大豆磷脂氮含量磷含量測定方法與注意事項(xiàng)

大豆磷脂磷含量測定狀態(tài)：黃色或黃棕色半固體，吸濕性強(qiáng)。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：以無水物計(jì)算，本品含磷（P）不得少于2.7%。檢驗(yàn)過程：對照品溶液的制備：精密稱取經(jīng)105°C干燥至恒重的磷酸二氫鉀對照品43.9mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml,置另一50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻（每1ml相當(dāng)于0.04mgP）。供試品溶液的制備：取本品約0.15g,精密稱定，置凱氏燒瓶中，加硫酸20ml與硝酸50ml,緩緩加熱至溶液呈淡黃色，小心滴加過氧化氫溶液，使溶液褪色，繼續(xù)加熱30分鐘，冷卻后，用水定量轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。測定法：精密量取對照品溶液與供試品溶液各2ml,分別置50ml量瓶中，各依次加入鉬酸銨硫酸試液4ml,亞硫酸鈉試液2ml與新鮮配制的對苯二酚溶液（取對苯二酚0.5g，加水適量使溶解，加硫酸1滴，用水稀釋至100ml）2ml,加水稀釋至刻度，搖勻，暗處放置40分鐘，照紫外-可見分光光度法（《中國藥典》2010年版二部附錄WA）,在620nm的波長處分別測定吸光度，計(jì)算含磷量。鉬酸銨硫酸試液：1?25g鉬酸銨，加硫酸7?5ml,用水稀釋到50ml（可保存2周）對苯二酚溶液：取對苯二酚0?25g加水適量使溶解，加硫酸1滴，用水稀釋至50ml（現(xiàn)配）亞硫酸鈉試液：2g無水亞硫酸鈉用水稀釋到10ml（現(xiàn)配）計(jì)算：X100%A供試品XM對照品XP/KH2PO4X稀釋倍數(shù)X對照品含量X100%A對照品XM供試品X（l-干燥失重％）式中：A供——供試品溶液吸收度；供試品A對照品——對照品溶液吸收度；對照品M供試品——供試品重量（g）；供試品M對照品—對照品重量（g）；P——磷的原子量（30.97）；KHPo——磷酸二氫鉀分子量（136.09）；24公式推導(dǎo)：基本原理A=ECLA供 = EC供磷L = m供磷/V = m供磷A對 = EC對磷L = m對磷/V = m對磷M供*（1-干燥失重％）*含量*（2/100）M對*M供*（1-干燥失重％）*含量*（2/100）X100％X100％A供XM對XP/KH2Po”X(10/50)X(2/50)XX100％X100％A對XM供X(1-干燥失重%)X(2/100)A供XM對XP/K^Po”X對照品含量X0.4A對XM供X（1-干燥失重%）、.，Y- ■、'八.，I[/—r-.T,注意事項(xiàng)：1.不加石棉網(wǎng)可快些，要逐漸調(diào)大火，防止酸液損傷電爐絲和溶液沸騰過于劇烈。2?溶液有時(shí)會(huì)變黑漸漸沸騰，最后硝酸揮發(fā)約剩20ml硫酸，顯淡黃或白色，約燒6小時(shí)。3.最后加過氧化氫約1~3滴管即能透明。那英杰406293109大豆磷脂氮含量測定檢驗(yàn)方法：取本品約O.lg，精密稱定，照氮測定法(《中國藥典》2010年版二部附錄WD第二法)測定。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：本品含氮量應(yīng)為1.5?2.0%。第二法(半微量法)連接蒸餾裝置(藥典)，A瓶中加水適量與甲基紅指示液數(shù)滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石數(shù)粒，從D漏斗加水約50m1,關(guān)閉G夾，開放冷凝水，煮沸A瓶中的水，當(dāng)蒸氣從冷凝管尖端冷凝而出時(shí)，移去火源，關(guān)H夾，使C瓶中的水反抽到B瓶，開G夾，放出B瓶中的水，關(guān)B瓶及G夾，將冷凝管尖端插入約50ml水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。如此將儀器洗滌2?3次。取供試品適量(約相當(dāng)于含氮量1.0?2.0mg),精密稱定，置干燥的30?50ml凱氏燒瓶中，加硫酸鉀(或無水硫酸鈉)0.3g與30%硫酸銅溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml；在凱氏燒瓶口放一小漏斗，并使燒瓶成45°斜置，用小火緩緩加熱使溶液保持在沸點(diǎn)以下，等泡沸停止，逐步加大火力，沸騰至溶液成澄明的綠色后，除另有規(guī)定外，繼續(xù)加熱10分鐘，放冷，加水2ml。