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8.3抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用抗體的人工制備8.3.1抗原抗體反應(yīng)的原理與特點(diǎn)8.3.2常用免疫分析方法8.3.3抗原抗體反應(yīng)的原理與特點(diǎn)8.3.2抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)可分為兩個階段:抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合,此階段僅需幾秒至幾分鐘,不出現(xiàn)可見反應(yīng)。可見反應(yīng),此階段抗原抗體復(fù)合物在環(huán)境因素的影響下,進(jìn)一步交聯(lián)集聚,表現(xiàn)為凝集、沉淀、中和、溶解、補(bǔ)體結(jié)合介導(dǎo)的生物現(xiàn)象等肉眼可見的反應(yīng)??乖贵w結(jié)合力抗原和抗體通過非共價鍵互補(bǔ)性特異結(jié)合,兩者間涉及多種弱的分子間作用力:包括靜電引力、范德華力、氫鍵作用力、疏水作用力等??乖贵w間結(jié)合力表現(xiàn)為親和力,是抗體分子上一個抗原結(jié)合位與對應(yīng)抗原決定簇之間的相適性而存在著的結(jié)合力,可用抗原抗體反應(yīng)平衡常數(shù)K表示,K值大親和力高。親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗體和大多數(shù)抗原都是蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)親水的氨基羧基周圍可形成水化層,再加上同種電荷相斥,就形成了穩(wěn)定的親水膠體。當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后,表面電荷減少,水化層變??;且抗原抗體結(jié)合后,與水接觸的表面積減少,由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。各疏水膠體進(jìn)一步靠攏,形成可見的抗原抗體復(fù)合物沉淀??乖贵w反應(yīng)的特點(diǎn)抗原抗體反應(yīng)是指抗原與對應(yīng)抗體在一定條件下特異結(jié)合,形成可逆性抗原抗體復(fù)合物的過程。此類反應(yīng)的規(guī)律和特點(diǎn)有:特異性可逆性比例性特異性特異性是指任何一種抗原分子,只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體發(fā)生反應(yīng)。因?yàn)榭贵wCDR與抗原決定簇在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系。這種高度的特異性在傳染病的診斷、防治等醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域都已得到了廣泛的應(yīng)用。大多數(shù)天然抗原物質(zhì)的構(gòu)成復(fù)雜,常含有多種抗原決定簇。如果兩種不同的抗原物質(zhì)具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇,則可與彼此相應(yīng)的抗血清出現(xiàn)交叉反應(yīng)(crossreaction)。可逆性可逆性是指在一定條件(如低pH、高濃度鹽等)下,抗原抗體復(fù)合物分子間作用力減弱而導(dǎo)致解離,回復(fù)到抗原與抗體的游離狀態(tài)。抗原抗體反應(yīng)遵循生物大分子熱動力學(xué)反應(yīng)原則,其反應(yīng)式為:抗原抗體反應(yīng)平衡取決于兩個因素,一是抗原抗體親合力大??;二是環(huán)境因素對復(fù)合物的影響。比例性比例性是指多價抗原與抗體反應(yīng),只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時,才形成大的抗原抗體結(jié)合物,產(chǎn)生凝集、沉淀等可見反應(yīng)。把最迅速出現(xiàn)可見反應(yīng)時的抗原抗體的濃度比或量比,稱為抗原抗體反應(yīng)的等價點(diǎn)(equivalencepoint),抗原與抗體比例最合適的范圍稱等價帶(equivalencezone)??乖贵w反應(yīng)的比例性等價帶網(wǎng)格學(xué)說解釋了抗原抗體反應(yīng)比例性的機(jī)制:多價抗原抗體比例適當(dāng)時形成立體網(wǎng)格狀復(fù)合體,產(chǎn)生肉眼可見的沉淀物。當(dāng)抗原或抗體過剩時,由于過剩方的結(jié)合價得不到飽和,只能形成較小復(fù)合物,不能出現(xiàn)可見
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