高效液相色譜思考題試卷及答案

高效液相色譜法的習(xí)題和參考答案思索題與練習(xí)題1.高效液相色譜是如何實(shí)現(xiàn)高效、快速、靈敏的？解：

氣相色譜理論和技術(shù)上的成就為液相色譜的發(fā)展創(chuàng)建條件，從它的高效、高速和高靈敏度得到啟發(fā)，采納5-10μm微粒固定相以提高柱效，采納高壓泵加快液體流淌相的流速；設(shè)計(jì)高靈敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測(cè)器，提高檢測(cè)靈敏度，克服經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn)，從而達(dá)到高效、快速、靈敏。2.簡(jiǎn)述液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素，如何削減譜帶擴(kuò)張，提高柱效？解：

液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素為渦流擴(kuò)散、流淌相傳質(zhì)、停留流淌相傳質(zhì)與柱外效應(yīng)。

在液相色譜中要削減譜帶擴(kuò)張，提高柱效，要削減填料顆粒直徑，減小填料孔穴深度，提高裝填的勻稱(chēng)性，采納低黏度溶劑作流淌相，流速盡可能低，同時(shí)要盡可能采納死體積較小的進(jìn)樣器、檢測(cè)器、接頭和傳輸管線等。3.色譜柱A柱長(zhǎng)為15cm，載體粒度為5μm。另一B柱長(zhǎng)為30cm，載體粒度為10μm。兩柱的柱效相等嗎？解：

∵l=L/dp

∴l(xiāng)A=15/0.0005=30000

lB=30/0.0010=30000

A柱的折合柱長(zhǎng)為30000，B柱的折合柱長(zhǎng)也為30000，表明組分在兩根柱內(nèi)從柱入口到出口都經(jīng)過(guò)30000個(gè)載體顆粒，兩柱的柱效相等。4.流淌相為什么要脫氣？常用的脫氣方法有拿幾種？解：流淌相中溶解氣體存在以下幾個(gè)方面的害處（1）氣泡進(jìn)入檢測(cè)器，引起光汲取或電信號(hào)的改變，基線突然跳動(dòng)，干擾檢測(cè)；（2）溶解在溶劑中的氣體進(jìn)入色譜柱時(shí)，可能與流淌相或固定相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；（3）溶解氣體還會(huì)引起某些樣品的氧化降解，對(duì)分別和分析結(jié)果帶來(lái)誤差。因此，運(yùn)用前必需進(jìn)行脫氣處理。常用的脫氣法有以下幾種:（1）加熱脫氣法；（2）抽吸脫氣法（3）吹氦脫氣法；（4）超聲波振蕩脫氣法。5.在液相色譜中。常用作固定相，又可用作鍵合相基體的物質(zhì)是A.分子篩B.硅膠C.氧化鋁D.活性炭解：B硅膠

要形成化學(xué)鍵合固定相，所用的基質(zhì)材料應(yīng)有某種化學(xué)反應(yīng)活性，在四種固體固定相中只有硅膠含有硅醇基，是能進(jìn)行鍵合的活性官能團(tuán)。6.在150×Φ2mm硅膠柱流淌相為己烷/甲醇（150:2），紫外檢測(cè)器色譜條件下分別丙烯酰胺，推斷以下組分的出峰次序，為什么？A.B.解：

在給定的色譜條件下，組分B先出峰，組分A后出峰。以硅膠為固定相，己烷/甲醇（150:2）為流淌相，該體系為正相色譜，樣品的極性A>B，在正相色譜體系極性小的組分先出峰，極性大的組分后出峰，所以出峰次序?yàn)锽先出，A后出。7.在硅膠柱上，用甲苯為流淌相，某組分的保留時(shí)間為30min，假如改用四氯化碳或乙醚為流淌相，試指出選用哪中溶劑能削減該組分的保留時(shí)間？為什么？解：

該體系為正向色譜體系。在該體系中流淌相的極性增大保留值削減。流淌相甲苯、四氯化碳與乙醚的溶劑強(qiáng)度參數(shù)分別是0.29、0.18、0.38，因此選用溶劑強(qiáng)度參數(shù)大于甲苯的乙醚，可縮短該化合物的保留時(shí)間。8.為什么體積排阻色譜中任何組分的安排系數(shù)必需符合0≤K≤1？假如K>1說(shuō)明什么問(wèn)題?解：