取2%硼酸溶液10m1,置100ml錐形瓶中，加甲基紅一溴甲酚綠混合指示液5滴，將冷凝管尖端插入液面下。然后，將凱氏燒瓶中內(nèi)容物經(jīng)由D漏斗轉(zhuǎn)入C蒸餾瓶中，用水少量淋洗凱氏燒瓶及漏斗數(shù)次，再加入40%氫氧化鈉溶液10ml,用少量水再洗漏斗數(shù)次，關(guān)G夾，加熱A瓶進(jìn)行蒸氣蒸餾，至硼酸液開始由酒紅色變?yōu)樗{(lán)綠色時(shí)起，繼續(xù)蒸餾約10分鐘后，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣繼續(xù)沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾。餾出液用硫酸滴定液(0.005mol/L)滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)(空白和供試品所得餾出液的容積應(yīng)基本相同，約70?75ml)校正。每1ml硫酸滴定液(0.005mol/L)相當(dāng)于0.1401mg的N。取用的供試品如在0.1g以上時(shí)，應(yīng)適當(dāng)增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相應(yīng)地增加40%氫氧化鈉溶液的用量。計(jì)算：X100%(V供試品-V空白)X°.14°1XFX100%WX1000式中：V供試品——供試品消耗硫酸滴定液(0.005mol/L)的容積(ml)；供試品V空白——空白溶液消耗硫酸滴定液(0.005mol/L)的容積(ml)；空白W ——供試品重量(g)；F ——硫酸滴定液(0.005mol/L)的校正因子\Y*■、'八■，I[/—r-.r*注意事項(xiàng)：加稀硫酸防止水中有氨蒸出影響結(jié)果。驗(yàn)證容器是否潔凈可用硼酸-指示劑混合液驗(yàn)證。3?開始小火泡沸2h左右。加漏斗堵口，防止硫酸燒干。大火2h左右，不時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)，使樣品完全消化。冷卻后為透明無色，加些水變淺綠，冷卻后加入裝置。4.連續(xù)做樣時(shí)可把A瓶塞打開使蒸汽不沖出進(jìn)樣口，即可加樣。冷凝水一定開大到使流出含氮水蒸氣完全液化。流出液體70ml左右并且是涼的不燙可以直接滴定。(本人接50ml左右，對結(jié)果并無影響，不同樣品可能不同)那英杰406293109氮測定法一、定義測定化合物中含氮元素量的分析方法稱為氮測定法。二、原理將供試品置凱氏燒瓶中，加硫酸、硫酸鉀(或無水硫酸鈉)、無水硫酸銅，加熱裂解，將氮變?yōu)殇@鹽，然后堿化反應(yīng)進(jìn)行蒸餾使氨釋放，同時(shí)用硼酸溶液收集，再用硫酸滴定液滴定，以氮的量計(jì)算供試品的含量。三、測定步驟消化(或破壞)消化原理將一定量的樣品與濃硫酸共熱，則有機(jī)物中的碳和氫被濃硫酸氧化成CO2和H20,而氮?jiǎng)t轉(zhuǎn)變成NH3；HSO被還原為SO和H0。生成的CO、SO和HO由溶液中逸去，而NH則與過量的HSO結(jié)合成NHHSO或4 2 2 2 2 2 3 2 4 4 4(NH)SO保留在溶液中。424為了使有機(jī)物的破壞能迅速完全，通常采用升高溫度和加入催化劑兩種辦法。在增高溫度方面常加入不易揮發(fā)的無水堿金屬硫酸鹽(KSO或NaSO)以提高濃硫酸的沸點(diǎn)，阻止高溫下濃硫酸的分解。在催化2424劑方面，常加入少量CuSO(無水)、HgO、CuO、Se、HSeO等催化劑，其中以CuSO最常用。4 2 3 4消化操作要求將供試品放入凱氏燒瓶中時(shí)，注意勿使供試品粘著瓶頸，如已沾著瓶頸，可在緩緩加硫酸時(shí)，用硫酸沖入。(2)破壞時(shí)有部分硫酸蒸發(fā)及分解出有毒氣體，故須在毒氣柜中進(jìn)行，以免中毒。使凱氏燒瓶成45。斜置，可防止在加熱過程中供試品液飛濺的損失，防止瓶外的雜質(zhì)掉入瓶內(nèi)。切勿將燒瓶口朝向自己或他人，以防加熱炮沸時(shí)濺出傷人。在凱氏燒瓶口放一小漏斗，有回流冷凝的作用，防止硫酸的揮發(fā)。