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第一頁(yè),共17頁(yè)。一、動(dòng)物(dòngwù)細(xì)胞融合〔細(xì)胞雜交〕1、過(guò)程(guòchéng):第二頁(yè),共17頁(yè)。一、動(dòng)物細(xì)胞(xìbāo)融合〔細(xì)胞(xìbāo)雜交〕2、概念(gàiniàn):指兩個(gè)或多個(gè)(duōɡè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。3、結(jié)果:形成單核的雜交細(xì)胞4、原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性5、誘導(dǎo)方式物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇〔PEG)生物法:滅活的病毒第三頁(yè),共17頁(yè)。動(dòng)物(dòngwù)細(xì)胞融合過(guò)程:動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)(yòudǎo),融合篩選(shāixuǎn)雜交細(xì)胞AB有絲分裂〔膜融合、質(zhì)融合、核融合〕注意:動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起,讓它們隨機(jī)融合后,再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞第四頁(yè),共17頁(yè)。7、意義:突破(tūpò)了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交〔種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間〕成為可能。8、應(yīng)用:成為研究細(xì)胞遺傳(yíchuán)、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段
特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而開(kāi)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為制造(zhìzào)單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。第五頁(yè),共17頁(yè)。1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法(fāngfǎ)及缺陷是什么?2、抗體(kàngtǐ)由什么細(xì)胞產(chǎn)生?B淋巴細(xì)胞每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種(yīzhǒnɡ)特異性抗體要想獲得大量的單一抗體,必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞群第六頁(yè),共17頁(yè)。二、單克隆抗體(kàngtǐ)設(shè)計(jì)方案:一種(yīzhǒnɡ)B淋巴細(xì)胞--只分泌一種(yīzhǒnɡ)特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞--能在體外大量增殖雜交(zájiāo)細(xì)胞第七頁(yè),共17頁(yè)。1、注射抗原的目的(mùdì)是什么2、誘導(dǎo)(yòudǎo)其融合的方法有哪些?3、融合后培養(yǎng)液中有幾種(jǐzhǒnɡ)細(xì)胞4、第一次篩選的方法和目的5、第二次篩選的方法和目的6、雜交瘤細(xì)胞獲得單一抗的方法第八頁(yè),共17頁(yè)。1、原理:雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)(liǎnɡɡè)親本的特性,即能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。2、過(guò)程(guòchéng)B淋巴細(xì)胞(xìbāo)骨髓瘤細(xì)胞(xìbāo)誘導(dǎo)融合B-B細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞〔B-瘤細(xì)胞〕克隆化培養(yǎng)專一抗體檢測(cè)能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體第九頁(yè),共17頁(yè)。3.單克隆抗體(kàngtǐ)的應(yīng)用:?jiǎn)慰寺】贵w(kàngtǐ)的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大①作為診斷試劑(shìjì):準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì),并與特異性結(jié)合優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速②用于運(yùn)載藥物:制成“生物導(dǎo)彈〞治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量。第十頁(yè),共17頁(yè)。除通過(guò)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體(kàngtǐ)外,還有什么方法?第十一頁(yè),共17頁(yè)。1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是〔〕A.經(jīng)過(guò)(jīngguò)免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒(méi)經(jīng)過(guò)(jīngguò)免疫的T淋巴細(xì)胞
C.經(jīng)過(guò)(jīngguò)免疫的T淋巴細(xì)胞A第十二頁(yè),共17頁(yè)。3.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的選項(xiàng)是〔〕誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段根本(gēnběn)相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細(xì)胞D4.單克隆抗體制備過(guò)程(guòchéng)中培育的雜交細(xì)胞是------A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D第十三頁(yè),共17頁(yè)。(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交(zájiāo)過(guò)程示意圖第十四頁(yè),共17頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞與植物(zhíwù)細(xì)胞的差異:無(wú)細(xì)胞壁全能性受限制,不能發(fā)育成雜種(záz
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