可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細菌，應增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。目前十一頁\總數(shù)六十三頁\編于點血培養(yǎng)采集須知應在抗生素應用前或停藥一周后采集標本，如不能停用抗生素，應于下次抗生素應用前采集！對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應立即采集血培養(yǎng)標本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集２套以上血培養(yǎng)標本。目前十二頁\總數(shù)六十三頁\編于點血培養(yǎng)采集容器法國梅里埃公司血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或安圖公司血培養(yǎng)瓶目前十三頁\總數(shù)六十三頁\編于點血培養(yǎng)標本采集方法1、皮膚消毒2、培養(yǎng)瓶消毒：(1)用75％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。(2)酒精作用60s。(3)在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無菌紗布或棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。3、血液注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固。目前十四頁\總數(shù)六十三頁\編于點血培養(yǎng)采集次數(shù)成年患者：推薦同時采集２－３套（不同部位）血培養(yǎng)標本（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標本）。嬰幼兒患者：推薦同時采集２次（不同部位）血培養(yǎng)標本。原因：血培養(yǎng)做1套的檢出率為65%。做2套和3套檢出率的檢出率分別為80%和90%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難臨床解釋。在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復采取血培養(yǎng)。兩個例外：細菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。目前十五頁\總數(shù)六十三頁\編于點血培養(yǎng)采血量成年患者：推薦采血量每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者：兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml，推薦采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1%）目前十六頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項1、嚴禁在輸液、輸血的針頭處抽取標本，以免影響檢驗結(jié)果。（最好在對側(cè)采集）2、若同時抽取幾個項目的血標本，一般注入容器的順序為：血培養(yǎng)瓶→抗凝管→干燥試管.動作要迅速準確，避免溶血。注入標本后的血培養(yǎng)瓶務必立即送至檢驗科細菌室3、每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應室溫保存（15-30℃），切勿放冰箱保存。目前十七頁\總數(shù)六十三頁\編于點骨髓標本的微生物學檢查

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標本。

采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期

當骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠高于血液培養(yǎng)

目前十八頁\總數(shù)六十三頁\編于點

二、尿液標本的采集

目前十九頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本的送檢指征1有典型的尿路感染癥狀；2肉眼膿尿或血尿；3尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞和/或亞硝酸鹽陽性；4不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5留置導尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱；6膀胱排空功能受損；7泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。目前二十頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本采集容器無菌試管或無菌尿液標本留取容器目前二十一頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本采集方法1、清潔中段尿標本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會陰部，女性應用手分開大陰唇，男性應翻上包皮，仔細清洗，再用清水沖洗尿道口周圍，開始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml于無菌容器中，立即送檢，于一小時內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標本收集方法，但很容易受到會陰部細菌污染，應由醫(yī)護人員采集或在醫(yī)護人員指導下由患者正確留取。目前二十二頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本采集方法2、恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細菌感染的“金標準”方法，但有一定的痛苦，病人難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標本困難的嬰兒尿標本的采集

目前二十三頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本采集方法3、直接導尿：按常規(guī)方法對會陰部進行清洗消毒后，用導尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液?？蓽p少尿液標本的污染，準確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道的細菌引入膀胱，導致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。

目前二十四頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本采集方法4、小兒收集包：對于無控制能力的小兒可應用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M行復查。

目前二十五頁\總數(shù)六十三頁\編于點尿液標本采集方法5、留置導尿管收集尿液：利用留置導尿管采集標本時，應先消毒導尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導尿管吸取尿液，操作時應防止混入消毒劑，不能從收集袋中采集尿液。長期留置導尿患者，應在更換新尿管時留取尿標本。

目前二十六頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項

嚴格進行無菌操作，因為尿液標本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌

通常應取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應在用藥前進行

目前二十七頁\總數(shù)六十三頁\編于點三、糞便標本的采集

目前二十八頁\總數(shù)六十三頁\編于點糞便標本的送檢指征1急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。3無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見于嬰幼兒和小兒。目前二十九頁\總數(shù)六十三頁\編于點糞便標本的采集容器一次性無菌便盒

目前三十頁\總數(shù)六十三頁\編于點糞便標本采集時間1．采樣原則

腹瀉病人應在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。2．沙門菌感染

腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便

目前三十一頁\總數(shù)六十三頁\編于點糞便標本采集方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢

直腸拭子方法

如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。目前三十二頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項

雖糞便含有多種雜菌，但應盡量采用無菌容器（一次性無菌平皿）。

為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應挑取其膿血、粘液部分。

目前三十三頁\總數(shù)六十三頁\編于點四、痰及上呼吸道標本的采集

目前三十四頁\總數(shù)六十三頁\編于點痰標本送檢指征1咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。

2咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。

3呼吸困難4發(fā)熱5胸痛：當炎癥病變累及壁層胸膜時，會發(fā)生胸痛。*肺部感染的患者有25～50％可能發(fā)生菌血癥，應同時作血培養(yǎng)。目前三十五頁\總數(shù)六十三頁\編于點上呼吸道標本送檢指征1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時，懷疑為咽部鏈球菌感染，應做細菌培養(yǎng)。2細菌性咽－扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送相應部位分泌物或痰液進行細菌培養(yǎng)。目前三十六頁\總數(shù)六十三頁\編于點痰標本和上呼吸道標本采集容器一次性無菌留痰盒咽拭子或鼻咽拭子目前三十七頁\總數(shù)六十三頁\編于點痰及上呼吸道標本采集時間痰：一般以晨痰為好；支氣管擴張癥患者，清晨起床后進行體位引流，可采集大量痰標本。咽拭標本：時間上雖無嚴格限制，但應于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜

目前三十八頁\總數(shù)六十三頁\編于點痰標本采集方法：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

目前三十九頁\總數(shù)六十三頁\編于點上呼吸道標本（咽拭子）采集方法：

采集上呼吸道標本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應用開水或生理鹽水反復漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜

目前四十頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項1．

采集標本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標本若不能及時送檢，應放4℃冰箱保存，以免雜菌生長。3．

作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。目前四十一頁\總數(shù)六十三頁\編于點五、穿刺液標本目前四十二頁\總數(shù)六十三頁\編于點穿刺液標本

采集時間：當懷疑感染存在，應盡早采集標本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集

采集容器：無菌容器采集方法：采用無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無菌試管立即送檢

目前四十三頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項：

如果用于檢測細菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標本不可置冰箱保存，否則會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素迅速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。目前四十四頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項：如果只采集了一管腦脊液，應先送細菌室做細菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查穿刺時應嚴格無菌操作

作腦脊液培養(yǎng)時，建議同時作血培養(yǎng)

目前四十五頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項：為了防止穿刺液的凝固，最好在無菌試管中預先加入滅菌肝素，再注入穿刺液盡可能采集更多的液體，至少1ml目前四十六頁\總數(shù)六十三頁\編于點六、膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本

目前四十七頁\總數(shù)六十三頁\編于點膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本采集開放性膿腫和膿性分泌物

先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用

大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物

用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢

封閉性膿腫

消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內(nèi)送檢

目前四十八頁\總數(shù)六十三頁\編于點注意事項：

不能立即送檢的標本，應放4℃保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標本除外

用藥前采集標本，嚴格無菌采樣

目前四十九頁\總數(shù)六十三頁\編于點七、生殖道標本目前五十頁\總數(shù)六十三頁\編于點生殖道標本檢驗生殖道標本的細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)；解脲支原體、沙眼衣原體、淋菌的培養(yǎng)；淋菌涂片；細菌性陰道病相關(guān)檢測、真菌涂片

目前五十一頁\總數(shù)六十三頁\編于點生殖道標本送檢指征1皮膚黏膜損害：原發(fā)損害可有斑疹、丘疹、結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、糜爛、潰瘍等。繼發(fā)損害由原發(fā)損害演變而來，有萎縮或斑痕等，患者可出現(xiàn)疼痛或瘙癢癥狀。2全身癥狀：多數(shù)無全身癥狀。偶有發(fā)熱、乏力、食欲不振等。3男性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)4女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)5疑為下列疾病時需送檢標本：前庭大腺膿腫、外陰陰道念珠菌病、細菌性陰道病、急性子宮頸炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、產(chǎn)褥期感染。目前五十二頁\總數(shù)六十三頁\編于點生殖道標本采集容器無菌試管、男性拭子、女性拭子

目前五十三頁\總數(shù)六十三頁\編于點生殖道標本采集方法1尿道分泌物①男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出的膿性分泌物或用無菌男性拭子插入尿道內(nèi)2～4厘米取出分泌物。如無膿液溢出，可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。②女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出。無肉眼可見的膿液，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子，采集標本。目前五十四頁\總數(shù)六十三頁\編于點生殖道標本采集方法2巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。3陰道分泌物：用窺器擴張陰道，用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物培養(yǎng)或涂片鏡檢。4宮頸分泌物：用窺器擴張陰道，先用無菌棉球擦取宮頸口分泌物；用女性拭子插入宮頸管2厘米采取分泌物，轉(zhuǎn)動并停留10～20秒鐘，讓拭子充分吸附分泌物，或用去針頭的注射器吸取分泌物，置入滅菌試管內(nèi)送檢。目前五十五頁\總數(shù)六十三頁\編