開始加熱時(shí)，應(yīng)用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點(diǎn)以下，防止突然高溫時(shí)，造成泡沫沖出而遭損失。等泡沸停止，強(qiáng)熱至沸騰，俟溶液成澄明的綠色后，除另有規(guī)定外，繼續(xù)加熱至規(guī)定時(shí)間，放冷。有必要時(shí)(如瓶壁上部有黑色殘?jiān)?，可輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)或搖動(dòng)燒瓶，時(shí)供試品能充分與硫酸接觸，以保證破壞完全。蒸餾1?蒸餾原理于消化后已冷卻的NHHSO或(NH)SO溶液中，加入濃NaOH溶液并加熱，可使NH再游離出來。TOC\o"1-5"\h\z4 4 42 4 3NHHSO+NaOH—NHf+NaHSO+HO4 4 3 4 2△或 (NH)SO+2NaOH—2NHf+NaSO+2HO42 4 3 2 4 2△一般采用通入水蒸氣加熱的辦法使NH逸出，將逸出的NH吸收在HBO溶液中。3 3 3NH+HBO—NHBO+HO3 3 3 4 2 22.蒸餾操作要求破壞完成以后的溶液，放冷有白色固體析出，于尚未完全凝固時(shí)，緩緩加適量純化水溶解，放冷至室溫。在堿化前，先將蒸餾裝置清洗好，安裝好，并檢查不得漏氣。若用水蒸氣蒸餾時(shí)，蒸汽發(fā)生器已沸騰。冷凝管的尖端應(yīng)插入吸收液面下2/3處，使吸收完全，防止倒吸現(xiàn)象。將足夠量的氫氧化鈉溶液注意使沿瓶壁緩緩流至瓶底，自成一液層，以減少酸堿作用范圍，待全部裝置妥善后，再使其與酸液混合，否則會(huì)因強(qiáng)酸強(qiáng)堿中和時(shí)產(chǎn)生大量的熱而使氨逸出損失。5）在常量法直接蒸時(shí)，加鋅粒是為防止過熱后出現(xiàn)爆沸，為止爆劑，但必須在加入堿液后，再加入鋅粒，以免鋅粒與硫酸作用而很快消耗掉。（6）在半微量法中，在發(fā)生水蒸氣的圓底燒瓶中加甲基紅指示液數(shù)滴，加稀硫酸使成酸性，是為防止水中含有氨等揮發(fā)性堿性物質(zhì)隨水蒸氣帶入蒸餾器中，從而進(jìn)入吸收液影響結(jié)果。注意一定不能使用鹽酸等揮發(fā)性酸調(diào)酸性，防止揮發(fā)性酸進(jìn)入蒸餾器內(nèi)中和堿液，或進(jìn)入吸收液影響結(jié)果。（7）安裝時(shí)，圓底燒瓶的蒸氣出口應(yīng)低于蒸餾器的蒸氣入口，使蒸氣帶起的小水滴再回流到圓底燒瓶中，防止進(jìn)入蒸餾器的夾層中降低蒸餾溫度。（8）圓底燒瓶中加玻璃珠或沸石數(shù)粒，以防止產(chǎn)生爆沸現(xiàn)象。（9）蒸餾開始不可太快，以免蒸出的氨未及吸收而逸失。（10）加熱的火力應(yīng)穩(wěn)定，不能忽大忽小，否則會(huì)發(fā)生倒吸現(xiàn)象。（11）蒸餾至規(guī)定接受體積時(shí)，先將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后，再停止蒸餾。（12）本法應(yīng)同時(shí)作空白試驗(yàn)，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。（三）滴定然后用硫酸滴定液直接滴定，其反應(yīng)式為：2NHBO+HSO+2H0—（NH）SO+2HBO224242433在這里h3bo3起著固定氨的作用。由于h3bo3的酸性極弱，它的存在并不干擾滴定。四、 不需有機(jī)破壞的含氮藥物某些含氮藥物（如吡拉西坦中含有酰胺結(jié)構(gòu)），可直接加入氫氧化鈉，加熱水解生成低級(jí)胺、氨，蒸餾出來，用硼酸溶液吸收，以硫酸滴定液滴定。五、 注意事項(xiàng)1?供試品取量應(yīng)適宜，常量法約相當(dāng)于含氮量25?30mg，半微量法約相當(dāng)于含氮量1?2mg，供試品取量太多或太少，都將影響測定結(jié)果。2?取用的供試品如在0.1g以上時(shí)，應(yīng)適當(dāng)增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相應(yīng)地增加40%氫氧化鈉溶液的用量。樣品裂解時(shí)，用直火加熱時(shí)間不可過長，加入硫酸鹽的量不可過多，以防硫酸銨分解。因強(qiáng)酸、強(qiáng)堿中和時(shí)會(huì)發(fā)生大量的熱，使