因?yàn)榻M分的安排系數(shù)為K=Cs/Cm,Cs與Cm分別為組分在固定相和流淌相中的濃度,當(dāng)分子直徑大于孔徑時(shí),此時(shí)Cm=0,∴K=0.當(dāng)分子直徑小于固定相孔徑時(shí),組分向空隙內(nèi)流淌相擴(kuò)散,達(dá)到平衡時(shí),一半組分在空隙內(nèi),一半組分在空隙外,此時(shí)K=1.0,若分子直徑介于以上兩種極限狀況之間,K肯定介于0與1之間,可見(jiàn)體積排阻色譜中,任何祖父呢的安排系數(shù)為0≤K≤1,假如K>1說(shuō)明此時(shí)的分別方式已不是純粹的體積排阻色譜,其分別過(guò)程受到其他作用力(如吸附)的支配.9.為了測(cè)定鄰氨基苯酚中微量雜質(zhì)苯胺,現(xiàn)有下列固定相:硅膠,ODS鍵合相,流淌相有:水-甲醇,異丙醚-己烷,應(yīng)選用哪種固定相,流淌相?為什么?解：

鄰氨基苯酚中微量雜質(zhì)苯胺測(cè)定,為了良好分別,應(yīng)讓苯胺先出峰,由于苯胺的極性小于鄰氨基苯酚,因此應(yīng)采納正相色譜法,選用硅膠為固定相,異丙醚-己烷為流淌相.10.在ODS鍵合相固定相,甲醇-水為流淌相時(shí)試推斷四種苯并二氮雜苯的出現(xiàn)峰依次.為什么?1.2.3.4.解：色譜條件為反相鍵合相色譜體系,在反相色譜體系中極性大的組分k小,首先出峰,按四種苯并二氮雜苯的結(jié)構(gòu),出峰依次為4-3-2-1.自測(cè)題1.在GC和LC中,影響柱選擇性的不同的因素是A.固定相的種類(lèi)；B.柱溫；C．流淌相的種類(lèi)；D．安排比。2.在液相色譜中,范氏方程中的哪一項(xiàng)對(duì)柱效能的影響可以忽視不計(jì)?A．渦流擴(kuò)散項(xiàng)；B．分子擴(kuò)散項(xiàng)；

C．固定相傳質(zhì)阻力項(xiàng)；D．流淌相中的傳質(zhì)阻力。3.在液相色譜中,某組分的保留值大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力？A．組分與流淌相；B．組分與固定相；

C．組分與流淌相和固定相；D．組分與組分。

4.在液-固色譜法中,以硅膠為固定相,對(duì)以下四組分,最終流精彩譜柱的組分可能是A.苯酚；B.苯胺；C．鄰羥基苯胺；D．對(duì)羥基苯胺。

5.在液-固色譜法中,以硅膠為固定相,對(duì)以下四組分,最終流精彩譜柱的組分可能是A.苯酚；B.苯胺；C．鄰羥基苯胺；D．對(duì)羥基苯胺。

6.用液相色譜法分別長(zhǎng)鏈飽和烷烴的混合物,應(yīng)采納下述哪一種檢測(cè)器?A．紫外汲取檢測(cè)器；B．示差折光檢測(cè)器；

C．熒光檢測(cè)器；D．電化學(xué)檢測(cè)器。

7.液－液色譜法中的反相液相色譜法，其固定相、流淌相和分別化合物的性質(zhì)分別為：

A．非極性、極性和非極性；

B．極性、非極性和非極性；C．極性、非極性和極性；D．非極性、極性和離子化合物。

8.若在一個(gè)1m長(zhǎng)的色譜柱上測(cè)得兩組分的分別度為0.68，若要使它們完全分別，

則柱長(zhǎng)(m)至少應(yīng)為：；B.2；C．5；D．9。

9.在液相色譜中，梯度洗脫最宜于分別：A．幾何異構(gòu)體；

B．沸點(diǎn)相近，官能團(tuán)相同的試樣；C．沸點(diǎn)相差大的試樣；D．安排比改變范圍寬的試樣。

10.液－液色譜法中的反相液相色譜法，其固定相、流淌相和分別化合物的性質(zhì)分別為